一种治疗肌肉萎缩及重症肌无力的药物及其制备方法

专利名称：一种治疗肌肉萎缩及重症肌无力的药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及到一种用于治疗肌肉萎缩及重症肌无力的药物及其制备方法，属于中草药制剂技术领域。临床上主要用于运动神经元疾病(肌萎缩侧索硬化、进行性脊肌萎缩、进行性延髓麻痹、原发性侧索硬化)、进行性肌营养不良、先天性肌病等疾病所致的肌肉萎缩及重症肌无力等症。
背景技术：
运动神经元疾病(motor neuron disease，MND)包括肌萎缩侧索硬化(amyotrophiclateral sclerosis，ALS)、进行性脊肌萎缩、进行性延髓麻痹、原发性侧索硬化等，是由于中枢神经系统上下运动神经元广泛变性引起的，其症状有肌力减退、肌肉萎缩，并逐渐发展为饮食呛咳、吞咽困难、呼吸困难，直到死亡。ALS是一种病因未明的选择性侵犯脊髓前角细胞、脑干运动神经核及锥体束的慢性进行性变性疾病，临床表现为上下运动神经元合并受损的体征，是慢性运动神经元疾病中最常见的类型。西医认为，在ALS的发病机制未完全明了的情况下，目前无特殊治疗方法，主要立足于对症支持疗法，保证足够营养，改善全身症状，对病人以心理支持，使其树立长期同疾病做斗争的勇气和决心。
中医认为，ALS等引起的肌萎缩疾病属于中医的痿证范畴，古人曾提出过“治痿独取阳明”的观点。李任先教授认为本病以脾肾亏虚为本，虚风内动为标，存在血脉不畅之病理因素，应以健脾补肾、熄风止痉、活血通络为治疗法则，临证自拟健脾补肾方加减，取得了一定的疗效；邓铁涛教授认为ALS证属脾肾阳虚夹痰夹瘀，用补中益气汤加减内服，并静滴和穴位注射黄芪注射液以健脾补肾，外洗方熏洗上肢以化痰通络，灌肠以排积便，再辅以针灸、按摩、饮食、情志等多种疗法，也取得了一定的疗效，但均不尽如人意。

发明内容
本发明的目的在于提供一种疗效显著的治疗肌肉萎缩及重症肌无力的药物及其制备方法。
本药物发明人吴以岭教授在实践中发现，只采用调理脾胃的治疗方法，临床效果并不理想。因此，发明人吴以岭教授首先绕过固有的从脾胃论治的模式，而将思维的触角伸向经络，并最终将落脚点放在奇经八脉的督脉上。他以奇经八脉为突破口探讨肌萎缩的发病机制，提出奇经论治的新观点和“扶元起萎，养荣生肌”的治疗法则，重在温理奇阳，滋填真精，温通八脉。并从大量的中药中精选出几十味温养督脉、振奋神经的药物，科学配方，研制成本发明药物。本发明药物试验证明可对抗肌萎缩侧索硬化症患者血清对神经末梢再生能力的抑制作用，促进受损神经末梢的再生和修复，明显提高实验动物游泳耐力，有明显增强肌力作用，并可使肌肉疲劳小鼠血清磷酸肌酸肌酶活性升高受到明显的抑制，对骨骼肌的功能有明显的保护作用。
本发明药物是由如下重量份比例的原料药制成的人参2-10份，淫羊藿2-8份上述原料药的重量份比例优选人参5份，淫羊藿5份和人参5份，淫羊藿2份和人参9份，淫羊藿7份和人参3份，淫羊藿1份本发明药物可以按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型，例如注射剂、胶囊、丸剂、片剂、口服液等。
