侧金盏总黄酮口腔贴片及其制备方法

专利名称：：侧金盏总黄酮口腔贴片及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种侧金盏总黄酮制剂，具体地说是涉及一种侧金盏总黄酮口腔贴片，该贴片用于治疗口腔溃疡。本发明还涉及该侧金盏总黄酮口腔贴片的制备方法。
背景技术：
：侧金盏为锦葵科植物黄蜀葵的干燥花，在民间有较多的应用。我国古代有用侧金盏治疗口腔溃疡的记载，《直指方》"小儿口疮，烧末敷之"。现代药理研究结果表明，侧金盏的乙醇提取物(含有总黄酮)具有明显的抗炎，抗菌，镇痛等药理作用，该药理作用证实了民间将其用于口疮治疗的可行性。我们经化学成分及药理预试验筛选发现，侧金盏清利湿热，消炎解毒，促进溃疡面愈合的作用的主要有效部位为总黄酮成分。据有关文献报道(黄蜀葵溶液及提取物—结晶m对口腔溃疡止痛作用的临床观察和原理初步探讨，安徽医学院学报，1983，18(4):44;金丝桃苷对小鼠胃粘膜损伤的保护作用及机制，安徽医科大学学报，1999，34(3):178;)，侧金盏黄酮成分对口腔黏膜具有消炎、镇痛、促进愈合的作用，治疗口腔溃疡具有显著的疗效。口腔贴片是近年来发展起来的新剂型，并很快用于口腔疾病的治疗，其剂型原理是利用药用高分子材料与口腔粘膜发生生物粘附的特性，压制成双层贴片，药物含在接触粘膜表面的粘附层中，而惰性层朝向口腔，药物单向释放到溃疡表面，使药物定位于病灶部位,延长作用时间，可以克服药物被唾液稀释、生物利用度低的问题；同时有效成分由粘膜吸收，避免药物的肝脏首过效应，提高生物利用度；另外贴片直接粘附于溃疡表面，还可以直接保护溃疡面、有效促进溃疡愈合；且贴片易于给药，移去制剂即可终止给药,患者使用方便。中国发明专利申请00132507.8公开了一种抗口腔溃疡药物醋酸地塞米松口腔粘贴片及其制备方法。该粘贴片剂分为两层，一侧为含药的粘附层；另一层为不溶于水的保护层，以减少药物向口腔粘膜的对侧的溶解和片剂在齿龈和口腔粘膜之间的双向粘附，尽量使药物向溃疡面渗入和减少在口腔中的不适感。中国发明专利申请200510032791.7公开了一种有效治疗口腔溃疡及牙周肿痛的药物及其制备方法，它是以99%1%(重量)的黄蜀葵花和1%99%(重量)的蜂胶为原料，通过下述步骤制备取黄蜀葵花，加入乙醇提取、合并提取液，回收乙醇，浓縮至无醇味，加沸水提取多次，过滤，滤液装入大孔吸附树脂柱中；用乙醇洗脱并收集洗脱液，回收乙醇，浓縮；再加入硅胶，拌匀，干燥，加入含水的有机溶剂浸泡并合并滤液，回收溶剂，干燥，得黄蜀葵花提取物粉；取蜂胶，粉碎成粗粉，加入乙醇提取并合并滤液，回收乙醇，浓縮，干燥，得蜂胶提取物粉；黄蜀葵花提取物粉、蜂胶提取物粉加适量的能形成凝胶的辅料，采用药剂学的制备方法制成凝胶。本发明配方及制作方法独特，治疗效果显著。由本发明人申请的中国发明专利申请200410035741.乂公开了一种治疗口腔溃疡、胃溃疡、烧烫伤、外伤感染(疮疖)的药物，利用黄蜀葵花总黄酮提取物作为药物活性成分。该发明提供了黄蜀葵花总黄酮提取物的提取制备方法及黄蜀葵花总黄酮提取物不同制剂的制备方法。目前市场上尚未有以侧金盏总黄酮提取物为原料，制备用于治疗口腔溃疡的制剂。
