专利名称：：一种动物干扰素液体喷雾剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及动物用干扰素的液体喷雾剂及其制备方法，属于药物制剂领域。
背景技术：
：干扰素(Interferon,简称IFN)是在特定的抗原剌激下由细胞分泌的一类具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节功能等生物活性的糖蛋白。自1957年Isaacs和Lindenma皿发现干扰素以来，干扰素已经显示出了极强的抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节活性和应用前景。因而干扰素的研究越来越受到人们的广泛关注。目前动物干扰素主要停留在基础研究和临床试验阶段，且大多数集中于猪、鸡、鱼等少数动物，近年来也取得了不小的进展。IFN的抗病毒活性是通过宿主细胞间接完成的，并具有严格的种属特异性和选择性。根据其来源和结构，IFN可分为a、13、Y三种类型，近年来，还发现了"、t等类型的干扰素。IFN-a主要由单核细胞产生；IFN-P主要由纤维母细胞产生，血管内皮细胞也可产生；IFN-y由抗原及PHA等有丝分裂原剌激T细胞后产生，此外，NK细胞也可产生。IFN-t是反刍动物孕体附植时滋养层细胞分泌的特有的妊娠识别信号因子，在妊娠识别中发挥着重要的作用。动物呼吸道疾病已成为我国养殖业十分关注的问题，呼吸道疾病具有流行普遍、危害大、发病率高、死亡率高，造成经济损失大，而且难于控制等特点。呼吸道疾病一般是由病毒、细菌、支原体、免疫抑制病病原、常规活疫苗接种反应和不利环境因素等多种原因或混合感染引起的。目前治疗动物呼吸道疾病采取的主要措施是使用抗生素，而大量实践实施表明，抗生素的大量常期使用会造成有害菌种的耐药性及畜产品药残，从而影响人类健康。作为抗生素的良好替代品干扰素不仅对防治呼吸道病毒感染有明显疗效，可显著縮短病程，减轻症状，并减少或防止复发，且无药残并不会产生耐药性。呼吸道病毒的多样性和可变性，同样说明采用具有广谱的抗病毒活性的干扰素制剂是适宜的。而在临床应用中，干扰素的给药方式是影响干扰素作用的一个重要因素。喷雾剂具有药量小，疗效好，见效快，安全，易行，适于临床推广等优点，特别适用于治疗动物呼吸道疾病。本发明将动物干扰素制成液体喷雾剂与其他剂型相比具有制造工艺和设备简单、生产周期短、成本低、药物用量少、见效快、疗效好、使用方便等优点。本发明制备的动物干扰素液体喷雾剂主要用于防治呼吸道病毒感染喷于动物口腔或鼻腔，药物迅速进入呼吸系统，发挥药效。我国是动物养殖大国，每年因呼吸道疾病的爆发给养殖业带来巨大损失，研制出快速、高效的预防和治疗动物呼吸道疾病的药物无疑在养殖业的发展和进步上具有十分重要的意义。
发明内容本发明的目的本发明目的之一是提供一种动物干扰素喷雾剂的水溶性配方。本发明的另一目的是提供一种动物干扰素液体喷雾剂。本发明的又一目的是提供动物干扰素喷雾剂水溶性配方的应用。本发明的其他目的，在下面对本发明的具体描述中体现出来。发明效果(1)动物干扰素液体喷雾剂治疗动物多种呼吸道疾病具有见效快，疗效好，易于推广等优势。(2)动物干扰素液体喷雾剂具有制备方便，成本低廉，无毒副作用及使用方便等特点。本发明为达到上述效果，提供了一种动物干扰素液体喷雾剂的制备方法。其特征在于用稀释液稀释干扰素原液，过滤除菌，分装在喷雾瓶中，无菌封口。其中，稀释液的组分如下氯化钠聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯(吐温-80)甘油苯酚注射用水调整pH值0.l-lg4-16g20-150mL20-100g0.1-1.0mL至lOOOmL6.0-8.0具体实施例方式——下面通过实施例进一步详述本发明实施例1:通过细胞病变抑制法，鸡胚成纤维细胞/VSV检测系统测定鸡a-干扰素原液的生物学活性为1.2Xl(^IU/ml，取鸡a-干扰素原液5ml，用稀释液稀释至1L，0.22iim膜除菌过滤，后分装于10ml喷雾瓶中，无菌封口。