专利名称：一种治疗缺血性心脏病的药物组合的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药药物组合以及该组合的制备方法，特别涉及该组合可以显著保护治疗心肌缺血再灌注损伤性疾病，属于医药技术领域。
背景技术：
缺血性心脏病包括粥样硬化病变引致的冠状动脉梗阻或狭窄。心肌梗死是临床上的常见缺血性心脏病病，近年来随着介入技术的发展，急性心肌梗死的治疗也迈入了一个新的发展阶段，介入治疗急性心肌梗死是近年迅速发展起来的一个新技术，通过介入手术迅速贯通栓塞的冠状动脉，重新恢复血流，以改善病人心肌供血供氧，挽救更多频临坏死的心肌，迅速改善病人的临床症状及远期疗效，从而降低了急性心肌梗死患者的死亡率，在临床上挽救了许多心肌梗死病人的生命，因而得到了广泛的推广。近来临床实践发现，部分患者行支架植入后，虽然冠脉血流得到了恢复，心肌缺血得到改善，但病人的临床症状及预后并没有明显改善，甚至病情加重。缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury, IRI) 是在组织器官缺血恢复血流后，其细胞代谢功能障碍及结构破坏反而加重的现象。据WHO 统计，到2020年急性冠状动脉梗阻性疾病将是世界上的主要致死原因，心肌缺血再灌注损伤将会是一个重大的临床问题，这已引起世界各国学者的广泛关注和研究。复方丹参方是在中医药理论指导下治疗心血管疾病的中药基础方剂，由丹参、 三七、冰片三种中药制成的，有活血化瘀，理气止痛功用，常用于治疗冠心病、心绞痛等疾病。随着心血管疾病的临床深入，单纯的复方丹参方虽适应多种心血管疾病的治疗，但是效果不太明显。丹参在我国医疗上应用历史悠久，功效甚广。传统医学记载，丹参性寒、味苦，归心经、心包经，专走血分。丹参能通血脉，功擅活血化瘀，故俗称“一味丹参抵四物。”常用的制剂有丹参片、复方丹参片、丹参心舒片、丹参注射液和复方丹参注射液。现代医学研究和临床实践表明，丹参有扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量、减慢心率，改善心肌缺氧之功效， 常用于治疗冠心病、心绞痛、胸闷、心悸等症。可治疗心肌梗塞、心肌炎，可改善急性症状和心电图缺血性改变。三七总皂苷(panax notoginseng saponin，PNQ是五加科植物三七的主要活性成分，大量研究表明PNS在心血管系统具有广泛的作用，包括减轻心肌缺血/再灌注损伤、抑制血管平滑肌细胞增殖、抑制血栓形成和动脉粥样硬化、保护血管内皮细胞、抗心律失常和抗缺血性休克等。穿山龙(Dioscorea nipponica Makino)为薯蓣科薯蓣属多年生藤本植物穿龙薯蓣的根茎，现代药理学研究表明，穿山龙具改善心血管功能，镇咳平喘，祛痰等多种药理作用。穿山龙总皂苷可以改善心肌营养性血流量，保护缺血心肌，防治动脉硬化，其中以穿山龙水溶性皂苷活性最好。复方丹参方和穿山龙组合，即丹参、三七、冰片、穿山龙四味药组合成复方，此组合及组合后的适应症尚未在研究中报道过。CN 102526423 A
发明内容
本发明目的在于提供一种可以治疗缺血性心脏病药物组合，该组合是在复方丹参片方的基础上加入穿山龙总皂苷的组合。组合物的制备，该组合由丹参提取物、三七总皂苷、冰片、穿山龙总皂苷，其中丹参提取物为150 600份，三七总皂苷50 200份，冰片8 10份，穿山龙总皂苷50 200份，通过优选成分之比，按300 100 10 50或=300 100 10 100或= 300 100 10 200比例混合而成，其中丹参提取物、三七总皂苷、穿山龙总皂苷均通过乙醇回流提取分离得到，丹参提取物，三七总皂苷里面所含指标性成分均达到《中国药典》2010版规定，穿山龙总皂苷通过0.5%碱的乙醇提取，其中水溶性皂苷含量达到了 52. 16%。本实验室通过模拟大鼠心肌缺血再灌注损伤模型来验证该组合治疗缺血性心脏病的疗效，从心肌酶(超氧化物歧化酶S0D，乳酸脱氢酶LDH，肌酸激酶同工酶CK-MB)、缺血面积计算、病理HE染色、心肌细胞凋亡TUNEL染色多指标分析，组合物效果优于各组分以及复方丹参片，为以后此组合适应其他心血管疾和药物制剂奠定了基础，从而完成了本发明。本发明有以下优点1、发现了一种治疗缺血性心脏病的中药组合。2、改变了复方丹参方的药物组合方式。3、该组合在保护治疗心肌缺血再灌注损伤疾病效果突出，优于复方丹参片。