本发明药物的制备方法包括以下步骤1)、取上述中药材，分别选净，粉碎，按组方量称量；2)、取人参药材，用60-90％乙醇提取1-3次，第1次加药材8-12倍量溶剂提取1-2小时，第2次加6-10倍量溶剂提取1-2小时，第3次加6-10倍量溶剂提取0.5-1小时；合并上述提取液，趁热滤过，减压回收乙醇，并浓缩，放入不锈钢桶内，加纯水搅拌均匀，冷藏24-36h；将冷藏液取出，放至常温，板框过滤器过滤，用少量水洗涤板框，滤液加纯水稀释，备用；取人参浓缩药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用pH值8-9的氨水、20％乙醇、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液。将80％洗脱液加入纯水，配成50％醇溶液，通过中性氧化铝柱，收集洗脱液，再用少量50％乙醇洗涤柱子，合并洗脱液备用；取药液加入活性炭，回流加热，煮沸20min，趁热板框抽滤，收集滤液，浓缩，冷藏过夜；澄清板过滤，减压干燥，即得人参提取物。
3)、取淫羊藿药材，加水煎煮提取2-5次，加水量为10-30倍，第一次提取时间定为0.5-2h，以后3次为0.5-1h；合并上述提取液，趁热滤过，减压浓缩，放入不锈钢桶内，加乙醇至药液含醇浓度为70％，冷藏；过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加水搅拌均匀，冷藏，过滤，备用；取淫羊藿药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用纯水、20％乙醇、50％乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱液；洗脱液拌入适量硅藻土混匀，用无水乙醇提取2-5次，提取液合并，回收乙醇并浓缩，浓缩液加入丙酮，并搅拌均匀，冷藏，过滤，沉淀加丙酮再同前处理2次，合并3次滤液，回收溶剂，并浓缩，减压干燥，即得淫羊藿提取物。
4)、取2)和3)中制备的提取物，加入1，2丙二醇、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠附加剂，并加注射用水定容到10-20ml，热处理冷藏，依次用微孔滤膜、超滤过滤，灌装，灭菌，即得本发明的注射剂。
或者将2)和3)中制备的提取物，按常规制剂方法制成胶囊、丸剂、片剂或口服液。
具体实施例方式
下面结合本发明药物注射剂、胶囊剂、片剂和丸剂的制备的实例，说明本发明的具体实施方式
。
实施例1人参5份，淫羊藿2份制备方法1)、取上述中药材，分别选净，粉碎，按组方量称量；2)、取人参药材，用70％乙醇提取3次，第1次加药材10倍量溶剂提取1小时，第2次加8倍量溶剂提取1小时，第3次加8倍量溶剂提取0.5小时；合并上述提取液，趁热滤过，减压浓缩，放入不锈钢桶内，加纯水搅拌均匀，冷藏24h；将冷藏液取出，放至常温，板框过滤器过滤，用少量水洗涤板框，滤液加纯水稀释，备用；取人参浓缩药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用pH值8-9的氨水、20％乙醇、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液。将80％洗脱液加入纯水，配成50％醇溶液，通过中性氧化铝柱，收集洗脱液，再用少量50％乙醇洗涤柱子，合并洗脱液备用；取药液加入活性炭，回流加热，煮沸20min，趁热板框抽滤，收集滤液，浓缩，冷藏过夜；澄清板过滤，减压干燥，即得。
3)、取淫羊藿药材，加水煎煮提取4次，加水量为20倍，第一次提取时间定为1h，以后3次为0.5h；合并上述提取液，趁热滤过，减压浓缩，放入不锈钢桶内，加乙醇至药液含醇浓度为70％，冷藏；过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加水搅拌均匀，冷藏，过滤，备用；取淫羊藿药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用纯水、20％乙醇、50％乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱液；洗脱液拌入适量硅藻土混匀，用无水乙醇提取3次，提取液合并，回收乙醇并浓缩，浓缩液加入丙酮，并搅拌均匀，冷藏，过滤，沉淀加丙酮再同前处理2次，合并3次滤液，回收溶剂，并浓缩，减压干燥，即得。
