专利名称：环己烯酮类双环(稠环)化合物及其制备方法与用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及环己烯酮类双环(稠环)化合物及其制备方法与用途。具体涉及含一个长链烃取代基的环己烯酮类双环(稠环)新化合物、含有该类化合物的提取物以及所述化合物和提取物的制备方法和用于制备细胞周期抑制剂、细胞凋亡诱导剂、细胞增殖抑制剂、癌细胞杀伤剂和抗肿瘤剂的用途。
背景技术：
环己烯酮类双环(稠环)化合物主要由环己烯酮的六元碳环与另一个碳环或杂环形成稠环，并在该稠环骨架上连接各种取代基而成。该类化合物中，由环己烯酮的六元碳环与另一个饱和五元氧杂环形成稠环、且在该稠环骨架上连有不同取代基的化合物有些已有文献报道。如文献C.Nishino，et al.，Halleridone，a cytotoxic constituent from CornuscontroversaJ.Nat.Prod.，51(6)，1281-1282，1988曾记载了9个该类化合物。但其中仅1个为天然化合物，其余8个均为该天然产物的人工衍生物，而且所记载的所有该类化合物的双环骨架结构以及取代类型和取代基都与本发明的化合物完全不同。迄今，与本发明的化合物骨架结构相同且连有长链烃取代基的环己烯酮类双环(稠环)化合物尚未见文献报道。
南酸枣(Choerospondias axillaries(Roxb.)Burtt et Hill)为漆树科南酸枣属植物，其树皮和果实入药，树皮主治疮疡、汤火伤、阴囊湿疹，鲜果则消食滞，治食滞腹痛，果核醒酒解毒，治风毒起疙瘩成疮或疡痈(江苏新医学院编，中药大辞典，上册，上海，上海人民出版社，1977年，第397-398页和第1564页)。干燥果实已作为中药“广枣”收入我国2000年版药典(国家药典委员会，中华人民共和国药典，一部，北京，化学工业出版社，2000年，第32页)。南酸枣中的黄酮、酚酸、有机酸、氨基酸、甾体等多种类型的化学成分已有报道，南酸枣粗提物、总黄酮或单体化合物的抗菌、抑制血小板聚集等多种活性也已有研究报道(熊冬生等；南酸枣植物在药物方面的研究概况及其应用前景广东药学，2000年第10卷第5期，第8-10页)。但南酸枣的抗肿瘤活性及其活性成分尤其是本发明涉及的环己酮类双环(稠环)活性化合物至今未见研究报道。
发明内容
本发明旨在提供一种化学结构新的具有细胞周期抑制、细胞凋亡诱导以及对癌细胞的直接杀伤等抗肿瘤活性的含一个长链烃取代基的环己烯酮类双环(稠环)化合物。
本发明人首次发现南酸枣的粗提物对癌细胞有很好的杀伤性细胞毒、细胞凋亡诱导、细胞周期抑制及对癌细胞增殖的抑制等抗肿瘤活性，遂对其活性成分进行了研究，并发现了下述式I所示环己烯酮类双环(稠环)新化合物 其中，R1、R2、R3、R4为氢、羟基、氨基、磺酸基、羧基、烃氧基、胺基、酰基、酰氧基或酰胺基，或者为具有或不具有羟基、氨基、磺酸基、羧基等取代基的C15～C20直链或支链烃基，其中，至少一个为具有或不具有羟基等取代基的(Z)-12-烯-十七烷基。
因此，本发明的第一个方面涉及式I所示环己烯酮类双环(稠环)化合物或其药学上可接受的盐
其中，R1、R2、R3、R4为氢、羟基、氨基、磺酸基、羧基、烃氧基、胺基、酰基、酰氧基或酰胺基，或者为具有或不具有羟基、氨基、磺酸基、羧基等取代基的C15～C20直链或支链烃基，其中，至少一个为具有或不具有羟基等取代基的(Z)-12-烯十七烷基。
