专利名称：一种用于疫苗超滤的衡滤方法
技术领域：
本发明属于疫苗超滤技术，主要是一种用于疫苗超滤的衡滤方法。
背景技术：
在疫苗生产中常采用超滤法对蛋白质等样品进行浓縮、除盐。传统方法是先将样 品浓縮几十倍或上百倍后加入磷酸盐缓冲液(PBS)再浓縮，如此反复超滤浓縮。超滤装置 是在一个密闭的容器中进行，以压縮空气为动力，推动容器内的活塞前进，使样液形成内 压，容器底部设有坚固的膜板。小于膜板孔径直径的小分子，受压力的作用被挤出膜板外， 大分子被截留在膜板之上。超滤开始时，由于溶质分子均匀地分布在溶液中，超滤的速度比 较快。但是，随着小分子的不断排出，大分子被截留堆积在膜表面，浓度越来越高，自下而上 形成浓度梯度，超滤速度就会逐渐减慢，易形成浓度极化现象。该法的缺点是在浓縮过程中 蛋白浓度过高，易于发生聚合或变性，而且小分子杂蛋白不容易除去，即超滤效率低。为了 克服浓度极化现象，增加流速，我们设计了衡滤技术。
发明内容
本发明的目的在于克服浓度极化现象，增加流速，而提供一种用于疫苗超滤的衡 滤方法。 为解决上述技术问题，本发明是提出以下技术方案实现的这种用于疫苗超滤的 衡滤方法，步骤如下 (1)、先将超滤管道进样口与超滤器进样管道相连，超滤管道回流口与超滤器回流 管道相连，将废液管道直接与超滤器滤过液管道相连； (2)、在样品瓶处通过样品用管道与磷酸盐缓冲液相连，同时，样品瓶通过蠕动泵 与超滤器进样管道相连，保证各个接口处密封无气泡进入； (3)、样品瓶中一边加入磷酸盐缓冲液， 一边通过超滤器进行超滤；在整个超滤过 程中样品瓶内的体积始终保持不变，即进入样品瓶的液量与从超滤器中流出的液量保持平 衡。 作为优选，进行超滤时，进口压力不超过lbar，流速保持600-800ml/m2. Min。
本发明的优点在于操作温和、对蛋白损伤小、蛋白不易发生聚合和变性，能最大 限度除去小分子杂蛋白，且处理时间短、回收率高、脱盐更彻底。超滤后样品回收率较传统 方法明显提高，对样品不进行浓縮或少量浓縮，是一种非常高效的超滤方法。
图1为本发明的结构示意图；
具体实施例方式下面结合附图和实施例对发明作进一步说明
如图所示，这种用于疫苗超滤的衡滤方法，步骤如下 (1)、先将超滤管道进样口与超滤器进样管道相连，超滤管道回流口与超滤器回流 管道相连，将废液管道直接与超滤器滤过液管道相连； (2)、在样品瓶处通过样品用管道与磷酸盐缓冲液相连，同时，样品瓶通过蠕动泵 与超滤器进样管道相连，保证各个接口处密封无气泡进入； (3)、样品瓶中一边加入磷酸盐缓冲液(PBS)，一边通过超滤器进行超滤；在整个
超滤过程中样品瓶内的体积始终保持不变，即进入样品瓶的液量与从超滤器中流出的液量
保持平衡。进行超滤时，进口压力不超过lbar，流速保持600-800ml/m2. Min。 以上对本发明的描述不具有限制性，如果本领域的普通技术人员受其启示，在不
脱离本发明权利要求的保护的情况，作出本发明的其它结构变形和实施方式，均属于本发
明的保护范围。
权利要求
一种用于疫苗超滤的衡滤方法，其特征在于步骤如下(1)、先将超滤管道进样口与超滤器进样管道相连，超滤管道回流口与超滤器回流管道相连，将废液管道直接与超滤器滤过液管道相连；(2)、在样品瓶处通过样品用管道与磷酸盐缓冲液相连，同时，样品瓶通过蠕动泵与超滤器进样管道相连，保证各个接口处密封无气泡进入；(3)、样品瓶中一边加入磷酸盐缓冲液，一边通过超滤器进行超滤；在整个超滤过程中样品瓶内的体积始终保持不变，即进入样品瓶的液量与从超滤器中流出的液量保持平衡。
2. 根据权利要求l所述的用于疫苗超滤的衡滤方法，其特征在于进行超滤时，进口压力不超过lbar，流速保持600-800ml/m2. Min。
全文摘要
本发明涉及一种用于疫苗超滤的衡滤方法，步骤如下(1)先将超滤管道进样口与超滤器进样管道相连，超滤管道回流口与超滤器回流管道相连，将废液管道直接与超滤器滤过液管道相连；(2)在样品瓶处通过样品用管道与磷酸盐缓冲液相连，同时，样品瓶通过蠕动泵与超滤器进样管道相连，保证各个接口处密封无气泡进入；(3)样品瓶中一边加入磷酸盐缓冲液，一边通过超滤器进行超滤；在整个超滤过程中样品瓶内的体积始终保持不变。本发明的优点在于操作温和、对蛋白损伤小、蛋白不易发生聚合和变性，能最大限度除去小分子杂蛋白，且处理时间短、回收率高、脱盐更彻底，超滤后样品回收率较传统方法明显提高。
文档编号A61K39/00GK101732701SQ20091015452
公开日2010年6月16日 申请日期2009年11月10日 优先权日2009年11月10日
发明者姚伟, 蒋正东 申请人:浙江天元生物药业股份有限公司