专利名称：一种具有止咳平喘作用的喷雾剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种川贝母总生物碱的制备方法，以及用川贝母总生物碱制成的具有止咳平喘作用的喷雾剂。
背景技术：
川贝母为百合科植物川贝母Fritillaria. cirrhosa D. Don、暗紫贝母 F. unibracteata Hsiao et K. C. Hsia、甘肃贝母 F. przewalskiiMaxim.或梭砂贝母 F. delavayi Franch.的干燥鳞茎，具有清热润肺止咳的功效，用于肺热燥咳、干咳少痰、阴虚劳嗽、咯痰带血。生物碱类是其主要成分，具有显著的镇咳效果。《中国实验方剂学杂志》2003年第3期公布了“均勻设计法优选川贝母渗漉提取工艺”，《中医学院学报》第2005年第1期公布了“川贝母提取工艺研究”二者均采用乙醇渗漉发提取，该方法提取时间长，耗时耗能；《中国中药杂志》第2005年第8期公开了“中药川贝母定量分析方法研究”，优选用氨水碱化药材lh，然后采用氯仿-甲醇回流提取，该方法提取率低且氯仿为有毒溶剂，易对环境造成污染。
发明内容
本发明的目的在于提供一种川贝母总生物碱的制备方法；本发明的另一个目的在于提供一种川贝母喷雾剂；本发明的另一个目的在于提供一种川贝母喷雾剂的制备方法。本发明的目的是通过如下技术方案实现的本发明川贝母总生物碱的制备方法包括如下步骤步骤1 取川贝母采用酸醇溶液进行提取；步骤2 取步骤1得到的提取物经大孔吸附树脂纯化。
优选地，所述步骤1的酸醇溶液为HCl-乙醇水溶液；优选地，所述步骤1的酸醇溶液为HCl-乙醇水溶液，其中HCl浓度为0. 3-0. 8%, 乙醇浓度为60-90% ；优选地，所述步骤1的酸醇溶液为HCl-乙醇水溶液；其中HCl浓度为0. 5%，乙醇浓度为60-90% ；溶剂用量为6-8倍量(质量体积比)；提取次数为2-4次，每次1-2小时。优选地，步骤2中提取物制成相当生药浓度为0. 5-1. 5g药材/mL的川贝母上样液，调节上样液PH至碱性。所述相当生药浓度为0. 5-1. 5g药材/mL的川贝母上样液，是指每ml川贝母上样液的量由0. 5-1. 5g川贝母提取。优选地，步骤2中，大孔吸附树脂纯化时，先用低浓度乙醇解吸附，再用高浓度醇进行洗脱；低浓度乙醇为10-50% ；优选地，所述步骤2中的大孔吸附树脂为非极性大孔树脂；优选地，所述步骤2中上样液pH为8-11 ；解吸附乙醇浓度为40-60%，用量为3_5 倍柱体积。
本发明所述川贝母总生物碱的制备方法，优选包括如下步骤步骤1 取川贝母，采用HCl-乙醇水溶液进行提取，提取液浓缩，干燥，得浸膏；步骤2 取步骤1得到的浸膏，制成生药浓度为0. 5-1. 5g药材/mL的川贝母上样液，调节上样液PH至碱性，过大孔吸附树脂纯化，用低浓度乙醇除杂，再用高浓度醇进行洗脱，收集高浓度乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得川贝母总生物碱。本发明川贝母总生物碱的制备方法进一步优选为步骤1:取川贝母，加6-9倍量(0.3-0.8%)HCl-(60_80%)乙醇水溶液，于 70-90°C水浴加热回流提取2-5次，每次l_3h，合并提取液，减压浓缩，真空干燥，得浸膏；步骤2 取步骤1得到的浸膏，用1-5% HCl研溶，加入硅藻土，过滤，滤液用1-5% HCl稀释，得生药浓度为Ig药材/mL的川贝母样品液；用NaOH溶液调节样品液pH为8-10，以UBV/h 的流速动态吸附，再用6-9BV的蒸馏水以相同流速冲洗树脂至流出液为无色；然后用3-6BV 的20-50 %浓度乙醇以l_:3BV/h的流速进行解吸附，洗脱完成后，再用75-95 %乙醇进行洗脱；收集75-95%乙醇洗脱液，减压浓缩后，真空干燥得川贝母总生物碱。本发明川贝母总生物碱的制备方法进一步优选为步骤1 取川贝母，加7倍量0. 5% HCl-75%乙醇水溶液，于80°C水浴加热回流提取3次，每次1.