发明内容本发明的一个目的在于提供一种侧金盏总黄酮口腔贴片，该贴片用于治疗口腔溃疡，具有药物含量准确可控、稳定性好、对粘膜无剌激、对溃疡面具有保护作用的优点；同时该贴片为采用二次压片或喷膜技术制备而成的双层片，药物能够单向释放到溃疡表面，使药物定位于病灶部位，延长作用时间，可以克服药物被唾液稀释、生物利用度低的问题；同时有效成分由粘膜吸收，避免药物的肝脏首过效应，提高生物利用度；另外贴片直接粘附于溃疡表面，还可以直接保护溃疡面、有效促进溃疡愈合；且贴片易于给药，移去制剂即可终止给药,患者使用方便。本发明的另一个目的在于提供侧金盏总黄酮口腔贴片的制备方法。本发明所述的侧金盏总黄酮口腔贴片由两层组成，一层为含侧金盏总黄酮提取物的黏附层，另一层为疏水的保护层。粘附层含有有效剂量的侧金盏总黄酮提取物和药学上可接受的辅料。其中，侧金盏总黄酮提取物的有效剂量为1050mg/片。其他的药用辅料包括生物黏附剂、填充剂、粘合剂、润滑剂等。疏水保护层含有疏水材料和药学上可接受的辅料。根据下面的药理学筛选实验结果，含药剂量优选为2040mg/片。侧金盏总黄酮提取物的有效剂量筛选药理试验如下选用健康的新西兰兔，建立醋酸诱发兔口腔黏膜溃疡模型，并用游标卡尺测量溃疡面直径计算溃疡面积的大小。模型建立后，随机分为阴性对照组、大剂量组、中剂量组、小剂量组，每组5只。给药前，各组溃疡平均面积统计学无明显差异(P>0.05)。阴性对照组每日用蒸馏水冲洗黏膜两次；大剂量组，每日于溃疡面涂敷受试提取物50mg，每日2次；中剂量组每日涂敷受试提取物20mg，每日2次；小剂量组每日涂敷受试提取物5mg。给药期间每隔3天用游标卡尺测量口腔溃疡面一次，对溃疡面积縮小50%所需时间的结果进行比较，计算溃疡面积縮小百分率。以縮小百分率为纵坐标，给药时间为横坐标做图，求出各组溃疡面积縮小50%所需时间。并对试验结束时各组动物取口腔黏膜进行病理组织学检查。结果显示，侧金盏总黄酮提取物大剂量组、中剂量组(2050mg)各时间点平均溃疡面积縮小与阴性对照组相比均有显著统计学意义(P<0.05)。卡波姆作为丙烯酸类高分子聚合物，具有良好的生物黏附性，且化学性质稳定，安全、无刺激性及过敏反应，因此将其作为含药层的黏附剂，并辅以糊精和硬脂酸镁制成侧金盏总黄酮口腔贴片，根据所得片剂的体外黏附力、口腔粘膜黏附时间、溶化时限、各时间点累积释放度等指标对卡波姆的种类和用量进行了筛选。经试验，卡波姆974P、卡波姆934P、卡波姆971P均可用，用量为1040mg/片，优选为2030mg/片。三种型号的卡波姆在用量相同时，制成的片剂在体外黏附力、口腔粘膜黏附时间、溶化时限上差别不大，随着用量的增加而有所增大；单用三种卡波姆的片剂累积释放度在后段释放较好，但均不能非常有效地控制药物在前段时间的突释。在上述处方的基础上分别加入羟丙基纤维素(HPC-H、HPC-M)1040mg/片、海藻酸钠525mg/片、羟丙甲纤维素(HPMC60RT5、60RT15、60RT25、60RT50、60RT4000、90SH-100000)1040mg/片、羧甲基纤维素钠(CMC-NaFM6型、FH6型、FH6特高型)1040mg/片以调整片剂上述指标，发现所得的片剂的体外黏附力、口腔粘膜黏附时间、溶化时限、各时间点累积释放度等指标均有所改善，可以有效控制调节片剂在整个时段的释放度。经多次验证，以羟丙甲纤维素(HPMC60RT15、60RT25、60RT50)2030mg/片或羧甲基纤维素钠(CMC-NaFM6型、FH6型、FH6特高型)1030mg/片与卡波姆1040mg/片配合效果最好制成的片剂在体外黏附力30~80g、口腔粘膜黏附时间26小时、溶化时限1~4小时，以在0.5、1、2小时或1、2、4小时时间测定，累积释放度为10%~50%、35°/。~80%及80%以上。含药的黏附层的制备方法为将侧金盏总黄酮提取物粉末与赋形剂及润滑剂硬脂酸镁混匀后直接压片；或者先将侧金盏总黄酮提取物粉末与填充剂混匀，然后湿法或干法制成颗粒，再与硬脂酸镁混匀后压片。