专利名称：顺铂脊柱肿瘤缓释植入剂及其制备方法
技术领域：
本发明属制药领域，涉及控缓释药物制剂，具体涉及一种以聚乳酸-羟基乙酸共
聚物(PLGA)为载体，顺铂为主药，治疗脊柱肿瘤的顺铂缓释植入剂及其制备方法。
背景技术：
脊柱肿瘤是一类在各种肿瘤中相对特殊的疾病。随着社会经济的发展和进步，脊 柱肿瘤的发生率及确诊率呈逐年上升的趋势。但由于脊柱解剖结构的特殊性、舭邻结构的 复杂性以及脊柱肿瘤的局部侵润，对于完整充分地切除肿瘤组织造成了极大的困难，术后 常有复发或转移。因此，如何延长脊柱肿瘤患者术后生存期、提高患者的生活质量，仍然是 摆在我们面前的艰巨任务。 目前针对脊柱肿瘤比较积极的治疗方案是综合治疗方案，即手术+静脉化疗+放 疗+支持疗法。手术辅以放疗和静脉化疗能有效提高脊柱肿瘤患者的存活率。化疗在脊柱 肿瘤的综合治疗中占有越来越重要的地位，最近的研究证明，约5%的恶性肿瘤通过单纯的 化疗可以完全治愈，另有55%的肿瘤患者通过各种途径的化疗，生存期得以延长6 36个 月不等。 顺铂(DDP)是以二价铂同2个氯原子和2个氨分子结合的重金属复合物，它既可 抑制蛋白质的合成，又可与DNA交叉连接，破坏DNA链，属细胞周期非特异性化疗药物。虽 然目前临床使用的化疗药物有近30余种，但顺铂以其广谱抗瘤作用、无交叉耐药性、骨髓 抑制较轻，成为大多数肿瘤单独或联合化疗的首选药物。 传统全身静脉化疗的疗效往往不理想药物无法在肿瘤局部浓集、作用肿瘤时间 短、全身副作用大、对正常组织细胞的毒性以及药物在体内的不稳定性都是导致疗效降低 的原因。最理想的化疗药物制剂应具有靶向性和长效性。为改善上述问题，新型药物释放 系统已成为药剂学领域的重要发展方向。近年来多聚物药物缓释系统的研究，开辟了肿瘤 化疗的一种新途径。聚酯类聚合物由于具有良好的生物相容性和组织相容性，且其共聚物 比例和相对分子质量的多样化适于释放速率的调整，是迄今研究和应用最广泛的生物降解 聚合物。其中由羟基乙酸和乳酸制成的共聚物聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)已成为微 球等载体的首选材料，已被FDA批准应用于药品生产。将PLGA与药物制成微球、小丸、片剂 植入手术后的瘤腔中，发挥较长时间的局部疗效，使脊柱肿瘤的间质化疗成为可能。
脊柱肿瘤术后局部缓释药物间质化疗解决了传统脊柱肿瘤全身静脉化疗药物分 布到肿瘤区域浓度低、作用时间短、副作用大的缺点，直接作用于瘤区、局部浓度大，同时延 长药物作用时间，降低全身毒副作用。
发明内容
本发明在于提供一种治疗脊柱肿瘤的顺铂缓释植入剂，它以聚乳酸-羟基乙酸共 聚物(PLGA)为载体，顺铂为主药，在脊柱肿瘤切除术后植入瘤腔，发挥长期高效的间质化 疗作用。
本发明的另一 目的在于提供该脊柱肿瘤顺铂缓释植入剂的制备方法。
为实现上述目的，本发明的技术方法如下 —种脊柱肿瘤顺铂缓释植入剂，由顺铂和聚乳酸_羟基乙酸共聚物(PLGA)以重量
比为l : 99 40 : 60组成。采用复乳化-溶剂挥发法制成顺铂缓释微球，将微球压成片
(形状不限)，制成顺铂缓释植入剂，用于脊柱肿瘤及其他实体肿瘤手术后的间质化疗。
采用复乳化-溶剂挥发法制备顺铂缓释植入剂精密称取一定量的顺铂溶于水 中，作为内水相；精密称取一定量的PLGA溶解于二氯甲烷，作为油相；在避光、冰水浴超声 条件下将内水相分散到油相中，超声乳化得到W/0初乳；将此初乳快速加入到乳化剂中；超 声处理直至形成复乳(W/O/W);再将所得复乳加至低浓度乳化剂中；挥发除去二氯甲烷；离 心收集微球，用蒸馏水洗涤，除去游离药物；微球用双蒸水制成混悬液，冷冻干燥后制成顺 铂缓释微球；将微球压片、灭菌制成顺铂缓释植入剂。 本发明中所述的乳化剂为聚乙烯醇、甲基纤维素、胆酸钠中的一种。 体外释放试验表明，本发明顺铂缓释植入剂体外释放38天的累积释药率可达
84%以上。动物实验表明，顺铂缓释植入剂能在脊柱局部浓集，可明显延长荷瘤大鼠的存活时间。 本发明的使用方法在脊柱肿瘤手术后期将顺铂缓释植入剂植入患者脊柱肿瘤切 除后的瘤腔中，发挥长效、局部高浓度的抑瘤效果。
图1.顺铂缓释植入剂体外释放曲线
图2.兔体内药物释放曲线
图3.荷瘤大鼠肿瘤生长曲线
具体实施例方式
