专利名称：一种联合用药治疗恶性肿瘤的方法以及抗恶性肿瘤的药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及医疗和医药领域，具体涉及通过联合用药的方法治疗恶性肿瘤以及该抗恶性 肿瘤的药物，特别涉及用羧胺三唑和对细胞因子具有一定调节作用的抗炎药物，如糖皮质激 素类药物或免疫抑制剂类或靶向细胞因子的生物药剂协同作用而治疗恶性肿瘤和得到的一系 列抗恶性肿瘤的组合药物。
背景技术：
在各种疾病中，癌症是致人死亡的主要疾病之一。据世界卫生组织报告，每年世界上有 超过1000万起新的癌症病例发生。目前治疗癌症的主要方法包括手术治疗、抗癌药物的化 学治疗、放射治疗和生物反应调节剂及其它治疗。但是，由于抗恶性肿瘤药物的选择性差， 毒副作用大，造成恶性肿瘤患者免疫功能低下，生活质量降低，这使得化疗药物的使用受到 一定的限制。另外，多药耐药性的产生也限制了化疗药物的使用。因此，研究新一代的低毒 高选择性、耐药性低的药物以及改进治疗方法成为恶性肿瘤治疗的当务之急。
特别是，设计用来通过使用超过一种以上的药物结合或组合的联合化学治疗，充分发挥 各组分的优势，既能提高药物的抗肿瘤活性又可降低药物毒性，是一种被普遍接受的治疗肿 瘤的方法。
大量的流行病学和临床证据表明癌症与慢性炎症之间存在某种联系(Coussens, L.M., and Werb, Z. Inflammation and cancer, 2002 (20》860—867. Shacter, E., and Weitzman, S.A.
Chronic inflammation and cancer. O"coZogy. 2002 (16):217—226. Hussain, S.P.， Hofseth, LJ., and Harris, C.C. Radical causes of cancer. TVaf. Ca"cer. 2003 (3):276_285. Fox, J.G.， and Wang, T.C. Inflammation, atrophy, and gastric cancer.C//". /"wW. 2007 (117):60-69.) 最近在小鼠的 人癌模型中更明确地证明炎症所造成的微环境有利于癌的发生和发展(Balkwill, F., Charles, K.A.， and Mantovani, A. Smoldering and polarized inflammation in the initiation and promotion of malignant disease. Cancer Ce〃. 2005 (7):211_217)。如果能有既能针对慢性炎症(包括癌前慢 性炎症)，又能针对癌症治疗的药物或药物组合，并且其毒性又相对较低的话，用于治疗癌和 癌前慢性炎症，又能预防炎症向癌症转化，这无疑将成为一个重大突破。
本发明满足了这种要求，通过提供一种对细胞因子具有一定调节作用的抗炎药物，如糖 皮质激素类药物或免疫抑制剂类或靶向细胞因子的生物药剂与在抗肿瘤和抗炎治疗中皆有效的羧胺三唑或其衍生物或其中间体一同给药，从而表现协同作用。
羧胺三唑(Carboxyamidotriazole， CAI)的化学名是5-胺基-1-[3， 5-二氯-4(4-氯苯甲酰 氯 ) 苄 基 ]-lH-l,2,3- 三 唑 -4- 苯 甲 酰 胺 (lH-l，2,3-Triazole-4-carboxyamide,5-amino-l-{[3，5-dichloro-4-(4-chlorobenzoyl)phenyl]methyl }-) (US Patent 4590201)，结构如下
目前已经发表的临床及临床前研究结果表明，羧胺三唑能够抑制内皮细胞和多种肿瘤细 胞系如乳腺癌(Lambert et al. 1997 (122): 372-378; discussion 378-379.)、卵巢癌的增殖