疏水保护层的疏水材料可选自乙基纤维素、丙烯酸树脂类、醋酸纤维素酞酸酯、羟丙甲纤维素酞酸酯、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯、甲基丙烯酸-丙烯酸甲酯共聚物中的一种或多种，通过试验，优选为乙基纤维素；同时考虑片剂使用中识别的需要，在疏水层中加入着色剂。疏水保护层的制备可采用喷膜法或压制法。喷膜法中，将乙基纤维素和着色剂(10:1~8:1(g/g))溶于30。/。1000/。乙醇中(乙基纤维素在乙醇溶液中的浓度为0.5°/。~10%(g/ml))，喷于或涂于含药黏附层任一面，并吹干成膜。在压制法中，同时加入硬脂酸镁作为润滑剂；制备时，将乙基纤维素(2040mg/片)、着色剂(15mg/片)、硬脂酸镁(0.2~3mg/片)混匀后，与含药层物料同置双层压片机上，分别填料后直接压制成双层片。本发明者经过对本项目的反复锐意研究，完成本发明。在本发明的一个优选实施例中，所述的侧金盏总黄酮口腔贴片的主药和辅料的组方配比为每片I、含药的粘附层侧金盏总黄酮提取物25mg糊精20mg'卡波姆25mg羟丙甲纤维素30mg硬脂酸镁2mgII、疏水的保护层乙基纤维素30mg硬脂酸镁lmg色淀3mg根据本发明的另一个方面，本发明所述的侧金盏总黄酮口腔贴片的制备方法，包括下述步骤I、制备侧金盏总黄酮提取物，用等量递加的方法与糊精混匀；II、加入卡波姆、羟丙甲纤维素和硬脂酸镁，混合均匀，制粒；III、将乙基纤维素、色淀、硬脂酸镁混合均匀；IV、采用二次压片或喷膜的方式进行压片，即得。药效学试验表明，侧金盏总黄酮口腔贴片对以醋酸致伤、机械损伤和细菌感染三种方法建立的兔口腔粘膜溃疡模型均有明显的治疗作用(P<0.05)。其中大剂量一天4次给药对三种模型均可迅速产生药效，说明药效持续有利于溃疡的修复。三种模型中机械损伤和细菌感染大、中剂量组均可产生与对照组有显著差异的药效作用；抗菌试验结果显示，侧金盏总黄酮口腔贴片对实验中的革兰氏阳性及革兰氏阴性菌均具有较强的杀灭或抑制作用；侧金盏总黄酮口腔贴片提取物大剂量(500mg/kg)，中剂量(250mg/kg)，灌胃给药可明显提高热板法小鼠疼痛阈值；在500mg/kg剂量下明显减少冰醋酸(0.6%)诱发的小鼠扭体次数(P<0.05)，说明侧金盏总黄酮口腔贴片提取物有一定的镇痛作用；侧金盏总黄酮口腔贴片提取物对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀的抑制作用，250-500mg/kg剂量组和阿司匹林阳性对照组比较，有较好的抑制作用(P〈0.05)。刺激性实验结果表明侧金盏总黄酮口腔贴片经单次及多次给药对兔口腔粘膜均无明显刺激作用。急性毒性试验结果显示，侧金盏总黄酮口腔贴片提取物灌胃给药的LD50>稳定性试验结果表明将按照本发明制备的产品在40°C±2°C、75%±5%恒温恒湿箱中，进行加速试验，分别于放置后O、1、2、3个月取样，检测其性状、鉴别、重量差异、溶出度、含量测定及卫生学检查等；又将按照本发明制备的产品在室温下进行长期稳定性试验。结果表明，本发明提供的侧金盏总黄酮口腔贴片稳定性良好。本发明提供的侧金盏总黄酮口腔贴片在临床上可用于治疗口腔溃疡。用药方式为口腔局部给药，贴于患处，每次12片，每日用药次数为34次，疗程为57天。本发明提供的侧金盏总黄酮口腔贴片，具有以下积极的技术效果1、本发明提供了一种侧金盏总黄酮新制剂，其对口腔溃疡具有明显的治疗作用，具有很高的临床应用价值。