专利名称：阿昔洛韦眼用凝胶制剂及制备方法
技术领域：
本发明涉及一种抗疱疹病毒的药物，具体涉及阿昔洛韦眼用凝胶制剂及制备方法。
背景技术：
病毒性疾病是严重危害人体健康的传染病，是目前世界上发病率最高的传染性疾病之一，而单纯疱疹病毒I型(HSV-1)引起的单纯疱疹性角膜炎(HSK)是眼部最常见的病毒感染，可累及巩膜、结膜和葡萄膜，同时又具有潜伏性，以反复发作为特点，从而造成视力损害。HSV是发展中国家眼部感染的主要原因，当眼部或全身其它部位受到反复感染后，病毒迁移上行到三叉神经节，潜伏在感觉神经元上或直接潜伏在角膜内。在机体的免疫状态发生改变，或受精神创伤、内分泌失调等原因刺激下经常复发，严重时可因反复发作和免疫学应答使角膜形成瘢痕而致盲，是角膜炎中的主要致盲原因。阿昔洛韦滴眼液和眼膏在我国已上市多年，大量临床应用证实阿昔洛韦对疱疹性角膜炎有确切疗效。阿昔洛韦滴眼液很受患者欢迎，但滴眼液容易流失，不能维持有效药物浓度，需不断地多次滴药。阿昔洛韦眼膏虽然疗效好，但由于用凡士林作为基质，油腻感强且使用后感觉视力模糊，因而患者不太乐意使用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种阿昔洛韦眼用凝胶制剂及制备方法，该眼用凝胶制剂具有优良的生物相容性和良好的粘滞性，可延长药物在角膜的滞留时间而达到缓释长效。
本发明提供的技术方案是阿昔洛韦眼用凝胶制剂，其基本组成为0.01～1.0wt％阿昔洛韦、0.01～10wt％高分子水凝胶基质、0～10wt％渗透压调节剂、0.001～0.1wt％防腐剂，余量为蒸馏水。
上述阿昔洛韦眼用凝胶制剂，还含有0～10wt％的调pH值的碱溶液，其碱溶液浓度为0.1～10wt％。
所述高分子水凝胶基质为卡波姆、羟丙基纤维素、黄原胶中的一种或一种以上的混合物；所述渗透压调节剂是选择甘露醇、氯化钠中的一种或两者的混合物；所述调pH值的碱溶液选择氢氧化钠水溶液、三乙醇胺溶液、氨水、碳酸钠溶液、碱性缓冲液中的一种或一种以上混合溶液。防腐剂可选择苯扎溴铵溶液、苯扎氯铵溶液、三氯叔丁醇、尼泊金中的一种或一种以上混合溶液。
本发明还提供了上述阿昔洛韦眼用凝胶制剂的制备方法，取高分子水凝胶基质，加入蒸馏水，搅拌，使其充分溶胀，制成空白凝胶；将阿昔洛韦、渗透压调节剂、防腐剂溶于蒸馏水中，搅拌使其溶解，经0.30μm微孔滤膜除菌过滤后，将滤液加到空白凝胶中，用碱性水溶液将pH调至7.0～8.5，加蒸馏水至足量，搅拌使成均匀凝胶，100～120℃灭菌20～40分钟，即得阿昔洛韦眼用凝胶制剂。
本发明眼用凝胶，有着良好的生物相容性，具有眼膏剂的一些优点如本发明制得的阿昔洛韦眼用凝胶制剂采用水性基质外观晶莹，眼部给药具有优良的生物相容性，刺激性小，同时由于良好的粘滞性，可以增加药物在角膜的滞留时间，延长药物的作用时限而达到缓释长效的目的，而且能减轻药物对眼球的磨擦和克服视力模糊的缺陷。由于不会象滴眼液那样造成流失，因而可以减少用药次数。为临床上治疗病毒性角膜炎提供一个安全、有效的药物新制剂。
兔眼用本发明阿昔洛韦眼用凝胶制剂后房水中阿昔洛韦浓度时间曲线图。
具体实施例方式
实施例11000.0g阿昔洛韦眼用凝胶制剂，其组成为，1.0g阿昔洛韦、3.0g卡波姆、15.0g甘露醇、10.0g～100.0g 10wt％氢氧化钠水溶液、0.075g苯扎溴铵、其余为蒸馏水。