证，合并3次提取液，减压浓缩，60°C真空干燥池，得浸膏；步骤2 取步骤1 得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，过滤，滤液用2% HCl稀释，得生药浓度为Ig药材 /mL的川贝母样品液；用5% NaOH溶液调节样品液pH为9，以2BV/h的流速动态吸附，再用 8BV的蒸馏水以相同流速冲洗树脂至流出液为无色；然后用4BV的50%浓度乙醇以2BV/h 的流速进行解吸附，洗脱完成后，再用95%乙醇进行洗脱，以改良碘化铋钾试剂检测终点； 收集95%乙醇洗脱液，减压浓缩后，于60°C条件下真空干燥至恒重得川贝母总生物碱；本发明川贝母总生物碱的制备方法进一步优选为步骤1 取川贝母，加6倍量0. 5% HCl-60%乙醇水溶液，于80°C水浴加热回流提取2次，每次池，合并提取液，减压浓缩，60°C真空干燥池，得浸膏；步骤2 取步骤1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，过滤。滤液用2% HCl稀释，得生药浓度为1. Og药材/ mL的川贝母样品液；用5% NaOH溶液调节上样溶液pH为7，以2BV/h的流速动态吸附，再用 8BV的蒸馏水以相同流速冲洗树脂至流出液为无色；然后用2BV的30%浓度乙醇以2BV/h 的流速进行解吸附，洗脱完成后，再用95%乙醇进行洗脱，以改良碘化铋钾试剂检测终点； 收集95%乙醇洗脱液，减压浓缩后，于60°C条件下真空干燥至恒重得川贝母总生物碱；本发明川贝母总生物碱的制备方法进一步优选为步骤1 取川贝母，加8倍量0. 5% HCl-90%乙醇水溶液，于80°C水浴加热回流提取4次，每次lh，合并提取液，减压浓缩，60°C真空干燥池，得浸膏；步骤2:取步骤1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，过滤。滤液用2% HCl稀释，得生药浓度为1. Og药材/ mL的川贝母样品液；用5% NaOH溶液调节样品液pH为11，以2BV/h的流速动态吸附，再用 8BV的蒸馏水以相同流速冲洗树脂至流出液为无色；然后用6BV的70%浓度乙醇以2BV/h 的流速进行解吸附，洗脱完成后，再用95%乙醇进行洗脱，以改良碘化铋钾试剂检测终点； 收集95%乙醇洗脱液，减压浓缩后，于60°C条件下真空干燥至恒重得)11贝母总生物碱；上述川贝母总生物碱可按常规工艺加入常规辅料制成片剂、胶囊、喷雾剂、颗粒剂等临床可接受的剂型。
本发明提供一种川贝母喷雾剂，该喷雾剂的原料组主要成为川贝母总生物碱、增溶剂、抛射剂；所述川贝母总生物碱的量以其制成喷雾剂来计，每mL喷雾剂中含川贝母总生物碱的量相当于1-4. Og川贝母，具体是指每mL喷雾剂中含川贝母总生物碱的量相当于由 1-4. Og川贝母提取的量。所述增溶剂加入量为总体积的5-20% ；所述增溶剂为吐温-80、吐温_20、1，2_丙二醇、丙三醇中的任意一种，优选为丙二醇，加入量为总体积的5-15% ；所述川贝母总生物碱的量每mL喷雾剂中含川贝母总生物碱的量相当于1. 2-3. Og 生药材；抛射剂的量为喷雾剂每IOOml加入5_15g抛射剂；所述喷雾剂的原料中还可以加入喷雾剂的常规辅料，选自甜味剂、矫味剂、防腐剂中的任一一种或几种；所述川贝母总生物碱的制备方法包括如下步骤步骤1 取川贝母采用酸醇溶液进行提取；步骤2 取步骤1得到的提取物经大孔吸附树脂纯化。优选地，所述步骤1的酸醇溶液为HCl-乙醇水溶液；优选地，所述步骤1的酸醇溶液为HCl-乙醇水溶液，其中HCl浓度为0. 3-0. 8%, 乙醇浓度为60-90% ；优选地，所述步骤1的酸醇溶液为HCl-乙醇水溶液；其中HCl浓度为0. 5%，乙醇浓度为60-90% ；溶剂用量为6-8倍量(质量体积比)；提取次数为2-4次，每次1-2小时。优选地，步骤2中提取物制成生药浓度为0. 5-1. 5g药材/mL的川贝母上样液，调节上样液PH至碱性。优选地，步骤2中，大孔吸附树脂纯化时，先用低浓度乙醇解吸附，再用高浓度醇进行洗脱；优选地，所述步骤2中的大孔吸附树脂为非极性大孔树脂；优选地，所述步骤2中上样液pH为7-11 ；除杂乙醇浓度为40-60%，用量为3_5倍柱体积。所述川贝母喷雾剂的制备方法包括如下步骤取处方的川贝母总生物碱与甜味剂、矫味剂、防腐剂中的任意一种或几种共同溶解于增溶剂中，加入注射用水，充分摇勻，静置，装入气雾瓶中，向瓶内压入抛射剂，灌装，灭菌，即得；所述川贝母总生物碱由如下方法制备而成步骤1 取川贝母，采用酸醇溶液进行提取，提取液浓缩，干燥，得浸膏；步骤2 取步骤1得到的浸膏，制成生药浓度为0. 