专利名称：治疗家畜泌尿系感染和肠炎注射液的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种兽药注射液的制备方法，具体说涉及一种治疗家畜泌尿系感染和肠炎注射液的制备方法。
背景技术：
家畜泌尿系感染和肠炎等疾病极大的困扰着养殖业的发展，特别是近年来，国家为了治理沙尘天气，各地实行封山禁牧，对家畜实行圈养后，家畜的饲草受到了限制，大量喂食受到农药、化肥等污染的粮食秸杆，使家畜的泌尿系感染和肠炎的发病率有所增加，传统上治疗家畜泌尿系感染和肠炎的方法是使用一些化学药品和抗生素消炎，这样不仅增加了动物源食品中的药物残留，而且使一些致病菌产生了耐药性，剂量不断增加，而疗效有所下降，增加了养殖成本。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗家畜泌尿系感染和肠炎注射液的制备方法，主要用于治疗家畜泌尿系感染和肠炎，该注射液为纯中兽药制剂，无毒副作用，使用安全，药物来源丰富，成本低。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是一种治疗家畜泌尿系感染和肠炎注射液的制备方法，其配方为小青杨树皮100-300克，制成注射液50-150ml增溶剂为吐温-80 1-2％止痛剂为苯甲醇0.5％具体工艺步骤如下(1)、将小青杨树皮剥去老皮，晾干，取其形成皮100-300克，切成0.5-2cm小块，加水800-2400克，浸泡1-2小时，加温煮沸1-2小时，放出浸煮液单独存放，浸煮物加水600-1800克，加温进行第二次煮沸，1-2小时后放出浸煮液，弃掉浸煮物，合并两次浸煮液，加温浓缩至20-60克，备用。
(2)、醇处理将(1)所制得的浓缩物加2.5-3.5倍量96％乙醇，搅拌使其溶解后，静止放置20-28小时，过滤，弃去滤渣，滤液回收乙醇至无乙醇度，第二次加3.5-4.5倍量96％乙醇搅拌使其溶解后，加10％氢氧化钠溶液调节PH值7-8，静止放置20-24小时，过滤，弃去滤渣，滤液回收乙醇至无乙醇度，备用。
(3)、热处理将操作(2)所制得的浓缩物加注射用水至50ml-150ml，搅拌均匀后加热煮沸20-30分钟，冷却，冷藏，静止沉淀，取上清液去沉淀，过滤，煮沸时可加针剂用活性碳1％除去热源和杂质。
(4)、配液及分装将操作(3)所制得的药液补加注射用水至50ml-150ml，加入1％-2％吐温-80，0.5％苯甲醇，搅拌均匀后精滤，灌封于20ml安瓶中。
(5)、将灌封完毕的药支流通蒸汽100℃30分钟灭菌，灯检澄明度，印字，分装，即得注射液成品。
本发明的有益效果本发明兽药注射液的适应症包括抗菌药。对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌及布氏杆菌等有抑制作用。本发明的注射液可用于治疗家畜尿路感染，急性肾盂肾炎，细菌性肠炎等。本发明临床效果显著，并使致病菌难以产生耐药性，有效避免了药物残留和社会公害的发生。本发明原料成本低廉，制备工艺简单，使用效果好，使用成本低。
本发明对抗菌活性成份、结构鉴定、抑菌试验以及临床效果和制备工艺进行了系统的研究。
本发明兽药注射液的临床效果进一步说明本发明的疗效一、本发明注射液所用原料小青杨树皮抗菌活性成份的研究1、抗菌活性部位的研究(见下表)
分别除尽B-I中有机溶剂后，加适量吐温-80，将A-I分别配制成相当小青杨树皮200％水溶液，作抑菌实验，结果见下表抑菌试验结果 从抑菌实验结果可以看出，第一次溶剂分步提取后，乙酸乙酯提取物是活性部位，第二次溶剂分步提取后，乙醚提取物是活性部位。