本发明的第二个方面涉及一种提取物，其特征在于其中包含至少一种上述第一个方面所述的式I所示的环己烯酮类双环(稠环)化合物或其药学上可接受的盐。
本发明的第三个方面涉及制备上述第一个方面所述的式I化合物的方法，所述方法包括用醇或含水醇对有关植物原料例如南酸枣进行提取后，再经过分离纯化得到式I化合物。
本发明的第四个方面涉及制备上述第二个方面所述的含有式I化合物的提取物的方法，所述方法包括用醇或含水醇对有关植物原料例如南酸枣进行提取，得粗浸膏即提取物。
本发明的第五个方面涉及含有作为活性成分的第一个方面所述的式I环己烯酮类双环(稠环)化合物以及一种或多种药用载体或赋形剂的药物组合物。
本发明的第六个方面涉及第一个方面所述的式I环己烯酮类双环(稠环)化合物用于制备细胞周期抑制剂、细胞凋亡诱导剂、细胞增殖抑制剂癌、细胞杀伤剂和抗肿瘤剂的用途。
在本发明的一个实施方式中，本发明涉及式I所示的环己烯酮类双环(稠环)化合物或其药学上可接受的盐
其中，R1、R2、R3、R4为氢、羟基、氨基、磺酸基、羧基、烃氧基、胺基、酰基、酰氧基或酰胺基，或者为具有或不具有羟基、氨基、羧基或磺酸基等取代基的C15～C20直链或支链烃基，其中，至少一个为具有或不具有羟基等取代基的(Z)-12-烯-十七烷基。
上述定义中，术语“烃氧基”是指烃基与氧原子结合形成的基团。
术语“胺基”是指氨基(-NH2)被烃基单或二取代所形成的基团。
术语“酰基”、“酰氧基”和“酰胺基”分别是指羰基(-CO-)、羰氧基(-OCO-)、羰基氨基(-NHCO-)被烃基取代所形成的基团。
上述定义中的“烃基”若非特别指明碳数，则是指任何由碳原子和氢原子组成的基团，例如可以包括如具有不多于20个碳原子的烷基、烯基、炔基等脂肪基、环烷基等脂环基、芳香基等，或者它们的组合。脂肪基中的烷基、烯基、炔基可以是直链或者支链的。脂环基可以是非芳香的单环、稠环、桥环或者螺环的饱和或不饱和环状烃基。芳香基例如苯基、萘基、菲基、联苯基等。上述基团的组合例如环烷基烷基、环烷基烯基、环烷基炔基、环烯基烷基、环烯基烯基、环烯基炔基、烷基环烷基、烯基环烷基、炔基环烷基、烷基环烯基、烯基环烯基、炔基环烯基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、烷基芳基、烯基芳基、炔基芳基等。特别的，所述的“C15～C20直链或支链烃基”指的是具有15～20个碳原子的直链或支链烷基、烯基或炔基。
术语“药学上可接受的盐”可以是药用无机或有机盐。本发明式I化合物中具有碱性基团如氨基、胺基等的可以与无机酸形成药用盐，例如硫酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐等；也可与有机酸形成药用盐，例如乙酸盐、草酸盐、柠檬酸盐、葡萄糖酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、马来酸盐等。本发明式I中具有酸性基团如羧基或磺酸基的化合物也可以与碱金属或碱土金属形成药用盐，优选但不限于钠盐、钾盐、镁盐或钙盐等。
优选的，本发明的式I环己烯酮类双环(稠环)化合物或其药学上可接受的盐中各基团具有如下定义 R1和R2为氢、羟基、氨基、磺酸基、羧基、烃氧基、胺基、酰基、酰氧基或酰胺基，R3和R4为氢、具有或不具有羟基等取代基的C15～C20直链或支链烃基或(Z)-12-烯-十七烷基。
