黄酮类化合物在保护肝脏中的用途的制作方法

专利名称：黄酮类化合物在保护肝脏中的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物技术和医药领域，更具体而言，涉及黄酮类活性物质在疾病预防 和治疗中的新用途。
背景技术：
本领域中已知多种与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病，例如(但不限于)肝 损伤、肝内胆汁淤积、胆道梗阻、胰腺疾病、甲状腺功能亢进症、急性心肌梗塞、心力衰竭或 多发性肌炎。其中，肝损伤是严重危害人类健康的重大疾病。在这些疾病中，肝炎是严重危害人类健康的重大疾病。肝炎特别是病毒性肝炎在 中国的发病率持续升高。就乙型肝炎来说，全世界20亿人感染乙肝病毒，其中6. 9亿在中 国，全球有乙肝病毒表面抗原(HBsAg)携带者3. 5亿人，其中三分之一在中国；全世界每年 有75万人死于乙肝病毒感染引起的疾病，其中28万人来自中国。如此惊人的数据，促使我 们不得不寻找有效的药物治疗及预防疾病的发生。肝炎从病因看主要有病毒性肝炎、酒精性肝炎、自身免疫性肝炎等。但是研究发 现，不论其初始病因如何，炎症和免疫介导的肝细胞和肝组织损伤是这些疾病发生的必经 过程，并且，它是影响疾病严重程度与预后的主要原因。因此，探索降低血清谷丙转氨酶活性(尤其是肝炎)的新方法和药物一直是医药 领域的研究热点。ConA(为刀豆蛋白A，一种植物凝集素)诱导的肝炎模型(ConA inducedhepatitis, CIH)是一种国际上广泛采用的、用以研究免疫介导的肝损伤的实验模 型(TiegsG，Hentschel J,ffendel A. .1 Clin Invest 1992，90 :196-203)。在模型诱导后 8 到24小时，动物血清中谷丙转氨酶(ALT)活性急剧增加，病理学分析(如HE染色和TUNEL) 可以观察到肝脏正常结构被破坏，大量的肝实质细胞凋亡。在CIH的诱导过程中，细胞因子 肿瘤坏死因子a (TNFa)、干扰素、(IFN Y )、白介素_12以及白介素_4对肝脏的损伤起了 关键作用。CIH为研究免疫介导的肝损伤的发病机理以及寻找有效药物治疗及预防免疫介 导的肝损伤提供了有利的动物模型。黄酮类(Flavonoids)化合物广泛分布于植物界，到目前为止，已发现了 2000多 种。它们多数以苷的形式存在，少数以游离态存在，其生理作用和生物活性是多种多样的。 由于黄酮类化合物结构的共轭性，对紫外和可见光均显示强吸收，并在可见和紫外区内高 度稳定。天然来源的黄酮类化合物具有抗菌、抗光敏、抗氧化、抗自由基、抗病毒等生物活性 与药理作用。目前已产业化开发了诸多植物黄酮类提取物，如水飞蓟素、银杏提取物、茶多酚、 葡萄籽提取物、松树皮提取物、甘草黄酮、大豆异黄酮、葛根异黄酮等。然而，在治疗或预防对象中与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病，尤其是免疫 介导的肝损伤中，仍然迫切需要开发出有效的药物。

发明内容
本发明的目的之一正是在于开发出某些黄酮类化合物在降低谷丙转氨酶活性 (尤其是预防和治疗免疫介导的肝脏损伤相关疾病)中的新用途，。在本发明的第一方面，提供了一种具有结构式A的化合物、其药学上可接受的盐、 或它们的组合在制备用于治疗或预防对象中与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病的药 物中的用途 式中R” R2、R3和R4各自独立地为选自下组的基团-H、-Ch烷基、-OH、-C^烷氧 基、-SH、-NH2、氟、氯、溴或碘。在本发明的一个实施方式中，所述礼、R2、R3和R4各自独立地为-H或-0H。在本发明的另一个实施方式中，所述化合物具有选自下组的结构式 在本发明的另一个实施方式中，所述与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病包 括肝损伤、肝内胆汁淤积、胆道梗阻、胰腺疾病、甲状腺功能亢进症、急性心肌梗塞、心力衰 竭或多发性肌炎。在一个优选例中，所述肝损伤为病毒性肝炎、酒精性肝炎、自身免疫性肝 炎、药物性肝炎、脂肪肝所致的肝损伤。在本发明的另一个实施方式中，所述肝损伤为免疫介导的肝损伤。在一个优选例中，所述免疫介导的肝损伤选自病毒性肝炎、酒精性肝炎和自身免 疫性肝炎。在另一优选例中，所述药物组合物还降低对象中血清细胞因子的表达。在另一 个优选例中，所述血清细胞因子是肿瘤坏死因子-a和/或干扰素。在另一个实施方式中，所述对象是哺乳动物。在一个优选例中，所述哺乳动物是
在本发明的另一个实施方式中，所述药物组合物中的具有结构式A的化合物、其 药学上可接受的盐、或它们的组合占药物组合物总重量的0. 001-99. 9wt%。在一个优选例中，所述药物组合物中的具有结构式A的化合物、其药学上可接受 的盐、或它们的组合占药物组合物总重量的l_95wt%，优选5-90wt%，更优选10-80wt%。在本发明的另一个实施方式中，所述药物组合物的剂型包括片剂、粉末剂、注射 剂、颗粒剂、糖浆、胶囊、溶液剂、栓剂或药膏。在一个优选例中，所述药物组合物为单位剂型或多剂型，其中具有结构式A的化 合物、其药学上可接受的盐、或它们的组合的含量为l_4000mg/剂，优选100-2000mg/剂。在另一优选例中，以0. 01-200mg/kg体重，较佳地0. l_150mg/kg体重，优选 0. 5-120mg/kg体重，更优选l-70mg/kg体重，更优选2_50mg/kg体重，最优选2. 5-20mg/kg 体重给予所述药物组合物。在本发明的另一个实施方式中，所述药物组合物还包含缓解或治疗肝脏损伤的其 它药物。在一个优选例中，所述缓解或治疗肝脏损伤的其它药物选自丹参酮II A、甘草酸 制剂、绿茶多酚、水飞蓟素或粉防己碱。在本发明的第二方面，提供了一种药物组合物，其含有(1)有效量的具有结构式A的化合物、其药学上可接受的盐、或它们的组合；(2)选自下组的一种或多种物质丹参酮II A、甘草酸制剂、绿茶多酚、水飞蓟素、 粉防己碱或它们的组合；和(3)药学上可接受的载体。