专利名称：四逆散制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种四逆之证治疗药物四逆散的制备工艺。
背景技术：
四逆散的来源
四逆散来源于张仲景《伤寒论》第318条，原文是这样描述的少阴病，四逆，其人或咳， 或悸，或小便不利，或腹中痛，或泄利下重者，四逆散主之。四逆散方甘草(炙)枳实(破，水渍，炙干)柴胡芍药
上四味，各十分，捣筛，白饮和服方寸匕，日三服。咳者，加五味子、干姜各五分，并主下利；悸者，加桂枝五分；或小便不利者，加茯苓五分；腹中痛者，加附子一枚，炮另坼；泄利下重者，先以水五升，煮薤白三升，煮取三升，去滓，以散三方寸匕，内汤中，煮取一升半，分温再服。四逆散的组成及用法
四逆散是一首和解剂中调和寒热的方剂，其药物组成为甘草(炙)、枳实(破，水渍，炙干)、柴胡、芍药，上四味，各十分，捣筛(各50g，共为细末)。用法白饮和服方寸匕，日三服(每次服3g，温开水送下，日服3次)。四逆散的功效和主治
甘草系豆科多年生草本植物。味甘，平。入脾、胃、肺经。功效益气补中，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和药性。临床应用分“生用”与“蜜炙”之别。生用主治咽喉肿痛，痈疽疮疡，胃肠道溃疡，及解药毒、食物中毒等；蜜炙主治脾胃功能减退，大便溏薄，乏力发热以及咳嗽、心悸等。枳实为芸香科植物酸橙的幼果。5 6月间采摘幼果，自中部横切为两半，晒干或低温干燥。较小者可整体干燥。性微寒，味苦、辛、酸。归脾、胃大肠经。功能破气除痞，消积化滞。主治用于积滞内停、痞满胀痛、泻痢后重、大便不通、痰滞气阻胸痹。柴胡为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根。按性状不同，分别习称“北柴胡”及 “南柴胡”。春、秋二季采挖，除去茎叶及泥沙，干燥。北柴胡气微香，味微苦。南柴胡苦， 微寒。归肝、胆经。功能疏散风寒，疏肝解郁，升阳举陷。主治用于寒热往来、感冒发热等症。芍药为毛茛科植物芍药的干燥根。夏、秋二季采挖，洗净，除去头尾及细根，刮去外皮后置沸水中略煮，或先煮后刮去外皮，晒干。性微寒，味苦、酸，归肝，脾经。功能平肝止痛、养血调经、敛阴止汗。主治用于头痛眩晕、胁痛、腹痛，四肢挛痛、血虚萎黄、月经不调、 自汗、盗汗。四逆散全方功能主治透解郁热，疏肝理脾。用于热厥手足不温，脘腹肋痛，泄痢下重。用法用量开水冲泡或炖服，一次9g，一日2次。主治1、阳郁厥逆证手足不温，或腹痛，或泄利下重，脉弦。2、肝脾气郁证胁肋胀闷，脘腹疼痛，脉弦。本方常用于慢性肝炎、胆囊炎、胆石症、胆道蛔虫症，肋间神经痛、胃溃疡、胃炎、胃
3肠神经官能症、附件炎、输卵管阻塞、急性乳腺炎等输肝胆气郁，肝脾(或胆胃)不合者。可见，本方为疏肝解郁、调和肝脾的祖方。根据报道，胆囊炎胆石症、胆道蛔虫、肝炎、胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、胃粘膜异型增生、胃神经官能症、胃下垂、顽固性腹痛、过敏性肠炎、腹泻、痢疾、呕逆、月经不调、痛经、自主功能失调等均有用四逆散进行直接或辅助治疗的。此方使用范围之广，是其他方剂所不及的。本方临床运用十分广泛，实难以尽述， 几乎各系统的疾病，均有使用的可能，所以研究四逆散的工艺是有很大意义的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种四逆散制备工艺，通过对四逆散中药材进行提取、微波真空干燥灭菌及粉碎粒度的控制，克服原有工艺中的不足所造成药材灭菌不彻底及有效成分流失大的问题，提高产品的质量及稳定性，达到疗效的提高。本发明采用的技术方案是对四逆散中不稳定成分(芍药苷和柴胡皂苷)增加药材提取操作，并且采用高效液相色谱法和紫外分光光度法对提取物中有效成分芍药苷和柴胡皂苷进行含量测定，保证了提取工艺的提取效率和可行性；对用到的四味药材微波干燥灭菌，使药品灭菌更彻底、快速，有效成分流失少，药品质量得到很大的提高；通过对药材粗粉粒度进行控制，使药材更容易吸收，起效更快。本发明所述的四逆散制备工艺，包括如下步骤
