专利名称：一种榄香烯微乳的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及抗肿瘤药物榄香烯的微乳制剂。
(二)
背景技术：
榄香烯(Elemene)是从中药提取分离的抗癌药物，已上市10多年，疗效确切，毒副 作用轻微，是全球化学名独家药品，是国家"七五"、"八五"、"九五"、"十五"攻关项目、国家 基本药物、国家医保药物、国家药典药品、国内首个经循证医学(EBM)系统评价证实安全有 效、分子量最小的靶向抗肿瘤植物药。它是传统中药"浙八味"之一温郁金提取的有效抗癌 活性成份，由碳、氢两种元素组成的倍半萜烯类化合物，主要成分为e-榄香烯。榄香烯是 一种疗效确切的非细胞毒性抗肿瘤药物，具有良好的抗癌活性。与具有细胞毒性的化疗药 物相比，榄香烯毒副作用轻微，没有明显的心、肝、肾功能损害，不发生骨髓抑制。但有一定 剌激性和副作用，主要表现为(l)静脉炎；(2)发热；(3)剌激性胸腹痛。该药来源于中药 温郁金和莪术。榄香烯现有剂型有榄香烯注射液、口服液两种。这些制剂主要通过静脉滴 注或口服给药，为传统剂型和经典给药途径。榄香烯是脂溶性药物，难溶于水。榄香烯现有 口服制剂首过效应明显，生物利用度较低。以上问题给患者和医护人员带来相应痛苦和不 便，使该药在临床使用上受到限制。克服榄香烯水溶性缺点提高生物利用度的同时减少其 毒副作用是目前亟待解决的问题。 微乳(micro emulsion,ME)是水、油、表面活性剂和助表面活性剂按适当的比例混 合，自发形成的各向同性、透明、热力学稳定的分散体系。由于除了具有乳剂的一股特征外， 还具有粒径小，透明，稳定等特殊优点，在药物制剂及临床方面的应用也日益广泛，目前，微 乳是一新型理想的药物释放载体。具有透明、稳定、生物利用度高、耙向释药等特点，并提高 了药物疗效，降低毒副作用。临床应用价值日益提高，具有很大的发展前景。 一股普通的乳 剂液滴在0. 1 10 ii m之间，形成不透明的乳白色液体。若液滴粒径在0. 1 1. 5 ii m时成 为亚微乳，静脉注射乳剂即为亚微乳；若液滴粒径在0. 01 0. 1 ii m时成为微乳或胶束乳， 这时的乳剂粒径在胶体分散系范围，形成透明或半透明的液体。 将榄香烯制成微乳剂型是解决其临床口服生物利用度低，水不溶性的缺点的一种 途径，使血药浓度更平稳，降低毒副作用，提高患者依从性。
(三)
发明内容
本发明目的是提供一种榄香烯微乳，以提高榄香烯的生物利用度并减少毒副作 用。 为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案 —种榄香烯微乳，由各原料组分按一定配比投料制成，所述的原料组分包括榄香 烯、表面活性齐U、助表面活性剂以及水或pH范围在5 8的缓冲液；所述的表面活性剂选自 下列一种或任意几种任意比例的混合吐温类表面活性剂、聚氧乙烯蓖麻油类、聚乙二醇硬
脂酸酯类表面活性剂；所述的助表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的混合乙醇、l，3-丙二醇、甘油；所述的缓冲液选自下列之一 磷酸盐缓冲液、乙醇-醋酸缓冲液、三 羟甲基氨基甲烷缓冲液、邻苯二甲酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、枸橼酸_磷酸氢二钠缓冲 液、氨-氯化铵缓冲液、醋酸盐缓冲液、醋酸-醋酸纳缓冲液、醋酸-醋酸铵缓冲液、磷酸-三 乙胺缓冲液；所述榄香烯微乳的pH范围在5 8;所述的榄香烯微乳中榄香烯的浓度为1
5g/mi，其中榄香烯表面活性剂助表面活性剂的投料比为i 5质量份i 40质量 份i 40体积份。优选的，所述榄香烯表面活性剂助表面活性剂的投料比为i 5
质量份5 40质量份5 40体积份。本发明所述的质量份/体积份的单位为g/ml。
本发明所述的榄香烯微乳，在水以及pH范围在5 8的缓冲液的选择时，一股当 榄香烯、表面活性剂、助表面活性剂等物质混合后PH范围在5 8，则可选择加入水，若pH 范围不在5 8，则需选择加入pH范围5 8的缓冲液进行调节。 本发明所述的表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的混合吐温类表 面活性剂、聚氧乙烯蓖麻油类、聚乙二醇硬脂酸酯类表面活性剂，所述的吐温类表面活性剂 包括吐温80、吐温20 ;所述的聚氧乙烯蓖麻油类表面活性剂包括聚氧乙烯蓖麻油及其衍 生物；所述的聚乙二醇硬脂酸酯类包括聚乙二醇硬脂酸酯及其衍生物。本发明优选所述 的表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的混合吐温80、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙 二醇-12-羟基硬脂酸酯，更优选下列两种以上的混合吐温80、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二 醇-12-羟基硬脂酸酯。 本发明所述的原料组分还可以包括抗氧化剂，所述的抗氧化剂与榄香烯的投料质 量比为0 0.05 : 1 5，所述的下限"0"表示无限趋近于零，但不为零；所述的抗氧化剂