在一个优选例中，所述具有结构式A的化合物、其药学上可接受的盐、或它们 的组合占组合物总重量的0. 001-99. 9wt%，优选l_95wt%，较优选为5_90wt%，更优选 10-80wt%。在另一优选例中，所述化合物选自结构式B的化合物(即芹黄素)、结构式C的 化合物(即木樨草素)、或结构式D的化合物(即黄芩素)或它们的组合。在另一优选例中，组分(1)和组分(2)的重量比为0.01 100 100 0.01，优 选 1 95 95 1。在本发明的第三方面，提供了治疗或预防疾病的方法。在一个优选例中，本发明提供了一种治疗或预防对象与血清谷丙转氨酶活性增加 相关的疾病的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的具有结构式A的化合物、其药 学上可接受的盐、或它们的组合， 式中
R” R2、R3和R4各自独立地为选自下组的基团-H、-Ch烷基、-0H、烷氧 基、-SH、-NH2、氟、氯、溴或碘。在另一个优选例中，所述化合物选自如上文所示的结构式B的化合物(即芹黄 素)、如上文所示的结构式C的化合物(即木樨草素)、或如上文所示的结构式D的化合物 (即黄芩素)或它们的组合。在一个实施方式中，所述与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病包括肝损伤、肝 内胆汁淤积、胆道梗阻、胰腺疾病、甲状腺功能亢进症、急性心肌梗塞、心力衰竭或多发性肌 炎。在一个优选例中，所述肝损伤为病毒性肝炎、酒精性肝炎、自身免疫性肝炎、药物 性肝炎、脂肪肝所致的肝损伤。在另一个优选例中，所述肝损伤为免疫介导的肝损伤，优选病毒性肝炎、酒精性 肝炎和自身免疫性肝炎。在另一优选例中，本发明提供了一种降低血清细胞因子表达的方法，所述方法包 括给予需要的对象有效量的具有结构式A的化合物、其药学上可接受的盐、或它们的组
口 o在另一优选例中，本发明提供了一种治疗或预防与血清细胞因子表达过度相关的 疾病的方法，所述方法包括给予需要的对象有效量的具有结构式A的化合物、其药学上可 接受的盐、或它们的组合。在本发明的一个实施方式中，以0. 01_200mg/kg体重，较佳地0. l_150mg/kg体 重，优选0. 5-120mg/kg体重，更优选l-70mg/kg体重，更优选2_50mg/kg体重，最优选 2. 5-20mg/kg体重给予具有结构式A的化合物、其药学上可接受的盐、或它们的组合。在本发明的另一个实施方式中，以片剂、粉末剂、注射剂、颗粒剂、糖浆、胶囊、溶液 剂、栓剂或药膏的形式给予具有结构式A的化合物、其药学上可接受的盐、或它们的组合。在本发明的另一个实施方式中，与其它缓解或治疗肝脏损伤的药物一起或先后给 予具有结构式A的化合物、其药学上可接受的盐、或它们的组合。在本发明的一个优选例中，所述缓解或治疗肝脏损伤的其它药物选自丹参酮 IIA、甘草酸制剂、绿茶多酚、水飞蓟素、粉防己碱或它们的组合。本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见 的。


图1 对CIH小鼠实施芹黄素(Api)、木樨草素(Lut)和黄芩素(Bai)治疗的实验 流程示意图。图2 芹黄素(Api)对CIH小鼠血清中ALT水平的影响。图中，“***”代表与对 照相比，P<0. 001。图3 经芹黄素(Api)治疗的CIH小鼠肝脏组织的H&E染色和TUNEL染色。其中，图 3A为对照组小鼠肝脏组织切片H&E染色结果；图3B为Api处理组小鼠H&E染色结果；图3C 为对照组小鼠TUNEL染色结果；图3D为Api处理组小鼠TUNEL染色结果。放大倍数X 100。图4 芹黄素(Api)对炎性细胞因子(图4A :TNF_a ；图4B :IFN-y)的影响。图中，“ ** ”代表与对照相比，P < 0. 01，“ _ ”代表与对照相比，P < 0. 001。图5 木樨草素(Lut)对CIH小鼠血清中ALT水平的影响。图中，“***”代表与 对照相比，P<0. 001。图6 经木樨草素(Lut)治疗的CIH小鼠肝脏组织的H&E染色和TUNEL染色。其 中，图6A为对照组小鼠肝脏组织切片H&E染色结果；图6B为Lut处理组小鼠H&E染色结 果；图6C为对照组小鼠TUNEL染色结果；图6D为Lut处理组小鼠TUNEL染色结果。放大倍 数 X100。图7 木樨草素(Lut)对炎性细胞因子(图7A :TNF_ a ；图7B :IFN- y )的影响。图 中，“ *，，代表与对照相比，P < 0. 05，“ ** ”代表与对照相比，P < 0. 01。图8 黄芩素(Bai)对CIH小鼠血清中ALT水平的影响。图中，“***”代表与对 照相比，P<0. 001。图9 经黄芩素(Bai)治疗的CIH小鼠肝脏组织的H&E染色和TUNEL染色。其中，图 9A为对照组小鼠肝脏组织切片H&E染色结果；图9B为Bai处理组小鼠H&E染色结果；图9C 为对照组小鼠TUNEL染色结果；图9D为Bai处理组小鼠TUNEL染色结果。放大倍数X 100。图10 黄芩素(Bai)对炎性细胞因子(图10A :TNF_a ；图10B :IFN-y)的影响。 图中，“*”代表与对照相比，P < 0. 05，“#”代表与对照相比，P < 0. 01。