2、本发明利用双层贴片技术，含药的粘附层直接接触口腔粘膜表面，而疏水的保护层朝向口腔，使药物单向释放到溃疡表面，定位于病灶部位，延长作用时间，可以克服药物被唾液稀释、生物利用度低的问题；同时有效成分由粘膜吸收，避免药物的肝脏首过效应，提高生物利用度；另外该贴片直接粘附于溃疡表面，还可以直接保护溃疡面、有效促进溃疡愈合。3、本发明制剂稳定性好，对溃疡面无刺激。4、本发明制备工艺简单，使用方便。以下通过对本发明具体实施方式的介绍，详细说明本发明。发明的具体实施例方式侧金盏总黄酮口腔贴片的制备实施例1处方(1)含药的黏附层侧金盏总黄酮提取物粉末40g卡波姆971P30g糊精30g硬脂酸镁1.5g疏水的保护层乙基纤维素30g柠檬黄色淀3g硬脂酸镁制成1000片制备方法(1)制备含药层的颗粒将处方量的侧金盏总黄酮提取物粉末、卡波姆、糊精混匀后，用95%的乙醇溶液做润湿剂，制粒、烘干、整粒，然后再与处方量的硬脂酸镁混匀，备用。(2)制备疏水保护层的颗粒将处方量的乙基纤维素、柠檬黄色淀混匀后，以无水乙醇作为润湿剂，制粒、烘干、整粒，然后再与处方量的硬脂酸镁混匀，备用o(3)压片将上述两种颗粒压成双层片。实施例2处方(1)含药的黏附层侧金盏总黄酮提取物粉末卡波姆934P羟丙甲纤维素(60RT25)淀粉20g10g20g50glg(2)疏水的保护层乙基纤维素5g柠檬黄色素0.5g制成1000片制备方法(1)制备含药层的颗粒将恻金盏总黄酮提取物粉末、卡波姆、羟丙甲纤维素、淀粉混匀，千法制成颗粒后，与硬脂酸镁混匀，备用。(2)压片将上述颗粒压成直径8mm、片重约100mg的片剂。(3)喷膜将乙基纤维素、黄色素用95X乙醇溶液100ml溶解，喷膜。实施例3处方(1)含药的黏附层侧金盏总黄酮提取物粉末卡波姆974P羧甲基纤维素钠(FH6特高型)微晶纤维素(2)疏水的保护层乙基纤维素30g25g10g35g0.5g25g柠檬黄色淀硬脂酸镁2g2.5g制备方法:(1)制备含药层的颗粒将侧金盏总黄酮提取物粉末、卡波姆、羧甲基纤维素钠、微晶纤维素混匀，用水做润湿剂，流化床制粒，然后与硬脂酸镁混匀。(2)将乙基纤维素、柠檬黄色淀、硬脂酸镁混匀，备用。(3)将上述两组物料压成双层片。实施例4处方(1)含药的黏附层侧金盏总黄酮提取物粉末50g卡波姆974P20g羟丙基纤维素(HPC-H)15g预胶化淀粉15g硬脂酸镁3g(2)疏水的保护层乙基纤维素40g柠檬黄色淀5g硬脂酸镁3g制备方法(1)将含药的黏附层的全部物料混匀，备用。(2)制备疏水层颗粒将乙基纤维素、柠檬黄色淀混匀，用30%乙醇溶液做润湿剂，制粒、烘干、整粒，再与硬脂酸镁混匀，备用。(3)压片将上述两种物料混压成双层片。实施例5处方(1)含药的粘附层侧金盏总黄酮提取物粉末35g卡波姆974P30g海藻酸钠20g乳糖15g硬脂酸镁0.5g(2)疏水的保护层乙基纤维素6g柠檬黄色淀0.7g制备方法(1)制备含药层颗粒将侧金盏总黄酮提取物粉末、卡波姆、海藻酸钠、乳糖混匀后，以50%乙醇溶液做润湿剂，制粒、烘干、整粒。(2)压片将含药层颗粒压成直径8mm、片重约100mg的片剂。(3)涂膜将乙基纤维素、柠檬黄色淀溶解、分散于100ml无水乙醇溶液中，刷涂或涂抹于片剂的任一面，并热风吹干成膜。实施例6处方(1)含药的粘附层侧金盏总黄酮提取物粉末卡波姆974P羟丙甲纤维素(90SH100000)甘露醇(2)疏水的保护层丙烯酸树脂25g20g25g30glg4g0.5g制备方法(1)制备含药层颗粒将侧金盏总黄酮提取物粉末、卡波姆、羟丙甲纤维素、甘露醇混匀，加入75%乙醇溶液做润湿剂，制粒、烘干、整粒，再与硬脂酸镁混匀。