在本发明进一步的优选实施方案中，R1和R2为羟基，R3为氢，R4为(Z)-12-烯-十七烷基，即如下化合物II 本发明的另一实施方式是含有上述式I化合物的提取物。本发明的提取物是指含有式I化合物的天然药物的提取物。本发明中所述的提取物，只要其中含有上述式I化合物，而且能够产生式I化合物的预期效果(如抑制细胞周期、诱导细胞凋亡、杀伤癌细胞等)，不仅包括植物提取物，也包括可能的情况下的动物或者真菌、细菌等的提取物，或者是对植物细胞、真菌、细菌进行培养得到的培养物的提取物。
植物提取物可以是植物整体的提取物或者个别组织、器官或者部分的提取物，如根、皮、叶、花、果实、种子、果核等。提取时可以使用新鲜获得的原料或者干燥后的原料。
所得的提取物可以是对例如植物原料直接提取所得到的最初的提取物、浸膏或者进行了初步纯化如溶剂萃取的粗处理物等，只要其中含有式I化合物，同时也含有其它对式I化合物活性没有实质影响的物质。
含有上述式I化合物的提取物及纯的式I化合物可通过如下方法制备用醇或含水醇对有关植物材料例如南酸枣或培养物等进行提取，得粗浸膏即提取物，然后再从粗浸膏中分离纯化而得到式I化合物。
根据本发明，上述方法中所采用的醇可以是甲醇、乙醇等低级醇，优选乙醇；所述含水醇中醇含量可以是60～95％左右，优选醇含量60～95％的含水乙醇。
所述提取可以采用浸提、渗滤或回流等方式，显然，提取时间、次数，所使用的醇的量可根据所采用的方式和温度而不同，因此本发明中不拟对此作出特别限定。譬如，室温浸提每次可浸泡4～8天、提取3～6次，室温渗滤可连续提取操作5～10天，回流提取每次可持续回流1～3小时、提取3～6次。
所述分离纯化包括本领域技术人员熟知的天然产物分离纯化的常规方法和手段，如液液萃取、柱层析、薄层层析、高效液相层析及重结晶等。其中柱层析、薄层层析、高效液相和重结晶精制可反复进行多次，柱层析和薄层层析可以使用本领域熟知的硅胶、氧化铝、聚酰胺、大孔树脂等吸附剂，另外，也可以使用RP-18、RP-8等反相硅胶作为吸附剂。
本发明人等采用丽丝胺罗丹明B(sulforhodamine B，SRB)法和流式细胞术结合显微镜下检测细胞形态特征的方法，测试了式I化合物对小鼠乳腺癌tsFT210细胞、人大肠癌HCT-15细胞、人宫颈癌HeLa细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人卵巢癌A2780细胞的细胞增殖抑制、细胞周期抑制和细胞凋亡诱导以及对癌细胞的直接杀伤等作用。经实验证实，式I化合物通过抑制细胞周期周转、诱发癌细胞凋亡或直接杀伤等方式对肿瘤细胞显示出抑制细胞增殖的生物学活性，从而具有抗肿瘤作用。
本发明式I化合物与各种药物可接受的载体、赋形剂或辅料配伍，可制成抗肿瘤药物，用于肿瘤的治疗。
本发明化合物可单独或以药物组合物的形式给药。给药途径可以是口服、非肠道或局部给药。药物组合物可根据给药途径配成各种适宜的剂型。
本发明化合物的药物组合物可以以下面的任意方式施用口服、喷雾吸入、直肠用药、鼻腔用药、颊部用药、局部用药、非肠道用药、如皮下、静脉、肌内、腹膜内、鞘内、心室内、胸骨内或颅内注射或输入，或借助一种外植储器用药。其中优选口服、腹膜内或静脉内给药方式。
当口服用药时，本发明化合物可制成任意口服可接受的制剂形式，包括但不限于片剂、胶囊、水溶液或水悬浮液。其中，片剂使用的载体一般包括乳糖和玉米淀粉，另外也可加入润滑剂如硬脂酸镁。胶囊制剂使用的稀释剂一般包括乳糖和干燥玉米淀粉。水悬浮液制剂则通常是将活性成分与适宜的乳化剂和悬浮剂混合使用。任选地，以上口服制剂形式中还可加入一些甜味剂、芳香剂或着色剂。本发明提取物和化合物也可以根据常规方法制成缓释和控释制剂使用。
