专利名称：一种香蕉皮的有效部位及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药材的有效部位及其用途，具体的说是涉及香蕉皮的有效部位及其在制备预防和治疗高血压药物中的用途。
背景技术：
香蕉为常见水果，其皮资源丰富，具有多种药用功效。可消食化积，涩肠止泻。用于食滞，消化不良，痢疾，腹痛。《中药学大辞典》中载成熟香蕉的干果皮甲醇提取物的水溶性部分有抑制真菌、细菌的作用。抗真菌物质可能是焦皮素(Musarin)。《广东中药》载“内服治痢疾，炒过煎水服，治霍乱肚痛。煎水洗皮肤痕(骚)痒。”近年来随着高血压发病率的提高，人们积极寻找能够预防治疗高血压的药物。《现代中药学大辞典》中记载香蕉皮或果柄30～60g。煎汤服，可治高血压(《食物中药与便方》)。
发明内容
本发明的目的在于提供一种香蕉皮的有效部位。
本发明的再一目的在于提供所述香蕉皮有效部位的用途。
本发明的目的是通过如下的技术方案实现的本发明提供的香蕉皮的有效部位，其为由如下的方法得到a、提取将干燥的香蕉皮粉碎至10～20目，使用水和/或醇作为提取溶剂进行提取；b、树脂吸附将步骤a得到的提取液浓缩，上大孔吸附树脂，先用3～4个柱体积的水洗去杂质，然后用洗脱溶剂进行洗脱，直至薄层检识无明显斑点为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位；所述的洗脱溶剂为水和/或10～50V％的甲醇、乙醇或丙酮的水溶液。
所述步骤a的香蕉皮为尖叶蕉(Musa acuminata)或长梗蕉(Musa balbisiana)或这两个原始野生蕉种内或种间杂交后代进化而成的香蕉栽培品种的果皮。包括香蕉(Musa nanaLour.)和大蕉(Musa sapientum L.)的果皮。
所述步骤a的提取溶剂中水和醇的混合物是50～95V％的乙醇水溶液。
所述步骤a的提取为加入6～8倍量的提取溶剂提取2～3次，可以是在室温下浸渍提取24～48h；或为用20～100Hz的超声波提取15～30min/次；或在60～80℃加热提取1～2h/次；或加热回流提取1～2h/次。
所述步骤b所采用的树脂包括D系列，HPD系列、HP系列、XAD系列和AB-8型大孔吸附树脂。
所述D系列的大孔吸附树脂优选D-101；HPD系列的大孔吸附树脂优选HPD-500型；HP系列的大孔吸附树脂优选HP-20型；XAD系列的大孔吸附树脂优选XAD-4型。
洗脱溶剂为水及10～50％的甲醇、乙醇或丙酮的水溶液。
本发明提供的香蕉皮有效部位，其制备方法还包括在步骤a中或之后进行脱脂。具体步骤如下在步骤a中，将干燥香蕉皮粉碎至10～20目之后，先用6～8倍量的极性较小的有机溶剂对香蕉皮进行提取2～3次，残渣再用水或/和乙醇作为溶剂提取；或在步骤a的提取之后，将提取液浓缩至不含有机溶剂，加入水，制成密度为1.1～1.2g/mL的悬浮液，再用极性较小的有机溶剂进行萃取2～3次，分出水相。
所述极性较小的有机溶剂包括石油醚、汽油、环己烷、正己烷、乙醚等。脱脂过程以2～3次为最佳。
本发明提供的香蕉皮有效部位，其制备方法还包括在步骤b之后进行萃取。具体步骤如下在步骤b的洗脱之后，水洗脱液浓缩至一定体积，用等体积的有机溶剂萃取3～4次，分出有机相。浓缩，即得香蕉皮有效部位。
所述有机溶剂包括乙醚、醋酸乙酯、正丁醇等。
本发明提供的香蕉皮的有效部位，是来源于香蕉皮的活性成分包括原儿茶醛在内的香蕉皮多酚类成分。
本发明提供一种所述香蕉皮的有效部位在制备预防和治疗高血压药物中的用途。将香蕉皮有效部位，即含原儿茶醛在内的香蕉皮多酚类性抗高血压有效成分，使之与药学上可接受的载体或其他适宜赋形剂相结合，按照常规方法制成经口服给药的内用剂型和非口服给药的注射剂或其它剂型，可以临床用于预防和治疗高血压。
本发明首次分离出了香蕉皮的有效部位香蕉皮多酚，并利用脱脂、溶剂提取和大孔吸附树脂法，得到纯度较高的香蕉皮多酚。本发明提供的香蕉的有效部位的制备方法工艺操作简单，生产成本低，适宜工业化生产。而且，通过二肾一夹型肾性高血压大鼠(RHR)模型实验证明活性部位在150.0mg.kg-1.d-1的降压作用与卡托普利5.0mg.kg-1.d-1相当，提示了该多酚类成分可作为活性成分在制备预防和治疗高血压药物中的应用。
图1为本发明实施例1～3分离制备出的香蕉皮多酚与各对照品对照的TLC图谱；薄层板为硅胶GF254薄层预制板(青岛海洋化工公司)，展开剂为石油醚-醋酸乙酯-甲酸(8∶4∶0.1)，显色为①碘蒸气显色，②紫外灯下(365nm)观察荧光，③紫外灯下(254nm)观察荧光，④铁氰化钾-三氯化铁显色剂显色；其中1为实施例1的香蕉皮多酚，2为呋喃甲酸，3为实施例2的香蕉皮多酚，4为原儿茶醛，5为实施例3的香蕉皮多酚。
具体实施例方式
实施例1、取干燥香蕉皮100g粉碎至20目，用500mL95V％乙醇回流提取2次，每次3h。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏18.46g，悬浮于少量水中，用环己烷进行萃取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上D-101型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂质，然后用40V％乙醇洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.12g。