稀释液组方为柠檬酸0.2g氯化钠8g聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯(吐温_80)50ml甘油50g苯酚1.OmL注射用水至1000ml调整pH值7.2实施例2:通过细胞病变抑制法，鸡胚成纤维细胞/VSV检测系统测定鸡Y_干扰素原液的生物学活性为1.5Xl(^IU/ml，取鸡Y-干扰素原液5ml，用稀释液稀释至1L，0.22iim膜除菌过滤，后分装于10ml喷雾瓶中，无菌封口。稀释液组方为柠檬酸0.2g氯化钠8g聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯(吐温-80)45ml甘油48g苯酚1.OmL注射用水至1000ml调整pH值7.2实施例3:通过细胞病变抑制法，MDBK细胞,/VSV检测系统测定猪a-干扰素原液的生物学活性为1.4X109IU/ml，取猪a-干扰素原液5ml，用稀释液稀释至1L，0.22ym膜除菌过滤，后分装于10ml喷雾瓶中，无菌封口。稀释液组方为柠檬酸0.2g氯化钠8g聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯(吐温-80)40ml甘油45g苯酚1.OmL注射用水至1000ml调整pH值7.2实施例4:通过细胞病变抑制法，MDBK细胞,/vsv检测系统测定猪e-干扰素原液的生物学活性为1.8Xl(^IU/ml，取猪P-干扰素原液5ml，用稀释液稀释至IL，O.22ym膜除菌过滤，后分装于10ml喷雾瓶中，无菌封口。稀释液组方为柠檬酸0.2g氯化钠8g聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯(吐温-80)45ml甘油45g苯酚1.OmL注射用水至1000ml调整pH值7.2本发明动物用干扰素喷雾剂的稳定性试验材料和方法一、材料本发明的动物干扰素液体喷雾剂采用本公司生产的重组干扰素，试验前保存于26t:冰箱。二、方法将实施例中四种干扰素液体喷雾剂成品分别置于2_8°C、25t:和37°C三个温度条件下，定期进行无菌检测、生物活性测定、外观和PH值测定。1、干扰素生物活性的测定鸡干扰素采用鸡胚成纤维细胞/VSV检测系统溜干扰素采用MDBK细胞/VSV检测系统。2、无菌检验按《中华人民共和国兽药典2005年版中的要求进行。3、外观检查按《中华人民共和国兽药典2005年版中的要求进行检验。结果表1:不同干扰素液体喷雾剂在2『C保存的稳定性(生物学活性106IU/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2:不同干扰素液体喷雾剂在25t:保存的稳定性(生物学活性106IU/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表3:不同干扰素液体喷雾剂在37t:保存的稳定性(生物学活性106IU/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>1、由表一可以看出，列举的四种干扰素液体喷雾剂在2『C能保存2年，干扰素活性基本上不降低；2、由表二可以看出，在25t:存放条件下，干扰素活力下降比较快，存放12个月，活力下降一个数量级；3、由表三可以看出，在37t:存放条件下，干扰素活力下降的最快，大约存放8个月时活力就下降了一个数量级；4、定期对存放的样品进行无菌检验，结果均呈阴性；5、同时对外观和pH值进行观察和检测，在28t:和25。C存放条件下，样品的外观和pH值均没有变化，符合《中华人民共和国兽药典》2005年版中的要求；在37t:存放条件下存放8个月时出现少量絮状物，pH值降至6.3;上述结果表明动物干扰素液体喷雾剂在2『C条件下保存，其生物活性、无菌、pH值以及外观都十分稳定，说明该制剂生产工艺稳定、可靠。本发明相关动物试验试验药品重组猪a-干扰素液体喷雾剂，重组鸡a-干扰素液体喷雾剂，重组鸡a_干扰素注射液，试验前保存于26t:冰箱。