专利名称：炎症的治疗方法
炎症的治疗方法交叉参考本申请案主张2008年3月20日申请的美国临时申请案第61/038，381号；2008年 3月25日申请的美国临时申请案第61/039，371号；2008年4月17日申请的美国临时申请 案第61/045，807号；和2008年12月9日申请的美国临时申请案第61/121，095号的权益， 所述申请案都以全文引用的方式并入本文中。
背景技术：
某些发炎性病状部分以淋巴细胞迁移到受影响组织中为特征。淋巴细胞的迁移会 诱发组织损伤，并使发炎性病状恶化。许多白细胞会跟随MIF梯度到达受影响组织。一般 说来，MIF与白细胞上的CXCR2和CXCR4受体相互作用，由此触发并维持白细胞迁移。
发明内容
在某些实施例中，本文公开一种利用治疗有效量的活性剂治疗有需要的个体的 MIF介导的病症的方法，所述活性剂可抑制(i)MIF与CXCR2和/或CXCR4的结合；(ii)MIF 对CXCR2和/或CXCR4的活化；(iii)MIF形成同源多聚体的能力；(iv)MIF与CD74的结合； 或其组合。在一些实施例中，所述活性剂特异性结合于MIF中假ELR基元的全部或一部分， 或与MIF的假ELR基元竞争。在一些实施例中，所述活性剂特异性结合于MIF中N环基元 的全部或一部分，或与MIF的N环基元竞争。在一些实施例中，所述活性剂特异性结合于 MIF中假ELR基元和N环基元的全部或一部分。在一些实施例中，所述活性剂选自CXCR2拮 抗剂、CXCR4拮抗剂、MIF拮抗剂或其组合。在一些实施例中，所述活性剂选自CXCL8(3-74) K11R/G31P ；Sch527123 ；N-(3-(氨磺酰基)-4-氯-2-羟苯基)-N ‘ -(2，3-二氯苯基) 脲；IL-8(l-72) ； (R) IL-8 ； (R) IL—8，NMeLeu ； (AAR) IL-8 ；GRO α (1-73) ； (R) GRO α ； (ELR) PF4 ； (R)PF4 ；SB-265610 ；安瘤克(Antileukinate) ；SB-517785-M ；SB 265610 ；SB225002 ； SB455821 ；DF2162 ；热帕瑞欣(Reparixin) ；ALX40-4C ；AMD-070 ；AMD3100 ；AMD3465 ； KRH-1636 ；KRH-2731 ；KRH-3955 ；KRH-3140 ；Τ134 ；Τ22 ；Τ140 ；TC14012 ；ΤΝ14003 ；RCP168 ； P0L3026 ；CTCE-0214 ；C0R100140 ；或其组合。在一些实施例中，活性剂是特异性结合于MIF 中假ELR基元的全部或一部分的肽；特异性结合于MIF中N环基元的全部或一部分的肽；特 异性结合于假ELR基元和N环基元的全部或一部分的肽；抑制MIF与CXCR2结合的肽；抑制 MIF与CXCR4结合的肽；抑制MIF与JAB-I结合的肽；抑制MIF与⑶74结合的肽；特异性结 合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ 以及 MIF 单体或 MIF 三聚体中至少一 者的相应特征/结构域；模拟以下肽序列PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及 MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域的肽；特异性结合于以下肽序列的 全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特 征/结构域；模拟以下肽序列DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF单体或MIF三聚体中至少一 者的相应特征/结构域的肽；特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 单体或 MIF 三聚体中至少一者的 相应特征/结构域；模拟以下肽序列PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 单体或 MIF 三聚体中至少一者的相应特征/结构域的肽；特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的 肽FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；模拟 以下肽序列FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构 域的肽；或其组合。在一些实施例中，在投予本文公开的活性剂后，巨噬细胞成为泡沫细胞 的转化受到抑制。在一些实施例中，在投予本文公开的活性剂后，心肌细胞的凋亡受到抑 制。在一些实施例中，在投予本文公开的活性剂后，浸润巨噬细胞的凋亡受到抑制。在一些 实施例中，在投予本文公开的活性剂后，腹部主动脉瘤的形成受到抑制。在一些实施例中， 在投予本文公开的活性剂后，腹部主动脉瘤的直径减小。在一些实施例中，在投予本文公 开的活性剂后，动脉瘤中的结构蛋白得以再生。在一些实施例中，所述方法进一步包含共投 予第二活性剂。在一些实施例中，所述方法进一步包含共投予烟酸、贝特(fibrate)、他汀 (statin) ,Apo-Al 模拟肽(例如 DF-4，诺华公司(Novartis))、apoA_I 转录上调剂(apoA-I transcriptional up-regulator)、ACAT 抑制剂、CETP 调节剂、糖蛋白(GP) Ilb/IIIa 受体拮 抗剂、P2Y12受体拮抗剂、Lp-PLA2抑制剂、抗TNF剂、IL-I受体拮抗剂、IL-2受体拮抗剂、 细胞毒性剂、免疫调节剂、抗生素、T细胞共刺激阻断剂、改良病症的抗风湿剂(disorder-m odifyinganti-rheumatic agent)、B细胞消耗剂(B cell depleting agent)、免疫抑制剂、 抗淋巴细胞抗体、烷化剂、抗代谢物、植物碱、类萜、拓扑异构酶抑制剂、抗肿瘤抗生素、单克 隆抗体、激素疗法或其组合。在一些实施例中，MIF介导的病症是动脉粥样硬化；腹部主动脉瘤；急性播散性脑 脊髓炎；烟雾病(Moyamoya disease)；高安氏病(Takayasu disease)；急性冠状动脉综合 症；心脏同种异体移植物血管病变；肺炎；急性呼吸窘迫综合症；肺纤维化；急性播散性脑 脊髓炎；爱迪森氏病(Addison' s disease)；强直性脊柱炎；抗磷脂抗体综合症；自体免疫 性溶血性贫血；自体免疫性肝炎；自体免疫性内耳病；大疱性类天疱疮；查格斯病(Chagas disease)；慢性阻塞性肺病；腹腔疾病；皮肌炎；1型糖尿病；2型糖尿病；子宫内膜异位症； 古巴士德氏综合症(Goodpasture‘ s syndrome)；格雷夫斯氏病(Graves' disease)；格 林一巴禾U综合症(Gui 1 Iain-Barresyndrome)；桥本氏病(Hashimoto ‘ s disease)；特发 性血小板减少性紫癜；间质性膀胱炎；全身性红斑狼疮(SLE)；代谢综合症；多发性硬化 症；重症肌无力；心肌炎；发作性睡病；肥胖症；寻常性天疱疮；恶性贫血；多发性肌炎；原 发性胆汁性肝硬化；类风湿性关节炎；精神分裂症；硬皮病；修格连氏综合症(Sjogren' s syndrome)；血管炎；白癜风；韦格纳肉芽肿(Wegener' s granulomatosis)；过敏性鼻 炎；前列腺癌；非小细胞肺癌；卵巢癌；乳癌；黑色素瘤；胃癌；结肠直肠癌；脑癌；转移性骨 病；胰腺癌；淋巴瘤；鼻息肉；胃肠癌；溃疡性结肠炎；克隆恩氏病(Crohn' sdisorder)； 胶原性结肠炎；淋巴细胞性结肠炎；缺血性结肠炎；改道性结肠炎；贝塞特氏综合症 (Behcet' s syndrome)；感染性结肠炎；未定型结肠炎；发炎性肝病；内毒素休克；脓毒症 休克；类风湿性脊柱炎；强直性脊柱炎；痛风性关节炎；类风湿性多肌痛；阿尔茨海默氏症 (Alzheimer' s disorder)；帕金森氏症(Parkinson' s disorder)；癫痫；艾滋病痴呆；哮 喘；成人呼吸窘迫综合症；支气管炎；囊性纤维化；急性白细胞介导性肺损伤；远端直肠炎；韦格纳肉芽肿；纤维肌痛；支气管炎；囊性纤维化；葡萄膜炎；结膜炎；牛皮癣；湿疹；皮肤 炎；平滑肌增殖病症；脑膜炎；带状疱疹；脑炎；肾炎；结核病；视网膜炎；异位性皮炎；胰腺 炎；齿龈炎；凝固性坏死；液化性坏死；纤维蛋白样坏死；血管内膜增生；心肌梗塞冲风； 器官移植排斥；或其组合。在某些实施例中，本文公开一种用于治疗有需要的个体的MIF介导的病症的医药 组合物，其至少包含一种活性剂，所述活性剂可抑制(i)MIF与CXCR2和CXCR4的结合；和/ 或(ii)MIF对CXCR2和CXCR4的活化；(iii)MIF形成同源多聚体的能力；或其组合。在一些 实施例中，所述活性剂特异性结合于MIF中假ELR基元的全部或一部分。在一些实施例中， 所述活性剂特异性结合于MIF中N环基元的全部或一部分。在一些实施例中，所述活性剂特 异性结合于MIF中假ELR基元和N环基元的全部或一部分。在一些实施例中，所述活性剂 选自CXCR2拮抗剂、CXCR4拮抗剂、MIF拮抗剂或其组合。在一些实施例中，所述活性剂选自 CXCL8(3-74)K11R/G31P ；Sch527123 ；N-(3-(氨磺酰基)-4-氯-2-羟苯基)-N' ，3- 二 氯苯基)脲；IL-8(l-72) ； (R)IL-8 ;(R)IL-8，匪 eLeu ;(AAR)IL-8 ;GR0a (1-73) ； (R) GRO α ； (ELR)PF4 ； (R)PF4 ；SB-265610 ；安瘤克；SB-517785-M ；SB 265610 ； SB225002 ；SB455821 ； DF2162 ；热帕瑞欣；ALX40-4C ；AMD-070 ；AMD3100 ；AMD3465 ；KRH-1636 ；KRH-2731 ； KRH-3955 ；KRH-3140 ；T134 ；T22 ；T140 ；TC14012 ；TN14003 ；RCP168 ；P0L3026 ；CTCE-0214 ； C0R100140 ；或其组合。