实施例2、取干燥香蕉皮100g粉碎至20目，用600mL水回流提取2次，每次2h。合并提取液，浓缩至少量，上D-101型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂质，然后用50V％乙醇洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，浓缩至少量，用等体积醋酸乙酯萃取，共3次，合并醋酸乙酯层，浓缩，即得香蕉皮有效部位3.03g。
实施例3、取干燥香蕉皮100g粉碎至10目，用800mL95V％乙醇在室温下浸渍提取2次，每次48h。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏19.30g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上HPD-500型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂质，然后用30V％丙酮水溶液洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.23g。
实施例4、取干燥香蕉皮100g粉碎至20目，用700mL50V％乙醇水溶液在70W超声波中提取2次，每次15min。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏20.35g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上HP-20型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂质，然后用40V％甲醇洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.27g。
实施例5、取干燥香蕉皮100g粉碎至10目，用650mL70V％乙醇水溶液用50kHz超声波提取3次，每次30min。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏22.37g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上XAD-4型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂质，然后用40V％甲醇水溶液洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.16g。
实施例6、取干燥香蕉皮100g粉碎至15目，用600mL60V％乙醇水溶液在60℃加热提取2次，每次1.5h。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏24.28g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂质，然后用50V％乙醇洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.17g。
实施例7、取干燥香蕉皮100g粉碎至20目，用600mL60V％乙醇水溶液在回流提取3次，每次2h。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏23.78g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂质，然后用40V％甲醇洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.14g。
实施例8、取干燥香蕉皮100g粉碎至10目，用700mL50V％乙醇在60℃加热提取2次，每次1.5h。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏23.76g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂质，然后用35V％丙酮水溶液洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.25g。
实施例9、香蕉皮有效部位对清醒肾性高血压大鼠血压及心率的影响首先制备二肾一夹型肾性高血压大鼠(RHR)模型，待模型形成后[以手术4周后收缩压大于160mmHg(21.3kPa)作为模型形成的标志]，随机分为模型对照组、香蕉皮有效部位组及卡托普利阳性对照组。给药前测量血压4次以上，间隔二天测量血压一次，以使动物适应测压过程并获得较稳定的给药前血压记录，以给药前数次血压测量结果的平均值作为给药前血压数据。
然后，每天上午9:00～10:00灌胃给药，每天给药一次，连续给药6d。香蕉皮有效部位每天给药150.0mg.kg-1.d-1；模型对照组灌等容量蒸馏水；阳性对照组灌卡托普利5.0mg.kg-1.d-1。分别在给药后第2、4、6天测量收缩压(SAP)、舒张压(DAP)及心率(HR)，记录给药后的血压及心率。并计算血压(心率)相对变化率[＝(给药后血压或心率-给药前血压或心率)÷给药前血压或心率×100％]。结果以均值±标准差(X±S)表示，统计学检验采用T-student组间t检验。结果见表1。
香蕉皮有效部位降压作用较明显，150.0mg.kg-1.d-1对SAP的最大降压百分率为16％，对DAP达18％。香蕉皮有效部位150.0mg.kg-1.d-1的降压作用与卡托普利5.0mg.kg-1.d-1相当(P＞0.05)。给药期间，香蕉皮有效部位有减慢心率作用。
