专利名称：用免疫调节剂化合物治疗或预防呼吸道病素性感染的制作方法
技术领域：
本发明涉及呼吸道病毒性感染的治疗或预防领域。
背景技术：
描述呼吸道病毒性感染每年能侵袭数亿人。
流感病毒有三种类型，即A，B和C型。这三种类型都感染人类。A型是最受关注的，它还感染很多种其它类动物。典型的人类流感A病毒的抗原漂移变体每年都再度出现，一般每年要感染约5亿人。抗原性不同的新病毒会周期性出现，这些抗原漂移变体具有引起流行病的可能，流行病会迅速导致数百万人的死亡。不同种动物之间的传播是潜在引起流行病的抗原漂移病毒的演变和致病性的关键。
冠状病毒感染人类、其他哺乳动物以及鸟类。严重急性呼吸综合征(SARS)是由冠状病毒引起的，冠状病毒首次出现在中国，随后蔓延到30个国家。SARS是一种异常的冠状病毒，因其包含神经氨酸酶，而神经氨酸酶通常会出现在流感病毒中。SARS病毒可以被视为正粘病毒与冠状病毒的杂交体。SARS病毒和引起1918年流感流行病的病毒都具有共同的基因序列。这两种病毒都具有初始序列“MNPNQKIITIGS”，说明它们可能相关。这两种冠状病毒和正粘病毒都是已知的能感染动物、鸟类和人类的病毒。这两种病毒具有能在动物和人类之间进行交叉传染的能力。
因此，本领域仍需要治疗或预防呼吸道病毒性感染的方法。
发明概述本发明的治疗或预防一种受试者的呼吸道病毒性感染的方法包括给所述受试者施用有效量的式A免疫调节剂化合物
在式A中，n是1或2，R是氢、酰基、烷基或肽片段，X是芳香族氨基酸或杂环氨基酸或其衍生物。优选地，X是L-色氨酸或D-色氨酸。
图1显示了感染流感的小鼠的存活率，经SCV-07处理后的动物与对照动物的存活率比较。
发明详述根据一个实施方案，本发明涉及通过将免疫调节剂化合物施用于受试者来治疗或预防呼吸道病毒的感染。
根据另一个实施方案，本发明涉及通过将免疫调节剂化合物施用于受试者来治疗或预防冠状病毒的感染。
根据再一个实施方案，本发明涉及通过将免疫调节剂化合物施用于受试者来治疗或预防严重急性呼吸综合征(SARS)。
根据又一个实施方案，本发明涉及通过将免疫调节剂化合物施用于受试者来治疗或预防流感。
根据另一个实施方案，本发明涉及通过将免疫调节剂化合物施用于受试者来治疗或预防正粘病毒-冠状病毒杂交体的感染。
受试者优选为哺乳动物，最优选为人类患者。
用于预防的施用可以是针对接触过疑似疾病携带者或无症状携带者的高危群。
本发明的免疫调节剂化合物包括式A的免疫调节剂 在式A中，n是1或2，R是氢、酰基、烷基或肽片段，X是芳香族氨基酸或杂环氨基酸或其衍生物。优选地，X是L-色氨酸或D-色氨酸。
“X”中的芳香族氨基酸或杂环氨基酸的适宜衍生物是酰胺、单-或双-(C1-C6)烷基取代的酰胺、芳酰胺和(C1-C6)烷基酯或芳基酯。“R”中适宜的酰基或烷基部分是1至约6个碳原子的支链烷基或直链烷基、2至约10个碳原子的酰基、和封闭基团如苄氧羰基和叔丁氧羰基。优选地，式A中所示的CH基的碳原子具有立体构型，当n为2时，其与X的立体构型不同。
优选的实施方案使用了如γ-D-谷氨酰-L-色氨酸、γ-L-谷氨酰-L-色氨酸、γ-L-谷氨酰-Nin-甲酰基-L-色氨酸、N-甲基-γ-L-谷氨酰-L-色氨酸、N-乙酰基-γ-L-谷氨酰-L-色氨酸、γ-L-谷氨酰-D-色氨酸、β-L-天冬氨酰-L-色氨酸和β-D-天冬氨酰-L-色氨酸的化合物。尤其优选的实施方案使用了γ-D-谷氨酰-L-色氨酸，有时被称为SCV-07。这些化合物、制备这些化合物的方法、这些化合物的药学可接受盐和这些化合物的药物制剂都公开在U.S.Patent No.5916878，该专利并于本文中。
式A化合物可以以约0.001-10mg范围的剂量施用。该剂量可以以每周给药一次或多次进行施用，优选为每日给药，每日给药一次或多次。可以通过肌内注射给药，也可以使用其它注射和输注方式给药，还可利用其它给药方式，如口或鼻吸入或口服。
在优选的实施方案中，式A化合物的施用剂量范围为约0.01-10mg，更优选为约0.1-1mg。
剂量还可以以每千克受试者体重的微克数计量，剂量范围为约0.01-100微克/千克，更优选为约0.1-10微克/千克，最优选为约1微克/千克。