在一些实施例中，活性剂是特异性结合于MIF中假ELR基元的全部 或一部分的肽；特异性结合于MIF中N环基元的全部或一部分的肽；特异性结合于假ELR基 元和N环基元的全部或一部分的肽；抑制MIF与CXCR2结合的肽；抑制MIF与CXCR4结合的 肽；抑制MIF与JAB-I结合的肽；抑制MIF与CD74结合的肽；特异性结合于以下肽序列的 全部或一部分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ 以及 MIF 单体或 MIF 三聚体中至少一 者的相应特征/结构域；模拟以下肽序列PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及 MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域的肽；特异性结合于以下肽序列的 全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特 征/结构域；模拟以下肽序列DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF单体或MIF三聚体中至少一 者的相应特征/结构域的肽；特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASVPDGFLS ELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 单体或 MIF 三聚体中至少一者的 相应特征/结构域；模拟以下肽序列PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 单体或 MIF 三聚体中至少一者的相应特征/结构域的肽；特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的 肽FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；模拟 以下肽序列的肽FGGSSEPCALCSLHSI ；或其组合。在一些实施例中，所述组合物进一步包含 第二活性剂。在一些实施例中，所述组合物进一步包含烟酸、贝特、他汀、Apo-Al模拟肽(例 如DF-4，诺华公司)、apoA-I转录上调剂、ACAT抑制剂、CETP调节剂、糖蛋白(GP)nb/IIIa 受体拮抗剂、P2Y12受体拮抗剂、Lp-PLA2抑制剂、抗TNF剂、IL-I受体拮抗剂、IL-2受体 拮抗剂、细胞毒性剂、免疫调节剂、抗生素、T细胞共刺激阻断剂、改良病症的抗风湿剂、B细 胞消耗剂、免疫抑制剂、抗淋巴细胞抗体、烷化剂、抗代谢物、植物碱、类萜、拓扑异构酶抑制 剂、抗肿瘤抗生素、单克隆抗体、激素疗法或其组合。
本发明的新颖特征将在随附权利要求书中予以具体陈述。参照以下陈述利用本发 明原理的说明性实施例的详细描述和其随附图式，将会对本发明的特征和优点获得更好的 理解，在图式中图1说明MIF触发的单核细胞阻滞是由CXCR2/CXCR4和⑶74介导的。如所示，在 存在或不存在MIF (以及抗MIF抗体、抗CXCLl和CXCL8抗体或同型对照)、CXCL8、CXCLlO或 CXCL12的情况下，预培育人类主动脉内皮细胞(Human aortic endothelialcell, HAoEC)、 稳定表达ICAM-I的CHO细胞(CH0/ICAM-1)和小鼠微血管内皮细胞(mouse microvascular endothelial cell, SVEC)2 小时。如所示，用抗 CXCRU CXCR2、β 2、CXCR4、CD74 的抗体或 同型对照预处理单核细胞30分钟，或用百日咳毒素(pertussistoximPTX)预处理2小时。 (a)用原代人类单核细胞灌注HAoEC ;(b)使用抗MIF抗体进行的免疫荧光检测显示，预处 理2小时后，MIF (绿色)呈递于HAoEC和CH0/ICAM-1细胞的表面，但预处理30分钟后没有 (图中未示)；相比之下，在缓冲液处理的细胞中没有MIF(对照)。比例条，ΙΟΟμπι。(c、d) 用MonoMac6细胞灌注CHO/1 CAM-1细胞；(e)用T细胞灌注HAoEC。(f、g)用Jurkat T细 胞(f)和用JurkatCXCR2转染子或载体对照(g)灌注CH0/ICAM-1细胞。在c、d、f和g中， 减去结合于经载体转染的CHO细胞的背景值。(h)在CXCR4拮抗剂AMD3465存在下，用稳定 表达CXCR1、CXCR2或CXCR3的Li. 2转染子和用仅表达内源CXCR4的对照灌注小鼠SVEC。 细胞阻滞是以每平方毫米的细胞数或对照细胞粘附的百分比定量。a和c-g中的数据表示 3到8个独立实验的平均值士标准差；h中的数据是由四个实验中的一个代表性实验得到 的结果。图2说明MIF触发的单核细胞趋化性是由CXCR2/CXCR4和⑶74介导的。使原代人 类单核细胞(a-e)、CD3+T细胞(f)和嗜中性粒细胞(g、h)分别在存在或不存在MIF的情况 下进行反式迁移分析(transmigration analysis)。CCL2 (a)、C)(CL8 (a、g、h) ^P CXCL 12(f) 用作阳性对照，或用于测试由MIF (或CXCL8，h)引起的脱敏。MIF、CCL2和CXCL8对单核细 胞(a)或MIF对嗜中性粒细胞(g)的趋化作用遵循钟形剂量-反应曲线。利用针对MIF的 活性剂、煮沸(b)或利用指定浓度的MIF(顶腔室中，c)可消除由MIF触发的单核细胞趋化 性。(d)如通过用百日咳毒素组分A和B (PTXA+B)、单独PTX组分B或者用LW94002处理 所证实，由MIF触发的单核细胞趋化性是由Gd 乂磷酸肌醇-3-激酶信号传导介导的。(e) 利用抗⑶74或抗CXCR1/CXCR2的抗体，可阻断MIF介导的单核细胞趋化性。(f)利用抗MIF 和抗CXCR4的抗体，可阻断由MIF诱导的T细胞趋化性。(g)嗜中性粒细胞趋化性是由MIF 诱导的。(h)MIF诱导的嗜中性粒细胞趋化性与CXCL8诱导的嗜中性粒细胞趋化性的比较、 抗CXCR2或抗CXCRl抗体的作用，以及MIF引起的CXCL8脱敏。a和f_h中的数据表示为趋 化性指数；c中的数据表示为对照组的百分比；而b、d和e中的数据表示为输入的百分比。 数据都表示4到10个独立实验的平均值士标准差，但图a、c和g ；b中煮沸的MIF ；以及b 和e中的单独活性剂对照组除外，这些图中数据为2个独立实验的平均值。图3说明MIF触发快速整合素(integrin)活化和钙信号传导。(a)用MIF或 TNF- α刺激人类主动脉内皮细胞2小时。利用实时PCR分析CXCLl和CXCL8mRNA，并相对 于对照组进行正规化。借助于ELISA评估来源于上清液的CXCL8 (n = 3个独立实验，一式两份执行)。(b)用MIF或CXCL8直接刺激MonoMac6细胞1分钟，并于CH0-ICAM-1细胞上 灌注5分钟(8个独立实验的平均值士标准差)。(c)用MIF刺激MonoMace细胞指定时 间。利用FACSAria监测LFA-I的活化(用327C抗体检测)，并表示为平均荧光强度(mean fluorescence intensity, MFI)的增加。(d)与c中相同，但针对原代单核细胞；数据是相 对于利用Mg2+/EGTA得到的最大活化表示。(e)用抗α 4整合素、⑶74或CXCR2的抗体预处 理M0n0MaC6细胞，用MIF刺激1分钟，在VCAM-1. Fc上灌注5分钟。细胞粘附表示为对照组 的百分比。c-e中的阻滞数据表示5个独立实验的平均值士标准差。(f)用MIF、CXCL8或 CXCL7刺激经Fluo-4 AM标记的嗜中性粒细胞发生钙瞬变。利用FACSAria纪录由钙引起的 MFI，持续0-240秒。对于脱敏，在刺激之前120秒添加刺激物。所示迹线表示4个独立实 验。(g)Ll. 2-CXCR2转染子中由指定浓度的CXCL8、CXCL7或MIF触发的钙内流的剂量-反 应曲线。数据表示为基线与峰值MFI (4-8个独立实验的平均值士标准差)之间的差异。图4说明MIF与CXCR2/CXCR4的相互作用以及CXCR2/⑶74复合物的形成。使 HEK293-CXCR2转染子(a)或带有CXCR4的Jurkat T细胞(c)分别经历受体结合分析，分 析MIF或冷同源配体对[I125]CXCL8(a)或[I125] CXCL12 (c)的竞争(平均值士标准差，η = 6-10)。(b)如所示，HEK293-C)(CR2 或7-CXCR2 转染子中 MIF 和 CXCL8 诱导的 C)(CR2 内化(插图显示代表性柱形图)；通过FACS分析表面CXCR2的表达来评估(缓冲剂(浓)百 分比，平均值士标准差，η = 5)。(d)与b中相同，JurkatT细胞中由MIF和CXCL12诱导的 CXCR4内化(平均值士标准差，η = 4-6)。(e)利用FACS分析荧光素-MIF与HEK293-CXCR2 转染子或载体对照的结合。插图显示HEK293-CXCR2转染子中与载体对照中生物素-MIF与 CXCR2的结合的比较，所述结合是利用蛋白免疫印迹法(western blot)，使用抗CXCR2抗体 在抗生蛋白链菌素(str印tavidin，SAv)离析后进行评估的。(f)针对CXCR2、CD74和核 (赫希斯特公司(Hoechst))进行染色的7-CXCR2转染子中CXCR2与⑶74 (橙色-黄 色重叠)的共定位，其是利用荧光显微镜(上图)或激光共聚焦扫描显微镜(下图)进行 分析的。比例条，10 μ m。(g)在表达经His标记的CD74的HEK293-CXCR2转染子的CHAPSO 提取物中CXCR2/CD74复合物的免疫共沉淀。相继进行抗His免疫沉淀(IP)和抗CXCR2或 抗His-⑶74蛋白免疫印迹(WB ；上图)，或相继进行抗CXCR2免疫沉淀和抗His-⑶74或抗 CXCR2蛋白免疫印迹(下图)。对照组不会发生免疫沉淀的溶解产物或单独珠粒。(h)与 g中相同，但针对Li. 2-CXCR2转染子。由Li. 2-CXCR2转染子进行的抗CXCR2免疫沉淀之后 进行抗⑶74或抗CXCR2蛋白免疫印迹(上图)。