当皮肤局部施用时，本发明化合物可制成适当的硬膏、软膏、洗剂或霜剂制剂形式，其中将活性成分悬浮或溶解于一种或多种载体中。软膏制剂可使用的载体包括但不限于矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯、乳化蜡和水；洗剂或霜剂可使用的载体包括但不限于矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、吐温60、十六烷酯蜡、十六碳烯芳醇、2-辛基十二烷醇、苄醇和水。
本发明化合物还可以无菌注射制剂形式用药，包括无菌注射水或油悬浮液或无菌注射溶液。其中，可使用的载体和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，灭菌的非挥发油也可用作溶剂或悬浮介质，如单甘油酯或二甘油酯。
另外需要指出，本发明化合物使用剂量和使用方法取决于诸多因素，包括患者的年龄、体重、性别、自然健康状况、营养状况、化合物的活性强度、服用时间、代谢速率、病症的严重程度以及诊治医师的主观判断。优选的使用剂量介于0.01-100mg/kg体重/天。
式I化合物还可作为抑制细胞周期或诱发细胞凋亡的低分子生物探针用于生命科学研究中。当把式I化合物作为细胞周期抑制剂或细胞凋亡诱导剂用于生命科学研究时，可溶于甲醇或含水甲醇中，也可溶于二甲基亚砜的含水溶液中加以应用。
图1是实施例1所得化合物(化合物II)在甲醇溶液(40μg/ml)中的紫外吸收光谱；图2是化合物II的红外吸收光谱(KBr)；图3是化合物II在氘代氯仿中的1H核磁共振谱；图4是化合物II在氘代氯仿中的13C核磁共振谱；图5是化合物II在甲醇溶液(0.1mg/ml)中的圆二色散(CD)谱；图6是小鼠乳腺癌tsFT210细胞用化合物II处理17小时后测得的流式细胞直方图。
具体实施例方式
下列实施例将进一步说明本发明，但并不对本发明构成限制。
需要说明的是，在化合物的结构研究中，熔点用北京天地宇科技有限责任公司X-4型精密显微熔点测定仪测定，温度计未经校正。比旋光度用JSASCO P-1020型旋光仪测定。正负离子ESI-MS和HR-ESI-MS分别用美国ABI公司API 3000型液相色谱-质谱联用仪和英国Micromass公司LCT型质谱仪测定，紫外光谱用Shimadzu UV2501PC型紫外分光光度仪测定，红外光谱用Nicolet Magna-IRTM550型红外光谱仪测定，核磁共振谱用JEOL Eclips-600型超导核磁共振仪(600MHz1H-NMR，150MHz13C-NMR)测定。圆二色散(CD)光谱用JASCOJ-810 Spectropolarimeter测定。
实施例1取南酸枣(Choerospondias axillaries(Roxb.)Burtt et Hill)的干燥树皮(3.2kg)粉碎后用乙醇25升室温浸提，每次浸泡7天，共提4次。合并提取液，浓缩干燥，得乙醇提取物750g。将乙醇提取物750g悬浮于3升水中，用氯仿萃取，每次用3升氯仿，共萃取4次。合并氯仿萃取液，浓缩至干，得到提取物60g。
所得提取物(60g)干法上减压硅胶柱(柱床7.5cm×18.5cm)，用石油醚-丙酮(100∶1→2∶1)溶剂系统作为洗脱剂进行梯度洗脱层析。在洗脱过程中，通过增加石油醚(P)中丙酮(A)的用量来梯度递增洗脱溶剂的极性(VP∶VA＝100∶1，50∶1，10∶1，5∶1等)。根据薄层检测及活性测试结果合并流分，于VP∶VA＝5∶1洗脱部分得到10.8g提取物，为提取物Fr-4。
