专利名称：一种治疗骨性关节炎的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗骨关节炎的药物组合物，具体涉及一种由治疗有效量的原
料药硫酸软骨素和青藤碱或其可药用盐制成的药物组合物，属于药物制剂领域。
背景技术：
骨性关节炎(osteoarthritis, OA)是以关节软骨退变和关节周围形成骨质增生为病 理特征，主要表现在软骨胶原纤维断裂、关节基质崩解、软骨细胞明显减少等关节软骨 蚀损改变，是影响人类健康最常见的关节疾患之一。骨关节炎患者常见于中老年人的慢 性退行性骨关节病，随桌我国人口的老龄化，OA的患病率也程逐年上升的趋势。
青藤碱是从植物青风藤sinomenium acutum Rehd.Et Wils中提取的单体生物碱， 临床多用其盐酸盐，具有明显抗炎、抗免疫、镇痛、镇静、降血压、促组胺释放、抗心 心律失常等药理作用。青藤碱多用于各种类型的风湿疾病的治疗，如对风湿性关节炎的 治疗具有较好的疗效。国内已有正清风痛宁片、盐酸青藤碱片、盐酸青藤碱注射液、青 藤碱缓释制剂等用于临床，这些制剂治疗类风湿性关节炎等各种风湿病及心律失常取得 了明显疗效。李国栋等(李国栋，李家邦，等.青藤碱治疗类风湿关节炎100例临床研 究.中国中医急症[J].2007， 16(4): 416-421)在用青藤碱治疗类风湿性关节炎患者时，其 总有效率可以达到93%，疗效非常显著。然后，青藤碱很少用于治疗骨性关节炎患者， 在这用于治疗骨性关节炎的相关药理药效研究也很少。杨惠琴等(杨惠琴、陈礼荣.青 藤碱对膝骨骨性关节炎兔关节液及血清白细胞介素IP含量的影响.中西医结合学报 [J].200S， 6(12): 1275-1279)在用青藤碱治疗兔膝骨性关节炎时发现，青藤碱可以减少兔 关节液及血清中的白细胞介素1P的含量，从而缓解关节病变的发生，但在对其软骨损 伤情况是发现，经注射青藤碱治疗5周后，其关节软骨仍呈现中度糜烂，软骨苍白且较 软，对骨性关节炎兔的软骨损伤修复不太理想。 硫酸软骨素(chondroitin sulfate CS)是一类硫酸化的糖胺聚糖，其分子结构主要 由D-葡萄糖醛酸与2-乙酰氨基-2-脱氧-硫酸-D-半乳糖组成。根据硫酸基在N-乙酰 基-D-氨基半乳糖上的位置可分为硫酸软骨素A、硫酸软骨素C等，商品CS是从猪、牛 和鸡等软骨提取的，相对分子质量在10X103 50X1()3之间。在欧美日等国，CS主要作 为保健食品或药品，用于防治冠心病、心绞痛、心肌梗死、关节炎等疾病。硫酸软骨素 作为软骨基质成分之一，认为给予外源性软骨成分硫酸软骨素，不但可以直接补充软骨 基质成分，减轻软骨降解，并可通过反馈机制促进软骨细胞代谢活性，恢复软骨细胞基 质分泌功能，还能够抑制关节内多种胶原酶活性，对软骨其保护作用，在狗创伤性关节 炎研究中发现，关节内注射硫酸软骨素可抑制软骨降解，明显降低软骨中胶原酶活性， 促进软骨基质的修复，效果慢，但复发率较低，对软骨损伤的修复较好。
在研究中，我们发现，将青藤碱与硫酸软骨素组合制成复方制剂，将其用于骨 关节炎的治疗，对骨关节炎软骨损伤的修复效果要强于任何单一成分，可起到协同增强 对骨关节炎的治疗作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种由硫酸软骨素和青藤碱或其可药用盐组成的复方制 剂，本发明研究人员经动物药理研究发现，青藤碱与硫酸软骨素合用，对骨性关节炎的 治疗可起到更好的效果，甚至可逆转受损软骨。 本发明复方制剂主要由原料药硫酸软骨素及青藤碱或其可药用盐制成，二者重
量配比为硫酸软骨素青藤碱或其可药用盐为8 : i-i : i。 本发明中，原料药硫酸软骨素与青藤碱或其可药用盐的重量比优选为