(1)中药材的整理炮制
将柴胡、麸炒的枳壳、白芍、甘草4味药分别炮制成生产所需饮片；
(2)称量、配料
取步骤(1)的四味饮片按重量份称量，柴胡为40 80份，麸炒的枳壳为40 80份、 白芍为40 80份、甘草为40 80份，备用；
(3)柴胡的提取、浓缩
柴胡饮片提取柴胡皂苷的提取工艺步骤为，将步骤(2)称取的柴胡饮片加体积分数为70 %的乙醇在真空提取罐内加热回流提取，加醇量为柴胡饮片重量的8倍，提取温度为 55 60°C，提取两次，滤过，滤渣备用，滤液回收乙醇，合并滤液，滤液经贮罐抽至浓缩罐中，进行浓缩，控制浓缩条件，温度阳 60°C，真空度0. 05 0. 07MPa，浓缩至相对密度为 1.05 1. 10的浓缩液，备用；
(4)白芍的提取、浓缩
白芍饮片的提取工艺步骤为，将步骤(2 )称取的白芍饮片加体积分数为70 %的乙醇在真空提取罐内加热回流提取，加醇量为白芍饮片重量的8倍，提取温度为55 60°C，提取三次，滤过，滤渣备用，滤液回收乙醇，合并滤液，滤液经贮罐抽至浓缩罐中，进行浓缩，控制浓缩条件，温度55 60°C，真空度0. 05 0. 07MPa，浓缩至相对密度为1. 05 1. 10的浓缩液，备用；
(5)柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草的干燥、粉碎
将柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草净药材均勻铺在干燥盘上；置于微波真空干燥设备中干燥灭菌，然后将柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草进行粉碎，粉碎成最粗粉，备用；
(6)混合将步骤(5)获得的柴胡、白芍、麸炒的枳壳、甘草最粗粉倒入槽型混合机中，加入步骤 (3)获得的柴胡和步骤(4)获得的白芍药材浓缩液进行混合，依次慢慢加入，待浓缩液完全加入后，混合均勻； (7)干燥、粉碎
将步骤(6)获得的混有浓缩液的药材最粗粉放入微波真空干燥设备中干燥灭菌，干燥后取出，放入多功能粉碎分级机中进行粉碎，控制粗粉的粒度使其全部通过二号筛，但粗粉中混有能通过四号筛的不超过20wt% ；然后包装成品。所述的柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草净药材是以3 km的厚度均勻铺在干燥盘上，置于微波真空干燥机中干燥灭菌。所述的微波真空干燥条件为极限真空度为0. 08 MPa，工作频率为(M50±50)MHz， 输出功率为10kw，温度50 55°C。本发明所述的四逆散制备工艺，其具体步骤包括如下 1、中药材的整理炮制
1. 1柴胡取原药材，拣去杂草，除去残根老茎及杂质，洗净泥沙，润透，切段片，干
燥即得。1.2麸炒的枳壳将麸皮撒入热锅内，待冒烟时加入净枳壳片，至色深，筛去麸皮。 每枳壳100kg，用麸皮10kg。1. 3白芍取原药材除去杂质。大小分开浸泡，洗净，润透(以切面显光滑状为度)， 切圆片或薄片，干燥即得。1. 4甘草除去杂质，洗净，润透，切厚片2 4mm，干燥。2、称量、配料
按生产指令领取柴胡、麸炒的枳壳、白芍、甘草，核对品名、规格、批号、数量，发现中药材外观不合格，有霉斑或异物，应退回仓库，不得投料。在称量时，应先检查衡器是否有定期校验，并调整零点平衡后方可称量。逐料称出，并有专人核对。3、中药材的提取、浓缩、干燥和粉碎 3.1柴胡的提取、浓缩