4)、取2)、3)中制备的半成品，加入1，2丙二醇、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠等附加剂，并加注射用水定容到16ml，热处理冷藏，依次用微孔滤膜、超滤过滤，灌装，灭菌即得本发明的注射剂。
实施例2人参5份，淫羊藿5份制备方法同实施例1中1)、2)3)步骤并按常规方法制成胶囊剂。
实施例3
人参9份，淫羊藿7份制备方法同实施例1中1)、2)3)步骤并按常规方法制成片剂。
本发明药物，是依据传统中医药理论，采用“扶元起萎，养荣生肌”为治疗原则，结合多年临床用药经验而研制的，旨在为由于运动神经元疾病(肌萎缩侧索硬化、进行性脊肌萎缩、进行性延髓麻痹、原发性侧索硬化)、进行性肌营养不良、先天性肌病等疾病所致的肌肉萎缩及重症肌无力患者提供一种疗效确切、服用安全的中药新制剂。
综观本发明药物处方，在甘平之人参中配以小量甘温之淫羊藿，使全方在性平之基础上，既有利于补益精气，滋补元阳，又不使其过于温燥。药虽仅二味，但功效明确，配伍严谨。
药理作用本发明的药物其注射剂进行了下列动物试验以证明其疗效肌萎灵注射液对体外培养运动神经元的保护作用摘要目的观察肌萎灵注射液(JWL)对体外培养运动神经元的保护作用。方法应用密度离心法分离鼠胚脊髓运动神经元进行原代培养，加入谷氨酸建立兴奋性氨基酸毒性损伤模型，评价不同浓度肌萎灵注射液对运动神经元的保护作用。MTT法检测细胞活力，NF-200免疫组化染色并进行图象分析，测定神经突起主干长度，生化分析仪检测培养上清中的乳酸脱氢酶(LDH)，TUNEL阳性神经元计数观察细胞凋亡。结果(1)肌萎灵注射液能明显促进体外培养运动神经元的活力，促进神经突起的生长；(2)肌萎灵注射液可减少兴奋性氨基酸毒性损伤运动神经元LDH的漏出；(3)肌萎灵注射液能显著减少谷氨酸诱导的运动神经元凋亡。结论肌萎灵注射液对正常运动神经元和兴奋性氨基酸毒性损伤运动神经元均具有保护作用。
中枢神经系统损伤的修复和保护是神经领域研究的难题，目前尚缺乏有效的治疗手段和药物。尤其是运动神经元的损伤或变性死亡导致数量的绝对减少是不可逆的，使相应的功能丧失，严重影响患者运动功能和生存质量。保护尚存的正常运动神经元，减轻变性神经元受到的损伤对治疗中枢神经系统损伤意义重大。肌萎灵注射液是吴以岭教授研制的治疗神经肌肉系统疾病的中药新制剂，在临床治疗运动神经元病等疾病取得明显的疗效。本研究应用体外细胞培养技术，观察肌萎灵注射液对运动神经元的作用，旨在为临床治疗中枢神经系统损伤寻找有效的治疗药物。
1. 材料和方法1.1 实验材料1.1.1 药物 肌萎灵注射液，由石家庄以岭药业股份有限公司生产，8ml/支(每ml含生药0.9g)，制剂号石卫药剂字(98)灭501-00296。本药具有扶元起痿，养荣生肌之功效。力如太R利鲁唑片，由Aventis公司生产，进口药注册证号H200020006，批号28097，应用时经0.9％NaCl-0.01NHCl溶解。
1.1.2 试剂 L15培养基、丁二胺、胰蛋白酶(1∶250)、多聚赖氨酸、兔抗NF-200抗体、胰岛素、DAB显色剂、MTT、DMSO购于Sigma公司，马血清和Laminin由Gibco BRL公司提供，胎牛血清为Hyclone产品，TUNEL试剂盒为Roche molecular Biochemical产品，生物素标记二抗和辣根过氧化物酶标记三抗为北京中山生物制品有限公司产品，余试剂为国产分析纯。