利用同型IgG或CXCR2阴性Li. 2细胞进 行的免疫沉淀(下图)用作对照。数据表示3个独立实验(e-h)。图5说明活体内MIF经由CXCR2诱发的致动脉粥样硬化炎症和微血管炎症，以及 MIF阻断对斑块消退的影响。(a)在喂食饲料30周的Mifv+Ldlr〃和MifyLdlrv小鼠(n = 4)中测定活体内单核细胞的内腔粘附以及原生主动脉根中损伤巨噬细胞的含量。显示代表 性影像。箭头指示粘附于内腔表面的单核细胞。比例条，ΙΟΟμπι。(b、c)活体内暴露于MIF 诱导的CXCR2依赖性白细胞募集。阴囊内注射MIF后，利用活体显微镜观察提睾肌微血管。 如与IgG对照组(n = 4)相比较，用阻断CXCR2的抗体预处理可消除粘附和迁移。(d)在 用野生型而非IlSrb"骨髓重建的野生型小鼠(η = ； )中，腹膜内注射MIF或媒剂引起嗜中 性粒细胞募集。(e-h)阻断MIF而非CXCLl或CXCL12，使动脉粥样硬化晚期斑块消退和稳 定。Apoe"小鼠接收高脂肪饮食12周，并随后用抗MIF、CXCLl或CXCL12的抗体或者媒剂(对照组)再处理4周(n = 6到10只小鼠)。使用油红O(Oil-Red-O)对主动脉根中的斑 块染色。代表性影像显示于e中(比例条，500 μ m)。F中的数据表示基线(12周)以及16 周后的斑块面积。M0MA-2+巨噬细胞的相对含量显示于g中，而每一切片中⑶3+T细胞的数 量显示于h中。数据表示平均值士标准差。图6说明在动脉粥样化形成的情况下MIF的细胞机制。利用各种促动脉粥样硬化 刺激物，例如氧化型LDL(oxLDL)或血管紧张素II (angiotensin II，ATII)，来诱导血管壁 细胞和内膜巨噬细胞中的MIF表达。随后，MIF上调内皮细胞粘附分子(例如血管[VCAM-1] 和细胞内[ICAM-1]粘附分子)和趋化因子(例如CCL2)，并通过结合其七螺旋(趋化因子) 受体CXCR2和CXCR4并经由这些受体传导信号，触发各别整合素受体(例如LFA-I和VLA-4) 的直接活化。此举要求单核细胞(单核细胞和T细胞)的募集和巨噬细胞转化成为泡沫细 胞，由此抑制了 SMC的凋亡，并调控(例如减弱)SMC的迁移或增殖。通过诱导MMP和组织 蛋白酶，MIF促进弹性蛋白和胶原蛋白降解，最终导致发展成不稳定斑块。ROS表示活性氧 物质(reactive oxygen species) ；PDGF-BB表示血小板源性生长因子BB。图7说明经由功能性MIF受体复合物进行的信号传导。糖皮质激素通过调控细胞 因子的产生覆盖其功能来诱导MIF，并且在其内吞后，可与细胞内蛋白质(即JAB-1)相互 作用，由此下调MAPK信号，并调节细胞氧化还原内平衡。在一些实施例中，细胞外MIF结合 于细胞表面蛋白CD74(恒定链Ii)。CD74缺乏信号转导细胞内结构域，但与蛋白聚糖CD44 相互作用，并经由CD44介导信号传导，以诱导Src家族RTK和MAPK/细胞外信号调控激酶 (extracellular signal-regulated kinase, ERK)的活化、活化 PI3K/Akt 路径或启始 p53 依赖性细胞凋亡抑制。MIF也仅结合G蛋白偶联趋化因子受体(CXCR2和CXCR4)，并经由所 述细胞因子受体进行信号传导。CXCR2与CD74形成复合物，可启动附属结合(accessory binding)，从而促进GPCR的活化以及类GPCR-RTK信号传导复合物的形成，由此触发钙内流 以及整合素的迅速活化。图8说明MIF对于心肌病理学的影响。在缺血再灌注的情况下，脓毒病中的 缺氧、活性氧物质(R0Q和内毒素(例如脂多糖[LPS])诱导心肌细胞经由蛋白激酶 C(proteinkinase C, PKC)依赖性机制分泌出MIF，并引起细胞外信号调控激酶(ERK)活化， 这将引起心肌细胞凋亡。在一些实施例中，用存活心肌细胞或用于治疗性注射的内皮祖细 胞(例如eEPC)表达的MIF经由其受体CXCR2和CXCR4促进血管生成，此过程需要MAPK和 PI3K的活化。图9说明干扰CXCR4但不同时干扰CXCR2将使动脉粥样硬化恶化。经由微型渗透 泵，用媒剂(对照组)或AMD3465处理接收高脂肪饮食的Apoe-/-小鼠12周(n =每组6 只)。用油红0染色，随后定量主动脉根(图14a)和胸腹主动脉(图14b)中的动脉粥样硬 化斑块。在指定时间点，利用流式细胞分析或标准细胞测量术测定末梢血液中嗜中性粒细 胞的相对数量(图14C)。图10说明MIF三聚体的晶体结构。假ELR结构域在所述三聚体中形成一个环，而 N环结构域从所述假ELR环向外延伸。图11说明MIF的核苷酸序列，其中注解显示对应于N环结构域和假ELR结构域的 序列。
具体实施例方式在某些实施例中，本文公开抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导的方法。 在一些实施例中，通过用活性剂占据CXCR2和CXCR4的MIF结合结构域，来抑制MIF经由 CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在一些实施例中，通过占据、遮蔽或以其它方式破坏MIF 上的结构域，来抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在一些实施例中，通过用活 性剂占据、遮蔽或以其它方式破坏MIF上的结构域，并由此破坏CXCR2和/或CXCR4与MIF 的结合，来抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在一些实施例中，通过用活性剂 占据、遮蔽或以其它方式破坏MIF上的结构域，并由此破坏MIF的三聚化，来抑制MIF经由 CXCR2和CXCR4进行的信号传导。尽管有许多方法能抑制MIF的相互作用或下调MIF的表达，但所属领域中还未认 识到，对于白细胞相互作用，MIF中的某些部分比其它部分更重要。本文所解决的一个问题 是，鉴别和产生结合MIF中对于白细胞趋化性重要的选择性部分的肽和小分子。此外，有许多肽和小分可抑制或下调CXCR2和CXCR4与其配体的相互作用。然而， 这些受体也涉及与其它配体(例如IL-8/CXCL8、GR0i3 /CXCL2和/或基质细胞源性因子 la (Stromal Cell-Derived Factor-la，SDF-la)/CXCL12)的相互作用。如果抑制后面所述 的这些相互作用，通常就会产生有害副作用。本文解决了所属领域中没能设计出选择性抑 制CXCR2和CXCR4与MIF的相互作用的肽和小分子的问题。某些定义术语“个体”、“受检者”或“患者，，可互换使用。本文使用的这些术语是指任何哺 乳动物(即，分类学分类动物界脊索动物门脊椎动物亚门哺乳纲内的任何目、科和属 的物种)。在一些实施例中，哺乳动物是人类。在一些实施例中，哺乳动物是非人类。在一 些实施例中，哺乳动物是以下分类学目的成员灵长目(例如狐猴、懒猴(Iorid)、婴猴、眼 镜猴、猴子、猿和人类)；啮齿目(例如小鼠、大鼠、松鼠、花鼠和地鼠)；复齿目(例如野兔、 家兔和鼠兔)；猬形目(例如猬和毛猬)；駒形目(例如駒鼠、鼹鼠和沟齿鼠)；翼手目(例 如蝙蝠)；鲸目(例如鲸、海豚和白鲸)；食肉目(例如猫、狮子和其它猫型亚目；狗、熊、鼬 属和海豹)；奇蹄目(例如马、斑马、貘和犀牛)；偶蹄目(例如猪、骆驼、牛和鹿)；长鼻目 (例如象)；海牛目(例如海牛(manatee)、儒艮和海牛(sea cow))；有甲贫齿亚目(例如 犰狳)；披毛目(例如食蚁兽和树懒)；负鼠目(例如美洲负鼠)；新袋目(例如袋鼠)；微 兽目(例如南猊(Monito del Monte))；袋鼹目(例如袋鼹)；袋鼬目(例如有袋类肉食兽 (marsupial carnivore))；袋狸目(例如袋狸和兔耳袋狸)；或双门齿目(例如袋熊、树袋 熊、负鼠、袋鼯、袋鼠、大袋鼠和小袋鼠)。在一些实施例中，所述动物是爬行动物(即，分类 学分类动物界；脊索动物门脊椎动物亚门爬行纲内的任何目、科和属的物种)。在一些实 施例中，所述动物是鸟类(即动物界脊索动物门脊椎动物亚门鸟纲)。这些术语都不需 要或不局限于以护理人员(例如医生、注册护士、从业护士、医师助手、男护理员或收容所 工作人员)管理(例如持久或间歇)为特征的情形。当提到结合分子(即活化剂；例如肽或肽模拟物)与蛋白质或多肽或抗原决定基 之间的相互作用时，短语“特异性结合”通常是指结合分子识别并以高亲和力可检测地特异 性结合相关目标。优选在指定条件或生理条件下，特定抗体或结合分子结合于特定多肽或 蛋白质或抗原决定基，但不以显著或不合需要的量结合于样品中存在的其它分子。换句话说，特定抗体或结合分子不会不合需要地与非目标抗原和/或抗原决定基交叉反应。可以 使用多种免疫分析型式来选择与特定多肽发生免疫反应并具有所需特异性的抗体或其它 结合分子。例如，固相ELISA免疫分析、BIAcore、流式细胞术和放射免疫分析都可用于选 择具有所需免疫反应性和特异性的单克隆抗体。有关适用于测定或评估免疫反应性和特 异性的免疫分析型式的描述，参见哈罗瓦(Harlow)，1988，抗体，实验室手册(ANTIBODIES， A LABORATORY MANUAL)，冷泉港出版社(Cold Spring HarborPublications)，纽约(New York)(下文中称为“哈罗瓦”)。“选择性结合”、“选择性”等词是指与一个分子相比较，活性剂优先与另一分子相 互作用。本文公开的活性剂与蛋白质之间的相互作用优选具有特异性和选择性。应注意， 在一些实施例中，活性剂是设计成“特异性结合”和“选择性结合”两种不同但类似的目标， 而不结合其它不合需要的目标。术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，用于指氨基酸残基的聚合物。 所述术语适用于天然存在的氨基酸聚合物，以及一个或多个氨基酸残基为非天然存在的氨 基酸(例如氨基酸类似物)的氨基酸聚合物。所述术语涵盖任何长度的氨基酸链，包括全 长蛋白质(即抗原)，其中氨基酸残基是通过共价肽键连接的。术语“抗原”是指能够诱导抗体产生的物质。在一些实施例中，抗原是特异性结合 于抗体可变区的物质。