专利名称：一种制备脱细胞生物膜敷料的方法
技术领域：
本发明涉及一种制备脱细胞生物膜敷料的方法。
背景技术：
现代烧伤治疗拯救了大部分严重烧伤患者的生命，由动物生物膜制备而成的生物敷料在烧伤创面得到较广泛的应用。经过脱细胞处理的生物膜去除了生物膜的抗原性成分，覆盖创面后和人体组织相容性好，能促进创面生长，诱导组织再生。已有的脱细胞生物膜材料存在以下不足操作较复杂，周期较长，效率较低，容易造成生物膜的损坏。因此，需要提供一种新的技术方案来解决上述问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种周期短、效率高、对生物膜天然结构损害轻的制备脱细胞生物膜敷料的方法。本发明采用的技术方案是
一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤
a、制备膜片工艺将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状或圆孔状的生物膜，所述生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺将断层皮片用质量浓度O.1%_1.0%的过氧乙酸和质量浓度
I.0%-5. 0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活30-60分钟，生物膜与病毒灭活溶液的质量比为I: 3-5 ；
C、脱脂工艺采用质量浓度I. 0%-3. 0%纯碱、质量浓度I. 0%-3. 0%烧碱和质量浓度
O.1%-1. 0%表面活性剂组成的混合脱脂剂进行脱脂30-60分钟，所述表面活性剂为平平加、 十二烷基氨基丙酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚、曲拉酮中的一种，生物膜与混合脱脂剂的质量比为I: 3-5 ；
d、脱细胞工艺采用质量浓度O.1%-0. 3%胰酶、质量浓度O. 1%-0. 5%激活剂、质量浓度O. 2%-0. 5%脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺30-60分钟，所述激活剂为质量浓度
O.1%-0. 3%硫酸铵，所述脱脂剂为质量浓度O. 2%-0. 5%平平加，质量浓度O. 2%-0. 5%十二烷基硫酸钠中的一种，生物膜与脱细胞液的质量比为I: 3-5 ；
e、含银脱细胞生物膜工艺将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为硝酸银O. 3-0.5%、β-环糊精3. 0-5. 0%、硝酸钾O. 005-0. 01%，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经Y射线辐照消毒灭菌，即为成品。本发明的有益效果(l)b步骤采用过氧乙酸和氯化钠溶液组成的病毒灭活溶液进行灭活，既达到了病毒灭活的效果，又避免了过氧乙酸溶液灭活病毒而产生的生物膜肿胀的问题；(2) c步骤中由纯碱、烧碱、表面活性剂组成的混合脱脂剂具有脱脂时间短、效率
3高、对生物膜组织结构的保护作用强的优点；(3) d步骤中采用酶、激活剂和脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺，具有脱细胞彻底、时间短、效率高，对生物膜天然结构损害轻的优点；(4) e步骤将脱细胞生物膜制备成含银的脱细胞生物膜，具有抗菌功能的优点。
具体实施例方式以下实施例旨在说明本发明而不是对本方明的进一步限定。实施例I
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤
a、制备膜片工艺将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺将断层皮片用质量浓度O.1%的过氧乙酸和质量浓度I. 0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活30分钟，生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1:3;
C、脱脂工艺采用质量浓度I. 0%%纯碱、质量浓度I. 0%烧碱和质量浓度O. 1%平平加组成的混合脱脂剂进行脱脂30分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:3;
d、脱细胞工艺采用质量浓度O.1%胰酶、质量浓度O. 1%激活剂硫酸铵、质量浓度O. 2% 脱脂剂平平加组成的脱细胞液进行脱细胞工艺30分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为I: 3 ；
e、含银脱细胞生物膜工艺将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为硝酸银0.3%、β-环糊精3. 0%、硝酸钾O. 005%，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经Y射线辐照消毒灭菌，即为成品。实施例2
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤
a、制备膜片工艺将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺将断层皮片用质量浓度O.1%的过氧乙酸和质量浓度I. 0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活30分钟，生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1:3;
