专利名称：一种富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法
技术领域：
本发明属于天然有机化学领域，涉及一种强心甙的纯化方法，特别是涉及一种利
用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法。
背景技术：
桂竹糖芥异名打水水花、金盏盏花(《内蒙古中草药》)，希和日_赫其(蒙 名)。年或二年生草本，高30 150厘米，全株有二或三叉状毛。茎直立，上部有分枝。单 叶互生；线形或披针形，先端稍尖，边缘波状或有浅而长的缺刻，基部渐狭；近无柄。总状花 序顶生成腋生；花小；花瓣4，黄色，匙形，十字形排列；雄蕊6， 4长2短。长角果柱形，长约 1 2厘米，有棱，成熟时开裂，果柄短，假隔膜薄纸状，每室有种子一列。种子细小，扁卵圆 形，黄褐色。花期4 6月。果期5 7月。野生于草原、田边，山坡及路旁。除华南外，分 布几遍全国。全草含葡萄糖糖芥甙、黄麻属甙A、木糖糖芥甙、木糖糖芥醇甙、糖芥卡诺醇甙 等强心甙。 强心甙是一种对人类健康有显著保健作用的天然活性物质，已引起国际社会的普 遍关注。经科学研究及临床应用证明，强心甙具有保护及增强心脏机能；中枢性降压作用。 人体测试结果显示，强心甙主治功能强心利尿，健脾和胃，消食；治心悸，浮肿，消化不良。 近年来，人们发现天然植物桂竹糖芥中含有大量的强心甙，从中提取强心甙并且取得了可 喜进展，由于其原料桂竹糖芥为中药，原料来源较广。名称为"超声辅助萃取桂竹糖芥的 方法"的专利中请中便公开了将桂竹糖芥经超声辐射方法优化提取强心甙工艺流程。上述 专利文献中的强心甙提取工艺主要是经过用超声波辅助萃取，75%乙醇提取等步骤提取而 成，其分离效果远远不如大孔吸附树脂处理后在进行硅胶柱层析分离的效果。
发明内容
本发明的目的在于克服常规技术提取率相对较低、提取纯度低等缺点，提供一种
利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法。 为实现上述目的，本发明采用的技术方案是 —种利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其步骤如下
(1)将干桂竹糖芥粉碎后用有机剂提取； (2)将经步骤(1)处理的五味子提取液抽滤，得提取液并减压回收溶剂的初提物；(3)将所获初提物用水加热溶解，加入乙酸乙醇萃取，用碱调其ra值为7.0
11. 00，静置、抽滤、减压浓縮得强心甙粗提物； (4)将所得强心甙粗提物用大孔吸附树脂进行吸附； (5)用不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集强 心甙各阶段洗脱液； (6)将强心甙各阶段洗脱液浓縮回收乙醇，得强心甙半成品，其含量为35%以上；
(7)将所得强心甙半成品上硅胶层析柱，并以乙酸乙酯、氯仿以不同体积比例进行
3洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集强心甙各阶段洗脱液； (8)将所收集的强心甙洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得强心甙，其含 量在98%以上。 所述的步骤(1)中，桂竹糖芥粉碎后过10 80目筛在进行有机溶剂提取。
在所述的步骤(1)中，有机溶剂为丙酮、乙酸乙酯、10 100%乙醇中的一种或一 种以上，提取时间为4 48小时。 所述的步骤(1)中，有机溶剂提取的方法为浸泡法、回流提取法、渗漉法、煎煮法、 连续提取法中的一种或一种以上。 所述的步骤(1)中，加入有机溶剂的体积为桂竹糖芥粉碎体积的5 20倍。
在所述的步骤(3)中，加入乙酸乙酯的量按体积计算为提取物水溶液的5 20
倍，调节ra值所用的碱为氢氧化纳或氨水。 所述的步骤(4)中所用的大孔吸附树脂为天津南开大学所产生的X-5、 NKA-9、 S-8、 D3520、 D4006、 H103、 D4020、 AB-8H和NKA-II型树脂中的一种，吸附为静态吸附或动态 吸附。 所述的步骤(5)中所述的洗脱为用10 90%的乙醇进行洗脱。 在所述的步骤(5)和(7)中，所采取的检测方法均为薄层色谱法跟踪检测。 所述的步骤(7)中所采取的乙酸乙酯与氯仿的体积为1 7 : 1。 本发明应用大孔吸附技术分离纯化强心甙，对强心甙的吸附选择性良好，吸附快
解析也快，吸附容量较大；提取方便快捷，原料来源丰富，生产成本低廉，分离效果明显，提
取纯度高，可以得到含量35%以上的强心甙半成品和含量98%以上的强心甙终产品，克服