—、顺铂缓释植入剂的制备 下面结合实施例，对本发明脊柱肿瘤顺铂缓释植入剂的制备作详细描述。应该理
解的是本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。
实施例1
处方 顺钼PLGA 30 : 70(重量比) PLGA 浓度为40% (50 : 50) 油相溶剂 二氯甲烷
乳化剂 聚乙烯醇 精密称取顺铂300mg，溶于适量双蒸水中，作为内水相。精密称取PLGA700mg，溶于 适量二氯甲烷，作为油相。在避光、冰水浴超声条件下将油相加至内水相中得到初乳。将此 初乳快速加入到聚乙烯醇溶液中；超声处理直至形成复乳；再将所得复乳加至低浓度聚乙 烯醇溶液中。挥发除去二氯甲烷；离心收集微球，用蒸馏水洗涤3次；加双蒸水制成混悬液， 冷冻干燥后得到顺铂缓释微球；将微球压片、灭菌制成顺铂缓释植入剂。
实施例2
4
处方 顺钼PLGA
PLGA 油相溶剂 乳化剂
25 : 75(重量比) 浓度为15% (75 : 25)
二氯甲烷 甲基纤维素
精密称取顺铂250mg，溶于适量双蒸水中，作为内水相。精密称取PLGA750mg，溶于 适量二氯甲烷，作为油相。在避光、冰水浴超声条件下将油相加至内水相中得到初乳。将此 初乳快速加入到甲基纤维素溶液中；超声处理直至形成复乳；再将所得复乳加至低浓度甲 基纤维素中。后续制备过程与实施例1相同，制得顺铂缓释植入剂。
实施例3
处方 顺钼PLGA
PLGA 油相溶剂 乳化剂
20 : 80(重量比) 浓度为30% (50 : 50)
二氯甲烷 聚乙烯醇
精密称取顺铂200mg，溶于适量双蒸水中，作为内水相。精密称取PLGA800mg，溶于 适量二氯甲烷，作为油相。在避光、冰水浴超声条件下将油相加至内水相中得到初乳。将此 初乳快速加入到聚乙烯醇溶液中；超声处理直至形成复乳；再将所得复乳加至低浓度聚乙 烯醇中。后续制备过程与实施例1相同，制得顺铂缓释植入剂。 实施例4
处方 顺钼PLGA
PLGA 油相溶剂 乳化剂
io : 90(重量比)
浓度为45% (25 : 75) 二氯甲烷 甲基纤维素
精密称取顺铂100mg，溶于适量双蒸水中，作为内水相。精密称取PLGA900mg，溶于 适量二氯甲烷，作为油相。在避光、冰水浴超声条件下将油相加至内水相中得到初乳。将此 初乳快速加入到甲基纤维素溶液中；超声处理直至形成复乳；再将所得复乳加至低浓度甲 基纤维素溶液中。后续制备过程与实施例1相同，制得顺铂缓释植入剂。
实施例5
处方 顺钼PLGA
PLGA 油相溶剂 乳化剂
15 : 85(重量比) 浓度为50% (75 : 25)
二氯甲烷 聚乙烯醇
精密称取顺铂150mg，溶于适量双蒸水中，作为内水相。精密称取PLGA850mg，溶于 适量二氯甲烷，作为油相。在避光、冰水浴超声条件下将油相加至内水相中得到初乳。将此 初乳快速加入到聚乙烯醇溶液中；超声处理直至形成复乳；再将所得复乳加至低浓度聚乙 烯醇溶液中。后续制备过程与实施例1相同，制得顺铂缓释植入剂。
5
实施例6
处方 顺钼PLGA 30 : 70(重量比)
PLGA 浓度为60% (50 : 50) 油相溶剂 二氯甲烷
乳化剂 胆酸钠精密称取顺铂300mg，溶于适量双蒸水中，作为内水相。精密称取PLGA700mg，溶于 适量二氯甲烷，作为油相。在避光、冰水浴超声条件下将油相加至内水相中得到初乳。将此 初乳快速加入到胆酸钠溶液中；超声处理直至形成复乳；再将所得复乳加至低浓度胆酸钠 溶液中。后续制备过程与实施例1相同，制得顺铂缓释植入剂。
二、顺铂缓释植入剂体外释放 测定顺铂微球的载药量，精密称取一定量顺铂微球，压制成片，使含药量为10mg/ 片。取l片顺铂缓释植入剂，置于5mL磷酸盐缓冲液(pH7.4，37tO中，100转/分钟恒温 摇床震摇。分别于6小时、1 、4、 7、 10、 15、 20、 26、 32、 38天取样，测量药物浓度，并计算微球的 累积释放百分率(n = 6)。 结果见图1，本发明顺铂缓释植入剂体外释放38天的累积释药率可达84%以上。