可选自下列一种或任意几种的混合物亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、没 食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚、二叔丁基对甲酚、维生素E、维生素 C、半胱氨酸、蛋氨酸、枸橼酸、苹果酸、山梨醇、抗坏血酸棕榈酸酯、乙醇胺、磷脂。抗氧化剂 的加入对于微乳的形成影响不大。 本发明所述的原料组分还可以包括防腐剂，所述的防腐剂与榄香烯的投料质量比 为0 0.05 : 1 5，所述的下限"0"表示无限趋近于零，但不为零；所述的防腐剂可选自
下列之一 尼泊金酯类、山梨酸、山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐。优选防腐剂为尼泊金酯类，
如尼泊金甲酯、尼泊金乙酯等，更优选为尼泊金乙酯。防腐剂的形成对于微乳的形成影响不 大。 本发明的优选方案l如下 所述的榄香烯微乳由榄香烯、表面活性剂、助表面活性剂以及水制成，所述各原料
组分的投料量以榄香烯微乳的体积计表示如下 榄香烯 1 5g/100ml 表面活性剂 5 40g/100ml 助表面活性剂 5 40ml/100ml 余量为水 所述的表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的组合吐温80、聚氧乙烯 蓖麻油、聚乙二醇_12-羟基硬脂酸酯；所述的助表面活性剂选自下列一种或任意几种任意 比例的混合乙醇、l，3-丙二醇、甘油。
本发明的优选方案2:
5
所述的榄香烯微乳由榄香烯、表面活性剂、助表面活性剂、防腐剂以及水制成，所
述各原料组分的投料量以榄香烯微乳的体积计表示如下 榄香烯 l 5g/100ml 表面活性剂 5 40g/100ml 助表面活性剂 5 40ml/100ml 防腐剂 0. 01 0. 05g/100ml 余量为水； 所述的表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的组合吐温80、聚氧乙烯
蓖麻油、聚乙二醇_12-羟基硬脂酸酯；所述的助表面活性剂选自下列一种或任意几种任意
比例的混合乙醇、l，3-丙二醇、甘油；所述的防腐剂选自下列之一 尼泊金酯类、山梨酸、
山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐。 本发明的优选方案3如下 所述的榄香烯微乳由榄香烯、表面活性齐U、助表面活性齐IJ、抗氧化齐IJ、防腐剂以及 水或pH范围5 8的缓冲液制成，所述各原料组分的投料量以榄香烯微乳的体积计表示如 下 榄香烯 1 5g/100ml 表面活性剂 5 10g/100ml 助表面活性剂 5 25ml/100ml
抗氧化剂 0. 005 0. 03g/100ml 防腐剂 0. 01 0. 05g/100ml 余量为水或pH范围在5 8的缓冲液； 所述的表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的组合吐温80、聚氧乙烯 蓖麻油、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯；所述的助表面活性剂选自下列一种或任意几种任 意比例的组合乙醇、l，3-丙二醇、甘油；所述的抗氧化剂选自下列一种或任意几种的混合 物亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、没食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯、叔 丁基对羟基茴香醚、二叔丁基对甲酚、维生素E、维生素C、半胱氨酸、蛋氨酸、枸橼酸、苹果 酸、山梨醇、抗坏血酸棕榈酸酯、乙醇胺、磷脂；所述的防腐剂选自下列之一 尼泊金酯、山 梨酸、山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐。
