专利名称：缩泉胶囊在制备抑制os-732细胞增殖药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中成药的新用途，尤其涉及缩泉胶囊在制备抑制0S-732细胞增殖药物中的应用。
背景技术：
骨肉瘤是指骨骼系统与其他器官一样会罹患来自任何组织成份肿瘤或来自其他器官的转移性病变。犯及骨骼的肿瘤，可发生于骨细胞、骨骼的造血成份，软骨以及纤维性或滑膜成份。可能与骨骼过度生长、慢性炎症刺激、遗传因素、特殊病毒的感染，骨内血液回流不顺畅及放射线照射等因素有关。病人之年龄、性别与发生部位，对骨瘤之良性与恶性之鉴别诊断很有帮忙。骨癌易发生在12 20岁左右的年轻人，以原发性骨瘤为常见，次为50 60岁者，则以转移性骨癌及多发性骨髓瘤转移较多。 缩泉胶囊是湖南汉森制药股份有限公司的独家产品，目前还没有其抑制骨肉瘤(0S-732)细胞增殖的文献报道。
发明内容
发明目的本发明的目的在于提供缩泉胶囊在制备抑制0S-732细胞增殖药物中的应用。技术方案缩泉胶囊在制备抑制0S-732细胞增殖药物中的应用。缩泉胶囊处方为重楼、南板蓝根、蒲公英、冰片、甘草，能清热解毒，消肿散结，用于上呼吸道感染引起的咽喉发炎，规格为每片O. 3g，口服，一次3-4片，一日3次，现发现其能抑制0S-732细胞增殖。有益效果缩泉胶囊抑制0S-732细胞增殖，效果良好。
具体实施例方式缩泉胶囊抑制0S-732细胞增殖的实验研究资料I实验材料I. I实验用细胞株骨肉瘤(0S-732)，来自本公司实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。I. 2实验药物研究药物缩泉胶囊，湖南汉森制药股份有限公司，批号20110423药液储液称取IOOmg缩泉胶囊内容物,溶于5ml无水乙醇中,O. 2μηι滤器过滤，500 μ I doff管分装，-20°c存储，同时O. 2 μ m滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。I. 3实验试剂DMEM(GIBC0 公司 Cat. No. 12100-061 Lot. No. 758137);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot. No. 100419)；NaHC03 (上海久亿化学试剂有限公司Cat. No. 11810_033Lot.No. 1088387)；Trypsin (AMRESC0 公司批号2010/04)；EDTA (AMRESC0 公司批号:2009/10);Penicillin G Sodium Salt(AMRESCO 公司批号2010242);Str 印 tomycin Su I fat e( AMRE SCO公司批号2010382);无水乙醇(南京化学试剂有限公司批号080310182);MTT(Biosharp批号:0793) ;PBS (实验室自配)；I. 4实验器材莱卡倒置显微镜(德国Leica型号DM1L);可见-紫外光微孔板检测仪(美国MD公司型号SPECTRA MAX 190) ;C02培养箱(FORMA型号3111);超净台(苏净集团安泰公司制造型号SW-CJ-ZFD);纯水仪(美国Spring公司型号S/N 020579);精密移液器(法国吉尔森公司型号P2);电子天平(德国赛多利斯有限公司型号BT323S);全自动高压灭菌锅(日本SANYO公司型号MLS-3020);台式电热鼓风干燥箱(上海精密实验设备公司型号DHG9123A);冰箱(西门子公司型号KG18V21TI);液氮罐(CBS型号2001);低速离心机(上海安亭科学仪器厂型号ΚΑ-1000) ;0. 2μπι滤器(MILLIP0RE型号SLGP033RB) ;10cm培养皿(NEST公司)、96孔培养板(NEST公司)；细胞计数板；离心管、移液管、Tips若干。
2实验方法I) 0S-732 细胞用 DMEM+10%FBS 于 37 °C、5%C02 进行常规培养(IOcm 培养皿)，当细胞生长至对数期时，收集细胞，弃去培养液，PBS轻洗3遍，加入3ml 0. 25%胰蛋白酶-0. 049ffiDTA，37°C消化2min后，向其中加入5ml完全培养基中和反应，吹打细胞后将其转入离心管中，IOOOrpm离心5min，调整细胞悬液浓度3X 104个/ml。2)将细胞种入96孔培养板中，每孔加入细胞悬液180 μ 1，培养板放入细胞培养箱中(37 °C，5%C02 )常规培养。3)根据细胞生长情况，一般长至50%_70%，加入缩泉胶囊溶液，继续培养24h。4) 24h 后加入 20 μ I MTT 溶液(5mg/ml，即 0. 5%MTT)，继续培养 4h。5) 4h后扣板法倒去上清，用吸水纸轻轻拍干，每孔加入200 μ I 二甲基亚砜，置摇床上低速振荡lOmin，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。6)同时设置本底(不加细胞，只加培养液)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)，每组设定6个复孔。7)结果以药物对细胞的抑制率表示细胞增值抑制率(％)=(对照孔OD值-给药孔OD值)/对照孔OD值X 100%。实验重复3次。3统计处理采用Microsoft Excel 2003软件中的相关分析和Student t检验，数据以mean + S. D.表不。4实验结果MTT法实验后统计结果显示，与对照组比较，当剂量达到5mg/ml时，对0S-732细胞增殖抑制有差异(p〈0. 05)，剂量在10mg/ml时该差异具有显著性(P〈0. 01)，当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异(Ρ〈0· 001)。表I缩泉胶囊对0S-732细胞增殖抑制影响研究—(X 土 SD)
权利要求
1.缩泉胶囊在制备抑制0S-732细胞增殖药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了缩泉胶囊在制备抑制OS-732细胞增殖药物中的应用，缩泉胶囊处方为山药、益智仁(盐炒)、乌药，补肾缩尿，用于肾虚之小便频数，夜卧遗尿，规格为每粒装0.3g，口服，成人每次6粒，一日3次，现发现其能抑制OS-732细胞增殖。
文档编号A61K31/045GK102824517SQ20121035772
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月24日 优先权日2012年9月24日
发明者不公告发明人 申请人:南京正亮医药科技有限公司