C、脱脂工艺采用质量浓度I. 0%%纯碱、质量浓度I. 0%烧碱和质量浓度O. 1%平平加组成的混合脱脂剂进行脱脂30分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:3;
d、脱细胞工艺采用质量浓度O.1%胰酶、质量浓度O. 1%激活剂硫酸铵、质量浓度O. 2% 脱脂剂十二烷基硫酸钠组成的脱细胞液进行脱细胞工艺30分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为1:3;
e、含银脱细胞生物膜工艺将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为硝酸银0.3%、β-环糊精3. 0%、硝酸钾O. 005%，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经Y射线辐照消毒灭菌，即为成品。实施例3本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤
a、制备膜片工艺将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成圆孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺将断层皮片用质量浓度O.5%的过氧乙酸和质量浓度3. 0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活45分钟，生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1:4 ；
C、脱脂工艺采用质量浓度2. 0%纯碱、质量浓度2. 0%烧碱和质量浓度O. 5%十二烷基氨基丙酸钠组成的混合脱脂剂进行脱脂45分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:4 ；
d、脱细胞工艺采用质量浓度O.2%胰酶、质量浓度O. 3%激活剂硫酸铵、质量浓度O. 3% 脱脂剂平平加组成的脱细胞液进行脱细胞工艺45分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为 1:4 ；
e、含银脱细胞生物膜工艺将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为硝酸银0.4%、β-环糊精4.0%、硝酸钾O. 008%，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经Y射线辐照消毒灭菌，即为成品。实施例4
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤
a、制备膜片工艺将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺将断层皮片用质量浓度O.5%的过氧乙酸和质量浓度3. 0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活45分钟，生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1:4 ；
C、脱脂工艺采用质量浓度2. 0%纯碱、质量浓度2. 0%烧碱和质量浓度O. 5%十二烷基氨基丙酸钠组成的混合脱脂剂进行脱脂45分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:4 ；
d、脱细胞工艺采用质量浓度O.2%胰酶、质量浓度O. 3%激活剂硫酸铵、质量浓度O. 3% 脱脂剂十二烷基硫酸钠组成的脱细胞液进行脱细胞工艺45分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为1:4;
e、含银脱细胞生物膜工艺将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为硝酸银O. 4%、β -环糊精4. 0%、硝酸钾O. 008%，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经Y射线辐照消毒灭菌，即为成品。实施例5
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤
a、制备膜片工艺将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成圆孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺将断层皮片用质量浓度I.0%的过氧乙酸和质量浓度5. 0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活60分钟，生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1:5;
C、脱脂工艺采用质量浓度3. 0%纯碱、质量浓度3. 0%烧碱和质量浓度I. 0%脂肪醇聚氧乙烯醚组成的混合脱脂剂进行脱脂60分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:5 ;d、脱细胞工艺采用质量浓度O.3%胰酶、质量浓度O. 5%激活剂硫酸铵、质量浓度O. 5% 脱脂剂平平加组成的脱细胞液进行脱细胞工艺60分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为 1:5 ；