本发明所述的"水"为蒸馏水或纯化水或注射用水。 进一步，本发明优选所述的榄香烯微乳由榄香烯、乙醇、甘油、l，3-丙二醇、吐温 80、尼泊金乙酯和纯化水制成，所述各原料组分的投料量以榄香烯微乳的体积计表示如 下乳榄香烯lg/100ml，乙醇5ml/100ml，甘油15ml/100ml， 1， 3-丙二醇15ml/100ml，吐温 805g/100ml，尼泊金乙酯50mg/100ml，余量为纯化水。 本发明所述的榄香烯微乳可采用下列方法中的一种或两种以上结合使用进行制 备搅拌法、超声法、高压均质法、高速乳匀法。优选采用超声法、高压均质法，超声法、高压 均质法有助于微乳的形成与减少辅料用量。 本发明具体推荐所述的榄香烯微乳通过如下方法制备按照一定配比取样，将部 分水或pH范围在5 8的缓冲液与其他原料组分混匀，室温下超声0. 1 2h，置冷至室温， 用O. 22iim微孔滤膜过滤，加入剩余部分的水或pH范围在5 8的缓冲液即得榄香烯微乳。
榄香烯微乳可用于恶性胸腹腔积液、脑癌、呼吸道、消化道肿瘤、妇科肿瘤、乳腺 癌、皮肤癌、骨转移癌、淋巴癌、白血病等多种恶性肿瘤。 本发明的优点有解决了榄香烯水不溶性缺点，提高了生物利用度，使血药浓度更 平稳，与现有制剂相比降低了毒副作用，同时间接提高了化疗药物榄香烯的疗效，增强了其 抗肿瘤作用；而且口服方便，剂量准确，有利于提高患者依从性；直接以榄香烯挥发油作为 油相，节省原料与成本，简化工艺，制备简单，易于产业化；各种配方成分均为生理相容性物 质，安全且易购，通过调整处方中原料的量，可制得榄香烯微乳，并可控制粒径大小，以适应 各种给药途径及用药要求。
(四)
图1是实施例6所得榄香烯微乳与乳剂血浆药时曲线。
(五)
具体实施例方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步说明，此处的具体实施方案仅是举例说
明，而不是以任何方式限制本发明的范围。
实施例1 处方榄香烯lg，乙醇5ml，甘油15ml，丙二醇15ml，吐温(80)5g，尼泊金乙酯 50mg，纯化水至100ml。 制备工艺将处方量榄香烯、吐温80、尼泊金乙酯、乙醇、甘油、丙二醇混匀，加入 60ml水中，混合均匀，室温下超声lh，置冷至室温，用0. 22 ii m微孔滤膜过滤，加纯化水调整 容量至100ml，分装即得榄香烯微乳。所制得的微乳pH为5. 4，粘度6mPa s，表面张力为 32. lmN/m，用激光粒度仪测定榄香烯微乳平均粒径，为67nm。
实施例2 处方榄香烯lg，乙醇5ml，甘油10mL，吐温(80) 5g，聚氧乙烯蓖麻油(EL) 1. 25g， 尼泊金乙酯50mg，纯化水至100ml。 制备工艺将处方量榄香烯、吐温(80)、聚氧乙烯蓖麻油(EL)、尼泊金乙酯溶解于 乙醇、甘油中，再加入纯化水50ml搅拌混合均匀，室温下超声lh，置冷至室温，用0. 22 ii m微 孔滤膜过滤，加水调整容量至100ml，分装即得榄香烯微乳。所制的的微乳pH为5. 26，粘 度4mPa s，表面张力为34. 7mN/m，粒径为54nm。
实施例3 处方榄香烯lg，乙醇5ml，甘油10mL，丙二醇5mL，吐温(80)2. 5g，聚氧乙烯蓖麻 油(EL)3. 75g，维生素C 25mg，尼泊金乙酯50mg，0. 1M磷酸盐缓冲液(pH7. 0)至100ml。
制备工艺将处方量榄香烯、吐温(80)、聚氧乙烯蓖麻油(EL)、尼泊金乙酯溶于乙 醇、甘油、丙二醇混合均匀，维生素C溶解于PBS缓冲液50ml中，油相加入水相搅拌混合均 匀，室温下超声lh，置冷至室温，用0. 22 ii m微孔滤膜过滤，加缓冲液调整容量至100ml，分 装即得榄香烯微乳。所制得的微乳PH为6. 84，粘度5mPa s，表面张力为35. 6mN/m，粒径 为60nm。 实施例4 处方榄香烯5g，乙醇40ml，吐温(80) 30g，聚乙二醇_12_羟基硬脂酸酯(SolutolHS15)3g，纯水至100ml 。 制备工艺将处方量榄香烯、吐温(80) 、 Solutol HS15溶于乙醇混合均匀，加水 至80mL搅拌混合均匀，室温下超声lh，置冷至室温，用0. 22 ii m微孔滤膜过滤，加水调整容 量至100ml，分装即得榄香烯微乳。所制得的微乳pH为6. 35，粘度64mPa s，表面张力为 30. 0mN/m，粒径为72nm。
实施例5 处方榄香烯lg，乙醇20ml， Solutol (HS15)5g，纯水至100ml。
制备工艺将处方量榄香烯、Solutol HS15溶于乙醇混合均匀，加水至80mL搅拌 混合均匀，室温下超声lh，置冷至室温，用0. 22 ii m微孔滤膜过滤，加水调整容量至100ml， 分装即得榄香烯微乳。所制得的微乳PH为5. 43，粘度4mPa s，表面张力为32. 8mN/m，粒 径为64nm。 实施例6榄香烯微乳的相对生物利用度试验
