一种同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物及其制备方法

文档序号:1129300阅读:177来源:国知局

专利名称::一种同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物及其制备方法
技术领域
:本发明属中药领域,涉及一种同时改善慢性心衰时骨骼肌功能、延缓慢性心衰恶化进程的药物组合物及其制备方法。
背景技术
:由于冠心病、高血压等导致慢性心功能不全的主要疾病发病率不断升高及社会人口老龄化的提前到来,心衰已成为本世纪最重要的心脏疾病。慢性心力衰竭(chronicheartfailure,CHF)是一种复杂的临床症候群,是多种心脏疾病的最终结局。随着人均寿命的延长,CHF患病率也逐年增高,据统计2575岁成人患病率可能在23%左右,而65岁以上人群可达46%,一旦发病,其1年和5年生存率分别是76%和35%,年死亡率约10-15%,与肿瘤不分上下。目前全球有2,250万心衰病人,且每年以200万患者的速度增加;预计本世纪初的30年间全球心衰患者将增加1倍。CHF患者心功能下降,生活质量受到严重影响;尤其是因患者病情加重反复住院所消耗的诊疗费用已成为沉重的社会和家庭负担。目前,临床上慢性心衰的治疗大多以西医方法为主,所用的药物有利尿剂、ACEI(血管紧张素转换酶抑制剂)、受体阻滞剂、ARB(血管紧张素II受体阻滞剂)、洋地黄等正性肌力药物及硝酸酯类药物等,但是由于这些药物的某些特殊药理作用使其应用在相当程度上受到限制如急性加重期心衰患者、缓慢性心律失常心衰患者、伴外周动脉病变得心衰患者、慢支伴发心衰的患者等,P受体阻滞剂的应用受限;ACEI的应用引起的一些患者难以耐受的咳嗽;ACEI、醛固酮受体拮抗剂虽然疗效确切,但却存在易致高血钾、肾功能损害等诸多副作用。事实上,有些药物虽然能改善患者的长期预后,但对患者短期内的临床症状、生活质量的改善并不明显,甚至有恶化的趋势,致使部分患者不能耐受……。近年来,虽然非药物治疗的方法有了新的发展,如干细胞移植、心脏再同步化治疗(起搏),以及对终末期心衰的心脏移植、全人工心脏植入等,显示出一定的临床疗效,但尚难以在临床上推广。西医药学的抗心衰治疗在很大程度上改善了患者的预后,然而大部分心衰患者依然疲乏、气短,四肢无力,活动耐量低下,生活质量仍未能得到提高。研究得知,其中一个重要的原因就是心衰时患者的骨骼肌功能受损并未因上述治疗而得到改善。而有关医学领域对其危害的重视程度还存在认识不足,致使慢性心衰的临床治疗结果长期不尽人意,心衰病人的生活质量低下。目前,在市售中成药中,生脉(参麦)、黄芪注射液等制剂并非专为心衰而设,其虽可不同程度改善心衰患者心功能,但无明显减轻体液潴留的作用,更不便长期使用。近年上市的芪苈强心胶囊虽为心衰而设,但其活血利水之功较弱,且胶囊制剂效缓力弱,对轻度心衰或心衰稳定期患者较为适用,而心衰急性加重期难以赖以缓解病情;且未经证实对心衰时骨骼肌受损有任何保护作用。中药治疗心衰的各种证候有着悠久的历史和良好效果,其可能具有的多靶点作用机制启示,从中药中寻找有效、安全和便于长期服用的抗心衰制剂不仅可能,而且是当务之急。
发明内容本发明的目的是提供能改善慢性心衰患者生活质量、提高运动耐量(增加6分钟步行距离)、改善慢性心衰时骨骼肌功能、延缓慢性心衰进程的药物,具体涉及一种同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物及其制备方法。慢性心衰时的骨骼肌功能受损可归于中医学的痿证,主要与以下病机变化有关①火不生土,母病及子-心衰时心肾阳虚导致脾气、脾阳虚弱,运化无力,气血乏源而无以充养四肢;②肝不藏血,筋失濡润-肝藏血,心行之,心衰时瘀阻肝络,藏血无能,心无以行之,则手足血少而运用无力;肝血不足,诸筋失于濡润而肢软乏力;③饮邪浸渍-心衰时饮邪内停,浸渍肌肉,四肢重着无力。本发明药物组合不仅针对心衰病"心肾阳气虚衰、饮停血淤"的病机,使心阳得振,下助肾阳,气化得司,水液蒸腾,血利水行,则无饮停血淤之虞。还通过温补心肾、振奋脾阳、软坚柔肝通络、蠲饮利水,有效地逆转心衰时"火不生土,气血乏源"、"肝不藏血,筋失濡润"和"饮邪内停,浸渍肌肉"的病理机制,以恢复心衰患者"脾主四肢、主肌肉"及"肝主筋"的功能,减轻心衰患者的骨骼肌受损。