4:i-i: i。 本发明中，所用的原料药青藤碱的可药用盐可以是其药学上可接受的有机或无
机酸盐，比如盐酸盐、硫酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐等，优选为盐酸盐，具体 为盐酸青藤碱。 本发明中，除含有原料药硫酸软骨素和青藤碱或其可药用盐外，还可以含有其
它一些各种剂型适合的制药辅料，比如可以含有填充剂、稀释剂、崩解剂、黏合剂、抗 氧剂、缓释基质等的一种或多种，根据制成制剂目的的不同配以布不同辅料组合，以制 成合格的剂型。 本发明合适组合物合适的制剂单元形式，可以是口服固体制剂或注射用给药制
剂。口服固体制剂可以是片剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂中的任意一种。注射用给药制 剂可以小水针剂、粉针剂、输液中的任意一种。 本发明的制剂单元形式，优选为注射制剂，更优选为注射用小水针或粉针剂。
具体实施例 制备实施例 实施例1 硫酸软骨素青藤碱片 处方(IOOO片处方量) 硫酸软骨素400g，青藤碱50g，乳糖140g，聚维酮10g，硬脂酸镁2g， 50%的乙 醇，适量。 将硫酸软骨素、青藤碱、乳糖分别粉碎成细粉，混合均匀，聚维酮溶解于乙醇 中，作为粘合剂，喷洒到已混好的细粉中，制软材、制粒，6(TC干燥，整粒，加入硬脂 酸镁，压制成1000片，即得。
实施例2 硫酸软骨素青藤碱胶囊(1000个胶囊处方) 硫酸软骨素300g，青藤碱50g，淀粉50g，聚维酮10g， 50%乙醇适量 分别将硫酸软骨素、青藤碱、淀粉粉碎过筛，混合均匀，以聚维酮的乙醇液为
粘合剂制软材，制粒，6(TC干燥，整粒，将干燥整好的颗粒装入1000个胶囊囊壳中，即得。 实施例3 硫酸软骨素青藤碱胶囊包衣片(1000片处方)
硫酸软骨素350g，青藤碱50g，微晶纤维素50g，聚维酮10g，硬脂酸镁5g，糖 衣粉40g， 50%的乙醇，适量。 将硫酸软骨素、青藤碱、微晶纤维素分别粉碎成细粉，混合均匀，聚维酮溶解 于乙醇中，作为粘合剂，喷洒到已混好的细粉中，制软材、制粒，6(TC干燥，整粒，加 入硬脂酸镁，压制成1000片，备用；糖衣粉分散于50%的乙醇中，将压制好的片置包衣
锅中，将糖衣粉缓慢喷洒于片剂表面进行包衣，即得糖衣片。
实施例4 硫酸软骨素青藤碱崩解片(1000片处方) 硫酸软骨素350g，青藤碱50g，微晶纤维素50g，交联聚乙烯吡咯烷酮100g，聚 维酮10g，微粉硅胶5g， 50%的乙醇，适量。 将硫酸软骨素、青藤碱、微晶纤维素分别粉碎成细粉，混合均匀，聚维酮溶解 于乙醇中，作为粘合剂，喷洒到已混好的细粉中，制软材、制粒，6(TC干燥，整粒，将 整好的干颗粒与交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀，再加入微粉硅胶，混匀，压制成IOOO 片，即得崩解片。
实施例5 硫酸软骨素盐酸青藤碱小水针剂(1000个小水针处方)
硫酸软骨素20g，盐酸青藤碱10g，注射用水，适量 将硫酸软骨素、盐酸青藤碱溶于适量注射用水中，超声、搅拌使其完全溶解， 加入5g注射用活性炭，6(TC水浴中保持30min， 0.22um的微孔滤膜过滤，再用截留分子 量为8万的超滤膜超滤，补足注射用水至2000ml，分装于5ml的安瓿中，每支装2ml，封
口，灭菌即得小水针剂。
实施例6 硫酸软骨素盐酸青藤碱小水针剂(1000个小水针处方)
硫酸软骨素20g，盐酸青藤碱20g，注射用水适量
制备工艺同实施例5。