具体实施例方式本发明人通过长期而深入的研究发现具有结构式A的黄酮类化合物(如芹黄素、 木樨草素、黄芩素)可降低血清谷丙转氨酶活性，且对免疫介导的肝损伤具有保护作用。 本发明人进一步发现此类黄酮类化合物可下调与炎症密切相关的细胞因子——IFN-y和 TNF-a，从而明确了其保护作用可能的机理。在此基础上，发明人完成了本发明。具体而言，本发明利用具有结构式A的黄酮类化合物(例如芹黄素、木樨草素、 黄芩素)，在CIH模型上证实了它们对免疫介导的肝损伤的保护作用。这些黄酮类化合物 均可显著地抑制诱导CIH后小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)的活性，使得ALT的水平降低到 1000U/L左右(CIH小鼠ALT平均值在8000U/L以上)。肝脏的病理分析显示，在这些黄酮 类化合物分别处理后的小鼠的肝脏中，几乎看不到明显的肝脏正常结构的破坏、炎性浸润 以及肝细胞凋亡。进一步的研究表明，这些黄酮类化合物通过下调与炎症密切相关的细胞 因子——IFN-y和TNF-a，而抑制免疫介导肝损伤。本发明提供了具有结构式A的黄酮类化合物在预防和治疗免疫介导的肝损伤中 的新用途，为降低开发成本和积极有效地治疗肝脏疾病提供了一种新的途径。具有结构式A的黄酮类活件物质如本发明所用，术语“具有结构式A的黄酮类活性物质”和“具有结构式A的黄酮 类化合物”可互换使用，是指具有结构式A的黄酮结构活性成分、其药学上可接受的盐、或它 们的混合物，
结构式A_式中礼、R2、R3和R4各自独立地为选自下组的基团-H、烷基、-0H、烷氧 基、-SH、-NH2、氟、氯、溴或碘。优选所述活性物质具有为如下所详细描述的芹黄素(结构 式B)、木樨草素(结构式C)和/或黄芩素(结构式D)。在本发明中，对于制备黄酮类活性物质的方法没有特别的限制，比如其可提取自 天然植物(例如中药材)，或可以采用化学合成、或半化学合成的方法来制备。本发明中所 使用的黄酮类活性物质可通过市售途径获得，例如可购自上海食品药品检定所、Sigma等。代表性的具有结构式A的黄酮类活性物质如下(但不限于)A.芹黄素芹黄素(apigenin)，是一种黄酮类化合物，又称芹菜素或洋芹素，广泛分布于温热 带的蔬菜和水果中，尤以芹菜中含量为高。在一些药用植物如车前子、络石藤等中也有很 高的含量，植物源性饮料如茶、酒以及一些调味品中也有分布。芹菜素的化学结构为5，7， 4'-三羟基黄酮(如上文的式B所示)，相对分子质量为270。芹菜素不溶于水，易溶于乙醇、二甲基亚砜(DMS0)。芹黄素现已可人工合成，是一 种来源充足、作用广泛、具有广阔开发前景的天然植物成分。早在20世纪70年代，国外科研工作者就对芹黄素及其相关化合物进行了研究。然 而，这些研究主要集中在芹黄素抗肿瘤及化疗增敏作用、对内分泌功能的影响、抗菌、抗病 毒作用等方面，而并未涉及其对与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病(尤其是免疫介导 的肝损伤)的预防和/或治疗作用。本发明中证明了芹黄素对与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病，尤其是免疫介 导的肝损伤具有预防和治疗作用，低剂量的芹黄素即可极为显著地抑制诱导CIH后小鼠血 清中谷丙转氨酶(ALT)的活性。并且，肝脏的病理分析显示，在芹黄素处理后的小鼠的肝脏 中，几乎看不到明显的肝脏正常结构的破坏、炎性浸润以及肝细胞凋亡。进一步的研究表 明，芹黄素通过下调与炎症密切相关的细胞因子——IFN-y和TNF-a，而抑制免疫介导肝 损伤。可用于本发明中的芹黄素包括但不限于提取自天然植物(例如芹菜、车前子、络 石藤等)的芹黄素，化学或半化学合成的芹黄素，或市售的芹黄素(例如可购自上海食品药 品检定所、Sigma等)。制成药物组合物时，芹黄素可以是中性形式或盐形式。这些盐包括酸加成盐，与无 机酸，例如盐酸、磺酸或磷酸，或与有机酸，例如乙酸、草酸、酒石酸、扁桃酸等形成的盐。合 适的碱加成盐包括但不限于基于碱金属或碱土金属的阳离子，包括锂、钠、钾、钙、镁和招 盐；非毒性季铵和胺阳离子，包括铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺 和乙胺。用于形成碱加成盐的其它代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌 嗪等。
B.木樨草素木樨草素(luteolin)是一种天然黄酮类化合物，存在于多种植物中，其结构如上 文的结构式C所示。该化合物具有多种药理活性，如消炎、抗过敏、抗肿瘤、抗菌、抗病毒等，临床主要 用于止咳、祛痰、消炎、治疗心血管疾病、治疗“肌萎缩性脊髓侧索硬化症”、SARS等。然而， 本领域并未涉及木樨草素对与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病(尤其是免疫介导的 肝损伤)的预防和/或治疗作用。本发明中证明了木樨草素对免疫介导的肝损伤具有保护作用，低剂量的芹黄素即 可极为显著地抑制诱导CIH后小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)的活性。并且，肝脏的病理分 析显示，在木樨草素处理后的小鼠的肝脏中，几乎看不到明显的肝脏正常结构的破坏、炎性 浸润以及肝细胞凋亡。进一步的研究表明，木樨草素通过下调与炎症密切相关的细胞因 子——IFN- y和TNF- a，而抑制免疫介导肝损伤。可用于本发明中的木樨草素包括但不限于提取自天然植物(例如木樨草 (ResedaodorataL.)的叶、茎和枝、金银花、菊花、荆芥、白毛夏枯草等)的木樨草素，化学或 半化学合成的木樨草素，或市售的木樨草素(例如可购自上海食品药品检定所、Sigma等)。制成药物组合物时，木樨草素可以是中性形式或盐形式。这些盐包括酸加成盐，与 无机酸，例如盐酸、磺酸或磷酸，或与有机酸，例如乙酸、草酸、酒石酸、扁桃酸等形成的盐。 合适的碱加成盐包括但不限于基于碱金属或碱土金属的阳离子，包括锂、钠、钾、钙、镁和 铝盐；非毒性季铵和胺阳离子，包括铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙 胺和乙胺。用于形成碱加成盐的其它代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和 哌嗪等。C.黄芩素黄芩素(Baicalein)是一种天然黄酮类化合物，存在于多种植物中，其结构如上 文的结构式D所示。研究表明黄芩素具有降低脑血管阻力，改善脑血循环、增加脑血流量及抗血小板 凝集的作用，临床用于脑血管病后瘫痪的治疗等。