试验方法1、预防试验天津某养猪场，取2-10日龄仔猪11窝，共102头，每窝仔猪随机分成两组，试验组仔猪用重组猪a-干扰素液体喷雾剂，每天喷雾l次，连续使用3天。对照组仔猪不使用本发明药物，试验组和对照组在相同的饲养条件下观察20天。20天后试验组的仔猪均未发病，精神及身体状况良好，而对照组的仔猪则有28头表现为精神沉郁、食欲减退、呼吸急促等症状，有明显的呼吸道症状。2、疗效试验取重组猪a-干扰素液体喷雾剂，在天津某猪场做临床疗效试验，用于治疗猪圆环病毒病及继发感染，主要临床症状表现为精神萎顿，食欲减退，腹式呼吸，呼吸急促，咳嗽等。每头每天喷雾1次，连续使用3天。一个疗程后有效率达95%，治愈率达70%。取重组鸡a-干扰素液体喷雾剂，在天津某鸡场做临床疗效试验，用于治疗鸡传染性支气管炎，主要临床症状表现为精神沉郁，呼吸时有湿性啰音，咳嗽等。每只每天喷雾1次，连续使用3天。一个疗程后有效率达90%以上，治愈率达76%。3、效果对比试验取重组鸡a-干扰素液体喷雾剂和重组鸡a-干扰素注射液，在天津某鸡场做治疗效果对比试验，用于治疗鸡传染性支气管炎，主要临床症状表现为精神沉郁，呼吸时有湿性啰音，咳嗽等。取病鸡40只，分为2组，每组20只，分别采用重组鸡a-干扰素液体喷雾剂和注射液进行治疗。使用喷雾剂组每只每天喷雾1次，连续使用3天；使用注射液组每只每天注射1次，连续注射三天。一个疗程后使用喷雾剂组有效率达90%，治愈率达80%;使用注射液组有效率为75%，治愈率仅为60%。有益效果通过以上试验结果分析，可得出动物干扰素液体喷雾剂在预防和治疗畜禽呼吸道疾病方面有显著的疗效。同时本发明药物为喷雾剂，在畜禽呼吸道疾病的治疗过程中，利于吸收，效果明显强于其他制剂，且在临床使用中极为方便，大生产时成本较低，适于在畜牧业中推广应用。权利要求一种动物干扰素溶液的喷雾剂，其中包含动物干扰素和稀释液。2.根据权利要求1所述的动物干扰素液体喷雾剂，其特征在于，所述的动物干扰素包括自然或重组的干扰素a，或P，或Y，或"，或t等。3.根据权利要求1所述的动物干扰素液体喷雾剂，其治疗和预防的动物疾病为由病毒、细菌、支原体、免疫抑制病病原、常规活疫苗接种反应和不利环境因素等原因或混合感染引起的动物呼吸道疾病。4.根据权利要求1所述的喷雾剂，其中动物干扰素的含量为20000-50000000IU/mL。5.根据权利要求1所述的喷雾剂的稀释液，其中组分含有稳定剂、分散剂、防腐剂、渗透压调节剂、缓冲体系和注射用水。6.根据权利要求5所述的稀释液，其中的稳定剂是聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯(吐温-80)，分散剂是甘油、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)或二者的组合物，防腐剂是苯酚、间甲苯酚、苯甲酸钠或其任意组合物，渗透压调节剂是氯化钠，缓冲体系是柠檬酸、磷酸氢二钠或其组合物。7.根据权利要求6所述的动物干扰素液体喷雾剂的稀释液，其中一组方及其含量为拧檬酸0.l-lg氯化钠4-16g聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯(吐温-80)20-150mL甘油20-100g苯酚0.1-1.0mL注射用水至1000mL调整pH值6.0-8.08.根据权利要求1所述的动物干扰素液体喷雾剂的制备方法，其特征在于用稀释液稀释干扰素原液，过滤除菌，分装在喷雾瓶中，无菌封口。全文摘要本发明公开了动物干扰素液体喷雾剂组方及其制备方法，提供了一种喷雾剂型的动物干扰素。本发明的制剂是用动物干扰素原液配以适当的稀释液制成的液体制剂，pH在6.0-8.0。该制剂通过压力喷雾器使干扰素液体变成雾化颗粒，雾化微粒通过动物的呼吸作用进入咽喉、肺等部位并直接吸收，用量少，见效快。可用于动物多种呼吸道疾病的预防和治疗。文档编号A61P11/00GK101721685SQ20081015277公开日2010年6月9日申请日期2008年11月4日优先权日2008年11月4日发明者王丽娟,管于平申请人:天津瑞普生物技术股份有限公司