(2)压片将含药层颗粒压成直径8mm、片重约100mg的片剂。(3)喷膜将丙烯酸树脂、柠檬黄色素溶解于40X乙醇溶液100ml中，对上述片剂的单面进行喷膜。上述各实施例制得的片剂，其体外黏附力、口腔黏附时间、溶化时限、在0.5h、lh、2h、4h时的累积释放度数据分别见表l:表l不同实施例所得片剂检査结果实施例123456体外粘膜黏附力46,85g57.82g77.64g48.53g47.62g72.58g口腔黏附时间3h50'3h40'5h30'3h55'4hl5'3h40'溶化时间3hlO'lh55'3h55'2h40'2h50'2h3'各时间0.5h--31.536.5点的累lh45.760.427.541.442.661.8积释放2h63.999.757.461.264.698.8度(％)4h101.5--94.799.4100.5--侧金盏总黄酮口腔贴片的主要药效学实验实施例7一、实验材料1.试验药品受试物侧金盏总黄酮口腔贴片。批号20030320。由山东省生物药物研究院提供。阳性对照物三金牌桂林西瓜霜，批准文号国药准字Z45021599,批号030817，规格2.5克/瓶，由桂林三金药业股份有限公司生产。2.试验动物昆明种小鼠，雌雄兼用；新西兰纯种健康白兔，雌雄兼用，雌者无孕，由山东鲁抗医药集团提供，合格证号SCXK鲁20030006。3.实验仪器XZC-2B型自控温度热板仪。二、试验方法1.试验动物的选择试验前对购进的28只、体重1.7—2.4kg的新西兰兔进行健康检查(1)活泼健康、皮毛有光泽、足爪清洁无溃破；(2)肉眼观察口腔黏膜红润无溃疡、无异常分泌物等口腔疾病的动物用于本试验。2.机械损伤性兔口腔黏膜溃疡模型的建立将兔整体置固定器内固定，只头部外露，一人用左手固定兔头，右手翻起兔左上唇，试验者持眼科镊子轻轻钳起黏膜，并用眼科剪将钳起黏膜剪下致伤，24h后观察溃疡面形成情况。黏膜损伤后24h，可见溃疡表面呈白色或淡黄色、圆形或椭圆形的溃疡，溃疡面周围有充血、水肿，中央略凹陷，有少许淡黄色渗出物。用游标卡尺测量溃疡面直径计算溃疡面积的大小。3.试验步骤选择溃疡面直径4.0-6.5mm之间的白兔25只，随机分为阴性对照组、阳性对照组、大剂量组、中剂量组、小剂量组，每组5只；给药前，各组平均溃疡面积统计学处理无明显差异(P〉0.05)。阴性对照组每日用蒸馏水冲冼黏膜两次；大剂量组间隔2h于溃疡面涂敷受试药l次，每日4次；中剂量组间隔4h涂敷受试药l次，每日2次；小剂量组每日涂敷受试药l次；每次涂敷药20-30mg;阳性对照组间隔2h于溃疡面喷敷西瓜霜1次，每次涂敷药20-30mg，每日4次。从给药2天后每天用游标卡尺测量各兔口腔溃疡直径一次，详细记录数据。4.溃疡面积縮小50%所需时间的计算方法溃疡面积縮小百分率=(给药前溃疡面积一给药后溃疡面积)/给药前溃疡面积X100。/。。以縮小百分率为纵坐标，给药时间为横坐标做图，求出各组溃疡縮小50%所需时间。'三、试验结果1.结果分析表2结果显示，侧金盏总黄酮口腔贴片大剂量组、中剂量组及阳性对照组溃疡面积縮小与对照组相比有显著统计学意义(P<0.05)。