1.1.3 动物 清洁级SD雌性孕鼠，孕期10～14d，由重庆第三军医大学大坪医院野战外科研究所实验动物中心提供。
1.1.4仪 器酶标仪(DG3022A型，上海)，图像分析系统(Image Pro Plus4.5型，美国)，全自动生化分析仪(BechMan CX7型，美国)。
1.2 方法1.2.1 胎鼠脊髓运动神经元原代培养取孕14d左右的胎鼠，于脑干平面以下取出脊髓，剥去脊膜和血管后剪成1～2mm3小块，用0.125％的胰酶消化30min，37℃，过200目钢网，滤过液移入预置1ml 4％BSA(牛血清白蛋白)的离心管中，300g离心10min，去上清，L15培养基溶解沉淀，加入预置1ml 6.8％Metrizamide的5ml离心管内，500g离心15min，吸出两液面间浅色带液体，300g离心10min，去上清，L15种植培养基溶解，即得脊髓前角神经细胞的单细胞悬液，调整浓度为4.5×105/ml，种植于24孔培养板和96孔培养板内，置CO2孵箱内培养，24h后换维持培养基，48h后加入12.5μg/ml 5-Fu作用24h吸出，换新鲜的维持培养基。
1.2.2 实验条件控制运动神经元培养72h后，实验组分别加入用新鲜培养基稀释为0.5％、1％、5％的肌萎灵注射液，力如太组加入利鲁唑(终浓度10μmol/L)，对照组加入等量培养基共同培养24h，兴奋性氨基酸毒性损伤加入谷氨酸(终浓度为0.5mmol/L)作用24h后进行指标检测。
MTT法测定细胞活力用吸管小心吸去96孔板内的培养液，每孔加入MTT溶液(浓度5mg/mL)10μL，37℃、5％湿化CO2反应4h后，去上清，加入溶剂二甲基亚砜(DMSO)100μL/孔，室温下置于微型震荡器上震荡5min，成色产物溶解后用全自动酶标仪，测定波长λ＝570nm，参考波长λ＝630nm，测定OD值。
NF-200免疫组织化学染色培养第6d细胞常规固定、封闭后，加入兔抗NF-200单克隆抗体(1∶1000)，24h(4℃)，加生物素标记的二抗IgG(1∶300)，60min(37℃)，再加辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素(1∶300)，60min((37℃)。以上各步骤间均用0.01mol/LPBS漂洗5min共3次。DAB溶液显色5min，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。阴性对照组，以PBS取代NF-200抗血清进行免疫组化反应。分别取盖玻片各2张，每张盖片随机取50个NF-200阳性神经元，Quantimet-a图像分析系统测量其突起主干长度LDH检测取出24孔板培养细胞，小心吸取培养上清，分组编号。用全自动生化分析仪分别检测培养上清液中乳酸脱氢酶活力。
TUNEL检测培养细胞常规固定后，0.3％H2O2/甲醇封闭30min，加0.1％Triton-0.1％枸橼酸钠溶液冰上放置2min，加末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT)及荧光素标记的dUTP，37℃孵育2h，辣根过氧化物酶偶联的抗荧光素抗体37℃孵育2h，NBT/BCIP显色，以上各步间均用0.01M PBS漂洗3次，每次5min，脱水，透明，封片。阴性对照组未加TdT酶。各实验组重复3次，随机计数5个视野的TUNEL染色阳性神经元。
统计学分析数据用均数±标准差(x±s)表示，均数间比较用t检验，组间差异显著性检测采用方差分析。