然而，本领域并未涉及黄芩素对与血清谷 丙转氨酶活性增加相关的疾病(尤其是免疫介导的肝损伤)的预防和/或治疗作用。本发明中证明了黄芩素对免疫介导的肝损伤具有保护作用，低剂量的黄芩素即可 极为显著地抑制诱导CIH后小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)的活性。并且，肝脏的病理分析 显示，在黄芩素处理后的小鼠的肝脏中，几乎看不到明显的肝脏正常结构的破坏、炎性浸 润以及肝细胞凋亡。进一步的研究表明，黄芩素通过下调与炎症密切相关的细胞因子—— IFN-y和TNF-a，而抑制免疫介导肝损伤。可用于本发明中的黄芩素包括但不限于提取自天然植物(例如唇形科植物高 黄芩(Scutellaria altissimaL.)的叶、并头草(S. galericulataL.)的叶和根、紫葳科 植物木蝴蝶(Oroxylum indicum(L.)Vent.)的种子和茎皮、车前科植物大车前(Plantago majorL.)的叶等)的黄芩素，化学或半化学合成的黄芩素，或市售的黄芩素(例如可购自上 海食品药品检定所、Sigma等)。制成药物组合物时，黄芩素可以是中性形式或盐形式。这些盐包括酸加成盐，与无 机酸，例如盐酸、磺酸或磷酸，或与有机酸，例如乙酸、草酸、酒石酸、扁桃酸等形成的盐。合适的碱加成盐包括但不限于基于碱金属或碱土金属的阳离子，包括锂、钠、钾、钙、镁和铝 盐；非毒性季铵和胺阳离子，包括铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺 和乙胺。用于形成碱加成盐的其它代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪等。具有结构式A的黄酮类活件物质的新用涂黄酮类活性物质在以往研究和临床应用中已用于心血管系统、神经系统、内分泌 系统、肿瘤等疾病。本发明人利用本领域广泛接受的T细胞介导的肝炎模型“ConA诱导的肝炎模 型”(CIH)，证实了具有结构式A的黄酮类化合物具有对免疫介导的肝损伤有显著的保护作 用，具有结构式A的黄酮类化合物可以使CIH小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)的活性显著降低。 肝脏的病理分析也显示，在黄酮类化合物处理组小鼠肝脏正常结构的破坏和TUNEL阳性的 凋亡细胞与对照组相比均明显减少。发明人深入的工作进一步表明具有结构式A的黄酮类化合物对免疫介导的肝损 伤的保护作用的机理是其导致介导肝损伤的炎性细胞因子，包括干扰素和肿瘤坏死因 子a表达的显著下降，从而保护肝脏免受损伤。如本文所用，术语“免疫介导的肝损伤”是所有由免疫介导的肝脏损伤的统称，在 许多肝炎的发病过程中都起了重要作用。免疫介导的肝损伤包括但不限于病毒性肝炎、酒 精性肝炎、自身免疫性肝炎等肝脏损伤疾病。肝损伤、肝纤维化和肝癌是肝脏损伤的不同病 理阶段，免疫介导的肝损伤一般出现在急性期或慢性期的早期，如果由急性期转入慢性期 多会导致肝脏的纤维化，而如果肝细胞自我修复系统紊乱，细胞大量的恶性增殖就转变为 肝癌。本发明中提供了具有结构式A的黄酮类活性物质的新用途，其可用于治疗或预防 对象的与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病，包括治疗或预防对象的肝损伤(尤其是 免疫介导的肝损伤)、或降低血清细胞因子(例如肿瘤坏死因子_a和/或干扰素)的 表达。所述与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病包括(但不限于)肝损伤、肝内胆汁淤 积、胆道梗阻、胰腺疾病、甲状腺功能亢进症、急性心肌梗塞、心力衰竭或多发性肌炎。其中， 肝损伤包括(但不限于)病毒性肝炎、酒精性肝炎、自身免疫性肝炎、药物性肝炎、脂肪肝 所致的肝损伤。在一个优选例中，所述肝损伤为免疫介导的肝损伤，优选为病毒性肝炎、酒精性肝 炎和自身免疫性肝炎。相应地，本发明中还提供了具有结构式A的黄酮类活性物质在制备用于治疗或预 防上述疾病的药物组合物中的用途，以及利用具有结构式A的黄酮类活性物质或其药物组 合物来治疗或预防上述疾病的方法。应理解，本发明中所用术语“缓解”是指使得疾病或失调的征状得到改善，甚至该 疾病或失调消失或痊愈。药物组合物本发明还提供了一种药物组合物在治疗或预防对象与血清谷丙转氨酶活性增加 相关的疾病(尤其是肝损伤)中的用途，所述的药物组合物含有有效量的具有结构式A的 黄酮类活性物质以及药学上可接受的载体，或任选含有其它本领域已知的对上述疾病具有治疗或预防作用的其它活性成分。如本文所用，术语“含有”或“包括”包括了“包含”、“基本上由……构成”、和 “由……构成”。如本文所用，术语“药学上可接受的”的成分是适用于人和/或动物而无过度不良 副反应(如毒性、刺激和变态反应)的，即有合理的效益/风险比的物质。如本文所用，术语“有效量”是指可对人和/或动物产生功能或活性的且可被人和 /或动物所接受的量。如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种 赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体它们本身并不是必要的活性成分，且施用 后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在《雷明顿药物科学》 (Remington's Pharmaceutical Sciences,Mack Pub. Co. ,N. J. 1991)中可找到关于药学上 可接受的赋形剂的充分讨论。在组合物中药学上可接受的载体可含有液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些 载体中还可能存在辅助性的物质，如填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、泡腾剂、润湿剂或乳 化剂、矫味剂、PH缓冲物质等。