表2治疗机械损伤性口腔溃疡试验结果(n=5，单位mm2)药前面积药后2天面积药后3天面积药后4天面积药后5天面积药后6天面积组别_(x±sD)(x±sD)(x±sD)(x±sD)(x±sD)(x±sD)阴性对照20.74±5.9415.81±5.2610.41±3,725.06±2.561.30±0.790.07±0.04阳性对照19.29±5.479.56±2.393.60±1.11*1.16±0.74*0.10±0,07*全愈大剂量组20.70±5.6611.35±2.755.09±0.73*1.71±1.20*0.10±0.08*全愈中剂量组20.10±4.0811.02±1.405.32±0.64*1.79±0.49*0.13土0.08*0.11±0.07小剂量组21.54±9.5414.00±7.518.34±4.104.33±2.330.98±0.520.09±0.07*与阴性对照组比较P〈0.052.溃疡縮小50%所需时间比较根据公式计算出不同给药时间溃疡面积縮小百分率，结果见表3。表3不同给药时间溃疡縮小百分率(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>以縮小百分率为纵坐标，给药时间为横坐标做图，求出各组溃疡縮小50%所需时间。结果表明，由机械损伤诱发的兔口腔黏膜溃疡面积縮小50%所需时间分别为阴性对照组为3.0天，阳性对照组为1.8天，大剂量组为2.1天，中剂量组为2.2天，小剂量组为2.6天。详见说明书附图，附图l是各组溃疡面积縮小50%所需时间比较图。四、结论机械性损伤诱发的兔口腔溃疡，用侧金盏总黄酮口腔贴片进行的试验性治疗，结果显示，侧金盏总黄酮口腔贴片大剂量(每日给药4次)、中剂量(每日给药2次)及阳性对照物于给药的第3、4、5天有明显的治疗作用(P<0.05)，小剂量治疗效果不明显(P〉0.05)。至给药第6天时各组口腔溃疡均全愈或接近全愈。由机械损伤诱发的兔口腔黏膜溃疡面积縮小50%所需时间经计算分别为，阴性对照组为3.0天，阳性对照组为1.8天，大剂量组为2.1天，中剂量组为2.2天，小剂量组为2.6天。从溃疡面积縮小程度和溃疡面积缩小50%所需时间综合评价，说明侧金盏总黄酮口腔贴片大剂量组和中剂量组对机械损伤诱发兔口腔溃疡有明显治疗作用(P<0.05)。实施例8一、实验材料l.试验药品受试物侧金盏总黄酮口腔贴片。批号20030320。由山东生物药物研究院提供。阳性对照物三金牌桂林西瓜霜，批准文号国药准字Z45021599，批号030817，规格2.5克/瓶，由桂林三金药业股份有限公司生产。2.试验动物昆明种小鼠，雌雄兼用；新西兰纯种健康白兔，雌雄兼用，雌者无孕，由山东鲁抗医药集团提供，合格证号SCXK鲁20030006。3.实验仪器XZC-2B型自控温度热板仪。二、试验方法1.热板法预选痛阈(热板温度55士0.5。C)在30秒钟内的小鼠50只，雌雄各半，随机分为侧金盏总黄酮口腔贴片提取物大剂量(500mg/kg)组、中剂量(250mg/kg)组、小剂量(125mg/kg)组，阳性对照(500mg/kg)组及空白对照组，灌胃给药，体积0.8ml/20g，对照组给等体积的水。将小鼠置XZC-2B型自控温度热板仪中，分别测定各鼠给药后90、120、150分钟时的疼痛阈值。2.扭体法取18-22g健康小鼠50只，雌雄各半，随机分为侧金盏总黄酮口腔贴片提取物大剂量组(500mg/kg)、中剂量组(250mg/kg)、小剂量组(125mg/kg)，阳性对照组(西瓜霜，500mg/kg)及空白对照组。灌胃给药，体积0.8ml/20g，对照组给等体积的水。给药后1.5小时，各组分别腹腔注射0.6%的冰醋酸0.2ml/20g，腹腔注射0.6%的冰醋酸后即刻记录各组小鼠15分钟内的扭体次数。三、试验结果1.热板法结果见表4。结果表明，侧金盏总黄酮口腔贴片提取物大剂量、中剂量及阳性对照物可明显提高热板法所引起的疼痛阈值(P<0.05)。