术语“抗体”是指单克隆抗体、多克隆抗体、双特异性抗体、多特异性抗体、移植 抗体、人类抗体、人类化抗体、合成抗体、嵌合抗体、骆驼化抗体(camelized antibody), 单链Fv(single-chain Fv，scFv)、单链抗体、Fab片段、F(ab ‘)片段、二硫键连接的 Fv(disulfide-linked Fv，sdFv)、胞内抗体(intrabody)和抗独特型(anti-idiotypic，抗 Id)抗体，以及任一上述抗体的抗原结合片段。具体地说，抗体包括免疫球蛋白分子，以及免 疫球蛋白分子的免疫活性片段，即含有抗原结合位点的分子。视免疫球蛋白重链恒定结构 域的氨基酸序列而定，免疫球蛋白可归为不同类别。对应于不同免疫球蛋白类别的重链恒 定结构域(Fe)分别称为α、δ、ε、Y和μ。众所周知不同类别免疫球蛋白的亚基结构和 三维构型。免疫球蛋白分子属于任何类型(例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、类别(例 如Ig(^、IgG2, IgG3、IgG4, IgA1和IgA2)或亚类。术语“抗体”与“免疫球蛋白”在最广泛的 意义上可互换使用。在一些实施例中，抗体是抗体与一个或多个其它蛋白质或肽共价或非 共价缔合而形成的较大分子的一部分。对于抗体，术语“可变结构域”是指各特定抗体对其特定抗原的结合和特异性中所 使用的抗体的可变结构域。然而，可变性并不是均勻分布于整个抗体可变结构域。相反，其 实际上是集中于轻链和重链可变结构域中三个称为高变区(也称为CDR)的区段中。可变结 构域中保守性较高的部分称为“框架区”或“FR”。未经过修饰的重链和轻链的可变结构域各 含有四个FR(FR1、FR2、FR3和FR4)，主要采用β -折叠构型，其间杂有三个⑶R，这些⑶R形 成环连接，并且在一些情况下，形成β -折叠结构的一部分。各链中的CDR通过FR紧接地固 持在一起，并与来自另一链的CDR—起帮助形成抗体的抗原结合位点(参见卡贝特(Kabat) 等人，免疫相关蛋白质的序列(Sequences ofProteins of Immunological Interest),第 5版，美国国立卫生研究院公共卫生部(PublicHealth Service, National Institutes of Health)，马里兰州贝塞斯达(Bethesda, Md.) (1991)，第 647-669 页)。
术语“高变区”和“CDR”当用于本文中时，指抗体中负责抗原结合的氨基酸残基。 ⑶R包含以互补方式结合于抗原的三个序列区的氨基酸残基，而且这三个序列区称为Vh 和\链各自的CDR1、CDR2和CDR3。根据卡贝特等人，免疫相关蛋白质的序列，第5版，美 国国立卫生研究院公共卫生部，马里兰州贝塞斯达(1991)，在轻链可变结构域中，⑶R通 常大致对应于残基M-34 (CDRLl)、50-56(CDRL2)和89-97 (CDRL3)，而在重链可变结构域 中，CDR 通常大致对应于残基 31-35 (CDRHl)、50-65(CDRH2)和 95-102 (CDRH3)。应了解， 不同抗体的CDR可含有插入序列，因此，氨基酸编号可能不同。卡贝特编号系统(Kabat numbering system)所用的编号方案利用附接于特定残基的字母(例如轻链中⑶RLl的 27A、27B、27C、27D、27E和27F)来反映不同抗体之间任何插入序列的编号，由此说明所述插 入序列。或者，根据查希亚(Chothia)和勒斯克(Lesk)，分子生物学杂志(J. Mol. Biol.), 196 :901-917(1987),在轻链可变结构域中，CDR通常大致对应于残基^_32(CDRL1)、 50-52 (⑶RL2)和91-96 (⑶RL3)，而在重链可变结构域中，⑶R通常大致对应于残基 26-32 (CDRHl)、53-55(CDRH2)和 96-101(CDRH3)。抗体的恒定结构域(Fe)不直接涉及抗体与抗原的结合，而是展现各种效应功能， 例如抗体通过与例如Fc受体(FcR)相互作用来参与抗体依赖性细胞毒性。在将抗体投予 患者后，Fc结构域还可以增加循环中抗体的生物利用率。本文使用的术语“亲和力(affinity)，，是指两种试剂可逆结合的平衡常数，并 且以Kd表示。结合蛋白对配体的亲和力，例如抗体对抗原决定基的亲和力，可例如为约 IOOnM (纳摩尔浓度)到约0. InM、约IOOnM到约IpM (皮摩尔浓度)，或约IOOnM到约IfM (飞 摩尔浓度(femtomolar))。本文使用的术语“亲合力(avidity) ”是指稀释后两种或两种以 上试剂的复合物的耐解离能力。术语“肽体(ρ印tibody) ”是指包含肽与抗体或者一个或多个抗体结构域(例如抗 体的Fc结构域)直接或间接融合的分子，其中所述肽部分特异性结合于所需目标。肽可与 Fc区融合，或可插入Fc环(一种经过修饰的Fc分子)中。术语“肽体”不包括Fc融合蛋 白(例如，全长蛋白质与Fc结构域融合)。术语“经分离的”和“经纯化的”是指物质是在天然环境中实质上或基本上移出或 浓缩得到的。例如，经分离核酸是与样品中至少一些通常侧接于其的核酸或者其它核酸或 组分(蛋白质、脂质等)分离者。在另一实例中，如果多肽是在其天然环境中实质上移出或 浓缩得到的，那么多肽经过纯化。纯化和分离核酸和蛋白质的方法是已证明的方法。“实质 上”的实施例包括至少20%、至少40%、至少50%、至少75%、至少85%、至少90%、至少 95%或至少99%。本文使用的术语“治疗”和其它语法等效形式包括缓解、抑制或减轻症状；减轻或 抑制疾病或病状的严重程度；降低疾病或病状的发生率；预防性治疗疾病或病状；减少或 抑制疾病或病状的复发；预防、延缓疾病或病状发作；延缓疾病或病状的复发；缓和或改善 疾病或病状症状；改善症状的潜在代谢成因；抑制疾病或病状，例如停滞疾病或病状的发 展、减轻疾病或病状、使疾病或病状消退、减轻由疾病或病状引起的病状，或停止疾病或病 状的症状。所述术语还包括获得治疗益处。治疗益处是指所治疗的潜在病症的根除或改善， 和/或由潜在病症引起的一种或多种生理学症状的根除或改善，由此观察到个体情况的改 良。
本文使用的术语“预防”和其它语法等效形式包括预防其它症状，预防症状的潜在 代谢成因，抑制疾病或病状，例如停滞疾病或病状的发展，并且打算包括防治。所述术语还 包括获得防治益处。对于防治益处，任选将组合物投予有发展特定疾病的风险的个体、报导 有一种疾病的一种或多种生理学症状的个体或有疾病复发风险的个体。本文使用的术语“有效量”或“治疗有效量”是指所投予的至少一种药剂足以达成 预定结果的量，例如在某种程度上减轻所治疗的疾病或病状的一种或多种症状，在某些情 况下，所述结果是减轻和/或缓解疾病的病征、症状或成因，或者生物系统的任何其它所需 的变化。在特定情况下，所述结果是减少至少一种异常增殖细胞(例如癌症干细胞)的生 长、杀死所述细胞或诱使所述细胞凋亡。在某些情况下，适于治疗应用的“有效量”是在临 床上明显减轻疾病所需的包含本文所述药剂的组合物的量。可使用例如剂量递增研究等任 何适合的技术测定适宜任何个别情况的“有效”量。本文使用的术语“投予”、“投药”等是指使药剂或组合物能够递送到所需生物作用 位点而使用的方法。这些方法包括(但不限于)口服途径、十二指肠内途径、非经肠注射 (包括静脉内、皮下、腹膜内、肌肉内、血管内或输注)、局部和直肠投药。任选用于投予本文 所述药剂和方法的技术包括例如古德曼(Goodman)和奇尔曼(Gilman)，治疗学的药理基础 (The Pharmacological Basis of Therapeutics)，现行版；贝力口蒙(Pergamon)；禾口雷明登 氏制药科学(Remington' s, Pharmaceutical Sciences)(现行版)，默克出版公司(Mack Publishing Co.)，宾夕法尼亚州伊斯顿(Easton，Pa)中所论述的技术。在某些实施例中， 本文所述的药剂和组合物是经口投予的。本文使用的术语“医药学上可接受的”是指物质不会消除本文所述药剂的生物活 性或特性，而且相对无毒(即，所述物质的毒性明显不能超过所述物质的益处)。在一些情 况下，将医药学上可接受的物质投予个体，不会引起显著不合需要的生物作用，或不会以有 害方式与含有所述物质的组合物的任何组分显著相互作用。巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物抑制(部分或完全)MIF的活性。 在某些情况下，MIF是促炎性细胞因子。在某些情况下，MIF是由活化的免疫细胞(例如淋巴 细胞(T细胞))回应于感染、炎症或组织损伤所分泌。在某些情况下，MIF是在下丘脑-垂 体-肾上腺轴受到刺激后由垂体腺前叶所分泌。在某些情况下，MIF与胰岛素一起由胰腺β 细胞分泌，并充当自分泌因子刺激胰岛素的释放。在某些情况下，MIF是受体CXCR2、CXCR4 和CD74的配体。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物抑制(部分或完全)CXCR2、 CXCR4和/或CD74的活性。在某些情况下，MIF诱导邻近白细胞(例如淋巴细胞、粒细胞、单核细胞/巨噬细 胞以及ΤΗ-17细胞)沿MIF梯度的趋化性。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合 物阻止沿MIF梯度的趋化性，或降低沿MIF梯度的趋化性。在某些情况下，MIF诱导白细胞 (例如淋巴细胞、粒细胞、单核细胞/巨噬细胞以及ΤΗ-17细胞)向感染、炎症或组织损伤 部位的趋化性。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物阻止或降低白细胞向感染、 炎症或组织损伤部位的趋化性。在某些情况下，白细胞(例如淋巴细胞、粒细胞、单核细胞 /巨噬细胞以及ΤΗ-17细胞)沿MIF梯度的趋化性将在感染、炎症或组织损伤部位引起炎 症。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物可治疗感染、炎症或组织损伤部位的炎症。在某些情况下，单核细胞沿RANTES梯度的趋化性将在损伤或炎症部位引起单核细胞阻 滞(即，单核细胞沉积于上皮上)。