本发明以黄芪、附子为君,温振心肾阳气以行水、利水;臣以白术、茯苓健脾利水;佐以葶苈子、车前子泻肺逐饮,三棱、莪术祛瘀利水软坚;白芍、麦冬为使,养阴和营,一以监制附子温燥之性,二使该方无利水伤阴之虞,制备同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物。本药物组合物诸药合方,使心阳(离火)得振,肾水(坎水)蒸腾,血利水行,则水液代谢正常,无饮停血淤之虞。具有温振心肾阳气和泻肺利水的功效,能更有效地改善心衰患者水钠潴留、肝脏淤血甚至淤血性肝硬化,同时对心衰时骨骼肌功能受损有显著的保护作用。本发明药物适用于心衰而有不同程度体液潴留(无论是体、肺循环)者,该类患者在中医辨证中大多属"心肾阳虚、饮邪内停"。现代药理研究已证实本发明药物既可增强心肌收縮功能又能显著减轻体液潴留。本发明药物组合物的优势在于能在改善心衰症状的同时,有效改善心衰时骨骼肌功能受损,从而增加患者的活动耐量、显著改善生活质量o本发明药物组合物由下列重量份配比的原料药与药用载体制成生黄芪3-6份、熟附子l-3份、白术l-3份、白芍1-3份、茯苓l-3份、三棱1-3份、莪术1-3份、葶苈子3-6份、车前子3-6份、麦冬l-3份。本发明药物组合物通过下述方法制备按所述重量份配比,取各原料药,置密闭容器内煮提两次,第一次加水6-10倍量.煮沸后80-95'C保温25-45分钟.得煎煮液.第二次加水4-8倍量,煮沸后80-95'C保温15-25分钟,得第二次煎煮液.合并二次煎煮液.滤过,合并滤液,真空浓縮至相对密度1.032.05(70-90°C),得浸膏,加糊精,湿法制粒,真空干燥,制成颗粒剂。本发明药物的轻剂量为1包/次,(每包含生药20.75g),每日2次,用于心衰稳定期;而加大剂量为2包/次,每日2次,能有效地控制心衰急性加重期的病情。本发明药物的颗粒剂,将温振心肾阳气和利水、泻肺的药味共组一方,其中利水药味较多,有更强的逐饮功效,在恢复心肾阳气的同时能更有效缓解心衰时饮溢肌肤(右心衰)、饮凌心肺(左心衰)的症状。冲泡后为汤剂,"汤者荡也",较胶囊效速力专,适用于绝大部分心衰患者(稳定期和急性加重期)。本发明药物经临床和动物实验证实,具有改善慢性心衰患者生活质量、进一步提高运动耐量(增加6分钟步行距离)、改善慢性心衰时骨骼肌功能的作用。并可显著减少心衰急性加重住院次数。本发明药物与现有技术与芪苈强心胶囊进行了比较。所述芪苈强心胶囊虽为心衰而设,但与本发明药物存在差异:主要在于利水除饮药味较少,以及活血利水之功较弱;且胶囊制剂效缓力弱,对轻度心衰或心衰稳定期患者较为适用,而心衰急性加重期难以赖以缓解病情。本发明具有如下优点1、能显著改善心衰患者的心功能(NYHA分级显著降低)。2、能显著提高心衰患者的生活质量(LHFQ评分)和运动耐量(6MWD)。3、能显著减少心衰患者利尿剂、地高辛的用量。4、能显著减少心衰患者因心衰加重的住院次数。5、能显著改善心衰患者的骨骼肌功能,表现在显著增加心衰患者的手握次数、RPE积分和估算心率;并增加运动后3分钟末梢乳酸水平,使之接近正常人,有改善局部骨骼肌组织的糖代谢能力,使能量代谢得到改善。开搏通和本发明药物干预后对慢性心衰实验大鼠膈肌超微结构病理改变有明显改善,其中图1是7400倍透射电镜下各组膈肌形态变化,①假手术组可见完整的细胞核,核内常染色体丰富,核边可见间质细胞,肌纤维排列正常,肌丝、Z带均清晰可见,可见小的线粒体呈椭圆形,线粒体排列规整;②模型组可见线粒体形态从正常的椭圆形变得不规则,密度增加,出现内质网的扩张和空泡变性,肌丝的变化不明显;③开搏通组肌丝变化不明现,内质网出现扩张现象,有脂滴形成,少量线粒体出现空泡变性改变,线粒体大小不规则,部分线粒体出现轻微肿胀;④本发明药物组(又称坎离煎组)可见完整的细胞核,核内常染色体丰富,肌纤维排列正常,肌丝、Z带均清晰可见,可见小的线粒体呈椭圆形,线粒体排列规整;接近假手术组结果。图2是13500倍透射电镜下各组膈肌形态变化①假手术组可见正常排列整齐的肌丝、Z带和正常的线粒体,肌丝清晰,线粒体大小正常,呈椭圆形,未见明显增生;②模型组可见线粒体密度增加,形态不规则,并出现线粒体大小相差悬殊,嵴不清晰,还可见内质网扩张的出现;③开搏通组肌纤维规则,线粒体轻微肿胀,空泡变性和体积增大,并且大小不规则,内质网扩张;④本发明药物组(又称坎离煎组)肌纤维走行排列规整,线粒体数目无明显增加的现象出现,内质网扩张,肌丝结构清晰可见。图3是33000倍透射电镜下各组膈肌形态变化①假手术组可见正常的肌丝和线粒体嵴(线粒体内部小细丝)的结构,细胞肌丝结构排列整齐,清晰,线粒体大小规整,嵴清晰;②模型组肌细胞中可见多个空泡变性的线粒体,嵴不正常,出现嵴溶解,并可见髓鞘样小体形成;③开搏通组线粒体大小基本正常,接近正常的椭圆形,个别线粒体体积增大,形态不规则,线粒体嵴基本正常;④本发明药物组(又称坎离煎组)肌纤维排列、走行规整,线粒体嵴明显,可见内质网的轻度扩张。