取处方量卡波姆，加入适量蒸馏水，溶胀；另将处方量主药阿昔洛韦、甘露醇、苯扎溴铵溶于蒸馏水中，搅拌使其溶解，经0.30μm微孔滤膜除菌过滤后，将滤液加到卡波姆基质中，用10wt％氢氧化钠溶液将pH调至7.0～8.5，加蒸馏水至足量，搅拌使成均匀凝胶，115℃灭菌30分钟，取样测定pH值及主药含量，合格后，无菌灌装，即得阿昔洛韦眼用凝胶制剂。
实施例21000.0g阿昔洛韦眼用凝胶制剂，其组成为，1.0g阿昔洛韦、10.0g卡波姆、10.0g甘露醇、10.0g～100.0g 10wt％氢氧化钠水溶液、0.075g苯扎溴铵、其余为蒸馏水。
取处方量卡波姆，加入适量蒸馏水，溶胀；另将处方量主药阿昔洛韦、甘露醇、苯扎溴铵等溶于蒸馏水中，搅拌使其溶解，经0.30μm微孔滤膜除菌过滤后，将滤液加到卡波姆基质中，用10wt％氢氧化钠溶液将pH调至7.0～8.5，加蒸馏水至足量，搅拌使成均匀凝胶，115℃灭菌30分钟，取样测定pH值及含量，合格后，无菌灌装，即得。
实施例31000.0g阿昔洛韦眼用凝胶制剂，其组成为，1.0g阿昔洛韦、10.0g羟丙基纤维素、9.0g氯化钠、30.0g～100.0g三乙醇胺、0.1g苯扎氯铵、其余为蒸馏水。
取处方量羟丙基纤维素，加入适量蒸馏水，溶胀；另将处方量主药阿昔洛韦、氯化钠、苯扎氯铵等溶于蒸馏水中，搅拌使其溶解，经0.30μm微孔滤膜除菌过滤后，将滤液加到羟丙基纤维素基质中，用三乙醇胺将pH调至7.0～8.5，加蒸馏水至足量，搅拌使成均匀凝胶，115℃灭菌30分钟，取样测定pH值及含量，合格后，无菌灌装，即得。
实施例41000.0g阿昔洛韦眼用凝胶制剂，其组成为，1.0g阿昔洛韦、5.0g黄原胶、10.0g甘露醇、30.0g～100.0g三乙醇胺、5g三氯叔丁醇、其余为蒸馏水。
取处方量黄原胶，加入适量蒸馏水，溶胀；另将处方量主药阿昔洛韦、甘露醇、三氯叔丁醇等溶于蒸馏水中，搅拌使其溶解，经0.30μm微孔滤膜除菌过滤后，将滤液加到黄原胶基质中，用三乙醇胺将pH调至7.0～8.5，加蒸馏水至足量，搅拌使成均匀凝胶，115℃灭菌30分钟，取样测定pH值及含量，合格后，无菌灌装，即得。
实施例51000.0g阿昔洛韦眼用凝胶制剂，其组成为，1.0g阿昔洛韦、3.0g卡波姆、3.0g黄原胶、10.0g～100.0g 10wt％氢氧化钠水溶液、0.1g苯扎溴铵、其余为蒸馏水。
取处方量卡波姆及黄原胶，加入适量蒸馏水，溶胀；另将处方量主药阿昔洛韦、苯扎溴铵等溶于蒸馏水中，搅拌使其溶解，经030μm微孔滤膜除菌过滤后，将滤液加到空白凝胶基质中，用10wt％氢氧化钠溶液将pH调至7.0～8.5，加蒸馏水至足量，搅拌使成均匀凝胶，115℃灭菌30分钟，取样测定pH值及含量，合格后，无菌灌装，即得。
实施例61000.0g阿昔洛韦眼用凝胶制剂，其组成为，1.0g阿昔洛韦、5.0g卡波姆、5.0g羟丙基纤维素、10.0g～100.0g 10wt％氢氧化钠水溶液、10g甘露醇、4.5g氯化钠、0.1g苯扎溴铵、其余为蒸馏水。
取处方量卡波姆及羟丙基纤维素，加入适量蒸馏水，溶胀；另将处方量主药阿昔洛韦、甘露醇、氯化钠、苯扎溴铵等溶于蒸馏水中，搅拌使其溶解，经0.30μm微孔滤膜除菌过滤后，将滤液加到空白凝胶基质中，用10wt％氢氧化钠溶液将pH调至7.0～8.5，加蒸馏水至足量，搅拌使成均匀凝胶，115℃灭菌30分钟，取样测定pH值及含量，合格后，无菌灌装，即得。
以下是本发明的动物试验一.本发明阿昔洛韦眼用凝胶治疗家兔疱疹病毒性角膜炎的疗效观察(一).材料1、病毒单纯疱疹病毒I型(HSV-1)SM44株，湖北医科大学病毒研究所保存。Hep-2细胞上增殖活化，实验用病毒滴度104TCID50/0.1ml。