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物阻止或 减少损伤或炎症部位处的单核细胞阻滞。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物 可抑制治疗淋巴细胞介导的病症。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物可治疗 粒细胞介导的病症。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物可治疗巨噬细胞介导 的病症。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物可治疗Th-17介导的病症。在一 些实施例中，本文公开的方法和/或组合物可治疗胰腺β细胞介导的病症。在某些情况下，MIF可由糖皮质激素诱导，这是一种会加速与许多需要糖皮质激素 疗法的疾病相关的动脉粥样硬化的机制。因此，在一些实施例中，本文公开的组合物和方法 可抑制糖皮质激素对MIF表达的诱导。在某些情况下，人类MIF多肽是由位于22号染色体上细胞发生带型22q 11. 23的 核苷酸序列编码的。在某些情况下，MIF蛋白是一种12. 3kDa蛋白质。在某些情况下，MIF 蛋白是包含三个具有115个氨基酸的多肽的同源三聚体。在某些情况下，MIF蛋白包含模 拟细胞因子中所见的ELR基元的假ELR基元。在某些情况下，所述假ELR基元包含两个不 相邻但适当间隔开的残基(Argl2和Asp45，参见图11)。在一些实施例中，假ELR基元包含 氨基酸12到氨基酸45的氨基酸序列(所述编号包括第一位的甲硫氨酸残基)。这相当于 氨基酸11到氨基酸44的假ELR基元，其中第一位的甲硫氨酸残基未计计算在内(在所述 情况下，假ELR基元包含Arg 11和Asp44)。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合 物通过抑制假ELR基元与CXCR2和/或CXCR4的结合来治疗MIF介导的病症。在某些情况下，MIF蛋白包含10个到20个残基的N端环基元(N环)。在某些情 况下，MIF N环介导与CXCR2和/或CXCR4受体的结合。在某些情况下，MIF的N环基元包 含MIF 的连续残基(47-56)(即 L47 M48 A49 F50 G51 G52 S53 S54 E55 P56 ；参见图 11)。 在某些情况下，MIF的N环基元包含氨基酸45-60。在某些情况下，MIF的N环基元包含氨 基酸44-61。在某些情况下，MIF的N环基元包含氨基酸43-62。在某些情况下，MIF的N环 基元包含氨基酸42-63。在某些情况下，MIF的N环基元包含氨基酸41-64。在某些情况下， MIF的N环基元包含氨基酸40-65。在某些情况下，MIF的N环基元包含氨基酸46-59。在 某些情况下，MIF的N环基元包含氨基酸47-59。在某些情况下，MIF的N环基元包含氨基 酸48-59。在某些情况下，MIF的N环基元包含氨基酸50-59。在某些情况下，MIF的N环基 元包含氨基酸47-58。在某些情况下，MIF的N环基元包含氨基酸47-57。在某些情况下， MIF的N环基元包含氨基酸47-56。在某些情况下，MIF的N环基元包含氨基酸48-58。在 一些实施例中，N环基元包含氨基酸48-57。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合 物通过抑制N环基元与CXCR2和/或CXCR4的结合来治疗MIF介导的病症。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物通过抑制(1) N环基元与CXCR2和 /或CXCR4的结合；和/或(2)假ELR基元与CXCR2和/或CXCR4的结合，来治疗MIF介导 的病症。在某些情况下，⑶74活化G蛋白偶联受体(GPCR)、活化CXCR2，和/或与这些分子 缔合，以形成信号传导复合物。因此，在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物通过 用⑶74抑制GPCR或CXCR2的活化，来治疗MIF介导的病症。在某些情况下，MIF是在动脉损伤后由内皮细胞、SMC、单核细胞和/或巨噬细胞表达的。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物可抑制内皮细胞、SMC、单核细胞 和/或巨噬细胞在动脉损伤后表达MIF。在某些情况下，MIF是在暴露于氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)、⑶40配体、血管紧张素II或其组合后由内皮细胞、SMC、单核细胞、巨噬细胞表达 的。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物可抑制内皮细胞、SMC、单核细胞和/或 巨噬细胞在暴露于氧化低密度脂蛋白、CD40配体、血管紧张素II或其组合后表达MIF。在某些情况下，MIF诱导内皮细胞中CCL2、TNF和/或ICAM-I的表达。在一些实施 例中，本文公开的方法和/或组合物可抑制内皮细胞中MIF诱导的CCL2、TNF和/或ICAM-I 的表达。在某些情况下，MIF诱导SMC中MMP和组织蛋白酶的表达。在一些实施例中，本文 公开的方法和/或组合物可抑制SMC中MIF诱导的MMP和组织蛋白酶的表达。在某些情况下，MIF通过CXCR2或CXCR4触发钙内流、诱导整合素的迅速活化、诱导 MAPK活化，并介导单核细胞和T细胞的G α i-和整合素依赖性阻滞和趋化性(图2和3)。 因此，在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物可抑制单核细胞和/或T细胞中的钙 内流、抑制MAPK活化、抑制整合素活化、抑制单核细胞和T细胞的G α i-和整合素依赖性阻 滞，或其组合。在某些情况下，MIF诱导的单核细胞募集涉及MIF结合蛋白⑶74。在某些情况下， MIF结合蛋白⑶74可诱导钙内流、有丝分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)活化或G α i依赖性 整合素活化(图7)。在一些实施例中，本发明包含一种抑制有需要的个体体内MIF介导的 MAPK激酶活化的方法。在一些实施例中，本发明包含一种抑制有需要的个体体内MIF介导 WGai依赖性整合素活化的方法。在某些情况下，MIF经由⑶74诱导的信号传导涉及⑶44和Src激酶。在一些实 施例中，本文公开的方法和/或组合物抑制CD74介导的Src激酶活化。在某些情况下，借助内吞作用吸收的MIF与JAB-I直接相互作用。在一些实施例 中，本文公开的方法和/或组合物抑制MIF的内吞。在某些情况下，抑制蛋白(arrestin)促进G蛋白偶联受体募集至介导MIF内化的 披网格蛋白小泡(clathrin-coated vesicle) 0因此，在一些实施例中，本文公开的方法和 /或组合物还包含抑制蛋白拮抗剂。抑制抑制蛋白与GPCR的结合的试剂的实例包含卡维地 洛(carvedilol)、异丙去甲肾上腺素(isoprenaline)、异丙肾上腺素(isoproterenol)、福 莫特罗(formoterol)、西马特罗(cimeterol)、克仑特罗(clenbuterol)、L_肾上腺素、脊亲 和蛋白(spinophilin)和沙美特罗(salmeterol)。在某些情况下，MIF的泛素化引起(部分或完全)MIF的迅速内化和后续降解。因 此，在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物还包含抑制MIF的泛素化。抑制泛素化 的试剂的实例包括(但不限于)PYR-41和相关吡唑酮。在某些情况下，MIF使用网格蛋白介导的内吞作用进入细胞。因此，在一些实施例 中，本文公开的方法和/或组合物还包含抑制网格蛋白介导的MIF内吞。在某些情况下，MIF负面调控MAPK信号传导，或通过经由JAB-I调控细胞氧化还 原内平衡来调节细胞功能。在某些情况下，MIF下调p53的表达。在某些情况下，MIF下调 P53的表达将引起巨噬细胞的凋亡受到抑制并延长其存活。因此，在一些实施例中，本文公 开的方法和/或组合物可抑制由MIF调节的巨噬细胞存活。
在某些情况下，MIF在易损斑块中诱导MMP-I和MMP_9。在某些情况下，易损斑块 中MMP-I和MMP-9的诱导将引起(部分或完全)胶原蛋白降解、纤维帽弱化以及斑块去稳 定。在一些实施例中，本文公开的方法和/或组合物可抑制(部分或完全)胶原蛋白降解、 纤维帽弱化和斑块去稳定。MIF经由CXCR2和CXCR4讲行的信号传导的抑制剂在某些实施例中，本文公开抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导的方法。 在一些实施例中，通过用小分子、肽和/或肽体占据CXCR2和CXCR4的MIF结合结构域(即 GPCR拮抗剂法)，来抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在一些实施例中，通 过占据、遮蔽或以其它方式破坏MIF上的结构域(即细胞因子抑制剂法)，来抑制MIF经由 CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在一些实施例中，通过用小分子、肽和/或肽体占据、遮蔽 或以其它方式破坏MIF上的结构域，并由此破坏CXCR2和/或CXCR4与MIF的结合，来抑制 MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在一些实施例中，通过用小分子、肽和/或肽体 占据、遮蔽或以其它方式破坏MIF上的结构域，并由此破坏MIF的三聚化，来抑制MIF经由 CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在某些情况下，占据、遮蔽或以其它方式破坏MIF上的结 构域不会影响由其它激动剂/配体(例如IL-8/CXCL8、GR0^/CXCL2和/或基质细胞源性 因子 la (SDF-Ia)/CXCL12)介导的 C)(CR2 和 C)(CR4 信号传导。