具体实施例方式实施例1取原料药生黄芪5份、熟附子2份、白术2份、白芍2份、茯苓2份、三棱2份、莪术2份、葶苈子5份、车前子5份、麦冬2份,置密闭容器内煮提两次,第一次加水6-10倍量。煮沸后80-95TM呆温25-45分钟,得煎煮液。第二次加水4-8倍量,煮沸后80-95'C保温15-25分钟,得第二次煎煮液。合并二次煎煮液,滤过,合并滤液,真空浓缩至相对密度1.032.05(70-90°C),得浸膏,加糊精,湿法制粒,真空干燥,制成颗粒剂。实施例2取原料药生黄芪6份、熟附子3份、白术3份、白芍3份、茯苓3份、三棱2份、莪术2份、葶苈子6份、车前子6份、麦冬3份,置密闭容器内煮提两次,第一次加水6-10倍量。煮沸后80-95'C保温25-45分钟,得煎煮液。第二次加水4-8倍量,煮沸后80-95"保温15-25分钟,得第二次煎煮液。合并二次煎煮液,滤过,合并滤液,真空浓縮至相对密度1.032.05(70-9CTC),得浸膏,加糊精,湿法制粒,真空干燥,制成颗粒剂。实施例3取原料药生黄芪5份、熟附子3份、白术2.5份、白芍2.5份、茯苓3份、三棱3份、莪术3份、葶苈子6份、车前子5份、麦冬3份,置密闭容器内煮提两次,第一次加水6-10倍量。煮沸后80-95。C保温25-45分钟,得煎煮液。第二次加水4-8倍量,煮沸后80-95。C保温15-25分钟,得第二次煎煮液。合并二次,煮液,滤过,合并滤液,真空浓縮至相对密度1.032.05(70-9(TC),得浸膏,加糊精,湿法制粒,真空干燥,制成颗粒剂。实施例4取原料药生黄芪6份、熟附子1份、白术3份、白芍2份、茯苓3份、三棱2份、莪术2份、葶苈子3份、车前子3份、麦冬2份,置密闭容器内煮提两次,第一次加水6-10倍量。煮沸后80-95'C保温25-45分钟,得煎煮液。第二次加水4-8倍量,煮沸后80-95'C保温15-25分钟,得第二次煎煮液。合并二次煎煮液。滤过,合并滤液,真空浓縮至相对密度1.032.05(70-90°C),得浸膏,加糊精,湿法制粒,真空干燥,制成颗粒剂。实施例5取原料药生黄芪4份、熟附子3份、白术1.4份、白芍1.4份、茯苓3份、三棱2份、莪术2份、葶苈子3份、车前子3份、麦冬3份,置密闭容器内煮提两次,第一次加水6-10倍量。煮沸后80-95'C保温25-45分钟,得煎煮液。第二次加水4-8倍量,煮沸后80-95t:保温15-25分钟,得第二次煎煮液。合并二次煎煮液,滤过,合并滤液,真空浓縮至相对密度1.032.05(70-90°C),得浸膏,加糊精,湿法制粒,真空干燥,制成颗粒剂。实施例6取原料药生黄芪5份、熟附子1份、白术2份、白芍1份、茯苓2份、三棱1份、莪术1份、葶苈子2份、车前子3份、麦冬1份,置密闭容器内煮提两次,第一次加水6-10倍量.煮沸后80-95'C保温25-45分钟,得煎煮液。第二次加水4-8倍量,煮沸后80-95'C保温15-25分钟,得第二次煎煮液。合并二次煎煮液,滤过,合并滤液,真空浓縮至相对密度1.032.05(70-90°C),得浸膏,加糊精,湿法制粒,真空干燥,制成颗粒剂。实施例7本发明制剂对慢性心衰患者活动耐量、生活质量、心衰进程的影响为了证明本发明制剂的临床疗效,以中药加载治疗的方法,在西药基础治疗上加用本发明制剂,从近期疗效、运动耐量、生活质量及部分终点指标等方面研究其对慢性心衰的疗效。研究结果显示,本发明药物具有显著减轻慢性心衰时骨骼肌受损、改善骨骼肌功能的作用。1、病例选择59例慢性心力衰竭患者(男女=28:31)平均年龄为65.83±9.76岁(41-80岁),随机分为两组中药加载组(n=30)和单纯西药组(n=29)。两组患者基线特征基本一致,具有可比性。2、诊断标准西医诊断标准心力衰竭一参照Framingham的心衰诊断标准心功能分级一参照美国纽约心脏病协会标准(NYHA标准);中医辨证分型(心肾阳虚证)诊断标准参照《中药新药临床研究指导原则,其中,心肾阳虚证主症心悸,短气乏力(或)动则气喘,身寒肢冷次症尿少浮肿,腹胀便溏,面色灰青舌脉舌淡胖或有齿印,脉沉细或迟3、纳入标准年龄4080岁;符合心力衰竭诊断标准;慢性心力衰竭(NYHAII—IV级);慢性心衰急性加重期能平地步行者;愿意接受中药治疗。