e、含银脱细胞生物膜工艺将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为硝酸银O. 5%、β -环糊精5. 0%、硝酸钾O. 01%，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经Y射线辐照消毒灭菌，即为成品。实施例6
本发明的一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，包括以下步骤
a、制备膜片工艺将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成圆孔状的生物膜，生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；
b、病毒灭活工艺将断层皮片用质量浓度I.0%的过氧乙酸和质量浓度5. 0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活60分钟，生物膜与病毒灭活溶液的质量比为1:5;
C、脱脂工艺采用质量浓度3. 0%纯碱、质量浓度3. 0%烧碱和质量浓度I. 0%脂肪醇聚氧乙烯醚组成的混合脱脂剂进行脱脂60分钟，生物膜与混合脱脂剂的质量比为1:5 ;
d、脱细胞工艺采用质量浓度O.3%胰酶、质量浓度O. 5%激活剂硫酸铵、质量浓度O. 5% 脱脂剂十二烷基硫酸钠组成的脱细胞液进行脱细胞工艺60分钟，生物膜与脱细胞液的质量比为1:5 ；
e、含银脱细胞生物膜工艺将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为硝酸银O. 5%、β -环糊精5. 0%、硝酸钾O. 01%，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；
f、冻干、包装和辐照消毒工艺将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经Y射线辐照消毒灭菌，即为成品。c步骤脱脂工艺中，表面活性剂还可以为曲拉酮。该脱细胞生物膜敷料供医疗机构用于因烧伤、外伤、手术、感染等原因引起的各种创面的覆盖治疗。本发明中(l)b步骤采用过氧乙酸和氯化钠溶液组成的病毒灭活溶液进行灭活， 既达到了病毒灭活的效果，又避免了过氧乙酸溶液灭活病毒而产生的生物膜肿胀的问题；
(2)c步骤中由纯碱、烧碱、表面活性剂组成的混合脱脂剂具有脱脂时间短、效率高、对生物膜组织结构的保护作用强的优点；(3) d步骤中采用酶、激活剂和脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺，具有脱细胞彻底、时间短、效率高，对生物膜天然结构损害轻的优点；(4) e 步骤将脱细胞生物膜制备成含银的脱细胞生物膜，具有抗菌功能的优点。
权利要求
1. 一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，其特征在于，包括以下步骤a、制备膜片工艺将生物膜去除表面脂肪后，用打孔器将生物膜制备成网孔状或圆孔状的生物膜，所述生物膜为动物的胸腹膜、小肠粘膜；b、病毒灭活工艺将断层皮片用质量浓度O.1%_1.0%的过氧乙酸和质量浓度 I. 0%-5. 0%的氯化钠组成的病毒灭活溶液进行病毒灭活30-60分钟，生物膜与病毒灭活溶液的质量比为I: 3-5 ；C、脱脂工艺采用质量浓度I. 0%-3. 0%纯碱、质量浓度I. 0%-3. 0%烧碱和质量浓度O.1%-1. 0%表面活性剂组成的混合脱脂剂进行脱脂30-60分钟，所述表面活性剂为平平加、 十二烷基氨基丙酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚、曲拉酮中的一种，生物膜与混合脱脂剂的质量比为I: 3-5 ；d、脱细胞工艺采用质量浓度O.1%-0. 3%胰酶、质量浓度O. 1%-0. 5%激活剂、质量浓度O. 2%-0. 5%脱脂剂组成的脱细胞液进行脱细胞工艺30-60分钟，所述激活剂为质量浓度O.1%-0. 3%硫酸铵，所述脱脂剂为质量浓度O. 2%-0. 5%平平加，质量浓度O. 2%-0. 5%十二烷基硫酸钠中的一种，生物膜与脱细胞液的质量比为1:3-5 ;e、含银脱细胞生物膜工艺将脱细胞生物膜浸泡于银离子溶液中，银离子溶液组成按重量百分比为硝酸银O. 3-0.5%、β-环糊精3. 0-5. 0%、硝酸钾O. 005-0. 01%，加注射用水至100%，制成含银脱细胞生物膜；f、冻干、包装和辐照消毒工艺将上述含银脱细胞生物膜放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，成型包装、再经Y射线辐照消毒灭菌，即为成品。
全文摘要
本发明公开了一种制备脱细胞生物膜敷料的方法，将动物生物膜通过病毒灭活、脱脂、脱细胞、加银、冻干、包装和辐照消毒工艺后得到脱细胞生物膜。本发明的优点脱脂时间短、效率高、对生物膜组织结构的保护作用强，脱细胞彻底，对生物膜天然结构损害轻，具有抗菌功能的优点。
文档编号A61L15/40GK102580140SQ20121006067
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月9日 优先权日2012年3月9日
发明者潘华倩, 潘银根 申请人:潘银根