表4.对小鼠热板致痛的影响(n=10)剂量药后不同时间(秒钟)痛阈值(s，X土SD)组别(mg/kg)90120150阴性对照_19.3±4.7418.8±3.5220.1±4.31阳性对照50025.6±7.23*23.8±5.35*20.6±3.13大剂量组50028.0±9.60*24.1±6.26*22.1±4.56中剂量组25025.4±6.57*23.7±4.60*20.7±4.03小剂量组_^_21.8±4.52_21.1±4.53_21.0±5.19*分别与空白对照组相比P<0.052.扭体法试验结果见表5。结果表明侧金盏总黄酮口腔贴片提取物大剂量与阳性对照物对醋酸引起的小鼠扭体次数明显减少(P<0.05)。表5.对小鼠扭体反应的影响(n=10，X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>四、结论:试验结果表明，侧金盏总黄酮口腔贴片提取物大剂量(500mg/kg)、中剂量(250mg/kg)可明显提高热板法试验小鼠疼痛阈值；灌胃给药(500mg/kg)可明显抑制由冰醋酸(0.6%)诱发的小鼠扭体反应，使动物扭体次数明显减少(P<0.05)，说明侧金盏总黄酮口腔贴片提取物有一定的镇痛作用。侧金盏总黄酮口腔贴片的刺激性实验实施例9一、试验材料1.受试物侧金盏总黄酮口腔贴片，批号20030320。2.赋形剂空白片本品为双层片，黏贴层为白色，隔离层为黄色。3.试验动物新西兰白兔12只，体重2.3—2.8kg，活泼健康，肉眼观察无明显口腔疾病的动物9只供本试验用。提供单位由山东鲁抗医药集团有限公司提供，合格证号SCXK鲁20030006二、试验方法l.试验分组随机将动物分为侧金盏总黄酮口腔贴片组、赋形剂空白片对照组和阴性对照组，每组3只。2.给药方法给药时，侧金盏总黄酮口腔贴片组和空白贴片组，将白兔置于固定器内，一人用双手固定兔头，试验者左手掀起兔左上唇，右手持镊子夹住侧金盏总黄酮口腔贴片或空白贴片，将其置于上唇黏膜处，被动固定1分钟后，用自制弹力兔嘴固定器固定4小时，以保证受试物与口腔黏膜密切接触不致脱落，解除固定后，立即观察贴片处黏膜部位变化情况；每天给药一次，连续给药一周，阴性对照组兔口腔黏膜每日用生理盐水冲洗1次并用同法处理观察。停药后继续观察二周。三、观察结果每曰受试物与口腔黏膜接触4小时解除固定后与次日晨观察，侧金盏总黄酮口腔贴片处黏膜无明显红肿、充血、溃破和异常分泌物等刺激症状，与赋形剂及阴性对照组相比无明显差别。连续给药一周，未见明显改变。停药后继续观察二周，均未见明显异常改变。四、结论试验结果显示，侧金盏总黄酮口腔贴片经多次给药对兔口腔黏膜无明显刺激作用。侧金盏总黄酮口腔贴片的稳定性实验实施例10将按照本发明制备的产品在40'C土2'C、75%±5%恒温恒湿箱中，进行加速试验，分别于放置后0、1、2、3个月取样，检测其性状、鉴别、重量差异、溶出度、含量测定及卫生学检査等；又将按照本发明制备的产品在室温下进行长期稳定性试验。结果表明，本发明提供的侧金盏总黄酮口腔贴片稳定性良好。侧金盏总黄酮口腔贴片的临床预试实施例ll将按照本发明制备的产品，采取随机的原则，共观察40例，其中治疗组20例，对照组20例。进行了临床疗效和安全性考察，结果表明，治疗组疾病疗效总有效率95.00%,愈显率75.00%。对照组(意可贴片)疾病总有效率90.00%，愈显率75.00%;经统计学处理(P>0.05)，两组疗效无显著差异。