4、排除标准由于肾、肝等重要脏器功能衰竭导致心力衰竭者;妊娠或哺乳妇女、过敏体质及对多种药物过敏者;合并有肝、肾及内分泌系统、造血系统等严重原发性疾病;有精神异常及不愿合作者;下肢肢体活动障碍的患者;患有能增加死亡率的疾病心源性休克、严重心律失常、未纠治的严重瓣膜病变、縮窄性心包炎、肺栓塞、有明显感染者,以及没有控制的高血压等。5、治疗方案入选病人均按中华医学会心血管分会提出的"慢性收縮性心力衰竭治疗建议"(2002年),以"ACEI、3受体阻滞剂、利尿剂、用或不用地高辛"为治疗原则,依心功能分级选择用药,包括雅施达、倍他乐克、氢氯噻嗪和/或地高辛,单纯用西药只用上述西药;中药加载组在上述治疗的基础上加用本药物组合,每次2包(每包含生药20.5g),每日2次,餐后2小时饮服。共治疗24周,随访至1年。6、观察指标和方法*中医证候积分参照《中药新药研究指导原则》按无症状(O分)、轻度(1分)、中度(2分)、重度(3分)对以下心衰病主要证侯积分动辄气急、倦怠乏力、尿少肢肿、胸闷心悸、颈脉显露;*中医证候疗效按《中药新药临床研究指导原则》标准评定显效、有效、无效和加重;*6分钟步行试验(6MWT):依Peeters^的方法进行,测定患者6分钟步行距离(6MWD);*心衰生活质量评分参照LHFQ评分量表^:包括呼吸困难计分、体力计分、情绪计分3部分;*临床心功能分级参照NYHA标准;*血流动力学指标(超声心动图)测定左室射血分数(LVEF)、短轴縮短率(LVFS)、E峰/A峰(E/A),采用超声心动图法。*西药减停率观察利尿剂、地高辛停减率*l年内因心衰急性加重住院人次和次数以上血流动力学指标于治疗前及治疗24周时各测定1次;握力及手握次数、主观体力感觉等级积分和末梢血乳酸水平于治疗前、治疗后4周进行检测;心衰急性加重住院次数于入组l年时统计;其余指标分别于治疗前、治疗4、8、12、24周及1年各时间点分别测定。7、统计分析采用SPSS11.5统计处理软件及SAS12.6统计处理软件进行统计分析。8、结果显示①本发明药物(又称坎离煎组)能进一步提高心衰的临床疗效中药加载组治疗4周后,患者中医证候总有效率显著高于西药组,并且这种优势保持到l年时(x^42.43;P〈0.01);重复测量方差分析结果显示两组治疗后中医证候积分均有显著改善(P〈0.01),中药加载组改善更显著(F=10.703,P〈O.OD,提示在常规治疗的基础上加用本发明药物能较快地改善CHF患者症状。②本发明药物能进一步改善心衰患者心功能治疗后中药加载组患者NYHA心功能分级改善明显优于对照组(x2=17.15,P;0.01);治疗24周后中药加载组患者心脏收縮功能较前改善,LVEF有显著提高(P〈0.05),西药对照组治疗前后LVEF无显著变化,表明中药加载组治疗后心功能改善显著优于西药组。③本发明药物能进二步改善心衰患者生活质量、增加运动耐量中药加载治疗4周后,即显示出该药在增加6MWD(P<0.01)和生活质量评分方面(P〈0.01,)的显著优势,并且随着疗程的增加而更为显著。表明本发明药物改善CHF患者运动功能的机制除直接改善心功能外,还可能与其能减轻心衰患者骨骼肌功能受损有关。④中药加载治疗后减少了利尿剂和地高辛的用量,中药加载组患者的药物减停率显著单纯西药组(P<0.01,),从而有助于避免长期应用这些药物所产生的副作用;显著减少患者心衰急性加重的年住院次数(46.2%vs81%,P〈O.OD,对降低患者的年医疗费用有重要意义。表l是中药加载组与西药组中医证候疗效比较[例数(%)]。表2是中药加载组与西药组治疗前后心功能(NYHA)分级的变化(;±0。表3是中药加载组与西药组治疗前后血流动力学指标的变化(〗±0。表4是中药加载组与西药组治疗前后6MWD比较(M,)。表5是中药加载组与西药组治疗前后LHFQ评分的比较(;±0。表6是中药加载组与西药组利尿剂停减率比较(%)。表7是中药加载组与西药组地高辛停减率比较(%)。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表6<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注与西药组同时间点比较,AAP<0.01实施例8对慢性心衰稳定期患者骨骼肌功能受损的影响(1)研究对象59例慢性心力衰竭患者(男女=29:30)平均年龄为66.82±8.75岁(41-80岁),均为上海中医药大学曙光医院心内科病房及心血管专科门诊收治的病人,随机分为两组中药加载组(n=29)和单纯西药组(n=28)。两组患者基线特征基本一致,具有可比性。