专利名称：一种小鼠结肠肌电生理活动测定方法
技术领域：
本发明涉及医疗评价及检测技术领域，具体地说涉及一种鼠结肠肌电生理活动测定方法及用途。
背景技术：
随着人们生活水平的提高、工作节奏的加快，便秘的发病率逐年上升。便秘作为ー种常见的临床症状，目前确切病因不明。据研究显示，便秘患者结肠推进性收缩波数目减少，收缩幅度减低，导致粪便在结肠通过减慢。由于结肠在有效地促使粪便排出体外方面具有重要作用，因此便秘常被认为是结肠动力异常所致。结肠的肌电动作电位产生于慢波之上，与平滑肌收缩相一致，是推进性运动的主 要动力，因而结肠肌电活动作为ー项客观的电生理指标，可间接反映结肠动力状況。记录肌电活动是目前结肠动力研究的重要方法之一。目前在大鼠身上的电极埋植技术已有公开文献报道，但该技术在小鼠动物身上均难以实现。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种鼠结肠肌电生理活动的測定方法及用途。本发明公开了ー种测定鼠结肠肌电生理活动的方法，包括如下步骤
a)取鼠，麻酔，使其仰卧于手术台上；
b)消毒，沿下腹正中纵行切开腹部，显露回盲部，于距盲肠1-1.5cm的结肠处安置一对铜丝电极；
c)导线经切ロ引出接肌电信号记录仪。其中所述的鼠为小鼠。其中步骤b)中，铜丝的直径为0. 25-0. 5cm。其中步骤b)中，两铜丝电极相距0. 5cm。其中步骤b)中，将铜丝电极插入浆肌层内。其中步骤c)中，肌电信号记录仪的灵敏度參数选择时间常数为0. 001s，増益放大倍数为250-500，高频滤波为15-30HZ。其中步骤C)中，肌电信号记录仪为BL-410、BL-420、BL-420F等BL-410系列生物机能实验系统。本发明的另一目的是提供基于便秘小鼠动物模型的药物筛选平台，即结肠肌电活动测定方法在便秘小鼠模型中的应用。便秘为临床常见症状，发病率高，常以排便间隔延长、大便干结、大便艰涩不畅为主要表现。因其病因不明确，临床疗效欠佳，本发明通过建立小鼠便秘模型，观察其结肠肌电生理变化情况，分析便秘小鼠结肠肌电生理电活变化与便秘的内在联系，从而探讨可能发生便秘的机制，为其临床防治便秘提供理论依据。
本发明首次成功将结肠肌电生理活动測定方法应用于便秘小鼠，该测定方法材料易得，简单易行，重复性好，成功率高，对研究对象损失轻微，适用于小鼠等小动，可客观地反映小鼠不同生理状态下结肠肌电活动的变化，为系统研究结肠运动机理及为便秘的防治提供了有力的工具。
图I对照组小鼠结肠肌电图。图2便秘组小鼠结肠肌电图。
具体实施例方式材料与方法
I材料
实验动物健康昆明小鼠，体重在20g 28g之间，雌雄各半。
试剂复方地芬诺酯片为江苏平光制药有限责任公司产品(批号0805221,2. 5g/片)，曙红Y为上海永叶生物科技有限公司(CAS号17372-87-1)。
导线铜丝，直径为0. 25mm。
仪器BL-410生物机能实验系统。2 方法
2.I药物给予方法 灌胃给药。
2.2结肠肌电活动參数分析
将每组的记录结果以3min作为ー个时间段的频率和振幅的均值、标准差及变异系数进行比较。
慢波频率变异系数(％)=慢波频率标准差/慢波频率均值X 100%
慢波振幅变异系数(％)=慢波振幅标准差/慢波振幅均值X 100%
2.3统计学处理
数据以土s表示，采用Excel2007软件进行t检验。实施例I便秘小鼠模型的建立
I. I分组取小鼠20只，雌雄兼用，称重后随机分成2组，对照组，便秘组，每组10只。I. 2药剂的配制取2片复方地芬诺酯片加蒸馏水5ml配成混悬液。取2g曙红加IOml蒸馏水配成混悬液。I. 3建模试验前24h停食给水，便秘组按10mg/kg复方地芬诺酯混悬液灌胃复制便秘模型。对照组则给水和淀粉的混悬液替代。每天记录小鼠粪便粒数、粪便的形态及小鼠的体重，井根据粪便及体重变化适当增减给药剂量。饲养时间为30天。2.实验指标建模30min后各组按10mg/kg曙红混悬液对小鼠进行灌胃。灌胃后小鼠首粒红便的时间，粪便的性状、粒数。3.结果便秘组小鼠的粪便较对照组小鼠的粪便细小、干硬。便秘组及芦荟组小鼠6h内排便的粒数较对照组明显減少，首粒红便排出的时间长(见表I)。表I小鼠排便情况的测定(f±0
权利要求
1.一种用于測定鼠结肠肌电生理活动的方法，包括如下步骤 a)取鼠，麻酔，使其仰卧于手术台上； b)消毒，沿下腹正中纵行切开腹部，显露回盲部，于距盲肠1-1.5cm的结肠处安置一对铜丝电极； c)导线经切ロ引出接肌电信号记录仪。
2.权利要求I所述的測定方法，其中鼠为小鼠。
3.权利要求I所述的測定方法，步骤b)中，铜丝的直径为0.25-0.5cm。
4.权利要求I所述的測定方法，步骤b)中，两铜丝电极相距0.5cm。
5.权利要求I所述的測定方法，步骤b)中，将铜丝电极插入浆肌层内。
6.权利要求I所述的測定方法，步骤c)中，肌电信号记录仪的灵敏度參数选择时间常数为0. 001s，增益放大倍数为250-500，高频滤波为15-30HZ。
7.权利要求I所述的測定方法，步骤c)中，肌电信号记录仪为BL-410、BL-420、BL-420F等BL-410系列生物机能实验系统。
8.权利要求I所述的測定方法，在便秘小鼠模型结肠肌电活动測定中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种鼠结肠肌电生理活动的测定方法及用途。方法用复方地芬诺酯混悬液对小鼠进行灌胃建立便秘模型，后选用医用缝合针，铜丝制作成铜丝电极，测定其结肠的肌电生理活动变化。结果与对照组相比，便秘组小鼠的结肠慢波频率、频率变异系数、振幅、振幅变异系数有极显著差异P<0.01。结论此小鼠结肠肌电生理活动的测定方法具有以下优点1、该测定方法材料易得，简单易行，重复性好，成功率高，2、对研究对象损伤轻微，适用于小鼠等小动物，3、该测定方法可客观地反映小鼠不同生理状态下结肠肌电活动的变化，4、本发明为系统研究结肠运动机理及为便秘的防治提供了有力的工具。
文档编号A61B5/0488GK102727195SQ20121017088
公开日2012年10月17日 申请日期2012年5月29日 优先权日2012年5月29日
发明者余意, 侯软玲, 刘晓丽, 卢智敏, 姜洪波, 安娜, 宋亭亭, 宦楠楠, 徐磊, 李多多, 杜爱林, 杨俊 , 沈慧, 洪渊, 谭军, 赵东海, 路承彪, 连阳阳, 郭永臣 申请人:新乡医学院