了常规提取率相对较低、提取纯度低的缺点。 本发明选用理化性质稳定、表面积较大、交换速度较快、机械强度高、抗污染能力 强、热稳定性好的大孔吸附树脂，不容于酸、碱及有机媒，对有机物选择性较好，不受无机盐 类及强离子低分子化合物存在的影响，可以通过物理吸附从溶液中有选择地吸附强心甙， 吸附快、解析也快，吸附容量较大。
具体实施例方式
实施例1 :一种利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其步骤如 下 (1)将干桂竹糖芥粉碎后过60目筛，用桂竹糖芥粉体积IO倍的乙酸乙酯浸渍提取 48小时; (2)将经步骤(1)处理的桂竹糖芥提取液抽滤，得提取液并减压回收溶剂的初提 物； (3)将所获初提物用水加热溶解，加入体积为提取物水溶液体积20倍的乙酸乙醇 进行萃取，然后用碱调其PH值为9. 0，静置、抽滤、减压回收溶剂得强心甙粗提物；
(4)将所得强心甙提物用大孔吸附树脂层析柱上进行吸附，所用的大孔树脂为天 津南开大学所生产的NKA-II型树脂； (5)用10%、20| %、30%、40%、50% | 、60%、70%、80% | 、90%的乙醇在大孔吸附 树脂层柱中依次进行梯度洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集强心甙各阶段洗脱液；
(6)将强心甙各阶段洗脱液浓縮回收乙醇，得到含量为35%以上五味子醇甲半成
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(7)将所得强心甙半成品上硅胶层析柱，并用乙酸乙酯、氯仿依次以1 : 1、2 : i、
3 : i、4 : i、5 : i、6 : i、7 : i的体积比进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集强心
甙各阶段洗脱液； (8)将所收集的强心甙洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得到含量98% 以上五味子醇甲。 实施案例2 :—种利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其步骤 如下 (1)将干桂竹糖芥粉碎后过10目筛，用桂竹糖芥粉体积20倍的丙酮浸渍提取12 小时，然后回流提取4小时； (2)将经步骤(1)处理的桂竹糖芥提取液抽滤，得提取液并减压回收溶剂的初提 物； (3)将所获初提物用水加热溶解，加入体积为提取物水溶液体积10倍的乙酸乙醇 进行萃取，然后用氨水调其K1值为7.0，静置、抽滤、减压浓縮得强心甙粗提物；
(4)将所得强心甙粗提物用大孔吸附树脂进行吸附，所用的大孔树脂为天津南开 大学所生产的D4006型树脂； (5)用10%、30%、50% | 、70% 、90%的乙醇在大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色 谱法跟踪检测，收集强心甙各阶段洗脱液； (6)将强心甙各阶段洗脱液浓縮回收乙醇，得到含量35%以上强心甙半成品；
(7)将所得强心甙半成品上硅胶层析柱，并用乙酸乙酯、氯仿依次以1 : 1、2 : 1、
3 : 1、4 : 1、5 : 1、6 : i、7 : i的体积比进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集强心
甙各阶段洗脱液； (8)将所收集的强心甙洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得到含量98% 以上五味子醇甲。 实施案例3 :—种利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其步骤 如下 (1)将干桂竹糖芥粉碎后过80目筛，用桂竹糖芥粉体积15倍的75%乙醇回提取 6小时； (2)将经步骤(1)处理的桂竹糖芥提取液抽滤，得提取液并减压回收溶剂的初提 物； (3)将所获初提物用水加热溶解，加入体积为提取物水溶液体积10倍的乙酸乙醇 进行萃取，然后用氢氧化钠水溶液调其ra值为11. 0，静置、抽滤、减压浓縮得强心甙粗提 物； (4)将所得五强心甙粗提物用大孔吸附树脂层析柱子、上进行吸附，所用的大孔树 脂为天津南开大学所生产的NKA-9型树脂； (5)用20% 、40% 、60% | 、80 %的乙醇在大孔吸附树脂层析柱子中依次进行梯度 洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集强心甙各阶段洗脱液； (6)强心甙各阶段洗脱液浓縮回收乙醇，得到含量35%以上强心甙半成品；
(7)将所得强心甙半成品上硅胶层析柱，并用乙酸乙酯、氯仿依次以i : i、2 : i、 3 : i、4 : i、5 : i、6 : i、7 : i的体积比进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集强心