实验结果表明，香蕉皮有效部位灌胃给药对清醒肾性高血压大鼠具有良好的治疗性降压作用，给药第二天即出现明显的降压疗效。香蕉皮有效部位具有轻度减慢心率作用，这对高血压的治疗有利。
表1.香蕉皮有效部位对清醒RHR血压和心率的影响(X±S)
注与对照组比较*P＜0.05**P＜0.01(下同)实施例10、香蕉皮有效部位静脉给药对麻醉RHR及麻醉SD大鼠血压及心率的影响实验分别用RHR及正常SD大鼠，用氨基甲酸乙酯(1.0g.kg-1)腹腔注射麻醉。动物麻醉后行颈总动脉插管测量血压，颈静脉插管给药。手术后至少观察血压2小时以上，待血压稳定后进行给药。观察静脉注射香蕉皮有效部位125.0mg.kg-1对血压的影响。结果见表2、表3。
香蕉皮有效部位125.0mg.kg-1静脉注射对麻醉肾性高血压大鼠具有明显的降压作用，对SAP、平均动脉压(MAP)及DAP均表现出明显的降压作用。作用较平和，最大降压幅度8％～11％，出现时间较晚，给药后150min才出现明显的血压下降，但降压作用持续时间较长，给药后8小时仍表现出明确而持久的降压作用。香蕉皮有效部位对麻醉RHR心率没有明显的影响。香蕉皮有效部位对麻醉SD大鼠血压及心率均没有明显的影响。
实验结果表明，香蕉皮有效部位有明显的降压活性。该活性部位可以在制备预防和治疗高血压药物中应用。
表2香蕉皮有效部位对麻醉RHR大鼠血压及心率的影响(N＝6)(X±S)
表3香蕉皮有效部位对麻醉SD大鼠血压和心率的影响(N＝8)(X±S)
权利要求
1.一种香蕉皮的有效部位，其为由如下的方法得到a、提取将干燥的香蕉皮粉碎至10～20目，使用水和/或醇作为提取溶剂进行提取；b、树脂吸附将步骤a得到的提取液浓缩，上大孔吸附树脂柱，先用3～4个柱体积的水洗去杂质，然后用洗脱溶剂进行洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位；所述的洗脱溶剂为水或甲醇、乙醇、丙酮的水溶液。
2.如权利要求1所述的香蕉皮的有效部位，其特征在于，其中的香蕉皮为尖叶蕉(Musaacuminata)或长梗蕉(Musa balbisiana)或这两个原始野生蕉种内或种间杂交后代进化而成的香蕉栽培品种的果皮；包括香蕉(Musa nana Lour.)和大蕉(Musa sapientum L.)的果皮。
3.如权利要求1所述香蕉皮的有效部位，其特征在于，所述步骤a的提取溶液中水和醇的混和物是50～95V％的乙醇水溶液。
4.如权利要求1所述的香蕉皮的有效部位，其特征在于，所述步骤a提取为加入6～8倍量的提取溶剂提取2～3次，可以是在室温浸渍24～48小时/次；或为用20～100kHz的超声波提取15～30min/次；或在60～80℃加热提取1～2h/次；或加热回流提取1～2h/次。
5.如权利要求1所述的香蕉皮的有效部位，其特征在于，所述步骤b所采用的树脂柱中填充的树脂为D系列、HPD系列、HP系列、XAD系列或AB-8型大孔吸附树脂。
6.如权利要求5所述的香蕉皮的有效部位，其特征在于，所述D系列的大孔吸附树脂为D-101型；HPD系列的大孔吸附树脂为HPD-500型；HP系列的大孔吸附树脂为HP-20型；XAD系列的大孔吸附树脂为XAD-4型。
7.如权利要求1所述的香蕉皮的有效部位，其特征在于，所述步骤b的洗脱溶剂为水和/或10～50V％的甲醇、乙醇或丙酮的水溶液。
8.如权利要求1所述的香蕉皮的有效部位，其制备方法还包括在步骤a中或之后进行脱脂，具体步骤如下在步骤a中，将香蕉皮粉碎至10～20目之后，先用6～8倍量的极性较小的有机溶剂对香蕉皮进行提取2～3次，残渣再用水和/或醇作为提取溶剂提取；或是在步骤a的提取之后，将提取液浓缩至不含有机溶剂，加入水，制成密度为1.1～1.2g/mL的悬浮液，再用极性较小的有机溶剂进行萃取3～4次，分出水相；所述极性较小的有机溶剂为石油醚、汽油、环己烷、正己烷或乙醚。
9.如权利要求1所述的香蕉皮的有效部位，其制备方法还包括在步骤b之后进行萃取。具体步骤如下在步骤b的洗脱之后，水洗脱液浓缩至一定体积，用等体积的有机溶剂萃取3～4次，分出有机相，浓缩即得香蕉皮有效部位；所述有机溶剂包括乙醚、醋酸乙酯或正丁醇。
10.一种香蕉皮的有效部位在制备预防和治疗高血压药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及一种香蕉皮的有效部位，是来源于香蕉皮的活性成分——香蕉皮多酚。其为将香蕉皮粉碎后，先使用水或/和醇进行提取；然后上大孔吸附树脂柱，使用水或/和甲醇、乙醇、丙酮的水溶液洗脱；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位。其制备方法还包括脱脂过程，即先使用极性较小的有机溶剂对香蕉皮进行提取，或使用极性较小的有机溶剂对提取液进行萃取。其制备方法也包括洗脱后的萃取过程，即将大孔吸附树脂柱的洗脱液浓缩到一定体积，用极性中等的溶剂进行萃取。该香蕉皮的有效部位与药学上可接受的载体或其他适宜赋形剂相结合，按照常规方法制成经口服给药的内用剂型和非口服给药的注射剂或其它剂型，可用于预防和治疗高血压。
文档编号A61K131/00GK1857530SQ20061003892
公开日2006年11月8日 申请日期2006年3月17日 优先权日2006年3月17日
发明者吴晓明, 黄文龙, 钱海, 饶光玲, 傅继华, 刘彩连 申请人:中国药科大学