2、有效成份提取分离及结构鉴定通过对本发明的抑菌试验得到其抗菌活性部位后，在此基础上，用各种层析法和溶剂法首次从注射液中分离出16个单体和饱和脂肪酸的混合物。通过理化性质，TLC、UV、IR、HNMR、MS以及其个别化合物衍生物的制备和必要的降解鉴定了13个化合物。其中醌和酚各一种2，6-二甲氧基对苯醌、邻苯二酚；有机酸8种壬二酸、水杨酸、对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、对羟基肉桂酸、咖啡酸和阿魏酸；甙两种水杨甙和柳葡萄甙；甾醇一种β-谷甾醇。这些成份为具有抗菌活性物质，彼此间具有协同作用。
二、本发明注射液的试管法协同抑菌试验。
1、菌种的制备取一白金耳菌接在5毫升普通液体培养基中，37℃培养18小时后，用普通液体培养基稀释1000倍备用。
2、取试管8支，分别在每支试管中加入2毫升普通液体培养基，然后在第一管中加入2毫升本发明样品(两个化合物协同试验时，在第一管中每种样品各加1毫升；五个化合物协同试验时，在第一管中每种样品各加入0.4毫升)，混匀，取出2毫升，加入到第二管中再混匀，从第二管中取出2毫升，再加入到第三管中，依次类推至第八管，从第八管中取出2毫升弃去。最后分别在每支试管中加入0.1毫升菌液，混匀，37℃培养20小时后，用比浊法判断，结果透明的有抗菌作用，混浊的表明无抗菌作用。
通过试验，本发明注射液所含抗菌成份2，6-二甲氧基对苯醌、壬二酸、水杨酸、邻苯二酚、咖啡酸、对羟基苯甲酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸和香草酸，都具有不同程度的抑菌作用，其中2，6-二甲氧基对苯醌抑菌作用最强，对痢疾杆菌、金黄葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌的抑菌浓度分别为14.5ppm，7.25ppm，87.8ppm，37.8ppm。在2，6-二甲氧基对苯醌、壬二酸、水杨酸、邻苯二酚、咖啡酸之间存在着明显的协同作用，其中2，6-二甲氧基对苯醌与咖啡酸；壬二酸与水杨酸之间对痢疾杆菌的协同作用最强。
三、本发明注射液管碟法抑菌试验1、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基配方牛肉膏0.3克、蛋白胨1克、氯化钠0.5克、琼脂18-20克、水100毫升。
制法按配方准确称取各成份(琼脂除外)，置大烧杯中，加热搅拌使全溶，冷却后(必要时过滤)调PH值7.4-7.6，再加入18-20克琼脂，加热全溶，分装于试管或烧瓶中，包扎后进行高压灭菌15磅，20-30分钟，即可，备用。
2、管碟法抑菌试验于已灭菌的平皿中倒入无菌的普通培养基10毫升，冷却，55℃时倒入混菌培养基8-10毫升，放凉后将灭菌小钢管置于其上，将本发明用灭菌滴管加到钢管中，而后覆盖灭菌陶土盖，于37℃培养18-24小时。
观察结果测量抑菌圈直径，本发明注射液对金黄葡萄球菌的抑菌圈直径为17mm。
四、本发明注射液治疗家畜泌尿系感染和肠炎的临床疗效。
1、病例选择(1)、泌尿系感染的病例选择排除肾结石及肾寄生虫病。临床症状表现为腰脊僵硬，拱背弩责，小便或困难或淋漓作痛，胸腹下及四肢常伴有水肿，尿检每个视野平均有红白细胞各两个以上，有时伴有脓球管型上皮蛋白的患畜。
(2)、肠炎的病例选择排除炭疽、肠结核、快疫等传染病以及侵袭病，重金属中毒所引起的下痢。临床症状表现为食欲减少或废绝，腹痛腹泻，尾有粪污，粪检有红白细胞、脓球、粘膜上皮的患畜。
2、疗效标准显效肠炎用药1-3日，泌尿系感染1-7日症状消炎，食欲恢复正常，粪尿检查正常的患畜。
有效肠炎用药4-5日，泌尿系感染8-14日，临床主要症状缓解，食欲略有增加，粪尿检查好转的患畜。
无效肠炎用药6日以上，泌尿系感染15日以上，症状未见缓解或病情加重和死亡的患畜。
3、实验药品本发明注射液，每毫升含生药相当于2克，分装于20ml安瓶中。
4、试验结果治疗家畜泌尿系感染、肠炎临床效果统计表
本发明对治疗家畜泌尿系感染和肠炎的疗效显著，无毒副作用，成本低廉。本发明为一种抗菌消炎药物，对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌及布氏杆菌等有抑制作用，用于尿路感染、急性肾盂肾炎、细菌性肠炎等，为纯中药制剂，不易复发，细菌难以产生耐药性，使用安全，避免了兽药残留和社会公害的发生。