破坏MIF结构域的药剂在一些实施例中，通过占据、遮蔽或以其它方式破坏MIF上的结构域(例如N环和 /或假ELR基元)，来抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在一些实施例中，通 过用小分子、肽和/或肽体占据、遮蔽或以其它方式破坏MIF上的结构域，并由此破坏CXCR2 和/或CXCR4与MIF的结合，来抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在一些实 施例中，小分子、肽和/或肽体可抑制(i)MIF与CXCR2和CXCR4的结合，和/或(ii)MIF对 CXCR2和CXCR4的活化；或(iii) (i)与(ii)的任何组合。在某些情况下，占据、遮蔽或以其 它方式破坏MIF上的结构域不会影响由其它激动剂/配体(例如IL-8/CXCL8、GROi3 /CXCL2 和/或基质细胞源性因子la(SDF-Ia)/CXCL12)介导的CXCR2和CXCR4信号传导。在某些情况下，N端细胞外结构域以及第一和/或第二细胞外环是配体结合于MIF 的介体。在一些实施例中，小分子、肽和/或肽体通过结合于MIF的假ELR基元，来抑制MIF 与CXCR2和/或CXCR4的结合。在一些实施例中，小分子、肽和/或肽体通过结合于MIF的 N环基元，来抑制MIF与CXCR2和/或CXCR4的结合。在一些实施例中，小分子、肽和/或肽 体调节关键残基，和/或引起MIF构象的改变，此举将阻止受体或底物相互作用。在一些实 施例中，小分子、肽和/或肽体干扰与CXCR2和/或CXCR4结合和信号传导相关的基元。在一些实施例中，活性剂是抑制MIF与CXCR2的结合的肽；抑制MIF与CXCR4的结 合的肽；抑制MIF与JAB-I的结合的肽；抑制MIF与⑶74的结合的肽；或其组合。在一些实施例中，活性剂是特异性结合于MIF中假ELR基元的全部或一部分的肽； 特异性结合于MIF中N环基元的全部或一部分的肽；特异性结合于假ELR基元和N环基元 的全部或一部分的肽；或其组合。在一些实施例中，活性剂是特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASV PDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/ 结构域；特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；特异性结合于以下肽序列的全部或一部 分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQHAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 单体或 MIF 三聚体中至少一者的相应特征/结构域；特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的肽 FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；或其组合。用于鉴别破坏MIF结构域的药剂的分析在一些实施例中，鉴别破坏MIF结构域的肽。在一些实施例中，破坏MIF结构域的 肽不会影响在CXCR2和CXCR4处发生的与MIF无关的信号传导事件。在一些实施例中，产生涵盖CXCR2和CXCR4的细胞外N端结构域和/或细胞外环的 肽的文库。在一些实施例中，所述肽的尺寸范围为约5个氨基酸到约20个氨基酸、约7个氨 基酸到约18个氨基酸、约10个氨基酸到约15个氨基酸。在一些实施例中，使用任何合适 方法(例如HTS GPCR筛选技术)，筛选肽文库用于抑制MIF经由CXCR2和CXCR4介导的信 号传导。在一些实施例中，还筛选肽文库用于抑制CXCR2和CXCR4上由11-8和/或SDF-I 介导的信号传导。在一些实施例中，如果一种肽抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号 传导，但允许SDF-I和IL-8经由CXCR2和CXCR4而介导的信号传导，那么将所述肽鉴别为 破坏MIF结构域的肽。在一些实施例中，将来自CXCR2和CXCR4的细胞外N端结构域和细胞外环的肽序 列在膜上排成阵列。在一些实施例中，将来自CXCR2和CXCR4的细胞外N端结构域和细胞 外环的肽序列在膜上排成阵列，并用全长MIF探测。在一些实施例中，MIF经过标记(例如 经同位素标记、放射性标记或荧光团标记)。在一些实施例中，分析经标记MIF所特异性结 合的肽序列对CXCR2和CXCR4的MIF介导的信号传导的抑制。在一些实施例中，使用任何 合适方法(例如GPCR筛选分析)，来筛选抑制CXCR2和CXCR4的MIF介导的信号传导的肽 序列。在一些实施例中，使用任何上述肽或多肽(例如来源于MIF的假ELR基元或MIF的 N环基元的肽)作为“模型”来进行结构-活性关系(structure-activity relationship, SAR)化学(如本文中所详细提供的)。在一些实施例中，SAR化学得到较小肽。在一些实 施例中，较小肽产生破坏MIF结合于CXCR2和/或CXCR4的能力的小分子(例如，通过确定 破坏MIF结合于CXCR2和/或CXCR4的能力所涉及的氨基酸残基)。破坏MIF三聚化的药剂在某些实施例中，本文公开抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导的方法。 在一些实施例中，通过占据、遮蔽或以其它方式破坏MIF上的结构域，来抑制MIF经由CXCR2 和CXCR4进行的信号传导。在一些实施例中，通过用小分子、肽和/或肽体占据、遮蔽或以 其它方式破坏MIF上的结构域，并由此破坏MIF的三聚化，来抑制MIF经由CXCR2和CXCR4 进行的信号传导。在一些实施例中，削弱MIF肽形成同源三聚体的能力将破坏(部分或完 全)MIF结合于受体(例如CXCR2或CXCR4)的能力。在某些情况下，占据、遮蔽或以其它方 式破坏MIF上的结构域不会影响由其它激动剂/配体(例如IL-8/CXCL8、GR0i3 /CXCL2和 /或基质细胞源性因子la(SDF-la)/CXCL1)介导的CXCR2和CXCR4信号传导。在某些情况下，MIF包含三个MIF多肽序列(即三聚体)。在某些情况下，三聚体 中各MIF多肽的假ELR基元形成环。在某些情况下，各MIF多肽的N环基元从假ELR环向外 延伸(参见图10)。在某些情况下，破坏三聚体将破坏MIF与其目标受体的高亲和力结合。在某些情况下，一个亚基的残基38-44 ( β -2链)与另一亚基的残基48-50 ( β _3链)相互 作用。在某些情况下，一个亚基的残基96-102 (β-5链)与另一亚基的残基107-109 (β-6 链)相互作用。在某些情况下，一个亚基上由N73R74S77K78C81形成的结构域与另一亚基 的mil Sl 12 Tl 13相互作用。在一些实施例中，MIF拮抗剂是来源于和/或并有MIF氨基酸残基38_44 ( β _2链) 中的任何残基或全部。在一些实施例中，MIF拮抗剂为来源于和/或并有MIF氨基酸残基 48-50(β-3链)中的任何残基或全部的肽。在一些实施例中，MIF拮抗剂为来源于和/或 并有MIF氨基酸残基96-102 (β-5链)中的任何残基或全部的肽。在一些实施例中，MIF拮 抗剂为来源于和/或并有MIF氨基酸残基107-109 (β-6链)中的任何残基或全部的肽。在 一些实施例中，MIF拮抗剂为来源于和/或并有MIF氨基酸残基Ν73、R74、S77、Κ78和C81 中的任何残基或全部的肽。在一些实施例中，MIF拮抗剂为来源于和/或并有MIF氨基酸 残基Nlll、S112和Τ113中的任何残基或全部的肽。用于鉴别破坏MIF三聚化的药剂的分析在一些实施例中，鉴别破坏MIF结构域三聚化的肽。在一些实施例中，破坏MIF结 构域三聚化的肽不会影响在CXCR2和CXCR4处发生的与MIF无关的信号传导事件。在一 些实施例中，使用任何适合的方法(例如HTS GPCR筛选技术)，针对抑制MIF经由CXCR2 和C)(CR4进行的信号传导，筛选来源于任何上述氨基酸序列(例如MIF的氨基酸残基 38-44 ( β -2链)、MIF的氨基酸残基48-50 ( β _3链)、MIF的氨基酸残基96-102 ( β _5链)、 MIF的氨基酸残基107-109 (β-6链)、MIF的氨基酸残基N73、R74、S77、K78和C81，和/或 MIF的氨基酸残基Nlll、S112和T113)的肽和/或多肽。在一些实施例中，使用来源于任何上述氨基酸序列(例如MIF的氨基酸残基 38-44 ( β -2链)、MIF的氨基酸残基48-50 ( β _3链)、MIF的氨基酸残基96-102 ( β _5链)、 MIF的氨基酸残基107-109 (β-6链)、MIF的氨基酸残基N73、R74、S77、K78和C81，和/或 MIF的氨基酸残基Nlll、S112和Tl 13)的肽和/或多肽作为“模型”来进行结构_活性关 系(SAR)化学。在一些实施例中，SAR化学得到较小肽。在一些实施例中，较小肽得到可破 坏MIF形成同源三聚体的能力的小分子(例如，通过找出破坏MIF形成同源三聚体的能力 所涉及的氨基酸残基)。在一些实施例中，MIF拮抗剂是SiRNA分子，和/或与MIF基因互补的反义分子， 和/或MIF RNA序列。在一些实施例中，siRNA和/或反义分子使MIF mRNA和/或蛋白质 的含量或半衰期减小至少约5 %、至少约10 %、至少约20 %、至少约30 %、至少约40 %、至少 约50%、至少约60%、至少约80%、至少约90%、至少约95%或实质上100%。结合CXCR2和CXCR4的拮抗剂在某些实施例中，本文公开抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导的方法。 在一些实施例中，通过用小分子或肽占据CXCR2和CXCR4的MIF结合结构域(即GPCR拮抗 剂法)，来抑制MIF经由CXCR2和CXCR4进行的信号传导。