治疗组在改善溃疡面积、渗出面积，水肿面积、灼热疼痛、口渴欲饮、烦热方面，与对照组比疗效无显著性差异(P〉0.05)，在改善面红口鼻灼干而热、便干尿赤方面疗效有显著性差异(P<0.05)，治疗组优于对照组。临床观察期间，未发现不良反应及毒副作用。说明该药临床应用安全，适用于复发性口疮，中医辨证心脾积热证。以上对本发明的详细描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明做出各种改变和变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求所定义的范围。权利要求1、一种侧金盏总黄酮口腔贴片，其特征在于，该贴片分为两层，分别为含药的粘附层和疏水的保护层，含药的粘附层含有侧金盏总黄酮提取物10～50mg和粘附材料，粘附材料选自卡波姆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、海藻酸钠中的一种或多种。2、如权利要求l所述的侧金盏总黄酮口腔贴片，其特征在于，所述含药的粘附层含有侧金盏总黄酮提取物25mg。3、如权利要求l所述的侧金盏总黄酮口腔贴片，其特征在于，所述粘附材料为卡波姆，含量为2040mg。4、如权利要求l所述的侧金盏总黄酮口腔贴片，其特征在于，所述含药的粘附层进一步含有药学上可接受的辅料。5、如权利要求l所述的侧金盏总黄酮口腔贴片，其特征在于，所述疏水的保护层含有疏水材料和药学上可接受的辅料，其中所述疏水材料为乙基纤维素。6、如权利要求l所述的侧金盏总黄酮口腔贴片，其特征在于，所述含药的粘附层含有:侧金盏总黄酮提取物1050mg、糊精2040mg、卡波姆2040mg、硬脂酸镁25mg;所述疏水的保护层含有乙基纤维素2040mg、色淀25mg。7、如权利要求6所述的侧金盏总黄酮口腔贴片，其特征在于，所述贴片的组方配比为I、含药的粘附层侧金盏总黄酮提取物'25mg糊精20mg卡波姆25mg羟丙甲纤维素30mg硬脂酸镁2mgTT论+i^但始巨JL"哪水口'J汰1^^:乙基纤维素30mg硬脂酸镁lmg色淀3mg。8、制备权利要求6所述的侧金盏总黄酮口腔贴片的方法，包括下述步骤-①制备侧金盏总黄酮提取物，用等量递加的方法与糊精混匀；②加入卡波姆、羟丙甲纤维素和硬脂酸镁，混合均匀，制粒；③将乙基纤维素、色淀、硬脂酸镁混合均匀；④采用二次压片的方式进行压片，即得。9、制备权利要求6所述的侧金盏总黄酮口腔贴片的方法，包括下述步骤:①制备侧金盏总黄酮提取物，用等量递加的方法与糊精混匀；②加入卡波姆、海藻酸钠和硬脂酸镁，混合均匀，制粒，压片；③将含有乙基纤维素、色淀的溶液喷涂于药片表面，晾干，即得。全文摘要本发明涉及一种侧金盏总黄酮口腔贴片及其制备方法。该口腔贴片分为两层，一层为含药的粘附层，另一层为疏水的保护层，含药的粘附层含有侧金盏总黄酮提取物10～50mg，该粘附层直接接触口腔粘膜表面，而疏水的保护层朝向口腔，使药物单向释放到溃疡表面，定位于病灶部位，延长作用时间，可以克服药物被唾液稀释、生物利用度低的问题；同时有效成分由粘膜吸收，避免药物的肝脏首过效应，提高生物利用度；另外该贴片直接粘附于溃疡表面，还可以直接保护溃疡面、有效促进溃疡愈合。本发明提供的侧金盏总黄酮口腔贴片在临床上可用于治疗口腔溃疡。文档编号A61K36/185GK101450087SQ200710113698公开日2009年6月10日申请日期2007年11月30日优先权日2007年11月30日发明者凌沛学,刘妍妍,史国玉,吴永霞,尚立霞,玲张,张建强,张新房,曲延伟申请人:凌沛学