通常，可将这些物质配制于无毒的、惰性的和药学上可接受 的水性载体介质中，其中PH通常约为5-8，较佳地，pH约为6-8。本发明的药物组合物中可含有作为有效成分的具有结构式A的黄酮类化合物、 其药学上可接受的盐、或它们的混合物。本发明的组合物中具有结构式A的黄酮类活性物质有效成分占组合物总重 量的0. 001-99. 9wt% ；优选为组合物总重量的l_95wt%，较优选为5_90wt%，更优选 10-80wt%。余量为药学上可接受的载体以及其它添加剂等物质。如本文所用，术语“单位剂型”是指为了服用方便，将本发明的组合物制备成单次 服用所需的剂型，包括但不限于各种固体剂(如片剂)、液体剂、胶囊剂、缓释剂。在本发明的一个优选实施方式中，所述组合物为单位剂型或多剂型，且其中具有 结构式A的黄酮类活性物质的含量为l-4000mg/剂，优选100-2000mg/剂。在本发明的一个优选例中，所述组合物中含有低剂量的具有结构式A的黄酮类活 性物质，例如l-10mg/剂，更优选2-8mg/剂，进一步优选含有3_6mg/剂。在本发明的另一个优选例中，所述组合物中含有中剂量的具有结构式A的黄酮类 活性物质，例如其含量为10-1000mg/剂；更优选20-800mg/剂，进一步优选50_600mg/齐lj， 更优选75-500mg/剂。在本发明的另一个优选例中，所述组合物中含有高剂量的具有结构式A的黄 酮类活性物质，例如其含量为1000-3500mg/剂；更优选1100-3200mg/剂，进一步优选 1200-3000mg/ 剂，更优选 1500_2000mg/ 齐[J。在本发明的另一个优选例中，每天施用1-6剂本发明的组合物，优选施用1-3剂； 在高剂量时优选每天服用1齐U。本发明的组合物，可以为固态(如颗粒、片剂、冻干粉、栓剂、胶囊、舌下含片)或液 态(如口服液、注射液)或其它合适的形式。应理解，所用黄酮类活性物质的有效剂量可随待施用或治疗的对象的严重程度而 变化。具体情况根据对象的个体情况(例如对象体重、年龄、身体状况、所需达到的效果)
12来决定，这在熟练医师或营养师可以判断的范围内。施用方式本发明的组合物可以通过常规途径施用，其中包括(但并不限于)口服、肌注、皮 下注射等。优选口服施用。组合物形式应与施用方式相匹配。本领域技术人员可根据需要确定具有结构式A的黄酮类活性物质的服用量。通常 本发明组合物的施用量，按活性物质重量计，通常为每天约0. 01-200mg活性物质/kg体重， 较佳地约0. l-150mg活性物质/kg体重，优选0. 5-120mg活性物质/kg体重，更优选l_70mg/ kg体重，更优选2-50mg活性物质/kg体重，最优选2. 5_20mg活性物质/kg体重。在一个实施方式中，本发明组合物含有作为活性物质的芹黄素，按芹黄素重量计， 通常为每天约0. 5-120mg芹黄素/kg体重，更优选1-70芹黄素mg/kg体重，更优选2_50mg 芹黄素/kg体重，最优选2. 5-20mg芹黄素/kg体重施用药物。在一个实施方式中，本发明组合物含有作为活性物质的木樨草素，按木樨草素重 量计，通常为每天约l-200mg木樨草素/kg体重，更优选2-140木樨草素mg/kg体重，更优 选4-100mg木樨草素/kg体重，最优选5-40mg木樨草素/kg体重施用药物。在一个实施方式中，本发明组合物含有作为活性物质的黄芩素，按黄芩素重量计， 通常为每天约0. 5-120mg黄芩素/kg体重，更优选1-70黄芩素mg/kg体重，更优选2_50mg 黄芩素/kg体重，最优选2. 5-20mg黄芩素/kg体重施用药物。本发明的组合物可直接使用，也可与其它治疗剂或辅剂联合使用。在本发明的优选实施方式中，本发明的组合物还可与有效量(如0. 0005-0. 1克/ kg体重/天；优选的，为0. 001-0. 05克/kg体重/天)的选自下组的一种或多种物质联合 施用丹参酮II A、甘草酸制剂、水飞蓟素、绿茶多酚或粉防己碱等。当两种或两种以上的药物联合给药时，一般具有优于两种药物分别单独给药的效 果。优选地，联合施用的药物或其它制剂不干扰本发明黄酮类活性物质有效成分的治疗活 性。本发明的优点本发明揭示了具有结构式A的黄酮类活性物质在治疗或预防肝脏损伤中的新用 途，具有以下优点1.本发明揭示了具有结构式A的黄酮类活性物质在治疗或预防对象的与血清谷 丙转氨酶活性增加相关的疾病(尤其是治疗或预防肝脏损伤)的作用及其作用机理，从而 为相关疾病的治疗和预防提供了新的途径；2.本发明中采用的具有结构式A的黄酮类活性物质多为已知的药物，本领域已熟 知其药物代谢动力学、毒理学等，因此降低了研发成本；且本领域中已知其生产制备工艺， 可根据现有技术条件来制备该药物，因此降低了生产成本。实施例下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条 件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意 义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。实验材料和动物动物C57BL/6品系小鼠，7_8周，雄性，体重24_25g，购自上海斯莱克实验动物有 限责任公司，随机分组；ConA 购自 Vector Laboratory Inc.，溶于 PBS (pH 7. 2-7. 4)，浓度为 2. 25mg/ml。芹黄素(Api):购自上海市食品药品检定所，先用DMS0溶解(浓度为0. 17mg/ yl)，于 _20°C 保存，临用前以 PBS (pH 7. 2-7. 4)稀释(浓度为 3. 125mg/ml 或 6. 25mg/ml)。木樨草素(Lut):购自上海市食品药品检定所，先用DMS0溶解(浓度为0. 17mg/ yl)，于 _20°C 保存，临用前以 PBS (pH 7. 2-7. 4)稀释(浓度为 6. 25mg/ml 或 12. 5mg/ml)。黄芩素(Bai):购自上海市食品药品检定所，先用DMS0溶解(浓度为0. 