所包含的还有带有被取代的、删减的、延长的、替代的或其它修饰部分的生物活性类似物，这些类似物具有与SCV-07基本类似的生物活性，如与SVC-07有足够同源性的SCV-07的衍生肽，其具有与SCV-07基本上相同的活性并以基本上相同的方式产生作用。
给药方式可以是任何适宜方式，包括口服、注射、定期输注、连续输注等。
根据一个实施方案，式A化合物可以施用于需要免疫刺激的患者以使患者的循环系统在治疗或预防期能基本上连续维持免疫刺激有效量的式A化合物。本发明的实施方案包括患者的循环系统在治疗或预防期间能基本上连续维持免疫刺激有效量的式A化合物至少约6、10、12个小时或更长，尽管本发明预期治疗期会长得多。在其它实施方案中，治疗期至少为约1天，甚至多天，如一周或更长。然而，可以认为上述治疗可以被相同或不同时间的非治疗期所间隔，其中在所述的治疗中，患者的循环系统中基本连续地维持有效量的式A化合物。
根据一个实施方案，式A化合物被连续输注患者体内，如通过静脉内输注，以在治疗期内使患者的循环系统基本上连续维持免疫刺激有效量的式A化合物。输注可以通过任何适宜方式如通过微泵进行。
也可维持式A化合物的注射方案，从而在患者的循环系统内基本上连续维持免疫刺激有效量的式A化合物。适宜的注射方案可包括每1、2、4、6等小时注射一次，以在治疗期内使患者的循环系统内基本上连续维持免疫刺激有效量的免疫调节剂肽化合物。
根据一个实施方案，连续输注式A化合物的一个治疗期至少约为1个小时，尽管预期在连续输注式A化合物期间给药时间会更长。更优选地，连续输注进行更长时间，如至少6、8、10、12个小时或更长。在其它实施方案中，连续输注至少约1天，甚至多天如一周或数周。
在一些实施方案中，式A化合物存在于药学可接受的液体载体中，如注射用水、生理浓度的盐水，或其类似物。
本发明还包括施用式A化合物与一种物质结合的生理可接受的活性结合物，该结合物被施用后能延长患者血浆内的式A化合物的半衰期。所述物质可以是基本上无抗原性的聚合物。适宜的聚合物的分子量范围为约200-300,000，优选为约1,000-100,000，更优选为约5,000-35,000，最优选为约10,000-30,000，尤其优选的分子量约为20,000。
所包括的聚合性物质还优选为室温下可溶于水的聚合物。非限定性所列举的聚合物包括聚亚烷基氧化物均聚物，如聚乙二醇(PEG)或聚丙二醇，聚氧乙烯多元醇(polyoxyethylenated polyols)，其共聚物及其嵌段共聚物，条件是嵌段共聚物仍具有水溶性。在基本上无抗原性的聚合物中，考虑了烷基单封端活化的聚亚烷基氧化物(PAO’s)，如单甲基封端的聚乙二醇(mPEG’s)。除mPEG之外，C1-4烷基封端的聚合物也是有用的。
作为基于PAO的聚合物的替代物，可使用有效的无抗原性物质如右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、基于碳水化合物的聚合物和其类似物。本领域技术人员会意识到前述所列仅仅用于举例说明，所有具有在此所述性质的聚合物材料都是预期的。本发明中的“有效的无抗原性”是指本领域所知的无毒且不会在哺乳动物体内引发可感知的免疫反应的所有物质。
所述聚合物可以是直链或支链的。聚乙二醇(PEG)是优选的聚合物。
聚合物可以与式A化合物通过任意适宜方法进行结合。用于将聚合物与肽结合的示例性方法如U.S.Patent Nos.4,179,337，4,766,106，4,917,888，5,122,614和6,177,074，以及PCT国际公开文本WO95/13090中所述的方法，所有文献都并入本文中。聚合物可以在一个或多个位点处进行结合。
有效量的式A化合物可以按照常规的剂量滴定实验进行测定。
上述剂量仅表示组合物中存在的式A化合物的量，而不是与之结合的聚合物的重量。
本发明的聚合物与式A化合物的结合实质上延长了肽的血浆半衰期。
式A化合物还可以与干扰素施用，所述干扰素为如a干扰素，其中优选为a-2b干扰素。a-2b干扰素的适宜剂量范围为约1-3MU。