甙各阶段洗脱液； (8)将所收集的强心甙洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得到含量98% 以上强心甙。
权利要求
一种利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其特征在于，其步骤如下(1)将干桂竹糖芥粉碎后用纯化水加热提取；(2)将经比周(1)处理的强心甙提取液过滤，得初提物；(3)将所收获初提物用水加热溶解，加入乙醇萃取，用碱调其PH值为7.0～11.0，静置、抽滤、减压浓缩得强心甙粗提物；(4)将所得强心甙粗提物用大孔吸附树脂进行吸附；(5)用不同浓度乙醇水溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，收集强心甙各阶段洗脱液；(6)将强心甙洗脱液浓缩回收洗脱剂，得强心甙半成品；(7)将所得强心甙半成品上硅胶层析柱，并以乙酸乙酯、氯防以不同体积比进行洗脱，收集强心甙各阶段洗脱液；(8)将所收集到得强心甙洗脱液进行精制的强心甙。
2. 根据权利要求1或2所述的利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法其 特质是所述的步骤(1)中，桂竹糖芥粉后过10 80目师再进行有机溶剂提取。
3. 根据权利要求1或2所述的利用大孔吸附树脂富集纯桂竹糖芥中强心甙的方法，其 特征是在所属的步骤(1)中，有机溶剂为丙酮，乙酸乙酯，10 100%乙醇中的一种或一种 以上，提取时间为4 48小时。
4. 根据权利要求3所述的利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其特 征是所述的步骤(1)中，有机溶剂提取的方法为浸渍法、回流提取法，渗漉法、煎煮法、连 续提取法中的一种或一种以上。
5. 根据权利要求3所述的利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其特 征是；所属的步骤(1)中，加入有机溶剂的体积为桂竹糖芥粉体积的5 20倍。
6. 根据权利要求5所述的利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其特 征是在所述的步骤(3)中，加入乙酸乙酯的量按体积计为提取物水溶液的5 20倍，调节 PH值所用的碱为氢氧化钠和氨水。
7. 根据权利要求6所述的利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其特 征是步骤(4)中所述吸附为静态吸附或动态吸附步骤(5)中所述的洗脱为用10 90% 的乙醇水溶液进行洗脱。
8. 根据权利要求7所述的利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其特 征是在步骤(5)和(7)中，洗脱过程中采用薄层色谱法跟踪检测。
9. 根据权利要求8所述的利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其特 征是步骤(7)中所采用乙酸乙酯与氯仿得体积比为1 7 : 1。
10. 根据权利要求7所述的利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法，其 特征是在步骤(8)中，采用活性炭脱色、重结晶方法进行精制。
全文摘要
本发明属于天然有机化学领域，涉及一种利用大孔吸附树脂富集纯化桂竹糖芥中强心甙的方法。其特点是应用大孔吸附技术分离纯化强心甙，对强心甙的吸附选择性良好，吸附快解析也快，吸附容量较大；提取方便快捷，原料来源丰富，生产成本低廉，分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量35％以上的强心甙半成品和含量98％以上的强心甙终产品，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低的缺点。本发明选用理化性质稳定、表面积较大、交换速度较快、机械强度高、抗污染能力强、热稳定性好的大孔吸附树脂，可以通过物理吸附从溶液中有选择地吸附强心甙，吸附快、解析也快，吸附容量较大。
文档编号A61P7/10GK101732391SQ20091021688
公开日2010年6月16日 申请日期2009年12月28日 优先权日2009年12月28日
发明者姚德利, 姚德坤, 姚航, 闫峰 申请人:大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司