17mg/ yl)，于 _20°C 保存，临用前以 PBS (pH 7. 2-7. 4)稀释(浓度为 3. 125mg/ml 或 6. 25mg/ml)。对照溶液含有DMS0的PBS溶液(DMS0浓度为7. 5%，PBS的pH为7. 2-7. 4)。试验方法黄酮类化合物芹黄素(Api)、木樨草素(Lut)和黄芩素(Bai)的治疗实验流程如图 1所示(1)将小鼠随机分组，经腹腔注射给予对照溶液(200iU，对照组)或者一定浓度 的黄酮类化合物(给药组)；(2)给药2小时后，各小鼠接受同样的给药处理；(3)随后，立即给所有的小鼠由尾静脉注射剂量为15mg/kg体重的ConA，以诱导 CIH ；(4a)于注射ConA 2小时后，处死小鼠，获取血清，检测血清中TNF_ a的水平；(4b)于注射ConA 8小时后，处死小鼠，获取血清和肝脏，检测血清中ALT和 IFN-y的水平，并进行肝脏的组织病理学分析。实施例1芹黄素(ADi)对CIH小鼠谷丙转氨酶(ALT)活件的降低作用(A)试验根据上文“试验方法”部分的记载进行芹黄素(Api)治疗实验，所用Api剂量分别 为:25mg/kg(低剂量Api组)和50mg/kg(高剂量Api组)。给予ConA 8小时后，处死小 鼠，取血清检测ALT的水平。(B)谷丙转氨酶酶活的测定测量步骤采用上海伊华医学科技有限公司生产的血清谷丙转氨酶活性测定试剂 盒，按照说明书操作。简要步骤如下血清适当稀释后，取25微升加至96孔板，加入100微升酶工作液， 37°C孵育15分钟，加入150微升终止液，酶标仪492nm读数，根据试剂盒提供的标准血清和 稀释倍数计算谷丙转氨酶活性数值。(C)试验结果及分析Api治疗对ALT活性影响的结果分别如图2A和2B所示。数据以平均数士标准差 的形式表示，代表了 3次试验的结果(***P < 0. 001)。低浓度Api组和高浓度Api组结果均显示Api可极显著地降低CIH小鼠血清中 谷丙转氨酶的活性。其中，高剂量Api对ALT活性的降低效果更优于低剂量Api。
由此可知Api可以有效地抑制诱导CIH的小鼠血清中ALT的水平。实施例2经芹昔素(ApD处理后的CIH小鼠肝_的H&E染色和TUNEL染色观察(A)试验根据上文“试验方法”部分的记载进行芹黄素(Api)治疗实验，所用Api剂量为 50mg/kg。给予ConA 8小时后，处死小鼠，取肝脏组织进行切片，进行组织病理学分析。(B)H&E 染色对小鼠肝脏组织的切片进行H&E染色。染色过程如下1.小鼠麻醉后，经PBS心脏灌注后除去残留血液后，取肝脏，放入装有4%的多聚 甲醛的管子中后固定；2.脱水将固定后的组织切成合适大小后依次经过如下步骤2. 1. 70%酒精，30min，2. 2. 95%酒精，lh 30min，重复一次，2. 3. 100%酒精，lh 30min，重复一次;3.透明将脱水好的组织放入二甲苯中，15-20min，重复一次；4.浸蜡将透明好的组织放入融化的石蜡中(60°C )，lh，重复一次；5.包埋；6.切片将包埋好的组织块切成5 u m厚的薄片；7.展片将5 ym的组织片铺在40°C的水面上，让组织充分展平；8.捞片将展平的组织片捞在多聚赖氨酸处理好的玻片上；9.将玻片放在37°C的烘台上烘干；10.脱蜡水合将烘干的带有组织的玻片经过如下步骤进行脱蜡水合10. 1. 二 甲苯，5min，重复一次，10. 2. 100%酒精，5min，重复一次，10. 3. 95%酒精，5min，重复一次，10. 470%酒精，5min，10. 5 7jC,5min ；11.苏木素中染色7min ；12.流水冲洗；13.水中反色 5min;14.伊红中染色 0. 5min ；15.脱水透明化，封片15. 1. 70%酒精，2min，重复一次，15. 2. 95%酒精，2min，重复一次，15. 3. 100%酒精，2min，重复一次，15.4. 二 甲苯，5min，重复一次，15.5.中性树胶封片。(C)TUNEL 染色对小鼠肝脏组织的切片进行TUNEL染色。TUNEL染色过程如下1.小鼠麻醉后，经PBS心脏灌注除去残留血液，取肝脏，放入装有4%的多聚甲醛
15的管子中后固定；2.脱水将固定后的组织切成合适大小后依次经过如下步骤2. 1. 70%酒精，30min，2. 2. 95%酒精，lh30min，重复一次，2. 3. 100%酒精，lh30min，重复一次；3.透明将脱水好的组织放入二甲苯中，15-20min，重复一次；4.浸蜡将透明好的组织放入融化的石蜡中(60°C )，lh，重复一次；5.石蜡包埋；6.切片将包埋好的组织块切成5 u m厚的薄片；7.展片将组织片铺在40°C的水面上，让组织充分展平；8.捞片将展平的组织片捞在多聚赖氨酸处理好的玻片上；9.将玻片放在37°C的烘台上烘干；10.脱蜡水合将烘干的带有组织的玻片经过如下步骤进行脱蜡水合10. 1. 二 甲苯，5min，10. 2. 100%酒精，5min，10. 3. 95%酒精，5min，10. 4. 90%酒精，5min，10. 5. 80%酒精，5min，10. 6. 70%酒精，5min，10. 7. 7jC，5min，10. 8. PBS，5min ；11.用滤纸小心吸去载玻片上组织周围的多余液体，加入蛋白酶K溶液(20iig/ ml)，湿盒中37°C水解15min，去除组织蛋白。用PBS洗两次，每次5min ；12.色缸中加入含6%过氧化氢的甲醇，于室温反应5min。用PBS洗两次，每次 5min ；13.用滤纸小心吸去载玻片上组织周围的多余液体，每标本加入按试剂盒(TUNEL 凋亡检测试剂盒，购自罗氏)说明书配制的TdT酶反应液(5iUTdT酶+45iU标记液每标 本，阴性对照只加标记液不加酶液)，盖玻片覆盖，湿盒中37°C反应lh，用PBS洗两次，每次 5min ；14.用滤纸小心吸去载玻片上组织周围的多余液体，每标本加入50 ill P0D，湿盒 中37°C反应30min。用PBS洗两次，每次5min ；15.用滤纸小心吸去载玻片上组织周围的多余液体，每标本加入100 iU新鲜配置 的DAB溶液，显色3-10min ；16.脱水透明化，封片16. 1.水，2min 重复一次，16. 2. 70%酒精，2min，重复一次，16. 3. 95%酒精，2min，重复一次，16. 4. 100%酒精，2min，重复一次，16. 5. 二 甲苯，5min，重复一次，