通过考察不同工艺对柴胡皂苷提取率的影响确定柴胡饮片最佳提取工艺，即柴胡饮片加8倍量体积分数为70%的乙醇加热回流2 h (真空提取罐内提取，温度55 60°C)，滤过，滤渣备用，滤液回收乙醇，提取两次，合并滤液，滤液经贮罐抽至浓缩罐中，进行浓缩。控制浓缩条件，温度阳 60°C，真空度0. 05 0. 07MPa。浓缩至相对密度为1. 05 1. 10的浓缩液，备用。3. 2白芍的提取、浓缩
采用正交设计实验确定白芍饮片的最佳提取工艺，即白芍饮片加体积分数为70%的乙醇提取三次，时间为90min，加醇量为8倍(真空提取罐内提取，温度55 60°C)，滤过，滤渣备用，滤液回收乙醇，合并滤液，滤液回收乙醇，经贮罐抽至浓缩罐中，进行浓缩，控制浓缩条件，温度55 60°C，真空度0. 05 0. 07MPa。浓缩至相对密度为1. 05 1. 10的浓缩液， 3. 3柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳和甘草的干燥、粉碎
将柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草净药材以适宜厚度(约3 km)均勻铺在干燥盘上；置于微波真空干燥设备(极限真空度为0.08 MPa，工作频率为(M50士50)MHz，输出功率为IOkW)中干燥灭菌，温度50°C 55°C，时间40分钟，然后将柴胡药渣、白芍药渣、 麸炒的枳壳、甘草进行粉碎，粉碎成最粗粉，备用。4、制剂操作过程和工艺条件 4. 1混合
将柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草最粗粉倒入槽型混合机中中，加入柴胡和白芍药材浓缩液行混合，边加边搅拌，逐次慢慢加入，待浓缩液完全加入后，混合5 10 分钟，以保证其均勻性。4. 2干燥、粉碎
将混有浓缩液的药材最粗粉放入微波真空干燥设备(极限真空度为0. 08 MPa，工作频率为(M50士50)MHz，输出功率为IOkW)中干燥灭菌，温度50°C 55°C，时间60分钟。干燥后取出，放入多功能粉碎分级机中进行粉碎，控制粗粉的粒度使其全部通过二号筛，但混有能通过四号筛不超过20wt %，送检，备用。包装
将检验合格的药材粉按指定的包装规格进行包装。本发明四逆散制备工艺有三个创新点
创新点一增加柴胡和白芍药材的提取，药渣继续干燥磨粉
改进此工艺原因有三个一、白芍药材中的有效成分芍药苷和柴胡中的柴胡皂苷a为热敏性物质，容易在加热状态下受破坏，增加提取操作可避免其有效成分流失过大，保证药品质量；二、浸膏直接入药，有利于药物的吸收，提高药物的生物利用度。三、防止提取时其他有效成分未提取出来，影响产品质量，所以药材提取剩下药渣继续磨粉，与浸膏混合后制成成品。具体改进及研究如下 一、白芍的提取 1.白芍提取工艺的研究
白芍的有效成分之一为芍药苷，芍药苷属热敏性物质，在温度60°C时开始分解，而且温度越高，分解越快，故提取时控制提取温度为60°C以下。根据文献报道以体积分数为70% 的乙醇提得率最高。本发明将结论直接引用，采用正交设计的方法.考察不同加醇量、提取时间和提取次数对白芍药材中芍药苷提取率的影响。每个因素选择三个水平进行试验.因素水平见表1 :
表1白芍提取因素水平
序号A (提取次数)B (加醇量)C (提取时间)11次12倍45min22次10倍60min33次8倍90m in
根据表1拟定了 L9 (3广9次试验，分别取白芍药材饮片各50g共9份，按(3)4正交表的规定加一定量的醇液，提取规定的时间和次数，滤过，合并提取液，将提取液减压浓缩至稠膏，于真空干燥箱内55°C干燥，称重，计算收膏率，以收膏率为指标来确定最佳条件，试验结果及方差分析表见表2，3:
表2白芍提取正交设计表及实验结果^mmI1CD收膏率*11111L 4121222L 3 41 23 13 23 31_ 2·522312,7362312SLf31322,82K32132.4933212.71Ij §. .ΜDj7.396.76δ.* 6.66Gt"""Σ· f=mnm7.33fi.S77.31i.ii!.HiΟ.ΟΟΚ 0.0M4CT=G"/n= ,