(2)诊断标准西医诊断心力衰竭一参照Framingham的心衰诊断标准心功能分级一参照美国NYHA标准中医辨证(心肾阳虚证)参照《中药新药临床研究指导原则》(3)纳入标准年龄4080岁;符合心力衰竭诊断标准;心功能(NYHA)II—III级;能平地步行;愿意接受中药治疗。(4)排除标准由于肾、肝等重要脏器功能衰竭导致心力衰竭者;妊娠或哺乳妇女、过敏体质及对多种药物过敏者;合并有肝、肾及内分泌系统、造血系统等严重原发性疾病;有精神异常及不愿合作者;下肢肢体活动障碍的患者;患有能增加死亡率的疾病心源性休克、严重心律失常、未纠治的严重瓣膜病变、縮窄性心包炎、肺栓塞、有明显感染者,没有控制的高血压,以及不能完成临床检测所需肢体运动者。(5)治疗方法所有入选病人均按中华医学会心血管分会提出的"慢性收縮性心力衰竭治疗建议"(2002年)[4],以"ACEI、e受体阻滞剂、利尿剂、用或不用地高辛"为治疗原则,依心功能分级选择用药;西药组只用上述西药,中药加载组在上述治疗的基础上加用本药物组合,每次2包(每包含生药21g),每日2次,餐后2小时饮服。治疗4周。(6)观察指标和方法手握次数;主观体力感觉等级积分(RPE积分)及估算心率;末梢血乳酸水平。(7)统计方法采用SPSS11.5统计处理软件及SAS12.6统计处理软件进行统计分析。(8)结果显示①与单纯西药治疗相比,本发明药物加载治疗能更显著地增加心衰患者的手握次数p<0.05,更显著地下降心衰患者的RPE积分PO.Ol,和估算心率PO.Ol,揭示本药物组合能更好地提高心衰患者的运动能力,从而提高慢性心衰患者的生活质量;②加用本药物组合与单纯西药治疗均能显著增加心衰患者运动后3分钟末梢血乳酸水平p<0.01;与单纯西药治疗相比,本药物组合加载治疗使心衰患者运动后末梢血乳酸水平提高幅度显著高于单纯西药治疗p<0.05,甚至高于健康对照组。提示本药物组合有改善局部骨骼肌组织的糖代谢能力,从而使能量代谢得到改善。表8是中药加载组与西药组慢性心衰患者治疗前后手握次数比较6±s,次)。表9是中药加载组与西药组慢性心衰患者治疗前后RPE积分比较(;±0。表10是中药加载组与西药组慢性心衰患者治疗前后估算心率变化6±、次)。表ll是中药加载组与西药组慢性心衰患者末梢血乳酸水平变化(;±0。表8_<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表10<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表ll<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注与健康对照组比较,#p<0.05;与同组治疗前比较,**p<0.01:与西药组比较,Ap<0.05实施例9改善腹主动脉縮窄致慢性心衰大鼠耐力型运动能力的动物实验实验证实,本发明药物制剂对心衰动物具备以下优点1、能显著改善腹主动脉縮窄致慢性心衰大鼠耐力型运动能力。2、能显著改善腹主动脉縮窄致慢性心衰大鼠血流动力学。3、能显著减低腹主动脉縮窄致慢性心衰大鼠膈肌疲劳速率。4、能显著减轻心衰大鼠膈肌超微结构损伤。5、改善腹主动脉縮窄致心衰大鼠骨骼肌乳酸、葡萄糖水平、Cah-ATP酶活性。(1)实验动物雄性Wistar大鼠48只,体重200220g左右,随机分为4组(假手术组、模型组、开搏通组、中药组),每组12只。(2)造模在大鼠双侧肾动脉间分离该处腹主动脉,将直径约为0.6mm的脑外科用血管银夹套入该段腹主动脉,后用止血钳夹紧,造成腹主动脉縮窄。假手术组除开腹暴露双侧肾动脉间腹主动脉,不套入银夹,其余步骤与模型动物处理相同。(3)研究用药:①本发明药物,将本发明药物的颗粒剂加水溶解成液体(含生药0.75g/ml)。②开搏通(片剂),12.5mg/片(上海施贵宝),碾碎,过药典IOO目筛后置于加入0.5%混悬剂(羧甲基纤维素钠)的双蒸水,制成0.3375mg/ml浓度的开搏通混悬剂。(4)给药根据"人和动物按体表面积折算的等效剂量比值表"折算,中药组大鼠给本药物组合溶液10ml/Kg(药物组合7.5g/kg),西药组给开搏通混悬液为10ml/kg(开搏通3.375mg/kg),每日l次灌胃;假手术组和模型组给予等量双蒸水每日一次灌胃。给药3周为1疗程(每疗程后停止给药1周,使灌胃时受损的口腔粘膜得以修复,以保证正常进食),共8个疗程。(5)耐力型运动试验动物经8个疗程给药后,应用大鼠游泳实验测试大鼠耐力型运动能力,分别记录各组动物的游泳时间;同时测大鼠体重,计算游泳指数{游泳指数=(体重+负重)X游泳时间h(6)结果显示,①除造模给药过程中死亡4只动物外,43只动物进入后续实验。