图1为本发明抗菌活性部位的研究图。
具体实施例方式(1)、将小青杨树皮50公斤，加水40万毫升浸泡1小时，过滤，滤液单独存放，将滤渣再加水30万毫升进行第二次煮沸1小时，过滤，弃去滤渣，合并两次滤液，加热80℃浓缩至糖浆状。
(2)、将(1)所制得的提取物加96％乙醇15万毫升搅拌均匀后，静止放置24小时，过滤，并去滤渣，滤液回收乙醇至无乙醇度，第二次加96％乙醇20万毫升，加10％氢氧化钠溶液调节PH值7-8，静止放置20小时，过滤，弃去滤渣，滤液回收乙醇至无乙醇度，备用。
(3)、将(2)所制得的醇提取物加注射用水2.5万毫升，加1％活性炭搅匀，加热煮沸25分钟，冷却，冷藏12小时，取上清液去沉淀，过滤。
(4)、将(3)所制得的药液加注射用水至2.5万毫升，用10％的氢氧化钠溶液调节PH值至8，加1％吐温-80和0.5％的苯甲醇后，搅拌均匀，精滤，用灌封机灌封于20ml安瓶中，在100℃流通蒸汽灭菌30分钟，灯检澄明度，印字，包装即得。
作用与用途抗菌药。对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和布氏杆菌等有抑制作用，用于家畜尿路感染，急性肾盂肾炎，细菌性肠炎等。
用法与用量常用量，肌肉、静脉注射，一次量，马、牛为60-80毫升；羊为10-20毫升；猪为20-30毫升，每日两次。
为巩固疗效，连续使用无副作用。
权利要求
1.一种治疗家畜泌尿系感染和肠炎注射液的制备方法，其特征在于配方为小青杨树皮100-300克，制成注射液50-150ml增溶剂为吐温-80 1-2％止痛剂为苯甲醇0.5％具体工艺步骤如下(1)、将小青杨树皮剥去老皮，晾干，取其形成皮100-300克，切成0.5-2cm小块，加水800-2400克，浸泡1-2小时，加温煮沸1-2小时，放出浸煮液单独存放，浸煮物加水600-1800克，加温进行第二次煮沸，1-2小时后放出浸煮液，弃掉浸煮物，合并两次浸煮液，加温浓缩至20-60克，备用。(2)、醇处理将(1)所制得的浓缩物加2.5-3.5倍量96％乙醇，搅拌使其溶解后，静止放置20-28小时，过滤，弃去滤渣，滤液回收乙醇至无乙醇度，第二次加3.5-4.5倍量96％乙醇搅拌使其溶解后，加10％氢氧化钠溶液调节PH值7-8，静止放置20-24小时，过滤，弃去滤渣，滤液回收乙醇至无乙醇度，备用。(3)、热处理将操作(2)所制得的浓缩物加注射用水至50ml-150ml，搅拌均匀后加热煮沸20-30分钟，冷却，冷藏，静止沉淀，取上清液去沉淀，过滤，煮沸时可加针剂用活性碳1％除去热源和杂质。(4)、配液及分装将操作(3)所制得的药液补加注射用水至50ml-150ml，加入1％-2％吐温-80，0.5％苯甲醇，搅拌均匀后精滤，灌封于20ml安瓶中。(5)、将灌封完毕的药支流通蒸汽100℃30分钟灭菌，灯检澄明度，印字，分装，即得注射液成品。
全文摘要
本发明公开了一种治疗家畜泌尿系感染和肠炎注射液的制备方法，其配方为小青杨树皮100－300克，制成注射液50－150ml，增溶剂吐温－80为1－2％，止痛剂为苯甲醇，具体工艺步骤包括将小青杨树皮加水加温煮成浸煮液并浓缩，之后加乙醇溶解，滤液回收乙醇至无乙醇度，浓缩物加注射用水加热煮沸取上清液去沉淀，药液补加注射用水并加入吐温－80和苯甲醇，搅拌均匀后精滤，灌封成注射液成品。本发明的注射液可用于治疗家畜尿路感染，急性肾盂肾炎，细菌性肠炎等。本发明临床效果显著，并使致病菌难以产生耐药性，有效避免了药物残留和社会公害的发生。本发明原料成本低廉，制备工艺简单，使用效果好，使用成本低。
文档编号A61P1/00GK1586518SQ20041005999
公开日2005年3月2日 申请日期2004年6月28日 优先权日2004年6月28日
发明者魏艳海 申请人:魏艳海