2、家兔体重2.5-3.0kg/只，购自武汉大学医学院实验动物中心，合格证号为鄂医动字第19-016号。
3、药物阿昔洛韦(ACV)眼用凝胶(含主药阿昔洛韦浓度分别为0.05％、0.1％、0.15％)，自制；3％阿昔洛韦(ACV)眼膏由上海第九制药厂生产，批号为990801。
4、试剂MEM培养基、荧光素、胎牛血清均系Sigma公司产品。
5、细胞Hep-2细胞由武汉大学医学院病毒研究所保存，培养用2％-10％胎牛血清MEM培养基。
(二)、方法1、家兔疱疹性角膜炎模型建立将家兔双眼角膜用针刺划痕，然后以104TCID50/0.1mlHSV50ul滴入家兔双眼下穹隆处，并轻揉眼睑。
2、抗病毒治疗动物分为6组，包括三种浓度(0.05％、0.1％、0.15％)的ACV眼用凝胶，3％ACV眼膏，空白药用基质对照和未经治疗的病毒对照组，每组5只家兔，左、右眼均感染病毒。家兔感染病毒后72小时，将不同浓度ACV眼用凝胶，3％ACV眼膏(阳性对照)及空白基质(阴性对照)均匀涂入眼内，每日4次，用药5天。
3、疗效检测指标①治疗当天及治疗后隔日用0.01M pH7.4磷酸缓冲液(PBS)浸湿棉签，轻擦角膜及上下穹隆，然后将棉签置1mlMEM培养基中，接种细胞，分离病毒，显微镜下观察结果，有CPE为病毒分离阳性，无CPE为病毒分离阴性；病毒分离阳性标本，再进行对数稀释，测定病毒效价；②从开始治疗当天，隔日用2％荧光素染眼，然后用0.9％氯化钠洗去染液，在裂隙灯下观察角膜病变程度，病变程度分为0-3级0级无角膜病变；1级角膜病变占全角膜的1/3以下；2级角膜病变占全角膜的1/3-2/3；3级角膜病变占全角膜的2/3以上。依角膜病变级别将疗效积分订为4级，即0级4分；1级3分；2级2分；3级1分。
4、结果的统计学处理按组间t检验方法进行。
(三)、结果1、家兔疱疹性角膜炎的发病特点家兔角膜感染病毒后48小时，即出现发病症状，患眼畏光，眼裂缩小，分泌物增加，球结膜充血，未经治疗的家兔及空白基质处理的动物，随病程延长，症状加重。在未经治疗组有两只家兔分别于感染后第9、11天死亡。ACV眼用凝胶和ACV眼膏治疗家兔，在治疗后24小时症状开始改善，48小时改善较为明显，眼裂增大，分泌物少，结膜充血减轻。
2、病毒检出结果各用药组病毒检出结果见表1。从表1可知，0.15％ACV组第5天病毒效价明显低于阴性对照组(P＜0.05)，在治疗第七天后，ACV眼用凝胶各组及ACV眼膏与阴性对照比较，差异均非常显著(P＜0.001)。剂量相关系数显著性检验，ACV眼用凝胶组间，P＜0.05，差异有显著性，且0.1％、0.15％ACV组病毒效价显著低于3％ACV眼膏组(P＜0.01及P＜0.001)。
表1 ACV眼用凝胶治疗家兔疱疹性角膜炎病毒检出情况药物 检测标 治疗后时间(天)/病毒效价(TCID50/0.1ml)分组 本数1 3 5 7 9ACV眼用凝胶0.05％ 10 5.4±0.4 5.3±0.3 4.9±0.3 3.1±0.3***○2.5±0.1***△△△0.1％ 10 5.3±0.2 5.2±0.4 5.1±0.3 2.7±0.3***△△△1.7±0.1***0.15％ 10 5.3±0.3 5.1±0.2 4.9±0.2*2.1±0.2***△△△1.7±0.1***3％ACV眼膏 10 5.3±0.3 5.1±0.3 4.9±0.3 3.1±0.2***1.7±0.3***阴性对照 10 5.4±0.3 5.3±0.4 5.2±0.4 4.9±0.3 3.9±0.2注与阴性对照比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；与阳性对照比较△P＜0.05，△△P＜0.01，△△△P＜0.001；○ACV眼用凝胶剂量组间比P＜0.05。