1. 1动物给药与血样处理 取90只SD大鼠，体重140-200g，雌雄不限，随机分为榄香烯乳剂(大连华立金港
药业有限公司榄香烯口服乳，规格O. 2g/20mL，批号0904231)组与榄香烯微乳(实施例1，
批号09111901)组，按100mg/kg 口服给药，分别于给药后0，0. 5，1，1. 5，2，2. 5，3，4，6，8，
10， 12， 14， 18， 24h取血3 5mL，离心2000 X g， 4°C ， 10min，取血桨，4。C保存备用。取血桨
0. 5mL，加入乙月青lmL，振荡5min，静置5min，离心14000 X g， 25°C ， 30min，取上清，用0. 22 ii m
一次性过滤器过滤，进样检测。 1. 2血浆药时曲线与相对生物利用度 绘制榄香烯乳剂与微乳的血浆药时曲线，见图1。 采用0riginPro 8. 0软件按积分计算AUC值，由于乳剂与微乳两组血药浓度在 24h后浓度为0，所以AUC。—她=AUC。—①，则AUC乳剂=2. 054 y g h mL—1 ;AUC微乳= 3. 423ii g *h *mL—、相对生物利用度F = AUC微乳XD乳剂/AUC乳剂XD微乳二 166. 7%，D乳剂为 榄香烯乳剂给药剂量，D微乳为榄香烯微乳给药剂量。Cmax微乳二 1. 820 y g mL—、 Cmax乳剂 =1.395i!g*mL—、结果发现，与榄香烯乳剂相比，榄香烯微乳的相对生物利用度有较大提 高，达166.7%，峰浓度提高了 1.4倍。
8
权利要求
一种榄香烯微乳，由各原料组分按一定配比投料制成，其特征在于所述的原料组分包括榄香烯、表面活性剂、助表面活性剂以及水或pH范围在5～8的缓冲液；所述的表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的混合吐温类表面活性剂、聚氧乙烯蓖麻油类表面活性剂、聚乙二醇硬脂酸酯类表面活性剂；所述的助表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的混合乙醇、1，3-丙二醇、甘油；所述的缓冲液选自下列之一磷酸盐缓冲液、乙醇-醋酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、邻苯二甲酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液、氨-氯化铵缓冲液、醋酸盐缓冲液、醋酸-醋酸纳缓冲液、醋酸-醋酸铵缓冲液、磷酸-三乙胺缓冲液；所述榄香烯微乳的pH范围在5～8；所述的榄香烯微乳中榄香烯的浓度为1～5g/100ml，其中榄香烯∶表面活性剂∶助表面活性剂的投料比为1～5质量份∶1～40质量份∶1～40体积份，其中质量份/体积份的单位为g/ml。
2. 如权利要求1所述的榄香烯微乳，其特征在于所述的表面活性剂选自下列一种或几 种任意比例的混合吐温80、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯。
3. 如权利要求1或2所述的榄香烯微乳，其特征在于所述的原料组分还包括抗氧化剂， 所述的抗氧化剂与榄香烯的投料质量比为0 0.05 : 1 5;所述的抗氧化剂选自下列一 种或任意几种的混合物亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、没食子酸丙酯、 抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚、二叔丁基对甲酚、维生素E、维生素C、半胱氨酸、 蛋氨酸、枸橼酸、苹果酸、山梨醇、抗坏血酸棕榈酸酯、乙醇胺、磷脂。
4. 如权利要求1或2所述的榄香烯微乳，其特征在于所述的原料组分还包括防腐剂，所 述的防腐剂与榄香烯的投料质量比为0 0.05 : 1 5;所述的防腐剂选自下列之一尼 泊金酯类、山梨酸、山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐。
5. 如权利要求1所述的榄香烯微乳，其特征在于所述的榄香烯微乳由榄香烯、表面活 性剂、助表面活性剂以及水制成，所述各原料组分的投料量以榄香烯微乳的体积计表示如下榄香烯 1 5g/100ml表面活性剂 5 40g/100ml助表面活性剂 5 40ml/100ml余量为水所述的表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的组合吐温80、聚氧乙烯蓖麻 油、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯；所述的助表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的混合乙醇、l，3-丙二醇、甘油。