16.6.中性树胶封片。(D)实验结果与讨论Api治疗后的肝脏组织切片H&E染色或者TUNEL染色结果分别如图3A和3B所示。由图可明显观察到经过Api处理后的小鼠诱导CIH后，小鼠肝脏部位的炎性浸润 和肝细胞坏死明显低于对照组小鼠。以上结果表明Api可以有效地抑制诱导CIH后小鼠肝脏中的炎性浸润和肝细胞 坏死。_仿丨丨3.(API)静性麵附白■向(A)血清中肿瘤坏死因子_ a (TNF- a )的浓度检测根据上文“试验方法”部分的记载进行Api (剂量为50mg/kg)治疗，在给予ConA 2 小时后，处死小鼠，取血清，按(C)中所述的ELISA方法，用厂商提供的ELISA试剂盒检测血 清中TNF-a的浓度。(B)血清、_干扰素的浓度检测根据上文“试验方法”部分的记载进行Api (剂量为50mg/kg)治疗，在给予ConA 8 小时后，处死小鼠，取血清，按(C)中所述的ELISA方法，用厂商提供的ELISA试剂盒检测血 清中干扰素(IFN-y)的浓度。(C) ELISA试剂及方法使用Duoset ELISA试剂盒(R&D，MN，USA)，按照生产商提供的说明书操作，简要步 骤如下取100微升一抗包板过夜，洗板后300微升封闭缓冲液封闭2小时，洗板后加入 100微升样品和标准品，孵育2小时，洗板后加入二抗孵育2小时，洗板后加入酶标链亲和 素，加入底物显色，硫酸中止，酶标仪450nm读数(参考波长为540nm)。根据标准曲线计算 样品中各细胞因子的浓度。(D)实验结果与讨论小鼠血清中肿瘤坏死因子-a的浓度检测实验和干扰素的浓度检测实验 结果分别如图4A和4B所示，其中的数据分别代表了 3次试验的结果(#P < 0. 01，***P < 0. 0001)。结果显示Api处理组小鼠血清中两种炎性细胞因子的水平均极显著低于对照 组，可有效抑制炎性细胞因子的表达。该结果表明Api对免疫介导的肝损伤的保护作用的机理之一是其导致了介导肝 损伤的炎性细胞因子，包括干扰素和肿瘤坏死因子a表达的显著下降，从而保护肝脏 免受损伤。实施例4.木樨草素(Lut)对CIH小鼠谷丙转氨酶(ALT)活件的降低作用(A)试验根据上文“试验方法”部分的记载进行木樨草素(Lut)治疗实验，所用Lut剂量分 别为:50mg/kg(低剂量Lut组)和100mg/kg(高剂量Lut组)。给予ConA 8小时后，处死 小鼠，取血清检测ALT的水平。(B)谷丙转氨酶酶活的测定采用实施例1⑶中所述的方法和试剂测定ALT活性。
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(C)试验结果及分析Lut治疗对ALT活性影响的结果分别如图5A和5B所示。数据以平均数士标准差 的形式表示，代表了 3次试验的结果(***P < 0. 001)。低浓度Lut组和高浓度Lut组结果均显示Lut可极显著地降低CIH小鼠血清中 谷丙转氨酶的活性。其中，高剂量Lut对ALT活性的降低效果更优于低剂量Lut。由此可知Lut可以有效地抑制诱导CIH的小鼠血清中ALT的水平。实施例5.经木樨草素(Lut)处理的CIH小鼠肝脏的H&E染饩和TUNEL染饩观察(A)试验根据上文“试验方法”部分的记载进行木樨草素(Lut)治疗实验，所用Lut剂量为 100mg/kg。给予ConA 8小时后，处死小鼠，取肝脏组织进行切片，进行组织病理学分析。(B) H&E 染色采用实施例2(B)中所述的方法和试剂对小鼠肝脏组织的切片进行H&E染色。(C) TUNEL 染色采用实施例2(C)中所述的方法和试剂对小鼠肝脏组织的切片进行TUNEL染色。(D)实验结果与讨论Lut治疗后的肝脏组织切片H&E染色或者TUNEL染色结果分别如图6A和6B所示。由图可明显观察到经过Lut处理后的小鼠诱导CIH后，小鼠肝脏部位的炎性浸润 和肝细胞坏死明显低于对照组小鼠。以上结果表明Lut可以有效地抑制诱导CIH后小鼠肝脏中的炎性浸润和肝细胞 坏死。实施例6木樨草素(Lut)对炎性细胞因子的影响(A)血清中肿瘤坏死因子_ a (TNF- a )的浓度检测根据上文“试验方法”部分的记载进行Lut (剂量为100mg/kg)治疗，在给予ConA 2小时后，处死小鼠，取血清，按(C)中所述的ELISA方法，采用厂商提供的ELISA试剂盒检 测血清中TNF-a的浓度。(B)血清中干扰素的浓度检测根据上文“试验方法”部分的记载进行Lut (剂量为100mg/kg)治疗，在给予ConA 8小时后，处死小鼠，取血清，按(C)中所述的ELISA方法，采用厂商提供的ELISA试剂盒检 测血清中干扰素(IFN-y)的浓度。(C) ELISA试剂及方法采用实施例3 (C)中所述的ELISA方法对小鼠肝脏组织的切片进行TUNEL染色。(D)实验结果与讨论小鼠血清中肿瘤坏死因子-a的浓度检测实验和干扰素的浓度检测实验结果 分别如图7A和7B所示，其中的数据分别代表了 3次试验的结果(*P < 0. 05，< 0. 01)。结果显示Lut处理组小鼠血清中两种炎性细胞因子的水平显著或极显著低于对 照组，可有效抑制炎性细胞因子的表达。该结果表明Lut对免疫介导的肝损伤的保护作用的机理之一是其导致了介导肝 损伤的炎性细胞因子，包括干扰素和肿瘤坏死因子a表达的显著下降，从而保护肝脏 免受损伤。