实施例7 硫酸软骨素盐酸青藤碱粉针剂1000个小水针处方) 硫酸软骨素20g，盐酸青藤碱5，甘露醇75g，注射用水适量将硫酸软骨素、盐 酸青藤碱、甘露醇溶解于适量的注射用水中，超声、搅拌使其完全溶解，加入5g注射用 活性炭，6(TC水浴中保持30min，趁热于0.22um的微孔滤膜过滤，再用截留分子量为8万 的超滤膜超滤，补足注射用水至2000ml，分装于10ml西林瓶中，每支装2ml，冷冻干燥 中冻干，即得粉针。 为更进一步说明本发明的有益效果，以下从药理药效具体实施方式
来说明本发 明。 本发明组合物注射制剂(实施例5)对兔骨关节炎的治疗作用 动物健康成年新西兰兔(购于沈阳医学试验动物中心)雌雄不限，体重 2.5-3.0kg，共45只，随机编号为1-45。
关节腔内注射药物 硫酸软骨素注射液(吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司)，2.2mg/kg/次，每只注射给药0.3ml 盐酸青藤碱注射液(湖南正清制药集团股份有限公司)，2.8mg/kg/次，每只注射 给药0.3ml(硫酸软骨素+盐酸青藤碱)注射液，分为三个剂量组分别为低(1.0+0.5)mg/kg、 中(2.0+1.0)mg/kg、高(4.0+2.0)mg/kg剂量组，每只注射给药0.3ml。 建立兔关节炎模型全部动物均在动物实验室的无菌条件下手术，每只兔两侧 关节施行手术，术前常规去毛、备皮、消毒及铺巾，以20mg/kg耳静脉注射3X戊巴比妥 钠麻醉动物，在髌腱内侧作一长约2cm的直切口，依次切开皮肤、皮下组织、筋膜等， 纵行切开关节囊，在直视下切断内侧副韧带，前、后交叉韧带，由此引起的膝关节不稳 定在手术台上以侧方应力试验和抽屉试验证实，同时切除内侧半月板，关节腔一庆大霉 素生理盐水冲洗干净后，逐层缝合关节囊和伤口。术后不固定伤肢，分笼喂养，强迫其 运动(每天驱赶其至少运动30min)，并按每天15mg/kg的剂量肌注庆大霉素，连续肌注4 天。 术后4周开始关节腔内分别注射药物硫酸软骨素、盐酸青藤碱、(硫酸软骨素+ 盐酸青藤碱)0.3ml，空白组注射生理盐水0.3ml，每隔3天注射一次。1-15号兔的右膝关 节注射硫酸软骨素(B组)、左膝关节注射(硫酸软骨素+盐酸青藤碱)中剂量组(E组)； 6-30号兔右膝关节注射盐酸青藤碱(C组)，左膝关节注射(硫酸软骨素+盐酸青藤碱)高 剂量组(F组)；31-45号兔右膝关节注射生理盐水(A组)，左膝关节注射(硫酸软骨素+ 盐酸青藤碱)小剂量组(D组)。 取材与标本制备标本取材均为双膝，每组动物给药4周后麻醉，从髌上囊部 位注射入关节腔lml无菌PBS，反复活动关节后，仔细抽取灌洗液，做好标记后立即置 于-7(TC冰箱中保存备用，然后空气栓塞处死动物，切开关节腔，将游离的关节和关节囊 固定于中性多聚甲醛固定液中。 观察指标标本于10%多聚甲醛中固定3天后，流水冲洗12小时，内、外股 骨髁软骨面用蒸馏水洗净后，用滤纸轻轻檫干，用毛笔将墨汁刷于软骨表面，半分钟后 用蒸馏水将墨汁冲去，将上述过程再重复一遍，参照Freemont分度法将骨关节炎分为三 级I度，关节软骨表面变得不规则，浅层软骨细胞周围出现嗜染程度的下降，基质染色 不均；II度，关节软骨出现纤维化，部分区域出现垂直于软骨表面的裂隙，软骨细胞出 现排列不均、聚集的现象III度，关节软骨破裂，基质染色不均，软骨细胞数量减少。
— 软骨损伤的治疗作用 具体结果见表l。表1显示，治疗4周后，阴性对照组I级O只，1I只3只， m级12只，软骨损伤严重，给予不同治疗药物后(硫酸软骨素、盐酸青藤碱及二者合 用)对兔骨性关节炎均能起到一定的治疗作用，与阴性对照组相比治疗具有显著性差异(P <0.01)。然而，将硫酸软骨素与盐酸青藤碱组合用于治疗骨性关节炎，发现其合用较单 用硫酸软骨素或盐酸青藤碱对软骨损伤的治疗效果更佳，对骨关节炎软骨的改善作用明 显好于单用硫酸软骨素或盐酸青藤碱，差异具有显著性(P〈0.05)。合用中剂量组与高剂 量组效果相当，改善无显著性差异。