(Enfissi et al， CW/ Ca/dww 2004 (36): 459-467.);另外也抑制前列腺癌(Wasilenko et al. /"r. / Ca"cw 1996 (68): 259-264.)、胶质母细胞瘤(Jacobs et al. 乂 Afewrao"co/. 1997 (32): 93-101.)、肺 癌(Moody et al. Ca"cer 2003 (39): 279-288.)、膀胱癌(Perabo et al.及仏2004 (24): 2869-2877.)、肝癌(Enfissi et al. Ce〃 Ca/c〖wm 2004 (36): 459-467.)等的侵袭和转移。与一 般的细胞毒药物比较，羧胺三唑的毒副作用非常低，国内外正在进行的若干项临床试验也已 证明了该药物良好的安全性。中国专利CN 1660434A对此有详细阐述(在此并入作为参考)。 在深入研究羧胺三唑的药理作用的过程中，我们发现，迄今为止被认为是抗癌药物的羧胺三 唑不仅具有抗癌作用，还具有强大的抗炎作用并能减轻炎症引起的疼痛。它能显著抑制2% 巴豆油引起的小鼠外耳廓肿胀，显著抑制组胺和血管上皮生长因子导致的血管通透性增加。 在醋酸致小鼠扭体模型、小鼠足底注射弗尔马林致痛实验模型中，羧胺三唑表现出良好的镇 痛效果。这说明它对急性炎症表现的各个方面都有明显的抑制作用。慢性炎症方面，羧胺三 唑显著抑制腹股沟埋设棉球引起的慢性肉芽肿增生；显著抑制弗氏完全佐剂注射导致的大鼠 关节炎 (Guo L, Ye C， Chen W, et al. Anti-inflammatory and Analgesic Potency of Carboxyamidotriazole, a Tumoristatic Agent / /Vmtw"co/. ￡x/ . 77 era/ 2008 (325) :1-7.)。中 国专利CN 101164538对此有详细阐述(在此并入作为参考)。
本发明的目的是提供一种通过联合用药降低毒性、提高耐药性的治疗恶性肿瘤的方法。
本发明的另一目的是提供一种具有抗恶性肿瘤活性并且毒性低的抑制恶性肿瘤的组合 药物及其制剂
发明内容
本发明的治疗方法，是将对细胞因子具有一定调节作用的抗炎药物，如糖皮质激素类药 物或免疫抑制剂类或靶向细胞因子的生物药剂与羧胺三唑或其衍生物或其中间体联合用药来 治疗恶性肿瘤。
本发明所提出的抗恶性肿瘤组合药物，是由对细胞因子具有一定调节作用的抗炎药 物，如糖皮质激素类药物或免疫抑制剂类或靶向细胞因子的生物药剂与羧胺三唑或其衍生 物或其中间体组成。
上述抗恶性肿瘤组合药物，可选用的糖皮质激素类药物包括，但不限于，可的松
(cortisone)、氢化可的松(hydrocortisone)、醋酸氢化可的松(hydrocortisone acetate)、 丁酸 氢化可的松(hydrocortisonebutyrate)、强的松(prednisone)、强的松龙(prednisolone)、甲基 强的松龙(methylprednisolone)、去炎松(triamcinolone acetonide)、曲安西龙(triamcinolone)、 氟羟氢化泼尼松(fluoxyprednisolone )、氟羟强的松龙(triamcortisone )、地塞米松
(dexamethasone)、 i咅4也米丰公(betemethasone)、 丁酸氯f咅j也丰公(clobetasone butyrate)、丙酸 氯倍他索(cloetasol propionate,氯倍米松，特美肤)、倍氯米松(beclomethasone，倍氯松， 倍氯美松双丙酸酯，氯倍他美松二丙酸酯，beclomethasone dipropionate)、曲安奈德
(triamcinolone acetonide，曲安縮松，去炎舒松，去炎松-A，确炎舒松-A)、特戊酸氟美松