^WM 7. H^m (Bai)对CIH小鼠谷丙转(ALT)活件的降低,作用(A)试验根据上文“试验方法”部分的记载进行黄芩素(Bai)治疗实验，所用Bai剂量分别 为:25mg/kg(低剂量Bai组)和50mg/kg(高剂量Bai组)。给予ConA 8小时后，处死小 鼠，取血清检测ALT的水平。(B)谷丙转氨酶酶活的测定采用实施例1⑶中所述的方法和试剂测定ALT活性。(C)试验结果及分析Bai治疗对ALT活性影响的结果分别如图8A和8B所示。数据以平均数士标准差 的形式表示，代表了 3次试验的结果(***P < 0. 001)。低浓度Bai组和高浓度Bai组结果均显示Bai可极显著地降低CIH小鼠血清中 谷丙转氨酶的活性。由此可知Bai可以有效地抑制诱导CIH的小鼠血清中ALT的水平。实施例8.经黄芩素(Bai)处理的CIH小鼠肝脏的H&E染饩和TUNEL染饩观察(A)试验根据上文“试验方法”部分的记载进行黄芩素(Bai)治疗实验，所用Bai剂量为 50mg/kg。给予ConA 8小时后，处死小鼠，取肝脏组织进行切片，进行组织病理学分析。(B) H&E 染色采用实施例2(B)中所述的方法和试剂对小鼠肝脏组织的切片进行H&E染色。(C) TUNEL 染色采用实施例2(C)中所述的方法和试剂对小鼠肝脏组织的切片进行TUNEL染色。(D)实验结果与讨论Bai治疗后的肝脏组织切片H&E染色或者TUNEL染色结果分别如图9A和9B所示。由图可明显观察到经过Bai处理后的小鼠诱导CIH后，小鼠肝脏部位的炎性浸润 和肝细胞坏死要明显低于对照组。以上结果表明Bai可以有效地抑制诱导CIH后小鼠肝脏中的炎性浸润和肝细胞 坏死。实施例9黄芩素(Bai)对炎性细胞因子的影响(A)血清中肿瘤坏死因子_ a (TNF- a )的浓度检测根据上文“试验方法”部分的记载进行Bai (剂量为50mg/kg)治疗，在给予ConA 2 小时后，处死小鼠，取血清，按(C)中所述的ELISA方法，采用厂商提供的ELISA试剂盒检测 血清中TNF-a的浓度。(B)血清中干扰素的浓度检测根据上文“试验方法”部分的记载进行Bai (剂量为50mg/kg)治疗，在给予ConA 8 小时后，处死小鼠，取血清，按(C)中所述的ELISA方法，采用厂商提供的ELISA试剂盒检测 血清中干扰素(IFN-y)的浓度(C) ELISA试剂及方法采用实施例3 (C)中所述的ELISA方法对小鼠肝脏组织的切片进行TUNEL染色。(D)实验结果与讨论
小鼠血清中肿瘤坏死因子-a的浓度检测实验和干扰素的浓度检测实验 结果分别如图10A和10B所示，其中的数据分别代表了 3次试验的结果(*P < 0. 05，**P < 0. 01)。结果显示Bai处理组小鼠血清中两种炎性细胞因子的水平显著或极显著低于对 照组，可有效抑制炎性细胞因子的表达。该结果表明Bai对免疫介导的肝损伤的保护作用的机理之一是其导致了介导肝 损伤的炎性细胞因子，包括干扰素和肿瘤坏死因子a表达的显著下降，从而保护肝脏 免受损伤。在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独 引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可 以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
权利要求
一种具有结构式A的化合物、其药学上可接受的盐、或它们的组合在制备用于治疗或预防对象中与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病的药物中的用途式中R1、R2、R3和R4各自独立地为选自下组的基团 H、 C1 6烷基、 OH、 C1 6烷氧基、 SH、 NH2、氟、氯、溴或碘。F2009100536041C0000011.tif
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述Ri、R2、R3和R4各自独立地为-H或-0H。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物具有选自下组的结构式
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾 病包括肝损伤、肝内胆汁淤积、胆道梗阻、胰腺疾病、甲状腺功能亢进症、急性心肌梗塞、心 力衰竭或多发性肌炎。
5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肝损伤为免疫介导的肝损伤。
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述对象是哺乳动物。
7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物组合物中的具有结构式A的化合 物、其药学上可接受的盐、或它们的组合占药物组合物总重量的0. 001-99. 9wt%。
8.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物组合物的剂型包括片剂、粉末剂、 注射剂、颗粒剂、糖浆、胶囊、溶液剂、栓剂或药膏。
9.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物组合物还包含缓解或治疗肝脏损 伤的其它药物。
10.一种药物组合物，其含有(1)有效量的具有结构式A的化合物、其药学上可接受的盐、或它们的组合；(2)选自下组的一种或多种物质丹参酮IIA、甘草酸制剂、绿茶多酚、水飞蓟素、粉防 己碱或它们的组合；和(3)药学上可接受的载体。
全文摘要
本发明涉及一类具有保肝作用的中药活性单体成分，即具有结构式A的黄酮类活性物质在治疗肝脏炎症相关疾病中的新用途，该结构式中R1、R2、R3和R4各自独立地为选自下组的基团-H、-C1-6烷基、-OH、-C1-6烷氧基、-SH、-NH2、氟、氯、溴或碘。具体而言，本发明涉及具有结构式A的黄酮类化合物、其药学上可接受的盐、或它们的组合在制备用于治疗或预防对象的与血清谷丙转氨酶活性增加相关的疾病(尤其是肝损伤)的药物组合物中的用途。所述黄酮类化合物优选为芹黄素、木樨草素和黄芩素。
文档编号A61P1/18GK101926787SQ20091005360
公开日2010年12月29日 申请日期2009年6月23日 优先权日2009年6月23日
发明者徐凌云, 王莹, 罗清琼, 许艳 申请人:中国科学院上海生命科学研究院