5-1. 5g 药材/mL的川贝母上样液，调节上样液pH至碱性，过大孔吸附树脂纯化，用低浓度乙醇除杂，再用高浓度醇进行洗脱，收集高浓度乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得川贝母总生物碱。优选为，所述步骤1的酸醇溶液为HCl-乙醇水溶液；其中HCl浓度为0. 5%,乙醇浓度为60-90% ；溶剂用量为6-8倍量(质量体积比)；提取次数为2-4次，每次1-2小时。所述步骤2中的大孔吸附树脂为非极性大孔树脂；上样液pH为7-11 ；除杂乙醇浓度为 40-60%，用量为3-5倍柱体积。
进一步优选为，步骤1 取川贝母，加7倍量0. 5%HCl-75%乙醇，于80°C水浴加热回流提取3次，每次1. 5h,合并3次提取液，减压浓缩，60°C真空干燥池，得浸膏；步骤2 取步骤1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，过滤，滤液用2% HCl稀释，得生药浓度为 Ig药材/mL的川贝母样品液；用5% NaOH溶液调节样品液pH为9，以2BV/h的流速动态吸附，再用8BV的蒸馏水以相同流速冲洗树脂至流出液为无色；然后用4BV的50%浓度乙醇以2BV/h的流速进行解吸附，洗脱完成后，再用95%乙醇进行洗脱，以改良碘化铋钾试剂检测终点；收集95%乙醇洗脱液，减压浓缩后，于60°C条件下真空干燥至恒重得川贝母总生物碱；或，步骤1 取川贝母，加6倍量0. 5% HCl-60%乙醇水溶液，于80°C水浴加热回流提取2次，每次池，合并提取液，减压浓缩，60°C真空干燥池，得浸膏；步骤2 取步骤1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，过滤。滤液用2% HCl稀释，得生药浓度为1. Og 药材/mL的川贝母样品液；用5% NaOH溶液调节上样溶液pH为7，以2BV/h的流速动态吸附，再用8BV的蒸馏水以相同流速冲洗树脂至流出液为无色；然后用2BV的30%浓度乙醇以2BV/h的流速进行解吸附，洗脱完成后，再用95%乙醇进行洗脱，以改良碘化铋钾试剂检测终点；收集95%乙醇洗脱液，减压浓缩后，于60°C条件下真空干燥至恒重得川贝母总生物碱；或，步骤1 取川贝母，加8倍量0. 5% HCl-90%乙醇水溶液，于80°C水浴加热回流提取4次，每次lh，合并提取液，减压浓缩，60°C真空干燥池，得浸膏；步骤2 取步骤1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，过滤。滤液用2% HCl稀释，得生药浓度为1. Og药材 /mL的川贝母样品液；用5% NaOH溶液调节样品液pH为11，以2BV/h的流速动态吸附，再用 8BV的蒸馏水以相同流速冲洗树脂至流出液为无色；然后用6BV的70%浓度乙醇以2BV/h 的流速进行解吸附，洗脱完成后，再用95%乙醇进行洗脱，以改良碘化铋钾试剂检测终点； 收集95%乙醇洗脱液，减压浓缩后，于60°C条件下真空干燥至恒重得)11贝母总生物碱。本发明进一步提供川贝母提取物或其喷雾剂在制备拮抗磷酸组胺、氯化乙酰胆碱或卵蛋白致气管平滑肌收缩药物中的应用。本发明采用先提取川贝母总生物碱部位再将其制为喷雾剂的工艺，克服了将川贝母粉碎成超微粉直接制成气雾剂时，工艺收率低(仅为65%)以及药粉易粘结，难以持续定量喷出的缺点。具体是实施方式实验例1川贝母总生物碱提取工艺研究(一 )川贝母总生物碱提取方法的优选方法1 :0. 5% HCl乙醇提取取干燥的川贝母(瓦布贝母)鳞茎巧40g各5份，粉碎成粗粉，用0.5% HCl乙醇 800ml，于95°C水浴加热回流提取3次，每次池，合并3次提取液，减压浓缩，60°C真空干燥 2h，浸膏得率为23. 72%，按总生物碱含量测定法，测得总生物碱含量为0. 360%。方法2 氯仿甲醇G 1)有机溶剂直接进行提取取干燥的川贝母(瓦布贝母)鳞茎巧40g各5份，粉碎成粗粉，用氯仿甲醇 (4 l)800ml，于80°C水浴加热回流提取3次，每次池，合并3次提取液，减压浓缩，60°C 真空干燥池，平均提取物得率为4. 65%，按总生物碱含量测定法，测得总生物碱含量为0. 364%。方法3 :0. 5 % HCl酸水渗漏取干燥的川贝母(瓦布贝母)鳞茎巧40g各5份，粉碎成粗粉，0. 5% HCl酸水 800ml,以1 2ml/min速率进行渗漏，减压浓缩，60°C真空干燥池，平均提取物得率为 23. 95%，按总生物碱含量测定法，测得总生物碱平均含量为0. 360%。三种方法比较见表