图1为药物组合和各成分对缺血再灌注大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响。图2为药物组合和各成分对缺血再灌注大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)含量的影响。图3为药物组合和各成分对缺血再灌注大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量的影响。图4为药物组合和各成分对缺血再灌注大鼠心肌梗死范围的影响图5为药物组合和各成分对缺血再灌注大鼠心肌梗死范围TTC染色结果图6为药物组合和各成分对缺血再灌注大鼠心肌组织HE(X400)染色检测结。图7为药物组合和各成分对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡指数的影响。图8为药物组合和各成分对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡TUNEL染色(X400)检测。
具体实施例方式下面结合具体实例来说明本发明的完成。实施例一丹参提取物的制备依据《中国药典》2010版，取丹参药材Ikg碎成粗粉，用6倍量的80%乙醇回流提取1. 5h,滤过，药渣加50%乙醇回流提取1. 5h,滤过，药渣加水煎煮池，滤过，合并滤液后浓缩至适量，干燥，即得，依据药典中含量测得方法，测得丹酚酸B含量为7.6%，丹参酮含量为0. 31%，符合规定复方丹参片的中丹参的质量控制。实施例二三七总皂苷的制备依据《中国纳典》2010版，取三七药材Ikg碎成粗粉，用6倍量的70%乙醇回流提取两次，每次lh，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩，上样与大孔吸附树脂，80%乙醇洗脱，洗脱液脱色后减压浓缩，精制，干燥，即得，经紫外检测，总皂苷的含量为96. 49%，其中人参皂苷Rbl为32. 19%，人参皂苷Rgl为31. 06%，三七皂苷Rl为7. 49%。实施例三穿山龙总皂苷的的制备取穿山龙药材Ikg碎成粗粉，用6倍量的70%乙醇含0. 5%碱溶液提取两次，每次 Ih,合并提取液，滤过，酸调至中性，滤液减压浓缩至浸膏，干燥，即得，依据《中国药典》2005 版附录VIC，精密取干燥品适量，过中性氧化铝柱，测得穿山龙总皂苷里面水溶性皂苷的含量为 52. 16%。实施例四组合物的制备组合物各组合成分的重量比例为丹参提取物三七总皂苷冰片穿山龙皂苷 =300 100 10 50 或=300 100 10 100 或=300 100 10 200。精密称取按以上方法提取分离得到的提取物，按以上配比比例组合，组合为固体混合物和液体混恳剂。实施例五复方丹参片购自与北京同仁堂科技发展股份有限公司(批号 9124525)，通心络胶囊购自于石家庄以岭药业(批号100728)。实施例六药物组合对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用1、实验动物健康成年雄性SD大鼠70只，体重250 280g，由军事医学科学院动物实验中心提供。大鼠饲养环境为SPF级实验环境。2、模型制作大鼠用2%戊巴比妥钠(按体重50mg/kg)腹腔注射麻醉，仰卧位固定于手术台上，连接心电图，记录正常心电图，将大鼠颈部及左胸部皮肤去毛，分别用碘伏和酒精依次消毒。颈部正中切开皮肤，钝性分离肌肉暴露气管，用眼科剪在气管上剪一小口行气管插管 (插管直径为2mm塑料导管)，连接小动物呼吸机(潮气量为70ml/kg，呼吸比为1. 5 1， 频率为70次/分)于左缘胸骨中线处3 5肋间打开胸腔，暴露心脏，打开心包膜，在肺动脉圆锥左缘与左心耳下缘2mm处进针，用6-0无损伤缝线经浅层心肌穿出并活结结扎，使左冠状动脉前降支位于其上，将心脏放回胸腔，迅速关闭胸腔心肌缺血的判断标准为心电图出现心肌梗死表现(ST段抬高或T波高尖)，心脏局部紫绀。缺血30min后，打开胸腔， 松开活结施行再灌注，并关闭胸腔，局部使用青霉素，缝合皮肤。再灌注他后，腹主动脉取血5ml，置于促凝管，3000r/min离心lOmin，取上清即为血清备用，打开胸腔，剪下心脏，减去心耳及血管，用冰冷的生理盐水冲洗后置于-80°C备用。