因素B的离均差平方和比空白列的小许多，这表明该因素对实验结果没有影响或影响甚微，可以认为该列的离均差平方和是实验误差引起的，为了提高分析精度，把它合并在误差离均差平方和中一起作为实验误差，相应的自由度也合并在一起。
表3白芍提取方差分析表
灘擺平擁mm 描糧mm1L 9162 a 9, 266*拿Ci. 331*22 ILI651iS6 *"3 Ol 01444 0.003C
注:F0. 05 (2,4) =6. 94 F0. 01(2,4) =18. 00
结论直观分析及方差分析表明，因素A与因素C对试验结果有显著性，选取显著因素的最好水平，故选择A3、C3,不显著因素B为节省用醇量及节省工时，选择B3,最佳条件为 B3C3,即体积分数为70%的乙醇提取3次，时间为90min，加醇量为8倍。鉴于白芍总苷属热敏性物质，提取时采用减压提取，温度控制在 60°C。按此提取工艺条件验证三批，结果与正交试验基本一致，说明此提取工艺稳定可行。2.白芍的含量测定 2. 1仪器与试药
Dionex高效液相色谱仪，P680泵，ASI-100自动进样器，PDA-100检测器，TCC-100柱温箱，ChromeLeon液相色谱工作站。芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号110736-200934，供含量测定用)；乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯；其它试剂为分析纯。2. 2方法与结果
2.2.1色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(50:50: 0. 3)为流动相；波长:230nm ；流速1 mL / min ；柱温:30°C ；色谱柱:Dikma (250 mm X4. 6 mm) C18 柱。进样量10 μ L。2. 2. 2溶液的配制
2.2.2.1对照品溶液的制备精密称取经减压干燥的芍药苷对照品适量，加甲醇制成每毫升含60 μ g的溶液，即得。2.2.2.2供试品溶液的制备将上述白芍浸膏稀释至每克提取物相当于Ig原白芍粗粉，精密称取0. 5g，置水浴上蒸干，残渣加稀乙醇约30mL，超声处理(功率MO W，频率 45 KHz) 30 min，置50 mL容量瓶中，放冷，加稀乙醇稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得。2.2.3标准曲线的制备取芍药苷对照品药:3mg，置IOmL容量瓶中，用甲醇溶解， 再从中吸0. 1，0. 2，0. 4，0. 6，0. 8和1. 0 mL置2mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻。进样20 μ L， 按上述色谱条件测定，记录峰面积，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果，芍药苷在0.015 0.15 mg / mL范围内浓度与峰面积有良好的线性关系，回归方程 A=O. 8649C-0. 2034,相关系数 r=0. 9998 (n=6)。2. 2. 4精密度实验取对照品溶液，连续进样5次，每次10 μ L，记录色谱图与峰面积，RSD为1. 2% (η=5),表明仪器的精密度良好。2.2.5稳定性考察精密吸取同一供试品溶液10yL，每间隔一定时间，注入高效液相色谱仪测定1次。重复进样5次，结果RSD为1.6%，表明供试品溶液在M h内稳定。2.2.6重复性实验取同一批号的样品5份，按含量测定方法测定，结果平均含量为1.43%，RSD为1. (n=5),表明重复性良好。2.2.7加样回收实验取已知含量的白芍提取物5份，精密称定，水浴蒸干。依次分别加入一定量芍药苷对照品，依照上述供试品溶液的制备方法制备，测定含量。结果见表 4。表4芍药苷的回收率试验