Io表1三种提取方法的比较
权利要求
1.川贝母总生物碱的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤步骤1 取川贝母采用HCl-乙醇水溶液进行提取；步骤2 取步骤1得到的提取物经大孔吸附树脂纯化。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤1中HCl-乙醇水溶液，其中HCl浓度为 0. 3-0. 8 %，乙醇浓度为 60-90 %。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤2中提取物制成相当生药浓度为 0. 5-1. 5g药材/mL的川贝母提取物上样液，调节上样液pH至碱性。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于步骤2中大孔吸附树脂纯化时，先用低浓度乙醇解吸附，再用高浓度乙醇进行洗脱；所述大孔吸附树脂为非极性。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在所述步骤2中上样液pH为8-11；解吸附乙醇浓度为40-60%，用量为3-5倍柱体积。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于该方法包括如下步骤步骤1 取川贝母，加6-9倍量0. 3-0. 8% HCl-60-80%乙醇水溶液，于70-90°C水浴加热回流提取2-5次，每次l_3h，合并提取液，减压浓缩，真空干燥，得浸膏；步骤2 取步骤1 得到的浸膏，用1-5% HCl研溶，加入硅藻土，过滤，滤液用1-5% HCl稀释，得生药浓度为 Ig药材/mL的川贝母样品液；用NaOH溶液调节样品液pH为8_10，以l_3BV/h的流速动态吸附，再用6-9BV的蒸馏水以相同流速冲洗树脂至流出液为无色；然后用3-6BV的20-50% 浓度乙醇以l_3BV/h的流速进行解吸附，洗脱完成后，再用75-95%乙醇进行洗脱；收集 75-95%乙醇洗脱液，减压浓缩后，真空干燥得川贝母总生物碱。
7.如权利要求1-6任一所述方法制备的川贝母总生物碱。
8.川贝母喷雾剂的制备方法，其特征在于将权利要求1-6任一所述方法制备的川贝母总生物碱与甜味剂、矫味剂、防腐剂中的任一一种或几种共同溶解于增溶剂中，加入注射用水，充分摇勻，静置，装入气雾瓶中，向瓶内压入抛射剂，灌装，灭菌，制成喷雾剂。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于川贝母总生物碱的量以其制成喷雾剂来计，每mL喷雾剂中含川贝母总生物碱的量相当于由1-4. Og川贝母提取而得的川贝母总生物碱；所述增溶剂加入量为总体积的5-20% ；所述增溶剂为吐温-80、吐温-20、1，2-丙二醇、 丙三醇中的任意一种。
10.如权利要求1-6任一方法制备的川贝母总生物碱在制备拮抗磷酸组胺、氯化乙酰胆碱或卵蛋白致气管平滑肌收缩药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了川贝母总生物碱及其喷雾剂的制备方法。川贝母总生物碱的制备方法川贝母采用HCl-乙醇水溶液进行提取，提取物经大孔吸附树脂纯化。本发明提取工艺收率高、药效高，且制备的喷雾剂可以持续定量喷出。
文档编号A61K125/00GK102451362SQ20111036495
公开日2012年5月16日 申请日期2011年11月17日 优先权日2011年11月17日
发明者代勇, 徐世军, 王晓蓉, 薛刚 申请人:成都恩威投资(集团)有限公司