②心衰模型组大鼠游泳时间明显短假手术组(P〈0.01);经给予开搏通和本药物组合8周后的心衰大鼠游泳时间显著延长,与模型组差异非常显著(P〈0.01),中药组心衰鼠比开搏通组游泳时间延长更显著(P<0.05)。(D由于游泳的耐力型运动能力不仅仅与游泳时间相关,也与游泳动物的体重和负重存在一定关联,本发明采用游泳指数参数进行分析,统计结果与游泳时间同,说明药物组合对于改善腹主动脉縮窄致慢性心衰模型大鼠的耐力型运动能力优于开搏通。表12是本发明药物对心衰大鼠耐力型运动能力的影响"±0。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>实施例10改善腹主动脉缩窄致慢性心衰大鼠血流动力学的动物实验(1)实验动物雄性Wistar大鼠48只,体重200220g左右,随机分为4组(假手术组、模型组、开搏通组、中药组),每组8只。(2)造模与给药造模及给药过程同实施例9。(3)血流动力学测定以25X乌拉坦按5ml/kg腹腔注射麻醉动物,肝素钠1200u/kg抗凝,将动物仰卧于手术台上。后切开气管,插入气管导管,分离右侧颈总动脉,插入连接高精度压力换能器的PE-50型聚乙烯心导管,通过PowerLab/4SP型生物信号处理和分析系统记录血流动力学参数,包括动脉收縮压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)和心率(HR),左室收縮压(LVSP)、左室舒张压(LVDP)、左室舒张末期压(LVEDP)以及左室内压最大变化速率(士LVdp/dtmax)等参数值。(4)结果显示,①各组SBP、DBP、MAP基本无统计学差异。②模型组心衰鼠LVSP显著低于假手术组(P〈0.01);经给予开搏通和本药物组合8周后的心衰大鼠LVSP均有显著升高(P〈0.01),中药组和开搏通组之间虽无显著性差异,但以中药组与假手术组更为接近。说明开搏通和本发明药物均能显著提高左室收縮压。模型组心衰鼠LVDP较假手术组显著升高(P〈0.01),经药物干预的开搏通组和中药组心衰鼠LVDP均有所降低,虽未显示显著性差异,但以中药组更接近假手术组。模型组大鼠LVEDP较假手术组显著升高(P〈0.05),经药物干预的开搏通组、中药组大鼠LVEDP则显著低于模型组(P<0.05),以中药组更接近正常。③对左室最大压力微分经统计分析后显示,模型组心衰鼠土LVdp/dtmax较假手术组显著降低(P〈0.01),经给予开搏通和本药物组合8周后的中药组和开搏通组大鼠士LVdp/dtmax显著增加(P〈0.01),且中药组增加较开搏通组更显著(P<0.05)。上述结果说明对于腹主动脉縮窄致心衰模型大鼠预防给予开搏通或本发明药物均能不同程度地改善心衰鼠血流动力学情况,对左室收縮功能亦有一定程度的改善作用,且本发明药物显示出优于开搏通的趋势,能更好地改善左室收縮功能。表13是药物组合对腹主动脉縮窄致心衰大鼠动脉血压的影响(;±5,n=8)。表14是药物组合对腹主动脉縮窄致心衰大鼠左室收縮功能的影响(;±^,n=8)。表15是药物组合对腹主动脉縮窄致心衰大鼠左室收縮功能的影响。±s,n=8)。表13组别SBP(imnHg)DBP(mmHg)MAP(mmHg)假手术组107.44±7.7268.13±8.6481.23±8.13模型组101.33±14.1467.61±14.5278.85±14.26开搏通组118,75±22,39*78.20±18.5991.92±19.59中药组113.48±9,0171.73±9.1485.64士6.09注与模型组比较,*P<0.05表14组别LVSP(mmHg)LVDP(mmHg)LVEDP(mmHg)假手术组145.90±9.68-12.74±9.512.81±9.13模型组92.54±16.51厶厶2.11±2.01A厶10.79±5.02A开搏通组130.91±27.91**0,86±13.623.40±6.12*中药组146.99±14.09**-4.49±6.773.10±7.24*注与假手术组比较,厶P〈0.05,A厶P〈0.01:与模型组比较,*P<0.05,**P〈0.01:表15组别+LVdp/dt(mniHg/s)-LVdp/dW(mmHg/s)假手术组10228.68±2207.87-7630.12±1127.87模型组20%.05±401.28aa-2352.13±467.75"开搏通组6284.28±1987.84**—5045.23±842.35**中药组7984.53±1364.80**#—6072.15±964.35**#注与假手术组比较,厶AP〈0.01;与模型组比较,林P〈0.01;与开搏通组比较,#P<0.05实施例11改善腹主动脉縮窄致慢性心衰大鼠膈肌疲劳速率的实验研究(1)方法造模、分组及给药过程同实施例10。