表1对软骨损伤情况的治疗作用
6<formula>formula see original document page 7</formula> 二对关节囊中关节液IL-113含量的影响 关节囊洗液炎性因子检查采用双抗夹心ABC-ELISA(酶联免疫吸附， enzymelinked immunosorbent assay)方法，每份关节囊洗液，分别取10ul进行IL-1 P蛋白 表达分析，应用美国Biosource公司提供的ELISA试剂盒，用抗免IL-1 P单抗包被与酶标 板上，标准品中的兔IL-113与单抗结合，加入生物素化的抗免IL-ie，形成免疫复合物 连接在板上，辣根过氧化物酶标记streptavidin与生物素结合，加入酶底物OPD，出现黄 色，加终止浓硫酸，颜色变深，在492nm处测OD值，兔IL-1 P含量与OD值成正比， 通过绘制标准曲线求出标本兔IL-113浓度。关节液中IL-113含量测定结果见表2。
表2对OA兔关节囊中IL-113含量的影响
与对照组相比，*P<0.05， **P < 0.01 ;与硫酸软骨素或盐酸青藤碱相比，#P < 0.05 从上表结果可以看出，各治疗组对OA兔关节IL-113的含量都有一定的降低作 用，青藤碱对OA兔关节IL-113的降低作用强于硫酸软骨素。本发明组合物对OA兔关 节IL-113的降低作用随剂量的增加而增强，呈剂量依赖关系，其中小剂量组的效果与元 素按青藤碱相当，中剂量组、高剂量组对OA兔关节液IL-113的降低作用与盐酸青藤碱、 硫酸软骨素组相比，降低效果更为明显，差异具有显著性。
-':.i::.二 d
瑜酸软,累 2.21
本Sl明低列S组 1+0.5
0.3ml 15 0 3 12
2.2 15 4 9 2
2.8 15 3 7 5
H0.5 15 8 6 1
2+1 15 10 5 0
4+2 15 11 4 0
A B c D E F
权利要求
一种治疗骨关节炎的药物组合物，其特征是主要由治疗有效量的原料药硫酸软骨素和青藤碱或其可药用盐制成。
2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是按重量比计，硫酸软骨素与青藤碱或其可药用盐的比例为8 : i i : i。
3. 根据权利要求2所述的药物组合物，其特征是按重量比计，硫酸软骨素与青藤碱或其可药用盐的比例为4 : i i : i。
4. 根据权利要求i至3中任意一权利要求所述的药物组合物，其特征是所述的青藤碱 的可药用盐为其盐酸盐。
5. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是所述的组合物的药物制剂形式为口服固体制剂或注射制剂。
6. 根据权利要求5所述的药物组合物，其特征是组合物的制剂形式为注射制剂。
7. 根据权利要求7所述的药物组合物，其特征是所述的注射制剂为注射液或粉针。
8. 权利要求1至3中任意一权利要求所述药物组合物在制备具有治疗骨关节炎药物中 的用途。
全文摘要
本发明公开了一种治疗骨性关节炎的组合物，具体由治疗有效量的原料药硫酸软骨素和青藤碱或其可药用盐组成，本发明药物组合物可用于治疗关节炎疾病，尤其是对骨性关节炎的治疗效果更佳，甚至可逆转受损的软骨。
文档编号A61K31/737GK101690728SQ20091018755
公开日2010年4月7日 申请日期2009年9月23日 优先权日2009年9月23日
发明者关屹, 闫冬 申请人:沈阳亿灵医药科技有限公司;关屹