提取物Fr-4(10.8g)干法上减压硅胶柱(柱床5.0cm×20cm)，用氯仿(C)-丙酮(A)系统梯度洗脱(VC∶VA＝30∶1，15∶1，10∶1，5∶1等)，根据薄层检测及活性测试结果合并流分，于VC∶VA＝10∶1洗脱部分得到3.8g提取物，为提取物Fr-4-3。
提取物Fr-4-3(3.8g)在甲醇中上Sephadex LH-20柱(柱床3.8cm×36cm)，并用甲醇洗脱，得到含化合物II的层析组分，该组分经制备硅胶薄层层析(石油醚-乙醚-正丁醇-乙酸2∶1∶0.2∶0.1展开)分离，得到化合物II粗品。该化合物II粗品在用80％甲醇洗脱的RP-18反相分析高效液相(203nm检测)中，在保留时间67分钟处给出化合物II的单一洗脱峰。经相同条件RP-18反相制备高效液相层析(203nm检测)分离，用80％甲醇洗脱并收集的相应洗脱峰，经浓缩得化合物II纯品167mg。
经结构解析，化合物II具有如下结构(4S5R8S绝对构型) 其中，
R1和R2为羟基；R3为氢；R4为(Z)-12-烯-十七烷基。
碳环及长链上的阿拉伯数字表示相应碳原子的标位。
其各种理化性质和波谱数据如下化合物II，分子式C25H42O4，油状化合物正离子ESI-MS m/z429[M+Na]+，424[M+NH4]+，407[M+H]+，389[M+H-H2O]+，371[M+H-2H2O]+；负离子ESI-MS m/z405[M-H]-，387[M-H-H2O]-；正离子HR-ESI-MS m/z实测值407.3171[M+H]+，计算值407.3161(C25H43O4[M+H]+)[α]D31-63.4°(c1.0，CHCl3)UVλmaxnm(logε)in MeOH213.6(3.96)，202(3.97)(参见图1)IR(KBr)νmaxcm-13384(OH)，3005(＝CH-)，2925，2854(CH3&CH2)，1683(共轭CO)，1460，1340，1298，1269，1203，1138，1070，1018(C-O)，922，719，646(参见图2)CDλmaxnm(mdeg)in MeOH at 0.1mg/ml330.8(-6.25309)，245.7(-21.3081)，205.4(+28.3949)(参见图5)。
1H及13C NMR数据见下表1(参见图3、图4)。
表1化合物II在氘代氯仿中的600MHz1H及150MHz13C核磁共振数据a)
a)表中信号根据DEPT、PFG1H-1H COSY、PFG HMQC、PFG HMBC及NOE差谱解析结果予以归属。b)该栏中的代号分别表示在PFG1H-1H COSY谱中与同一行标位中的氢核给出偶合相关信号的氢核。c)该栏中的代号分别表示在PFG HMBC谱(IrJCH＝8.3或4 Hz)中与同一行标位中的氢核给出HMBC偶合相关信号的碳原子。d)、e)、f)该信号因与其它信号相互重叠而未能予以确切归属。g)、h)该两个信号间信号归属可互换。
化合物II的NOE差谱测试分析结果当照射Ha-6时，在He-6和Hb-7上观测到NOE；当照射He-6时，在Ha-6、Ha-7和Hb-7上观测到NOE；当照射Ha-7时，在He-6、Hb-7和H-8上观测到NOE；当照射Hb-7时，在He-6、Ha-6和Ha-7上观测到NOE；当照射H-8时，在Ha-7、Ha-9、Hb-9、Ha-10和Hb-10上观测到NOE。