(flumethasone pivalate)、糠酸莫米松、(mometasone fUroate)、戊酸月JM也米丰公(betamethasone valerate)、 二丙酸倍他米松(betamethasone dipropionate)、肤轻松(flucinonode)、氯氟舒松
(halcinonide，哈西奈德halcinonide，哈西縮松)、卤美他松(halmetasone)、 二丙酸倍氯米松
(BDP)、布地奈德(BUD)和氟替卡松。
糖皮质激素类还包括可用的盐和酯，如，但不仅限于，醋酸、丁酸、琥珀酸钠、双醋酸 酯、磷酸、丙酸、盐酸盐或酯、硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐、乳糖酸盐、天冬酸盐、硝酸盐、 枸橼酸盐、嘌呤或嘧啶盐及马来酸盐等。
上述抗恶性肿瘤组合药物，可选用的通过免疫抑制作用抑制炎症的药物包括但不仅限
于环孢素、硫唑嘌呤、甲氨喋呤、羟基脲、乙亚胺、乙双吗啉、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、青 霉胺、抗淋巴细胞蛋白、抗淋巴细胞血清、莫罗莫那-CD、雷公藤总甙、来氟米特。
上述抗恶性肿瘤组合药物，可选用的对细胞因子具有一定调节作用的抗炎药物选自靶 向细胞因子的生物药剂如TNF阻滞剂(Etanercept、 Infliximab)和IL —l受体拮抗剂等。
上述抗恶性肿瘤组合药物，既可以为一种或几种所述糖皮质激素类药物或免疫抑制剂类 或耙向细胞因子的生物药剂和羧胺三唑及其中间体或衍生物的组合。
本发明提供的抗恶性肿瘤药物制剂，是以上述抗恶性肿瘤组合药物作为活性成分，并辅以可接受的药用辅料、载体和/或赋型剂，以制成各种制剂，如，但不限于，口服液、胶 丸、口服混悬液、固体分散体、胶囊、缓释剂、颗粒剂、片剂、注射剂、软膏、贴剂、植入 剂等。
上述抗恶性肿瘤组合药物和制剂可以直接在恶性肿瘤治疗中作为联合药物。 本发明的联合制剂的组成成分可以同时、分开或顺序给药。
因此，本发明的另一目标是在抗癌治疗中同时、分开或顺序使用本发明的联合制剂。
本发明的联合制剂可用于针对在包括人类的哺乳动物中发现的包括肺、白血病、黑色 素瘤、肝脏、乳腺、卵巢、前列腺、胃、胰腺、肾脏、结肠和中枢神经系统肿瘤这些癌症、 瘤或恶性肿瘤的所有类型的治疗。优选地，用于非小细胞肺癌、结肠癌的治疗。
总的说来，本发明涉及对病人施予治疗有效量的组合药物，该药物，由治疗有效比例和 量的糖皮质激素类药物或免疫抑制剂类或靶向细胞因子的生物药剂与羧胺三唑，或其衍生物 或中间体组成。该药物组分能够协同羧胺三唑抑制恶性肿瘤的生长，降低羧胺三唑的有效剂 量，减少患者的并发症，提高肿瘤细胞对羧胺三唑或其衍生物或中间体的敏感性。本发明的 药用组合物和制剂，可作为多种恶性肿瘤治疗的药物。
图1:显示了糖皮质激素(地塞米松)对羧胺三唑抑制小鼠移植性Lewis肺癌生长的协同效 应。
图2:显示了地塞米松和羧胺三唑对结肠癌细胞生长的体内抑制作用。
表1:显示了地塞米松和羧胺三唑对C57BL/6小鼠黑色素瘤的体内协同抑制作用 具体实施例
通过如下实施例对本发明抗恶性肿瘤组合物的技术作进一步的描述-实施例l:
该例验证糖皮质激素(地塞米松)对羧胺三唑抑制小鼠移植性Lewis肺癌生长的协同效应。