3、角膜病变程度检查治疗后不同时间角膜病变程度见表2，从表2可知，经均数组间t检验，在治疗后第3天0.1％、0.15％ACV组病灶明显好转，与阴性对照组比差异显著(P＜0.05、P＜0.001)，第5天，各ACV眼用凝胶组均出现显著疗效，与阴性组比P＜0.001，且0.15％组比3％ACV眼膏阴性组比疗效更明显(P＜0.05)，第7天及第9天ACV眼用凝胶(0.1％、0.15％)3％ACV眼膏与阴性对照比，差异仍有显著性，0.15％组更明显(P＜0.05、P＜0.001)。
表2 阿昔洛韦眼用凝胶对家兔疱疹性角膜炎疗效观察药物病灶 治疗后时间(天)/疗效积分分组数1 35 7 9ACV眼用凝胶0.05％ 101.5±0.71.9±0.6 2.3±0.6△***2.7±0.7△△2.7±0.6△0.1％ 101.4±0.62.0±0.6*3.1±0.6***3.7±0.6***3.9±0.6**0.15％ 101.8±0.42.4±0.7***3.7±0.7△***3.9±0.7***4.0±0.0***3％ACV眼膏 101.8±0.71.9±0.6 2.9±0.6***3.7±0.5***3.7±0.0**阴性对照101.5±0.71.3±0.7 1.1±0.6 2.7±0.53.1±0.6注同表1。
(四)、讨论我们利用HSV感染的家兔致病模型，观察了阿昔洛韦眼用凝胶对家兔疱疹病毒性角膜炎的治疗作用，结果发现该药有明显的抗HSV作用，这表现在阿昔洛韦眼用凝胶能减轻HSV的病变程度，加速角膜病变愈合，缓解症状，降低病毒效价。在治疗后第3天，当浓度在0.1％和0.15％时，就显示出治疗效果。在治疗后第5天，低浓度组(0.05％)与阴性对照组比亦显示出效果。在治疗后第7天，ACV眼用凝胶各剂量组与阴性对照组比较，均显示出治疗效果和量效关系，且0.15％ACV眼用凝胶优于3％ACV眼膏，可能与ACV凝胶容易吸收有关，这说明ACV眼用凝胶对疱疹性角膜炎有治疗作用，并有量效和时效关系，是一种有希望过渡到临床的抗疱疹性角膜炎的新剂型。
二、阿昔洛韦眼凝胶局部吸收试验1.试验材料1.1受试品阿昔洛韦眼用凝胶5g∶5mg，自制。
1.2动物日本大耳兔，雌雄兼有，体重2.0～2.5kg，由武汉市全辉实验动物经营部提供。
1.3试剂1.3.1戊巴比妥钠中国医药(集团)上海化学试剂公司，进口分装，批号F20020405。以市售0.9％氯化钠注射液配制成2％溶液，2ml/40mg/kg，ip。
1.3.2阿昔洛韦对照品由湖北科益药业股份有限公司提供，。甲醇、醋酸钠、庚烷磺酸钠、冰醋酸等均为分析纯。
1.4仪器岛津LC-10A液相色谱仪；岛津SPD-10A紫外检测器，7161手动进样器(定量管20μl)，N2000色谱工作站。
2.方法学2.1房水样品的获取，动物全麻下行前房穿刺术，分别于给药后0.5、1.5、3.0、5.0、7.0小时，每次取房水约0.08～0.1ml，冷冻储存。检测时直接进样。
2.2血浆样品的制取在上述同一时间点经兔耳缘静脉取全血抗凝，常规离心分离血浆。取0.5ml血浆加入0.1ml 5％硫酸钠，充分振摇后加入0.2ml 0.15M氢氧化钡，振摇后0℃下过夜。次日取出离心(6000rpm×15min×2次)。取上清液测定。