实验动物经血流动力学检测后,剪开腹腔,仔细分离出膈肌。将分离的肌肉置入浴槽内(内置营养液),后仔细分离长度约2cm的肌条;肌条的一端固定在浴槽底部,上端连接MLT0202/D型张力换能器(ADI,Instrument),换能器的输出通过PowerLab/4SP生物信号处理系统处理和Chartv3.4.6(PowerLab)软件记录、储存和分析。应用超强直流电串脉冲刺激肌纤维标本,造成离体肌纤维的疲劳,测定疲劳速率(以肌条在刺激疲劳中的负重能力评定,负重减少为疲劳速率增加)。(2)结果显示,①与假手术组比较,模型组心衰鼠膈肌肌条在刺激第1次35次疲劳速率显著增加(P<0.05),从40次50次刺激时非常显著增加(P<0.01),提示心衰鼠骨骼肌易疲劳。②与模型组比较,开搏通组心衰鼠膈肌肌条疲劳速率在各刺激时间点都无显著差异;中药组则在第l、45、50次较模型组有显著降低(P〈0.05),并在第50次出现显著降低(P〈0.01)。③中药组与开搏通组比较,虽然心衰鼠膈肌肌条疲劳速率未显示出显著性差异,但在各刺激时间点均表现肌条疲劳速率有减低趋势;并且除第50次外,肌条疲劳速率均和假手术组无显著性差异。结果表明,本药物组合干预有显著改善心衰鼠骨骼肌疲劳速率的作用,并且有优于开搏通的趋势,使之更接近于正常鼠。表16是药物组合对腹主动脉縮窄致心衰大鼠膈肌疲劳速率的影响6±s,n=8,g)。表17是药物组合对腹主动脉縮窄致心衰大鼠膈肌疲劳速率的影响"±*,n=8,g)。表16<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注与假手术组比较,AP<0.05,A厶P〈0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01实施例12减轻心衰大鼠膈肌超微结构损伤的动物实验(1)方法迅速取出大鼠膈肌,戊二醛PBS固定,后行包埋,LKBV型超薄切片机切片;行橼酸铅电子染色,制成电镜切片,透射电镜下观察组织超微结构。(2)电镜观察结果显示腹主动脉縮窄致慢性心衰大鼠膈肌超微结构发生改变,主要表现为核固縮,肌浆网轻度扩张,间质内组织水肿;出现内质网扩张和空泡变性;线粒体形态从正常的椭圆形变得不规则,密度增加,并出现线粒体大小相差悬殊,嵴不清晰,个别线粒体出现空泡变性,出现嵴溶解,甚至还有髓鞘样小体形成。开搏通和坎离煎组干预后对上述病理改变有明显改善(见图1、2、3)。实施例13改善腹主动脉縮窄致心衰大鼠骨骼肌乳酸、葡萄糖水平、Ca^-ATP酶活性的实验研究(1)方法造模及给药过程同上,于每组动物中随机选取8只动物进行血流动力学检测。后各组动物取出左肱三头肌长头,制备10%的骨骼肌匀浆液,离心取上清液,采用比色法检测肌肉匀浆液乳酸水平和Ca2+-ATP酶活性;肌肉匀浆葡萄糖水平及蛋白含量(蛋白含量用于乳酸和Ca2+-ATP酶活性的计算)采用全自动生化分析仪检测。(2)结果①造模后各组动物骨骼肌匀浆乳酸水平均较假手术组有显著升高。虽然模型组、开搏通组、中药组之间比较没有统计学差异,但与假手术组相比,中药组升高较少(P<0.05),而模型组、开搏通组均有非常显著的升高(P<0.01)(见表ll)。②假手术组、模型组、开搏通组之间骨骼肌匀浆中葡萄糖水平不存在统计学差异,中药组则显著高于其他三组(P〈0.01)(见表ll)。模型组心衰大鼠骨骼肌(^2+-八7酶活性较假手术组明显降低(P〈0.05),开搏通组未见改善,而中药组心衰大鼠骨骼肌Ca2tATP酶活性则有升高趋势,虽与模型组相比尚无显著性,但已接近假手术组并与其无统计学差异(见表12)。结果显示,慢性心衰同时会出现局部骨骼肌组织乳酸堆积和葡萄糖减少的病理改变,以及骨骼肌(^2+^酶活性降低,从而影响骨骼肌的能量代谢和收縮活动。本发明药物可显著提高心衰鼠骨骼肌组织葡萄糖水平,显示降低骨骼肌内乳酸水平的趋势,并有促使降低的骨骼肌(^2+^1酶活性恢复的趋势,从而改善心衰时的骨骼肌功能受损。表18药物组合对腹主动脉縮窄致心衰大鼠骨骼肌匀浆乳酸、葡萄糖水平的影响(n=8,出,圆1/U。表19药物组合对腹主动脉縮窄致心衰大鼠骨骼肌Ca2+-ATP酶活性的影响(n=8,x±s,画lP/mgProt/h)。