实验材料C57BL-6品系小鼠，为II级实验动物，合格证号为中华人民共和国科学技术 部2005年颁发的SCXK2005-0013号。体重18-22g，雄性，12只/组，购自中国医学科学院实 验动物中心。实验方法在无菌操作下，取生长良好无破溃的Lewis'LC肿瘤瘤结，选出健康无坏死 的肿瘤组织，剪碎后放入研磨器中，加入适量生理盐水(NS)，研磨成肿瘤单细胞匀浆液，在镜下计数后，用NS调至lxl07/ml细胞的浓度，于小鼠右腋皮下接种，每只注入瘤细胞液2xl06/0.2ml。接种Lewis肺癌瘤株10天后，分组给药治疗，持续给药9天后称量各组动物的平均瘤重，观察各种药物及组合物对小鼠移植性Lewis肺癌生长的抑制作用。肿瘤生长抑 制率计算公式如下-(l一治疗组平均瘤重/对照组平均瘤重)X100% 实验结果显示，羧胺三唑单独使用，对Lewis肺癌移植瘤生长的抑制率约为30.56。/。，合用 地塞米松组的抑制率可达50.0%，有明显的增强作用，如图1所示。PEG400为羧胺三唑的溶剂； CAI:羧胺三唑，剂量为20mg/kg; Dex:地塞米松,剂量为2.5mg/kg。 */7<0.05。实施例2:该例验证地塞米松和羧胺三唑对结肠癌细胞生长的体内抑制作用。 实验材料SCID小鼠，为SPF级实验动物，合格证号为SCXK (京)2002 — 0003 实验方法在第0天，将SCID小鼠(6—8周龄)皮下接种2X1()S个结肠癌LS174T细胞，10天后， 荷瘤动物分组。分别经腹腔注射给予地塞米松1.25mg/kg，或灌胃给予羧胺三哇20mg/kg，或 同时施以组合物进行处理，同时设立生理盐水(NS)对照组和PEG400对照组。在第23天 切除肿瘤测定重量。抑瘤率计算公式 (l一治疗组平均瘤重/对照组平均瘤重)X100% 实验结果见图2。实验结果表明，灌胃给予剂量为20mg/kg的羧胺三唑对LS174T结肠癌的抑制率为51.8 %，当同时经腹腔注射给予地塞米松时，抑瘤率上升到66.7%，增加了 14.9%，表现出明显 的增效作用。实施例3:地塞米松和羧胺三唑对C57BL/6小鼠黑色素瘤的体内协同抑制作用 实验材料C57BL/6品系小鼠，为II级实验动物，体重18-22g,雄性，合格证号为中华人民共和国科学技术部2005年颁发的SCXK2005-0013号。体重18-22g，雄性，12只/组，购自中国医学科 学院实验动物中心。 实验方法实验进行前将C57BL/6小鼠进行腋下脱毛，接种时取处于对数生长期的黑色素瘤B16细胞， 吹打均匀调节细胞密度后，皮下接种于左前肢腋下。待第10天，选择生长旺盛且无溃破而动 物健康较好的瘤源动物取出肿瘤，二次接种。在接种瘤株后第8天，进行随机分组，每组12 只，共5组，分别为生理盐水对照组，地塞米松组(1.25mg/kg)， PEG 400对照组，CAI治疗 组(20mg/kg)以及地塞米松+羧胺三唑治疗组。第8， 9， IO天给药，并每天用游标卡尺测 量肿瘤长短半径以初步确定肿瘤大小以及给药量，第11天处死小鼠，取出肿瘤并称重，计算 肿瘤抑制率。计算公式如下100XX给药组瘤重/对照组瘤重 实验结果如表1所示表1地塞米松及羧胺三唑对C57BL/6小鼠黑色素瘤瘤重的影响组别剂量动物数动物体重抑瘤率给药前给药后(%)生理盐水对照--1020.14±1.2824.48±2.81--地塞米松1.25mg/kg1020.97±1.6222.37±2.4819.3±4.20PEG400对照--1020.47±1.7623.94±3.72--羧胺三唑20 mg/kg1020.35±1.4824.17±2.2539.8±6.6地塞米松+同各单药919.87±2.2822.81±2.9469.0±10.38羧胺三唑结果:动物体内实验结果表明，单独使用羧胺三唑对小鼠黑色素瘤的抑制率为39.8%，而腹腔 注射地塞米松时的抑制率为19.3%，两种合用后对黑色素瘤的移植瘤为69.0%，与对照组相比， 差异都极显著。
权利要求
1、一种抗恶性肿瘤组合药物，由对细胞因子具有一定调节作用的抗炎药物与羧胺三唑或其衍生物或其中间体组成。
2、 如权利要求1所述的抗恶性肿瘤组合药物，其特征在于，对细胞因子具有一定调节 作用的抗炎药物选自糖皮质激素类，其中包括但不仅限于肾上腺皮质激素及促肾上腺皮质激 素及其盐或酯(可的松、氢化可的松、醋酸氢化可的松、丁酸氢化可的松、强的松、强的松 龙、甲基强的松龙、去炎松、曲安西龙、氟羟氢化泼尼松、氟羟强的松龙、地塞米松、培他 米松、丁酸氯倍他松、丙酸氯倍他索、倍氯米松、曲安奈德、特戊酸氟美松、糠酸莫米松、 戊酸脱他米松、二丙酸倍他米松、肤轻松、氯氟舒松、卤美他松、二丙酸倍氯米松、布地奈 德、氟替卡松)中的一种或其组合。