2.3药浓测定2..3.1房水中阿昔洛韦的HPLC法测定2.3.1.1色谱条件色谱条件定为色谱柱INERTSIL ODS-3(C185μ 250mm×4.6mm ID)；检测波长254nm；流动相为含0.025mol/L庚烷磺酸钠和0.005mol/L醋酸钠的2％甲醇水溶液；流速为1.0ml/min。
3.结果与讨论3.1房水药浓给药后各时间点均值±标准差列于表3，所绘c-t曲线见附图。
表3阿昔洛韦眼用凝胶在家兔房水中的含量(X±SD)
由表3及
给药后0.5小时，房水药浓最高，以后逐渐降低，7h时全部在0.171μg/ml以下，其中1例接近检测低限，难以准确定量，按检测低限值处理。文献报道，阿昔洛韦对单疱I型病毒有很强的抑制作用，体外试验在HL及Vero细胞培养中，阿昔洛韦对单疱I型病毒的ID50分别为0.07(3)及0.11～0.25μg/ml。上述房水中阿昔洛韦浓度均在所有ID50之上，提示药物吸收迅速而且其有效抑制病毒浓度持续时间较长。
3.2血浆药浓家兔一眼下睑结合膜囊涂用100mg 0.1％阿昔洛韦眼用凝胶后于取房水样品同时取血浆测其药浓，结果表明，在本试验条件下，血浆中药浓均低于HPLC检测下限，提示本品经眼局部吸收入血数量很少，药物使用的安全性较好。
文献报道，阿昔洛韦眼用制剂局部用药后吸收进入血中的药物是非常有限的，即使采用结膜下注射给药25mg(此时吸收是完全的)，2h后血中的阿昔洛韦也仅为0.12μg/ml，7h后降至0.05μg/ml(5)。而此注射用量为0.1％阿昔洛韦眼用凝胶的250倍。此数据从另一侧面也提示了本品使用的安全性。
结论家兔眼部应用0.1％阿昔洛韦眼用凝胶后的吸收试验结果表明，本品应用是有效、安全的。
三.阿昔洛韦眼用凝胶局部用药毒性试验(一)单次给药眼刺激试验1、试验材料动物日本大耳家兔，♀3只，♂3只，体重2.1±0.3kg，中国医科院病毒研究所提供，喂颗粒饲料(湖北省动物学会，湖北省医学科学院监制，湖北省动物饲料厂生产)，自由饮常水，单笼观察性饲养一周。健康家兔供试。
受试物阿昔洛韦眼用凝胶，对照物基质，均由本公司制剂室提供。
2、试验方法剂量兔每只眼涂敷0.1％阿昔洛韦眼用凝胶或基质约0.1g。
给药方法及观察将阿昔洛韦眼用凝胶涂敷于家兔右眼结膜囊内，左眼涂敷基质作为赋形剂对照。给药后使眼睛闭合约10秒。记录给药后6、24、48h至10天眼的局部反应情况。
眼刺激反应评分参照“新药(西药)临床前研究指导原则汇编”眼刺激试验项下进行。(下同)3、结果见表4表4 单次给药眼刺激评分分值角膜 虹膜 结膜充血结膜水肿结膜分泌物总积分动物号左 右左 右 左 右 左 右 左 右 左 右1000011 00 0011♂2000022 00 00223000001 00 11121000000 00 0000♀2000001 03 00043000003 00 1316n＝6 515
眼刺激性评价标准刺激程度积分(最后分值)无刺激性0-3轻度刺激性 4-8中度刺激性 9-12强度刺激性 13-16从表1结果计算，右眼最后分值，即单次给与0.1％阿昔洛韦眼用凝胶后对眼刺激性的最后分值为2.50分，按上评价标准判定为无刺激性。左眼，单次给与基质后的最后分值为0.83分，为无刺激性。
(二)多次给药眼刺激试验1、试验材料动物日本大耳家兔，♀3，♂3，体重2.3±0.2kg。饲养与来源同前。
受试物与对照物同前。
2、试验方法剂量兔每只眼涂敷0.1％阿昔洛韦眼用凝胶或基质约0.1g。