表18组别乳酸水平葡萄糖水平假手术组0.773±0.2820.612±0.236模型组1.219±0.283AA0.438±0.177开搏通组1.291±0.4110.613±0.189中药组1.129±0.2440,±0.246**##注与假手术组比较,厶P〈0.05,AAP〈0.01;与模型组比较,**P<0.01,##P<0.01表19组别Ca"-ATP酶活性假手术组0.0061±0.0018模型组0.0047±0.0012厶开搏通组0.0047±0.0009中药组0.0055±0.0008注与假手术组比较,AP<0.0权利要求1、一种同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物,其特征是由下列重量份的原料药与药用载体制成生黄芪3-6份、熟附子1-3份、白术1-3份、白芍1-3份、茯苓1-3份、三棱1-3份、莪术1-3份、葶苈子3-6份、车前子3-6份、麦冬1-3份。2、按权利要求1所述的同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物,其特征是所述的原料药的重量份是,生黄芪5份、熟附子2份、白术2份、白芍2份、茯苓2份、三棱2份、莪术2份、葶苈子5份、车前子5份、麦冬2份。3、按权利要求1所述的同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物,其特征是所述的原料药的重量份是生黄芪6份、熟附子3份、白术3份、白芍3份、茯苓3份、三棱2份、莪术2份、葶苈子6份、车前子6份、麦冬3份。4、按权利要求1所述的同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物,其特征是所述的原料药的重量份是生黄芪5份、熟附子3份、白术2.5份、白芍2.5份、茯苓3份、三棱3份、莪术3份、葶苈子6份、车前子5份、麦冬3份。5、按权利要求1所述的同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物,其特征是所述的原料药的重量份是生黄芪6份、熟附子1份、白术3份、白芍2份、茯苓3份、三棱2份、莪术2份、葶苈子3份、车前子3份、麦冬2份。6、按权利要求1所述的同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物,其特征是所述的原料药的重量份是生黄芪4份、熟附子3份、白术1.4份、白芍1.4份、茯苓3份、三棱2份、莪术2份、葶苈子3份、车前子3份、麦冬3份。7、按权利要求1所述的同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物,其特征是所述的原料药的重量份是生黄芪5份、熟附子1份、白术2份、白芍1份、茯苓2份、三棱1份、莪术1份、葶苈子2份、车前子3份、麦冬1份。8、权利要求1所述的同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物的制备方法,其特征是通过下述步骤按所述重量份,取各原料药,置密闭容器内煮提两次,第一次加水6-10倍量.煮沸后80-95t保温25-45分钟.得煎煮液.第二次加水4-8倍量,煮沸后80-95'C保温15-25分钟,得第二次煎煮液.合并二次煎煮液.滤过,合并滤液,真空浓縮至相对密度1.032.05(70-90°C),得浸膏,加糊精,湿法制粒,真空干燥,得制剂。9、权利要求8所述的制备方法,其特征是所述制剂是颗粒剂。全文摘要本发明属中药领域,涉及一种同时改善骨骼肌功能的抗心衰药物组合物及其制备方法。本发明针对心衰病“心肾阳气虚衰、饮停血淤”的病机,采用中药生黄芪、熟附子、白术、白芍、茯苓、三棱、莪术、葶苈子、车前子和麦冬与药用载体制成。具有温振心肾阳气和泻肺利水的功效,经临床和动物实验证实,能有效地改善心衰患者水钠潴留、肝脏淤血甚至淤血性肝硬化,同时对心衰时骨骼肌功能受损有显著的保护作用。本药物适用心衰而有不同程度体液潴留者。能改善慢性心衰患者生活质量、进一步提高运动耐量,增加6分钟步行距离,改善慢性心衰时骨骼肌功能。文档编号A61K36/9066GK101293082SQ200710039888公开日2008年10月29日申请日期2007年4月24日优先权日2007年4月24日发明者吴大正,姚成增,燕徐,蒋梅先,阮小芬申请人:上海中医药大学附属曙光医院
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