式A化合物还可以与其他免疫调节剂或抗病毒剂共同施用。
通过下述实施例对本发明进行进一步的说明，但这些实施例并非意在限定本发明。
实施例1使用了产毒型流感病毒A-A/Achi/1/168(H3N2)。为了制备所述病毒，在10-11天的小鸡胚胎中制备了连续两代的所述病毒。将装在安瓿中的来自Pasteur’s Research Institute(St-Petersbrug，Russia)的冻干流感病毒用0.5ml盐水稀释得到含有病毒的10-3和10-5稀释液。将这些稀释液进一步用于接种10个胚胎。将接种后的胚胎在37℃下温育48个小时，然后在14℃冷却18-20个小时。将从各胚胎得到的含病毒的液体从1∶2至1∶4096进行滴定，以测定在1％小鸡红血球悬浮液中的溶血活性。对于下一代，选择滴定度至少为1∶256的样品，并稀释至10-3和10-5。将所述各稀释液用于接种另外10个胚胎。之后，重复一次这些步骤。血凝素滴定度为1∶512-1∶1024的含有病毒的稀释液在初期的实验中被用于测定LD100。
将购自Puschino animal facility(Puschino，Moscow District，Russia)的远系繁殖、不带病原体的4周龄CFW雌性小鼠放在带有空调的无病原体房间内，房间的温度为21±2℃，湿度为55±10％。非限制地给予它们标准的实验室饲料和自来水。
将小鼠分成4组，每组有9-10只小鼠。每组(peros)用存在于0.2ml PBS中的0.1、1.0或10.0mg/kg的SCV-07处理5天。对照组仅用0.2ml PBS处理。在最后一次施用的三天后，在短时间乙醚麻醉下，将所有小鼠鼻内给予LD100量的含病毒的液体(每个鼻孔内给予50ml)，然后每天进行观察，观察14天。
用Log Rank test给出对照组和SCV-07处理组的存活率曲线的对照。
结果各组小鼠的原始存活数据示于表1中，存活半数的数据示于表2中。
表1
表2
*p＝0.025，通过Log Rank test与PBS处理组进行的比较。
权利要求
1.一种治疗或预防受试者呼吸道病毒性感染的方法，其包括给予所述患者有效量的式A的免疫调节剂化合物 其中，n是1或2，R是氢、酰基、烷基或肽片段，X是芳香族氨基酸或杂环氨基酸或其衍生物。
2.权利要求1的方法，其中X是L-色氨酸或D-色氨酸。
3.权利要求1的方法，其中所述化合物为SCV-07。
4.权利要求1的方法，其中所述呼吸道病毒性感染是冠状病毒感染。
5.权利要求1的方法，其中所述呼吸道病毒性感染是流感感染。
6.权利要求1的方法，其中所述呼吸道病毒性感染是正粘病毒-冠状病毒的杂交体感染。
7.权利要求1的方法，其中所述感染是SARS病毒感染。
8.权利要求1的方法，其中所述感染是流感病毒感染。
9.权利要求1的方法，其中所述化合物的给药剂量范围为约0.1-10mg。
10.权利要求1的方法，其中所述化合物的给药剂量范围为约0.1-1mg。
11.权利要求1的方法，其中所述化合物的给药剂量范围为约0.01-100微克/千克受试者体重。
12.权利要求1的方法，其中所述化合物的给药剂量范围为约0.1-10微克/千克受试者体重。
13.权利要求12的方法，其中所述化合物为SCV-07。
14.权利要求4的方法，其中所述化合物为SCV-07。
15.权利要求5的方法，其中所述化合物为SCV-07。
16.权利要求6的方法，其中所述化合物为SCV-07。
17.权利要求7的方法，其中所述化合物为SCV-07。
18.权利要求8的方法，其中所述化合物为SCV-07。
全文摘要
给予患有呼吸道病毒性感染的患者或者呼吸道病毒性感染的高危患者一种免疫调节化合物。
文档编号A61K31/30GK1964731SQ200580015527
公开日2007年5月16日 申请日期2005年5月12日 优先权日2004年5月14日
发明者辛西娅·W.·塔特希尔, 阿尔佛雷德·R·鲁道夫, 亚历山大·A.·科洛博夫, 安德雷·S.·辛比尔采夫, 亚历山大·V.·彼得罗夫 申请人:希克龙制药公司