在一些实施例中，MIF拮抗剂是羟基肉桂酸酯衍生物、基于希夫碱(Schiff)的色 氨酸类似物或对乙酰氨基酚(acetaminophen)的亚氨基-苯醌代谢物。在一些实施例中，MIF拮抗剂是磺酰脲(glyburide)、丙磺舒(probenicide)、 DIDS (4,4- 二异硫氰酸芪 _2，2- 二磺酸)、布美他尼(bumetanide)、呋塞米(furosemide)、磺溴酞(sulfobromophthalein)、二苯胺-2-甲酸、氟灭酸(flufenamic acid)或其组合。在一些实施例中，CXCR2拮抗剂是选自 Q(CL8(3_74)K11R/G31P ；IL_8(4_72) ；IL_8(6_72)； 重组IL-8 (rIL-8)；重组DL-8，^eLeu (在25位具有N-甲基化亮氨酸的rhIL_8)； (AAR) IL-8 (N 端 Ala4-Ala5 替换为 Glu4_Leu5 的 IL-8) ；GRO- α (1_73)(也称为 CXCL1)； GRO-α (4_73) ； GRO- α (5_73) ；GRO- α (6_73)；重组 GRO(rGRO) ； (ELR) PF4 (N 端具有 ELR 序列的 PF4)；重组 PF4(rPF4)；安瘤克；Sch527123 (-羟基-N，N-二甲基-3-{2-[[ (R)-1-{5-甲 基-呋喃-2-基)_丙基]氨基]-3，4-二氧-环丁-1-烯基氨基}-苯甲酰胺)；N-(3-(氨 磺酰基)-4-氯-2-羟基苯基)-N ‘ -(2，3- 二氯苯基)脲；SB-517785-M(GSK) ；SB 265610 (N-(2-溴苯基)-N' - (7-氰基-IH-苯并三唑-4-基)脲)；SB225002 (N-(2-溴苯 基)-N' -(2-羟基-4-硝基苯基)脲)；SB455821 (GSK)、SB272844(GSK) ；DF2162(三氟甲 烷磺酸4-[(1 -2-氨基-1-甲基-2-氧乙基]苯酯)；热帕瑞欣；或其组合。在一些实施例中，CXCR4拮抗剂是ALX40-4C(N_a-乙酰基-九-D-精氨酸 酰胺乙酸盐)；AMD-070(AMD11070、AnorMED)；普乐沙福(Plerixafor) (AMD3100)； AMD3465 (AnorMED) ；AMD8664(1_ 吡啶-2-基-N-W-(1，4，7-三氮杂环十四烷-4-基甲 基)苄基]甲胺)；KRH-1636(吴羽化学工业株式会社(Kureha Chemical Industry Co. Limited)) ；KRH-2731 (吴羽化学工业株式会社)；KRH-3955 (吴羽化学工业株式 会社)；KRH-3140(吴羽化学工业株式会社)；T134(C端酰胺经羧酸取代的L-瓜氨酸 16-TW70) ；T22([Tyr5'12, Lys7]-鲎肽 II (polyphemusin II)) ；TW70 (脱-[Cys8，13，Tyr9, 12]-[D-LyslO, Proll]-T22) ；T140(H-Arg-Arg-Nal-Cys-Tyr-Arg-Lys-DLys-Pro-Tyr-Arg-Cit-Cys-Arg-OH) ；TC14012 (R-R-Nal-C-Y-(L) Cit-K-(D) Cit-P-Y-R-(L)瓜氨酸-C-R-NH2， 其中Nal = L-3-(2-萘基苯胺)，Cit =瓜氨酸，且所述肽与半胱氨酸成环)；TN14003; RCP168 (N 端添加有 D-氨基酸的 vMIP-11(11-71)) ；P0L3026 (Arg (*) -Arg-Nal (2) -Cys (Ix)-Tyr-Gln-Lys- (d-Pro) -Pro-Tyr-Arg-Cit-Cys (Ix) -Arg-Gly- (d-Pro) (*)) ；P0L2438 ；化合 物 3 (N- (1-甲基-1-苯乙基)-N-[ ((3S)-1-{2-[5- (4H-1，2，4-三唑-基-4-基)-IH-吲 哚-3-基]乙基}吡咯烷-3-基)甲基]胺)；异硫脲Ia-Iu(有关异硫脲Ia-Iu的形 成，参见吉伯哈德托马(GelAard Thoma)等人，口服生物可用性异硫脲在体外和体内阻断 趋化因子受体 CXCR4 的功能(Orally Bioavailable Isothioureas Block Function of theChemokine Receptor CXCR4 In Vitro and hi Vivo)，药物化学杂志(J. Med. Chem.)，即 将发表的论文(2008)，所述文献的公开内容以引用的方式并入本文中)；或其组合。 在一些实施例中，MIF拮抗剂可抑制(部分或完全)MIF结合于CXCR2和/或CXCR4 的能力。在一些实施例中，MIF拮抗剂是C0R100140(健生科技公司(Genzyme Corp)/卡提 克有限公司(Cortical Pty Ltd.)) ； IS0-1 ((S，R)-3-(4-羟基苯基)-4，5-二氢-5-异噁唑 乙酸甲酯)；4-IPP(4-碘-6-苯基嘧啶)；或其组合。在一些实施例中，MIF拮抗剂是来源 于CXCR2和/或CXCR4的肽。在一些实施例中，小分子、肽和/或抗体拮抗剂可抑制生物活性形式MIF的 释放。在一些实施例中，小分子、肽和/或抗体拮抗剂可抑制类固醇诱导的、TNFa诱 导的、IFN-Y诱导的和内毒素诱导的MIF释放(例如从巨噬细胞、肺、ATP结合序列盒 (ATP-bindingcassette, ABC)转运体释放)。MIF模拟物
在一些实施例中，本文公开的方法和组合物包含类MIF氧化还原活性肽，其模拟 MIF并抑制CXCR2和/或CXCR4的结合和信号传导。在一些实施例中，本文公开的方法和组合物包含呈现与MIF的N环基元类似的 结构或功能特征的小分子、肽和/或抗体。在一些实施例中，所述肽和/或多肽包含残基 L47M48A49F50G51G52S53S54E55和P56中的至少一者。在一些实施例中，小分子、肽和/或 抗体包含包括残基L47 M48 A49 F50 G51 G52 S53 S54 E55和P56中全部或一部分的人类 MIF的5到16个连续氨基酸。在一些实施例中，所述呈现与MIF的N环基元类似的结构或 功能特征的肽和/或多肽包含一个或多个选自表1的肽。在一些实施例中，所述肽和/或 多肽包含用于改进ADME-PK的N端和/或C端化学修饰。在一些实施例中，所述肽和/或 多肽包含非天然氨基酸。在一些实施例中，所述肽和/或多肽包含环状变体。
权利要求
1.一种利用治疗有效量的活性剂治疗有需要的个体的MIF介导的病症的方法，所述活 性剂抑制(i)MIF与CXCR2和/或CXCR4的结合；(ii)MIF对CXCR2和/或CXCR4的活化； (iii)MIF形成同源多聚体的能力；(iv)MIF与⑶74的结合；或其组合。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述活性剂特异性结合于MIF的假ELR基元的全 部或一部分，或与MIF的假ELR基元竞争。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述活性剂特异性结合于MIF的N环基元的全部 或一部分，或与MIF的N环基元竞争。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述活性剂特异性结合于MIF的所述假ELR基元 和N环基元的全部或一部分。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述活性剂选自CXCR2拮抗剂、CXCR4拮抗剂、MIF 拮抗剂或其组合。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述活性剂选自C)(CL8(3-74) Kl 1R/G31P ； kh527123 ;N-(3-(氨磺酰基)-4-氯-2-羟苯基)-N' -(2，3-二氯苯基)脲；IL-8(1_72)； (R) IL-8 ； (R) IL-8, NMeLeu ； (AAR) IL-8 ；GRO α t(l-73) ； (R) GRO α ； (ELR) PF4 ； (R) PF4 ； SB-265610 ；安瘤克(Antileukinate) ；SB-517785-M ；SB 265610 ；SB225002 ；SB455821 ； DF2162 ；热帕瑞欣(Reparixin) ；ALX40-4C ；AMD-070 ；AMD3100 ；AMD3465 ；KRH-1636 ； KRH-2731 ；KRH-3955 ；KRH-3140 ；Τ134 ；Τ22 ；Τ140 ；TC14012 ；ΤΝ14003 ；RCP168 ；P0L3026 ； CTCE-0214 ；C0R100140 ；或其组合。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述活性剂是特异性结合于MIF的所述假ELR基 元的全部或一部分的肽；特异性结合于MIF的所述N环基元的全部或一部分的肽；特异性 结合于所述假ELR基元和N环基元的全部或一部分的肽；抑制MIF与CXCR2结合的肽；抑 制MIF与CXCR4结合的肽；抑制MIF与JAB-I结合的肽；抑制MIF与⑶74结合的肽；特异性 结合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及 MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；模拟以下肽序列的肽PRASVPDGF LSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构 域；特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF单体或 MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；模拟以下肽序列的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL 以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；特异性结合于以下肽序列的 全部或一部分的肽:PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；模拟以下肽序列的肽PRASVPDGFLS ELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 单体或 MIF 三聚体中至少一者 的相应特征/结构域；特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的肽FGGSSEPCALCSLHSI 以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；模拟以下肽序列的肽 FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；或其组合。