6. 如权利要求1所述的榄香烯微乳，其特征在于所述的榄香烯微乳由榄香烯、表面活性剂、助表面活性剂、防腐剂以及水制成，所述各原料组分的投料量以榄香烯微乳的体积计表示如下榄香烯 1 5g/100ml表面活性剂 5 40g/100ml助表面活性剂 5 40ml/100ml防腐剂 0. 01 0. 05g/100ml余量为水；所述的表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的组合吐温80、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯；所述的助表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例 的混合乙醇、l，3-丙二醇、甘油；所述的防腐剂选自下列之一尼泊金酯类、山梨酸、山梨 酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐。
7. 如权利要求1所述的榄香烯微乳，其特征在于所述的榄香烯微乳由榄香烯、表面活性剂、助表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂以及水或pH范围在5 8的缓冲液制成，所述各原料组分的投料量以榄香烯微乳的体积计表示如下榄香烯 1 5g/100ml表面活性剂 5 10g/100ml助表面活性剂 5 25ml/100ml抗氧化剂 0. 005 0. 03g/100ml防腐剂 0. 01 0. 05g/100ml余量为水或pH范围在5 8的缓冲液；所述的表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的组合吐温80、聚氧乙烯蓖麻 油、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯；所述的助表面活性剂选自下列一种或任意几种任意比例的组合乙醇、l，3-丙二醇、甘油；所述的抗氧化剂选自下列一种或任意几种的混合物亚 硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、没食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚、二叔丁基对甲酚、维生素E、维生素C、半胱氨酸、蛋氨酸、枸橼酸、苹果酸、山 梨醇、抗坏血酸棕榈酸酯、乙醇胺、磷脂；所述的防腐剂选自下列之一 尼泊金酯、山梨酸、 山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐。
8. 如权利要求1所述的榄香烯微乳，其特征在于所述的榄香烯微乳由榄香烯、乙醇、 甘油、l，3-丙二醇、吐温80、尼泊金乙酯和纯化水制成，所述各原料组分的投料量以榄香烯 微乳的体积计表示如下榄香烯lg/100ml，乙醇5ml/100ml，甘油15ml/100ml， 1， 3-丙二醇 15ml/100ml，吐温80 5g/100ml，尼泊金乙酯50mg/100ml，余量为纯化水。
9. 如权利要求1所述的榄香烯微乳，其特征在于所述的榄香烯微乳采用下列方法中的 一种或两种结合使用进行制备超声法、高压均质法。
10. 如权利要求9所述的榄香烯微乳，其特征在于所述的榄香烯微乳通过如下方法制 备按照一定配比取原料组分，将部分水或PH范围在5 8的缓冲液与其他原料组分混匀， 室温下超声0. 1 2h，置冷至室温，用0. 22 y m微孔滤膜过滤，加入剩余部分的水或pH范围 在5 8的缓冲液即得榄香烯微乳。
全文摘要
本发明公开了一种榄香烯微乳，由各原料组分按一定配比投料制成，所述的原料组分包括榄香烯、表面活性剂、助表面活性剂以及水或pH范围在5～8的缓冲液；所述的表面活性剂选自下列一种或任意几种的混合吐温类、聚氧乙烯蓖麻油类、聚乙二醇硬脂酸酯类；所述的助表面活性剂选自下列一种或任意几种的混合乙醇、1，3-丙二醇、甘油；所述榄香烯微乳的pH范围在5～8；所述的榄香烯微乳中榄香烯的浓度为1～5g/100ml，其中榄香烯∶表面活性剂∶助表面活性剂的投料比为1～5质量份∶1～40质量份∶1～40体积份，其中质量份/体积份的单位为g/ml。本发明提高了榄香烯的生物利用度，使血药浓度更平稳，与现有制剂相比降低了毒副作用，同时间接提高了化疗药物榄香烯的疗效，增强了其抗肿瘤作用。
文档编号A61K9/107GK101756900SQ20101011409
公开日2010年6月30日 申请日期2010年2月25日 优先权日2010年2月25日
发明者周广林, 曾昭武, 谢恬 申请人:杭州法善医药有限公司