给药方法与观察取0.1％阿昔洛韦眼用凝胶涂敷于家兔右眼结膜囊内，左眼涂敷基质作为赋形剂对照，使两眼闭合约10秒。连续给药12日。记录给药后6、24、48h至21日眼局部反应情况。
3、结果见表5。
表5、多次给药眼刺激评分分值动物角膜 虹膜 结膜充血结膜水肿结膜分泌物总积分序号左 右左 右左 右 左 右 左 右左 右1 0 0 0 0 12 02 223 6♂ 2 0 0 0 0 00 00 000 03 0 0 0 0 33 02 003 51 0 0 0 0 00 01 020 3♀ 2 0 0 0 0 02 01 000 33 0 0 0 0 10 00 001 0n＝6 7 17右眼最后分值＝17/6＝2.83左眼最后分值＝7/6＝1.17由表2计算结果，多次给与0.1％阿昔洛韦眼用凝胶后，对家兔右眼刺激反应的最后分值为2.83，按前述标准评判为无刺激性。多次给与基质后，对家兔左眼的刺激反应的最后分值为1.17分，即无刺激性。
结论单次和多次连续给与0.1％阿昔洛韦眼用凝胶，对家兔眼睛均无刺激性。
权利要求
1.阿昔洛韦眼用凝胶制剂，其基本组成为0.01～1.0wt％阿昔洛韦、0.01～10wt％高分子水凝胶基质、0～10wt％渗透压调节剂、0.001～0.1wt％防腐剂，余量为蒸馏水。
2.根据权利要求1所述的眼用凝胶制剂，其特征是含有0～10wt％的调pH值的碱溶液，其碱溶液浓度为0.1～10wt％。
3.根据权利要求2所述的眼用凝胶制剂，其特征是所述渗透压调节剂是选择甘露醇、氯化钠中的一种或两者的混合物；所述调pH值的碱溶液选择氢氧化钠水溶液、三乙醇胺溶液、氨水、碳酸钠溶液、碱性缓冲液中的一种或一种以上混合溶液。
4.根据权利要求1或2或3所述的眼用凝胶制剂，其特征是所述高分子水凝胶基质为卡波姆、羟丙基纤维素、黄原胶中的一种或一种以上的混合物。
5.根据权利要求1或2或3所述的眼用凝胶制剂，其特征是防腐剂为苯扎溴铵溶液、苯扎氯铵溶液、三氯叔丁醇、尼泊金中的一种或一种以上混合溶液。
6.权利要求1所述阿昔洛韦眼用凝胶制剂的制备方法，其特征是取高分子水凝胶基质，加入蒸馏水，搅拌，使其充分溶胀，制成空白凝胶；将阿昔洛韦、渗透压调节剂、防腐剂溶于蒸馏水中，搅拌使其溶解，经0.30μm微孔滤膜除菌过滤后，将滤液加到空白凝胶中，用碱性水溶液将pH调至7.0～8.5，加蒸馏水至足量，搅拌使成均匀凝胶，100～120℃灭菌20～40分钟，即得阿昔洛韦眼用凝胶制剂。
全文摘要
本发明涉及阿昔洛韦眼用凝胶制剂，其基本组成为0.01～1.0wt％阿昔洛韦、0.01～10wt％高分子水凝胶基质、0～10wt％渗透压调节剂、0.001～0.1wt％防腐剂，余量为蒸馏水。其制法为，将高分子水凝胶基质加入蒸馏水制成空白凝胶；将阿昔洛韦、渗透压调节剂、防腐剂溶于蒸馏水中，搅拌使其溶解，经除菌过滤后，加到空白凝胶中，调pH至7.0～8.5，加蒸馏水至足量，搅拌使成均匀凝胶，灭菌即得阿昔洛韦眼用凝胶制剂。本发明有着良好的生物相容性和粘滞性，可以增加药物与患处的接触时间，延长药物的作用时限，而且能减轻药物对眼球的磨擦和克服视力模糊的缺陷。由于不会象滴眼液那样造成流失，因而可以减少用药次数。
文档编号A61K31/519GK1554345SQ20031011167
公开日2004年12月15日 申请日期2003年12月29日 优先权日2003年12月29日
发明者刘红, 王登美, 陈历胜, 黄汉明, 熊增慧, 余修祥, 刘 红 申请人:湖北丽益医药科技有限公司