8.根据权利要求1所述的方法，其中在投予本文公开的活性剂后，巨噬细胞成为泡沫 细胞的转化受到抑制。
9.根据权利要求1所述的方法，其中在投予本文公开的活性剂后，心肌细胞的凋亡受 到抑制。
10.根据权利要求1所述的方法，其中在投予本文公开的活性剂后，浸润巨噬细胞的凋亡受到抑制。
11.根据权利要求1所述的方法，其中在投予本文公开的活性剂后，腹部主动脉瘤的形 成受到抑制。
12.根据权利要求1所述的方法，其中在投予本文公开的活性剂后，腹部主动脉瘤的直 径减小。
13.根据权利要求1所述的方法，其中在投予本文公开的活性剂后，动脉瘤中的结构蛋 白得以再生。
14.根据权利要求1所述的方法，其进一步包含共投予第二活性剂。
15.根据权利要求1所述的方法，其进一步包含共投予烟酸、贝特(fibrate)、他汀 (statin) ,Apo-Al模拟肽(例如DF-4，诺华公司(Novartis))、apoA_I转录上调剂、ACAT抑 制剂、CETP调节剂、糖蛋白(GP) Ilb/IIIa受体拮抗剂、P2Y12受体拮抗剂、Lp_PLA2抑制剂、 抗TNF剂、IL-I受体拮抗剂、IL-2受体拮抗剂、细胞毒性剂、免疫调节剂、抗生素、T细胞共 刺激阻断剂、改良病症的抗风湿剂、B细胞消耗剂、免疫抑制剂、抗淋巴细胞抗体、烷化剂、抗 代谢物、植物碱、类萜、拓扑异构酶抑制剂、抗肿瘤抗生素、单克隆抗体、激素疗法或其组合。
16.根据权利要求1所述的方法，其中所述MIF介导的病症是动脉粥样硬化；腹部主动 脉瘤；急性播散性脑脊髓炎；烟雾病(Moyamoya disease)；高安氏病(Takayasudisease)； 急性冠状动脉综合症；心脏同种异体移植物血管病变；肺炎；急性呼吸窘迫综合症；肺纤 维化；急性播散性脑脊髓炎；爱迪森氏病(Addison' s disease)；强直性脊柱炎；抗磷 脂抗体综合症；自体免疫性溶血性贫血；自体免疫性肝炎；自体免疫性内耳病；大疱性类 天疱疮；查格斯病(Chagas disease)；慢性阻塞性肺病；腹腔疾病；皮肌炎；1型糖尿病； 2型糖尿病；子宫内膜异位症；古巴士德氏综合症(Goodpasture' s syndrome)；格雷夫 斯氏病(Graves，disease)；格林-巴利综合症(Gui 1 Iain-Barresyndrome)；桥本氏病 (Hashimoto' s disease)；特发性血小板减少性紫癜；间质性膀胱炎；全身性红斑狼疮 (SLE)；代谢综合症；多发性硬化症；重症肌无力；心肌炎；发作性睡病；肥胖症；寻常性天 疱疮；恶性贫血；多发性肌炎；原发性胆汁性肝硬化；类风湿性关节炎；精神分裂症；硬皮 病；修格连氏综合症(Sjogren's syndrome)；血管炎；白癜风；韦格纳肉芽肿(Wegener' s granulomatosis)；过敏性鼻炎；前列腺癌；非小细胞肺癌；卵巢癌；乳癌；黑色素瘤 ’胃癌； 结肠直肠癌；脑癌；转移性骨病；胰腺癌；淋巴瘤；鼻息肉；胃肠癌；溃疡性结肠炎；克隆恩 氏病(Crohn' s disorder)；胶原性结肠炎；淋巴细胞性结肠炎；缺血性结肠炎；改道性结 肠炎；贝塞特氏综合症(Behcet's syndrome)；感染性结肠炎；未定型结肠炎；发炎性肝病； 内毒素休克；脓毒症休克；类风湿性脊柱炎；强直性脊柱炎；痛风性关节炎；类风湿性多肌 痛；阿尔茨海默氏症(Alzheimer' s disorder)；帕金森氏症(Parkinson' s disorder)； 癫痫；艾滋病痴呆；哮喘；成人呼吸窘迫综合症；支气管炎；囊性纤维化；急性白细胞介导 性肺损伤；远端直肠炎；韦格纳肉芽肿；纤维肌痛；支气管炎；葡萄膜炎；结膜炎；牛皮癣； 湿疹；皮肤炎；平滑肌增殖病症；脑膜炎；带状疱疹；脑炎；肾炎；结核病；视网膜炎；异位性 皮炎；胰腺炎；齿龈炎；凝固性坏死；液化性坏死；纤维蛋白样坏死；血管内膜增生；心肌梗 塞；中风；器官移植排斥；或其组合。
17.一种用于治疗有需要的个体的MIF介导的病症的医药组合物，其至少包含活性剂， 所述活性剂抑制(i)MIF与CXCR2和CXCR4的结合；和/或(ii)MIF对CXCR2和CXCR4的活化；(iii)MIF形成同源多聚体的能力；或其组合。
18.根据权利要求17所述的组合物，其中所述活性剂特异性结合于MIF的假ELR基元 的全部或一部分。
19.根据权利要求17所述的组合物，其中所述活性剂特异性结合于MIF的N环基元的 全部或一部分。
20.根据权利要求17所述的组合物，其中所述活性剂特异性结合于MIF的所述假ELR 基元和N环基元的全部或一部分。
21.根据权利要求17所述的组合物，其中所述活性剂选自CXCR2拮抗剂、CXCR4拮抗 剂、MIF拮抗剂或其组合。
22.根据权利要求17所述的组合物，其中所述活性剂选自CXCL8(3-74)K11R/G31P； kh527123 ;N-(3-(氨磺酰基)-4-氯-2-羟苯基)-N' -(2，3-二氯苯基)脲；IL-8(1_72)； (R)IL-8 ； (R)IL-8, NMeLeu ； (AAR)IL-8 ；GRO α (1-73) ； (R)GRO α ；(ELR) PF4； (R)PF4 ； SB-265610 ；安瘤克；SB-517785-M ;SB 265610 ；SB225002 ；SB455821 ；DF2162 ；热帕瑞欣； ALX40-4C；AMD-070 ；AMD3100 ；AMD3465 ；KRH-1636 ；KRH-2731 ；KRH-3955 ；KRH-3140 ；T134 ； T22 ；T140 ；TC14012 ；TN14003 ；RCP168 ；P0L3026 ；CTCE-0214 ；C0R100140 ；或其组合。
23.根据权利要求17所述的组合物，其中所述活性剂是特异性结合于MIF的所述假 ELR基元的全部或一部分的肽；特异性结合于MIF的所述N环基元的全部或一部分的肽；特 异性结合于所述假ELR基元和N环基元的全部或一部分的肽；抑制MIF与CXCR2结合的肽； 抑制MIF与CXCR4结合的肽；抑制MIF与JAB-I结合的肽；特异性结合于以下肽序列的全 部或一部分的肽:PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQ以及MIF单体或MIF三聚体中 至少一者的相应特征/结构域；模拟以下肽序列的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVH VVPDQ以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；特异性结合于以下肽 序列的全部或一部分的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的 相应特征/结构域；模拟以下肽序列的肽DQLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF单体或MIF三聚 体中至少一者的相应特征/结构域；特异性结合于以下肽序列的全部或一部分的肽PRASV PDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPDQLMAFGGSSEPCALCSL 以及 MIF 单体或 MIF 三聚体中至少 一者的相应特征/结构域；模拟以下肽序列的肽PRASVPDGFLSELTQQLAQATGKPPQYIAVHVVPD QLMAFGGSSEPCALCSL以及MIF单体或MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；特异性 结合于以下肽序列的全部或一部分的肽FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF单体或MIF三聚体中 至少一者的相应特征/结构域；模拟以下肽序列的肽FGGSSEPCALCSLHSI以及MIF单体或 MIF三聚体中至少一者的相应特征/结构域；或其组合。
24.根据权利要求17所述的组合物，其进一步包含第二活性剂。
25.根据权利要求17所述的组合物，其进一步包含烟酸、贝特、他汀、Apo-Al模拟肽 (例如DF-4，诺华公司)、apoA-I转录上调剂、ACAT抑制剂、CETP调节剂、糖蛋白(GP) IIb/ IIIa受体拮抗剂、P2Y12受体拮抗剂、Lp_PLA2抑制剂、抗TNF剂、IL-I受体拮抗剂、IL-2受 体拮抗剂、细胞毒性剂、免疫调节剂、抗生素、T细胞共刺激阻断剂、改良病症的抗风湿剂、B 细胞消耗剂、免疫抑制剂、抗淋巴细胞抗体、烷化剂、抗代谢物、植物碱、类萜、拓扑异构酶抑 制剂、抗肿瘤抗生素、单克隆抗体、激素疗法或其组合。
全文摘要
在某些实施例中，本文公开一种治疗MIF介导的病症的方法。在一些实施例中，所述方法包含投予一种活性剂，所述活性剂可抑制(i)MIF与CXCR2和CXCR4的结合，和/或(ii)MIF对CXCR2和CXCR4的活化；(iii)MIF形成同源多聚体的能力；或其组合。
文档编号A61P9/10GK102088993SQ200980109328
公开日2011年6月8日 申请日期2009年3月20日 优先权日2008年3月20日
发明者乔舒亚·罗伯特·舒尔茨, 于尔根·伯恩哈根, 克里斯蒂安·韦伯, 贝内迪克特·福尔拉特, 阿尔玛·策内克 申请人:卡罗勒斯治疗公司