2.结果
2.1 脊髓运动神经元形态学观察神经元接种4h后开始贴壁，细胞呈单个圆形或椭圆形，种植24h已见部分运动神经元长出突起，1％JWL组运动神经元突起明显较长。培养48～72h后贴壁的细胞明显长大，胞体内逐渐出现颗粒状物质，细胞周晕清晰，突起增多延长，96h以后整个视野内突起纵横交错。运动神经元生长5～6d的细胞最为丰满，折光性强，胞核位于细胞中央或偏于一边，胞核浅亮与核周质容易分开，胞核及核仁清晰可见。对照组培养第5d的运动神经元加入谷氨酸24h后突起回缩，1％肌萎灵注射液培养神经元生长良好，密度适中，可见突起粗大并互相交错。TUNEL染色可见谷氨酸对照组运动神经元凋亡，出现较多凋亡小体，1％肌萎灵注射液组中凋亡小体明显减少。
2.2肌萎灵注射液对正常运动神经元生长的影响(表1)0.5％、1％、5％JWL组运动神经元细胞活力与对照组有统计学差异(P＜0.05)，其中1％JWL组细胞活力明显优于力如太组(P＜0.05)；0.5％和1％JWL组脊髓运动神经元突起生长明显优于对照组(P＜0.05)，而且与力如太组有显著性差异(P＜0.05)。
表1肌萎灵注射液对正常运动神经元活力和突起的影响(x±s)Tab 1 The effect of JWL injection on vigor and outgrowth of normal motor neuron

1.与对照组比较P＜0.05；2.P＜0.05与力如太组比较1.P＜0.05 vs control group；2.P＜0.05 vs riluzole group2.3肌萎灵注射液对兴奋性氨基酸毒性损伤运动神经元LDH漏出的影响(表2)检测结果O.5％JWL和力如太组培养上清中LDH均低于对照组(p＜0.05)，两者之间无显著性差异(p＞0.05)，说明两者可降低谷氨酸损伤运动神经元导致细胞内LDH的漏出。
表2肌萎灵注射液对兴奋性氨基酸毒性损伤运动神经元LDH漏出的影响(x±s)Table 2 The effect of JWL injection on LDH leakage of neurotoxicity motor neurons


1.与对照组比较P＜0.05；2.P＜0.05与力如太组比较1.P＜0.05 vs control group；2.P＜0.05 vs riluzole group2.4肌萎灵注射液对兴奋性氨基酸毒性损伤运动神经元细胞凋亡的影响(表3)1％JWL组和力如太组TUNEL阳性细胞少于对照组(p＜0.05)。0.5％和5％JWL组TUNEL阳性细胞减少但与对照组无显著性差异(p＞0.05)，与力如太组有差异(p＜0.05)。
表3肌萎灵注射液对兴奋性氨基酸毒性损伤运动神经元细胞凋亡的影响(x±s)Table 2 The effect of JWL injection on apoptosis of neurotoxicity motor neurons

1.与对照组比较P＜0.05；2.P＜0.05与力如太组比较1.P＜0.05 vs control group；2.P＜0.05 vs riluzole group3.讨论中医药在中枢神经系统修复过程中具有一定的优势。肌萎灵注射液是吴以岭教授在中医奇经理论指导下研制成的治疗神经肌肉系统疾病的中药新制剂，由人参等药组成，具有扶元起痿，养荣生肌的作用。实验研究发现肌萎灵注射液可明显改善实验性自身免疫性运动神经元病(EAMND)模型小鼠的运动功能，对受损伤的脊髓前角运动神经元具有保护和改善作用。