3、分组及给药70只大鼠按体重随机分10组，每组7只1组假手术组(生理盐水lml/100g)， II组模型组，(生理盐水lml/100g)，III组丹参提取物组(300mg/kg)，IV组三七总皂苷(100mg/kg)，V穿山龙总皂苷组(100mg/kg)，VI VIII组组合组(丹参提取物 +三七总皂苷+冰片+穿山龙总皂苷)3个剂量组VI组合1(300+100+10+50)mg/kg，组合 2 (300+100+10+100)mg/kg，VIII 组合 3 (300+100+10+200)mg/kg，IX 组复方丹参片组 (300mg/kg)、X组为阳性药组通心络胶囊组(300mg/kg)，以上各组均以灌胃方式给药(按体重lml/100g)，连续给药7天，每天1次，末次给药Ih后造模，除假手术组开胸后只穿线不接扎左冠状动脉前降支外，其余II X组，均以以上方法造模。上述药物均精密称定后，用灭菌后的蒸馏水溶解配置为混悬液。4、实验结果采用SPSS 12.0统计软件分析数据，计量资料用表示，多组间比较用方差分析，两两比较用q检验，P < 0. 05为差异有显著性，P <0.01为差异具有极显著性。(1)血清中心肌酶SOD、LDH、CK-MB的含量测定如表1、图1、2、3所示，与假手术组比较，模型组的LDH和CK-MB均显著升高，SOD 值显著下降，表明冠脉结扎再灌注后损伤了大鼠的心肌细胞膜，LDH及CK-MB从细胞中外漏，使其在细胞中活性降低，而在血浆中活性明显升高。各药物组合后，SOD含量明显升高， LDH和CK-MB含量明显降低，说明组合的效果均优于各组合成分，而且优于复方丹参片和通心络胶囊，证明该组合提高了机体内源性抗氧化系统的活性，抑制了缺血过程中自由基的生成，显著的起到了对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。表1药物组合和各成分对缺血再灌注大鼠血清中S0D、LDH及CK-MB活力的影响( χ士 s, η = 7)
权利要求
1.一种中药组合物，其特征在于，该组合药物组成为丹参提取物、三七总皂苷、冰片、 穿山龙总皂苷。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合具治疗缺血性心脏病的作用。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的的药物组合是在复方丹参方组合的基础上加入穿山龙总皂苷。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，按照重量组分计算，组成该组合的各成分为丹参提取物150 600份，三七总皂苷50 200份，冰片8 10份，穿山龙总皂苷 50 200份。
5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合各成分的重量比例为丹参提取物三七总皂苷冰片穿山龙总皂苷=300 100 10 50或=300 100 10 100 或=300 100 10 200。
6.根据权利要求1所述的组合物，丹参提取物、三七总皂苷、穿山龙总皂苷均为乙醇或者其他适宜溶剂提取得到。
7.根据权利要求2所述的缺血性心脏病，其特征在于，所述的缺血性心脏病包括冠心病，心肌缺血再灌注损伤，心肌梗死，心肌炎以及由心肌缺血导致的其他心脏病。
8.根据权利要求1-5中任何一项所述的组合物，其特征在于，所述的组合物以口服制剂类型使用。
9.根据权利要求7中所述的口服制剂类型包括片剂，丸剂，胶囊剂，软胶囊剂，颗粒齐U，混悬剂，滴丸的任何一种。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，提供了一种治疗缺血性心脏病的中药组合物。该组合物由丹参提取物、三七总皂苷、冰片和穿山龙水溶性总皂苷组成，是在复方丹参方的基础上加入穿山龙总皂苷得到的。通过大鼠心肌缺血再灌注损伤动物实验验证，该组合在治疗缺血性心脏病的效果显著优于复方丹参片，且药物制备经济，简单，为复方丹参片的二次开发和心血管中药新复方的研究提供了实验依据。
文档编号A61P9/10GK102526423SQ20121000293
公开日2012年7月4日 申请日期2012年1月6日 优先权日2012年1月6日
发明者孔祥娟, 洪婷, 潘从泽, 王云飞, 王升启, 郑冰清 申请人:中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所