权利要求
1.一种四逆散制备工艺，包括如下步骤(1)中药材的整理炮制将柴胡、麸炒的枳壳、白芍、甘草4味药分别炮制成生产所需饮片；(2)称量、配料取步骤(1)的四味饮片按重量份称量，柴胡为40 80份，麸炒的枳壳为40 80份、 白芍为40 80份、甘草为40 80份，备用；(3)柴胡的提取、浓缩柴胡饮片提取柴胡皂苷的提取工艺步骤为，将步骤(2)称取的柴胡饮片加体积分数为70 %的乙醇在真空提取罐内加热回流提取，加醇量为柴胡饮片重量的8倍，提取温度为 55 60°C，提取两次，滤过，滤渣备用，滤液回收乙醇，合并滤液，滤液经贮罐抽至浓缩罐中，进行浓缩，控制浓缩条件，温度阳 60°C，真空度0. 05 0. 07MPa，浓缩至相对密度为 1.05 1. 10的浓缩液，备用；(4)白芍的提取、浓缩白芍饮片的提取工艺步骤为，将步骤(2)称取的白芍饮片加体积分数为70%的乙醇在真空提取罐内加热回流提取，加醇量为白芍饮片重量的8倍，提取温度为55 60°C，提取三次，滤过，滤渣备用，滤液回收乙醇，合并滤液，滤液经贮罐抽至浓缩罐中，进行浓缩，控制浓缩条件，温度55 60°C，真空度0. 05 0. 07MPa，浓缩至相对密度为1. 05 1. 10的浓缩液，备用；(5)柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草的干燥、粉碎将柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草净药材均勻铺在干燥盘上；置于微波真空干燥设备中干燥灭菌，然后将柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草进行粉碎，粉碎成最粗粉，备用；(6)混合将步骤(5)获得的柴胡、白芍、麸炒的枳壳、甘草最粗粉倒入槽型混合机中，加入步骤(3)获得的柴胡和步骤(4)获得的白芍药材浓缩液进行混合，依次慢慢加入，待浓缩液完全加入后，混合均勻；(7)干燥、粉碎将步骤(6)获得的混有浓缩液的药材最粗粉放入微波真空干燥设备中干燥灭菌，干燥后取出，放入多功能粉碎分级机中进行粉碎，控制粗粉的粒度使其全部通过二号筛，但粗粉中混有能通过四号筛的不超过20wt% ；然后包装成品。
2.根据权利要求1所述的四逆散制备工艺，其特征在于所述的柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草净药材是以3 4cm的厚度均勻铺在干燥盘上，置于微波真空干燥机中干燥灭菌。
3.根据权利要求1或2所述的四逆散制备工艺，其特征在于微波真空干燥条件为极限真空度为0. 08 MPa，工作频率为(M50士50)MHz，输出功率为10kW，温度50 55°C。
全文摘要
本发明公开一种四逆散制备工艺，包括如下步骤将柴胡、麸炒的枳壳、白芍、甘草4味药分别炮制成饮片；柴胡为40～80份，麸炒的枳壳为40～80份、白芍为40～80份、甘草为40～80份；柴胡和白芍的各自提取、浓缩至相对密度为1.05～1.10的浓缩液，备用；柴胡药渣、白芍药渣、麸炒的枳壳、甘草的干燥、粉碎，然后铺在干燥盘上置于微波真空干燥机中干燥灭菌，并粉碎成最粗粉，最粗粉倒入槽型混合机中，依次慢慢加入柴胡和白芍药材的浓缩液进行混合，混合均匀；混有浓缩液的药材最粗粉放入微波真空干燥设备中干燥灭菌，取出，放入多功能粉碎分级机中粉碎，粗粉全部通过二号筛且粗粉中混有能通过四号筛的不超过20wt％；然后包装。
文档编号A61P1/12GK102379949SQ20111036536
公开日2012年3月21日 申请日期2011年11月17日 优先权日2011年11月17日
发明者徐燕和, 徐章文, 林祥键, 连红, 郑施波, 项庆阳 申请人:福州海王金象中药制药有限公司