谷氨酸作为兴奋性神经递质在中枢神经系统中起重要的生理作用，但在缺血性中风、肌萎缩侧索硬化(ALS)等疾病中，谷氨酸能神经通路异常激活而产生兴奋性毒性，是造成神经元损伤的重要因素。谷氨酸抑制剂研制为临床治疗神经系统疾病开辟了新的途径。力如太是美国FDA通过的治疗ALS的新药，其主要药理作用是对抗兴奋性氨基酸毒性，临床研究可减慢疾病的发展，但价格昂贵且并不能治愈ALS和明显改善患者症状。本研究将应用密度梯度离心法体外培养运动神经元，加入谷氨酸建立兴奋性氨基酸毒性损伤模型，以力如太作为抗兴奋性氨基酸毒性的对照药，研究肌萎灵注射液对正常和兴奋性氨基酸毒性损伤运动神经元的保护作用。
3.1运动神经元体外培养是观察药物对中枢神经系统作用疗效的重要手段由于中枢神经系统的特殊性，临床和实验研究不能直观地对运动神经元进行观察。体外细胞培养是近年来应用较多的一种实验方法和手段，能够有效地观察比较药物疗效，并进一步探讨作用机制。本研究应用密度梯度离心法分离鼠胚脊髓运动神经元进行原代培养，建立了观察药物对运动神经元作用的体外模型。为了获得一定纯度的运动神经元，采取两个措施一是内置6.8％Metrizamide的离心管形成了一个完整的密度梯度体系，经离心后体积较大的运动神经元因浮力大，上浮于Metrizamide的顶部；二是在培养24h后加入5-Fu，应用有丝分裂抑制剂减少神经胶质细胞的增生。应用以上方法获得的运动神经元纯度可达85％，而且生长活性未受影响，生长稳定，有利于对药物作用的观察。
3.2肌萎灵注射液促进正常运动神经元的生长研究发现，当运动神经元病患者出现临床症状时，其运动神经元已经减少50％以上，甚至达到80％，而且其减少速度大约是每6个月减少一半。由于运动神经元一旦损伤将不可修复，因此，尚存的正常运动神经元在保持患者运动功能和有效代偿中起重要作用。本研究结果表明，肌萎灵注射液可显著增强正常培养运动神经元活力，并促进脊髓运动神经元突起生长(P＜0.05)。由于力如太主要作用机理是对抗兴奋性氨基酸毒性，而对正常运动神经元未见增加细胞活力作用，本研究结果与文献一致。0.5％和1％肌萎灵注射液促进神经突起生长作用明显优于力如太(P＜0.05)。这说明肌萎灵注射液促进正常运动神经元的活力，其促进神经突起生长的作用对中枢神经系统损伤的功能代偿具有重要意义。
3.3肌萎灵注射液减轻兴奋性氨基酸毒性对运动神经元的损伤为了研究肌萎灵注射液对兴奋性氨基酸毒性损伤运动神经元的保护作用，首先用肌萎灵注射液处理培养运动神经元，继而加入谷氨酸建立兴奋性氨基酸毒性损伤模型。LDH是细胞内的一种标志酶，正常情况下释放量极少，当神经元受损后LDH释放量相应增加，因此测定培养液中的LDH含量能够定量评价神经元的受损程度，结果发现一定剂量的肌萎灵注射可减轻细胞乳酸脱氢酶的漏出。但在体外培养中，药物剂量过高时，对细胞可能反而有一定的损伤作用。目前认为，神经元在低剂量兴奋性氨基酸作用下主要以凋亡方式死亡，而在高剂量时主要以坏死方式死亡。本研究发现加入谷氨酸后，培养细胞中出现TUNEL阳性细胞，是谷氨酸诱导运动神经元凋亡的标志。1％肌萎灵可减少TUNEL阳性细胞数目，说明肌萎灵可对抗谷氨酸诱导的神经元细胞凋亡。
本研究表明，肌萎灵注射液既可增强正常运动神经元活力，促进神经突起生长，又能保护兴奋性氨基酸毒性损伤运动神经元，减少细胞凋亡，在维持中枢神经系统功能，延缓病情发展，提高患者生存质量方面具有重要的临床应用价值。
权利要求
1.一种治疗肌肉萎缩及重症肌无力的药物，其特征在于是由如下重量份比例的原料药制成的人参1-10份，淫羊藿1-10份。
2.根据权利要求1所述的药物，其原料药的重量份比例为人参5份，淫羊藿5份。
3.根据权利要求1所述的药物，其原料药的重量份比例为人参5份，淫羊藿2份。
4.根据权利要求1所述的药物，其原料药的重量份比例为人参9份，淫羊藿7份。