3、 如权利要求1所述的抗恶性肿瘤组合药物，其特征在于，对细胞因子具有一定调节 作用的抗炎药物选自通过免疫抑制作用抑制炎症的药物，其中包括但不仅限于环孢素、硫唑 嘌呤、甲氨喋呤、羟基脲、乙亚胺、乙双吗啉、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、青霉胺、抗淋巴细 胞蛋白、抗淋巴细胞血清、莫罗莫那-CD、雷公藤总甙、来氟米特。
4、 如权利要求1所述的抗恶性肿瘤组合药物，其特征在于，对细胞因子具有一定调节 作用的抗炎药物选自靶向细胞因子的生物药剂如TNF阻滞剂(Etanerc印t、 Infliximab)和IL 一1受体拮抗剂等。
5、 根据权利要求l-4所述的抗恶性肿瘤组合药物，其特征在于，为一种或几种所述糖皮 质激素类药物和羧胺三唑及其中间体或衍生物的组合，或一种或几种糖皮质激素类药物的盐 和/或酯和羧胺三唑及其中间体或衍生物的组合。
6、 根据权利要求l-4所述的抗恶性肿瘤组合药物，其特征在于，为一种或几种所述通过 免疫抑制作用抑制炎症的药物和羧胺三唑及其中间体或衍生物的组合。
7、 根据权利要求l-4所述的抗恶性肿瘤组合药物，其特征在于，为一种或几种所述的靶 向细胞因子的生物药剂，如TNF阻滞剂(Etanercept、 Infliximab)和IL —1受体拮抗剂和羧 胺三唑及其中间体或衍生物的组合。
8、 抗恶性肿瘤的药物制剂，以权利要求1至7任一所述抗恶性肿瘤组合药物作为活 性成分，并辅以可接受的药用载体。
9、 根据权利要求8所述抗恶性肿瘤的药物制剂，其特征在于，所述制剂为口服液、 胶丸、口服混悬液、固体分散体、胶囊、缓释剂、颗粒剂、片剂、注射剂、软膏、贴剂、植 入剂等。
10、 权利要求l一9任一所述组合物在制备治疗恶性肿瘤的药物的应用。
11、 一种恶性肿瘤的治疗方法，是将权利要求1至io所述糖皮质激素类或通过免疫抑制作用抑制炎症的药物或靶向细胞因子的生物药剂与羧胺三唑或其衍生物或其中间体联合用 药治疗恶性肿瘤。
12、 根据权利要求11所述治疗方法，其特征在于，所述糖皮质激素类药物或通过免疫抑制作用抑制炎症的药物或靶向细胞因子的生物药剂和羧胺三唑或其衍生物或其中间体分别 施予受药者。
13、 根据权利要求11所述治疗方法，其特征在于，所述糖皮质激素类药物或通过免疫 抑制作用抑制炎症的药物或靶向细胞因子的生物药剂和羧胺三哇或其衍生物或其中间体制成 组合药物施予受药者。
14、 根据权利要求11-13所述治疗方法，其特征在于，给药的有效剂量在对受药者体 重大约每天0.25mg/kg到50mg/kg之间。
15、 根据权利要求11-14所述治疗方法，其特征在于，给药的有效剂量在对受药者体 重优选每日0.25mg/kg到25mg/kg之间。
全文摘要
本发明公开了一种联合用药治疗恶性肿瘤的方法，同时公开了一类具有抗肿瘤活性并且毒性低的抗恶性肿瘤组合药物以及以此药物组合物作为活性成分的抗恶性肿瘤药物制剂，本发明将对细胞因子具有一定调节作用的抗炎药物，如糖皮质激素类药物或免疫抑制剂类或靶向细胞因子的生物药剂与羧胺三唑或其衍生物或其中间体联合施用形成恶性肿瘤的治疗药物。实验验证，该组合药物能够增加肿瘤细胞对羧胺三唑的敏感性，可作为对多种恶性肿瘤治疗中的广谱药物应用，尤其用于治疗非小细胞肺癌、结肠癌等。
文档编号A61K31/56GK101669941SQ20081021228
公开日2010年3月17日 申请日期2008年9月9日 优先权日2008年9月9日
发明者叶菜英, 张德昌, 磊 郭, 瑞 鞠 申请人:中国医学科学院基础医学研究所