实施例2.生物活性测试实验样品及实验方法被测样品溶液的配制取上述实施例1中分离精制的化合物II纯品，精密称取适量，用甲醇配制成所需浓度的溶液，供测活性。
细胞系及细胞培养活性测试采用小鼠乳腺癌tsFT210细胞系、人大肠癌HCT-15细胞系、人宫颈癌HeLa细胞系、人乳腺癌MCF-7细胞系、人卵巢癌A2780细胞系。
细胞用含10％FBS的RPMI-1640培养基，在32℃(tsFT210细胞)或37℃(HCT-15、HeLa、MCF-7和A2780细胞)于通入5％二氧化碳的培养箱中继代培养。
细胞增殖抑制活性测试方法(丽丝胺罗丹明B法即SRB法)取对数生长期的人大肠癌HCT-15细胞、人宫颈癌HeLa细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人卵巢癌A2780细胞，用新鲜的RPMI-1640培养基配制成密度为每毫升2×105个细胞的细胞悬液，按每孔200微升接种于96孔板中，每孔加入2微升不同浓度的样品或空白溶液，37℃下培养24小时。取药物作用下培养后的细胞，首先在光学显微镜下观察药物处理引起的形态学变化，判断有无细胞周期抑制，细胞凋亡或细胞坏死的形态学特征。继而吸去上清液并往每孔细胞中加入20％三氯醋酸50微升，置于4℃固定1小时，用水冲洗5次并空气干燥。每孔加入0.4％SRB的醋酸溶液50微升并在室温静置30分钟。用1％醋酸水清洗4次，除去未结合的游离SRB染料。每孔加入150微升Tris缓冲液(10mmol/L，pH 10.5)溶解蛋白结合染料并利用MD公司产SPECTRA MAX Plus型酶标仪测定每孔在520nm处的光密度(OD)值。在同一块96孔板中样品的每个浓度均设置三孔，另设三孔空白对照，取三孔平均OD值按IR％＝(OD空白对照-OD样品)/OD空白对照×100％式计算每个浓度下的细胞增殖抑制率(IR％)。
流式细胞术测试方法取对数生长期的tsFT210细胞，用新鲜的RPMI-1640培养基配制成密度为每毫升2×105个细胞的细胞悬液，按每孔0.5毫升接种于24孔板中，每孔加入5微升不同浓度的样品溶液，32℃下培养17小时。取药物作用下培养后的细胞，首先在光学显微镜下观察药物处理引起的形态学变化，判断有无细胞周期抑制，细胞凋亡或细胞坏死的形态学特征，必要时进行拍照。继而将细胞分别从24孔板转移至1.5毫升Eppendorf离心管中，4℃下3000转/分离心3分钟，吸去上清液，加0.5毫升磷酸缓冲溶液(PBS)震荡洗涤一次，相同条件下离心收集细胞，加150微升碘化丙啶(PI)水溶液(在100毫升水中含5毫克PI、100毫克柠檬酸纳和200毫克NP-40)，4℃下染色30分钟后，加入150微升PBS稀释，用流式细胞仪分析测定细胞中DNA的含量分布。
实验结果化合物II对人癌细胞增殖的抑制活性在SRB法测试中，化合物II对人大肠癌HCT-15细胞、人宫颈癌HeLa细胞、人卵巢癌A2780细胞、人乳腺癌MCF-7细胞的增殖显示出不同程度的抑制活性，不同浓度的化合物II对这些人癌细胞增殖的抑制活性测试结果见表2。
表2化合物II抑制人癌细胞增殖的SRB法测试结果
表2结果表明，在SRB法测试中，化合物II对所测试的癌细胞均显示不同程度的抑制癌细胞增殖的抗癌活性。