三、动物体内药物释放 实验动物新西兰兔28只，雌雄各半，体重4-5公斤。 实验方法将28只新西兰兔随机分成7组，每组4只。麻醉后取俯卧位固定，以肩 胛骨中下界所对应的椎节(胸8)为手术部位。纵向切开背部皮肤，暴露约三个脊柱节段， 在不影响脊柱稳定性的范围内切除部分椎体，将5片顺铂缓释植入剂(含药量为10mg/片) 植入椎体及其附近软组织，缝合皮肤。分别于术后1、6、12、18、24、30、36天7个时间点处死 动物，取手术部位及其上下两个脊柱节段和周围软组织制成匀浆，测定其中顺铂含量，计算 植入剂的累积释放率。 结果见图2，表明本发明顺铂缓释植入剂缓释作用明显，能显著提高脊椎及其附近 软组织中顺铂的药物浓度，体内作用时间可达36天。
四、荷瘤大鼠肿瘤生长实验 实验动物Wistar大鼠80只，雌雄不限，4周龄。 模型建立与选择将Lewis肺癌细胞在培养基中培养传代，至细胞长满后除去培 养液，用缓冲溶液稀释。取适量上述溶液接种于80只Wistar大鼠前肢腋窝皮下。 一周后 大鼠前肢腋窝下出现肿瘤，测量肿瘤体积，选取肿瘤体积最相近的60只进行下一步实验。
实验方法从上述60只大鼠中随机选取6只处死，解剖取出肿瘤组织并称重，计算 平均瘤重。将余下54只大鼠随机分成A、B、C组，每组18只。A组静脉给药组；B组顺铂 缓释植入剂植入组；C组空白组。具体方法如下 A组手术暴露大鼠前肢腋窝下肿瘤，随后缝合切口，立即通过尾静脉注射10ml顺 铂溶液(含顺铂20mg)。分别于术后第6、12、18、24、30、36天随机处死3只大鼠，解剖取出
肿瘤组织并称重。 B组手术暴露大鼠前肢腋窝下肿瘤，将顺铂缓释植入剂(20mg)植入肿瘤附近组 织，缝合切口。分别于术后第6、12、18、24、30、36天随机处死3只大鼠，解剖取出肿瘤组织并称重。 C组手术暴露大鼠前肢腋窝下肿瘤，随后缝合切口。分别于术后第6、12、18、24、 30、36天随机处死3只大鼠，解剖取出肿瘤组织并称重。 结果见图3，表明顺铂缓释植入剂的抑瘤效果明显优于静脉注射组和空白组。
通过试验证明，本发明应用生物可降解材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载 体，广谱化疗药物顺铂为主药，制备得到的顺铂缓释植入剂能够以较小的剂量达到较高的 局部治疗浓度，且药物释放持续时间长。既克服了全身静脉化疗副作用大的缺点，又克服了 以往局部用药维持时间短的不足，非常适合脊柱肿瘤术后及其他实体瘤术后的局部间质化 疗。
权利要求
一种顺铂脊柱肿瘤缓释植入剂，其特征在于聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体材料，顺铂为主药，顺铂和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的重量比为1∶99～40∶60，采用复乳化-溶剂挥发法制成顺铂缓释微球，将微球压成片，制成顺铂缓释植入剂，用于脊柱肿瘤及其他实体肿瘤手术后的间质化疗。
2. 根据权利要求1所述顺铂脊柱肿瘤缓释植入剂中顺铂和聚乳酸_羟基乙酸共聚物 (PLGA)的最佳重量比为10 : 90 30 : 70。
3. 根据权利要求1所述顺铂脊柱肿瘤缓释植入剂载体材料聚乳酸_羟基乙酸共聚物 (PLGA)中乳酸与羟基乙酸的分子比为20 : 80 80 : 20。
4. 根据权利要求l所述采用复乳化-溶剂挥发法制备顺铂缓释微球所使用的乳化剂可 以是聚乙烯醇、甲基纤维素、胆酸钠中的一种。
5. 根据权利要求1所述顺铂脊柱肿瘤缓释植入剂的外形不限，可以压制成圆形、菱形、 不规则形等。
全文摘要
本发明属制药领域，涉及控缓释药物制剂，具体涉及一种以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体，顺铂为主药的治疗脊柱肿瘤的顺铂缓释植入剂及其制备方法。顺铂和PLGA的重量比为1∶99～40∶60。采用复乳化-溶剂挥发法制成顺铂缓释微球，将微球压成片，制成顺铂缓释植入剂，用于脊柱肿瘤及其他实体肿瘤手术后的间质化疗。试验证明顺铂缓释植入剂体外38天累积释药率可达84％，体内缓释作用时间长达36天、局部药物浓度高，抑瘤效果显著。
文档编号A61K47/34GK101732345SQ20081020304
公开日2010年6月16日 申请日期2008年11月20日 优先权日2008年11月20日
发明者吴娟, 唐辉, 肖建如, 郑伟 申请人:中国人民解放军第二军医大学