5.根据权利要求1所述的药物，其原料药的重量份比例为人参3份，淫羊藿1份。
6.根据权利要求1-5任一所述的药物，其特征在于该药物为注射剂、胶囊、丸剂、片剂或口服液。
7.根据权利要求6所述的药物，其特征在于该药物为注射剂。
8.权利要求7所述药物的制备方法，其特征在于包括以下步骤1)、取上述中药材，分别选净，粉碎，按组方量称量；2)、取人参药材，用60-90％乙醇提取1-3次，第1次加药材8-12倍量溶剂提取1-2小时，第2次加6-10倍量溶剂提取1-2小时，第3次加6-10倍量溶剂提取0.5-1小时；合并上述提取液，趁热滤过，减压回收乙醇，并浓缩，放入不锈钢桶内，加纯水搅拌均匀，冷藏24-36h；将冷藏液取出，放至常温，板框过滤器过滤，用少量水洗涤板框，滤液加纯水稀释，备用；取人参浓缩药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用pH值8-9的氨水、20％乙醇、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液。将80％洗脱液加入纯水，配成50％醇溶液，通过中性氧化铝柱，收集洗脱液，再用少量50％乙醇洗涤柱子，合并洗脱液备用；取药液加入活性炭，回流加热，煮沸20min，趁热板框抽滤，收集滤液，浓缩，冷藏过夜；澄清板过滤，减压干燥，即得人参提取物。3)、取淫羊藿药材，加水煎煮提取2-5次，加水量为10-30倍，第一次提取时间定为0.5-2h，以后3次为0.5-1h；合并上述提取液，趁热滤过，减压浓缩，放入不锈钢桶内，加乙醇至药液含醇浓度为70％，冷藏；过滤，滤液回收乙醇并浓缩，加水搅拌均匀，冷藏，过滤，备用；取淫羊藿药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用纯水、20％乙醇、50％乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱液；洗脱液拌入适量硅藻土混匀，用无水乙醇提取2-5次，提取液合并，回收乙醇并浓缩，浓缩液加入丙酮，并搅拌均匀，冷藏，过滤，沉淀加丙酮再同前处理2次，合并3次滤液，回收溶剂，并浓缩，减压干燥，即得淫羊藿提取物。4)、取2)和3)中制备的提取物，加入1，2丙二醇、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠附加剂，并加注射用水定容到10-20ml，热处理冷藏，依次用微孔滤膜、超滤过滤，灌装，灭菌，即得本发明的注射剂。
9.权利要求6所述药物的制备方法，其特征在于包括以下步骤将权利要求8中步骤2)和3)制备的提取物，按常规制剂方法制成胶囊、丸剂、片剂或口服液。
全文摘要
本发明以是以传统中医理论“扶元起萎，养荣生肌”为治疗原则，提供一种了用于治疗运动神经元疾病(肌萎缩侧索硬化、进行性脊肌萎缩、进行性延髓麻痹、原发性侧索硬化)、进行性肌营养不良、先天性肌病等疾病所致的肌肉萎缩及重症肌无力的药物及其制备方法，达到标本兼治。该药物是由原料药人参、淫羊藿制备而成。本发明药物具有以下作用对抗肌萎缩侧索硬化症患者血清对神经末梢再生能力的抑制作用，促进受损神经末梢的再生和修复，明显提高实验动物游泳耐力，有明显增强肌力作用，并可使肌肉疲劳小鼠血清磷酸肌酸肌酶活性升高受到明显的抑制，对骨骼肌的功能有明显的保护作用。
文档编号A61P21/04GK1785223SQ200410096779
公开日2006年6月14日 申请日期2004年12月8日 优先权日2004年12月8日
发明者吴以岭 申请人:河北以岭医药研究院有限公司