流式细胞术结果由图6可见，将tsFT210细胞用不同浓度的化合物II处理后用流式细胞术进行了检测分析。结果表明化合物II在每毫升0.39微克至每毫升1.56微克的浓度范围内主要表现出细胞周期抑制活性，将tsFT210细胞的细胞周期抑制在G0/G1期；而且从每毫升0.78微克的浓度开始，同时呈现细胞凋亡诱导活性，在sub-G0/G1区均检测到明显的凋亡峰，且随浓度增高，凋亡峰愈加显著，从每毫升3.125微克开始主要呈细胞凋亡诱导活性；当浓度在每毫升25微克以上时，开始检测到坏死性细胞毒活性。上述流式细胞术分析检测结果与下述显微镜下观测的形态学检测结果基本吻合。
形态学检测结果在光学倒置显微镜下观察到，tsFT210细胞当用每毫升1.56微克的化合物II处理时开始检测到有较多的细胞呈凋亡细胞的形态特征，当用每毫升3.125微克以上的化合物II处理时，视野中绝大多数细胞呈典型的凋亡形态特征，即细胞雪花瓣状或膜裹着细胞碎片；当用每毫升25微克或该浓度以上的化合物II处理时，细胞数显著减少，部分细胞呈坏死性细胞的形态特征，表明化合物II在高浓度时对哺乳动物癌细胞具有直接杀伤性细胞毒活性。
结论上述实验结果表明，本发明的式I化合物可通过抑制细胞周期、诱发癌细胞发生凋亡或对癌细胞的直接杀伤性细胞毒活性来发挥其抑制癌细胞增殖的抗肿瘤作用。因此，本发明的化合物可作为抗肿瘤剂用于肿瘤的治疗，也可作为诱发细胞凋亡或抑制细胞周期的低分子探针用于探索生命现象本质的生命科学研究中。
权利要求
1.式I化合物或其药学上可接受的盐 其中，R1和R2为氢、羟基、氨基、磺酸基、羧基、烃氧基、胺基、酰基、酰氧基或酰胺基，或者具有或不具有羟基、氨基、羧基、磺酸基取代基的C15～C20直链或支链烃基，其中至少一个为具有或不具有羟基取代基的(Z)-12-烯-十七烷基。
2.权利要求1所述的化合物，其中，R1和R2为氢、羟基、氨基、烃氧基、胺基、酰基、酰氧基或酰胺基，R3和R4为氢或者具有或不具有羟基取代基的C15～C20直链或支链烃基或(Z)-12-烯-十七烷基。
3.权利要求1或2所述化合物，其中，R1和R2为羟基，R3为氢，R4为(Z)-12-烯-十七烷基。
4.提取物，其特征在于其中含有至少一种权利要求1～3任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
5.药物组合物，含有作为活性成分的权利要求1～3任一项所述化合物或权利要求4所述提取物以及一种或多种药用载体或赋形剂。
6.权利要求1～3任一项所述的化合物的制备方法，该方法包括用醇或含水醇浸提植物原料，获得提取物，然后从提取物中分离纯化而得到。
7.权利要求4所述的提取物的制备方法，该方法包括用醇或含水醇浸提植物原料，获得提取物。
8.权利要求6或7的方法，所述醇是乙醇，所述含水醇是60～95％的含水乙醇，所述分离纯化包括液液萃取、柱层析、薄层层析、高效液相层析及重结晶。
9.权利要求1～3任一项所述的化合物和/或权利要求4所述的提取物用于制备细胞周期抑制剂、细胞凋亡诱导剂、细胞的增殖抑制剂或肿瘤细胞杀伤剂的用途。
10.权利要求1～3任一项所述的化合物和/或权利要求4所述的提取物用于制备抗肿瘤药物的用途。
全文摘要
本发明涉及式I所示的含一个长链烃取代基的环己烯酮类双环(稠环)化合物、含有该类化合物的提取物及所述化合物和提取物的制备方法和用途(式I中R
文档编号A61K31/343GK1733748SQ200510099109
公开日2006年2月15日 申请日期2005年9月5日 优先权日2005年9月5日
发明者崔承彬, 李长伟, 蔡兵, 韩冰 申请人:中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所