专利名称：胶原基眼角膜支架材料的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种多糖及胶原的复合材料及其制备方法。此材料有一定的透光性，外观成薄膜状。用于眼科眼角膜移植前的角膜细胞培养支架。属于医用生物材料领域。
背景技术：
目前世界上超过1000万人的眼盲是由角膜病引起，为导致眼盲的第二大原因，仅次于白内障。其中80%可以通过角膜移植手术脱盲。然而，传统的角膜移植手术有其两大弊端，一是角膜供体的来源困难，二是手术成功率低。有鉴于此，开发一种角膜移植术前针对病人特有眼角膜细胞生存繁殖的支架材料变的尤为重要。又由于天然眼角膜的结构中基质层90%为胶原，故本公司采用了利用多糖 与胶原进行结构重建的方法制备此类复合支架材料。此方法制得的材料，均匀、透光、有一定的抗压性，防水，主要组成成分接近天然角膜组织，具有良好的生物相容性。能为角膜移植受体的角膜细胞培养提供良好的支架。
发明内容
本材料选用了多糖与胶原进行结构重建的方法制成。能够满足角膜细胞培养达到角膜重建的要求。主要操作步骤如下I、胶原溶液的制备市售I型胶原、II型胶原、III型胶原之一或多种，溶于
O.01mol/L O. 5mol/L的盐酸，搅拌均匀，制得浓度为O. 1% 15. 0% (w/w)的溶液。2、复合组分制备市售壳聚糖盐酸盐、羧化壳聚糖、糖胺聚糖、蛋白聚糖、壳聚糖乳酸盐、壳聚糖季胺盐、壳聚糖硫酸脂、类透明质酸壳聚糖、海藻酸钠、透明质酸、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维钠或羟丙基纤维素钠中的一种或两种多糖与胶原溶液中的胶原按质量比为(I 10) (10 I)的比例搅拌混合均匀。3、碱溶液市售氢氧化钠，溶液配制，使其浓度为O. 01mol/L 5. OmoI/L04、胶原基眼角膜支架材料的制备复合组分在温度为(1°C 40°C )的环境下混合搅拌，O. 5h 24h后，碱溶液调pH值，使最终pH值为出 8)。最后将所得溶液进行铺板交联成膜。
具体实施例方式实施例I、取市售壳聚糖盐酸盐I. 0g，缓慢倒进IOOml浓度为5. O %的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原和III型胶原的混合胶原溶于0. 2mol/L盐酸。搅拌均匀后，搅拌I小时，环境温度23°C。用l.Omol/L氢氧化钠溶液调pH值至7。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为1:5;实施例2、取市售海藻酸钠I. 3g，缓慢倒进IOOml浓度为13. O %的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原和II型胶原的混合胶原溶于3. Omol/L盐酸。搅拌均匀后，搅拌7小时，环境温度23°C。用5. Omol/L氢氧化钠溶液调pH值至6。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为I : 10。实施例3、取市售羧化壳聚糖I. 5g，缓慢倒进IOOml浓度为I. O %的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原和III型胶原的混合胶原溶于O. 2mol/L盐酸。搅拌均匀搅拌12小时，环境温度38°C。用I. Omol/L氢氧化钠溶液调pH值至7。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为3 2。实施例4、 取市售壳聚糖乳酸盐5. 0g，缓慢倒进IOOml浓度为5. O %的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原和II型胶原及III型胶原的混合胶原溶于0. 2mol/L盐酸。搅拌均匀后，搅拌8小时，环境温度2°C。用3. 0mol/L氢氧化钠溶液调pH值至6. 8。将所 得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为I : I。实施例5、取市售壳聚糖季胺盐10. 0g，缓慢倒进IOOml浓度为10. O %的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为II型胶原和III型胶原的混合胶原溶于0. 2mol/L盐酸。搅拌均匀后，搅拌2小时，环境温度10°C。用0. 5mol/L氢氧化钠溶液调pH值至7. 3。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为I : I。实施例6、取市售壳聚糖硫酸脂2. 0g，缓慢倒进IOOml浓度为0. 5%的胶原溶液中，边搅拌边倒入。胶原溶液为I型胶原溶于0. 2mol/L盐酸，搅拌均匀后，搅拌0. 5小时，环境温度15°C。用2.5mol/L氢氧化钠溶液调pH值至7。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为4 I。实施例7、取市售类透明质酸壳聚糖3. Og,缓慢倒进IOOml浓度为2. 0%的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原和III型胶原的混合胶原溶于0. 2mol/L盐酸，搅拌均匀后，搅拌5小时，环境温度18°C。用2. 8mol/L氢氧化钠溶液调pH值至6. 5。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为3 2。实施例8、取市售羧甲基纤维素钠8. 0g，缓慢倒进IOOml浓度为2. O %的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为II型胶原和III型胶原的混合胶原溶于0. 2mol/L盐酸，搅拌均匀后，搅拌10小时，环境温度1°C。用4. Omol/L氢氧化钠溶液调pH值至8。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为4 I。实施例9、取市售壳聚糖盐酸盐I. 5g和羧甲基纤维素钠I. 5g，分别缓慢倒进IOOml浓度为I. 5%的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原溶于I. 0mol/L盐酸，搅拌均匀后，搅拌18小时，环境温度25°C。用2. 0mol/L氢氧化钠溶液调pH值至8。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为2 I。实施例10、
取市售透明质酸3. Og,缓慢倒进IOOml浓度为2. O %的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为II型胶原和III型胶原混合胶原溶于O. 2mol/L盐酸，搅拌均匀后，搅拌16小时，环境温度25°C。用2. Omol/L氢氧化钠溶液调pH值使最终pH值至7. 8。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为3 2。实施例11、取市售羟乙基纤维钠4. 0g，缓慢倒进IOOml浓度为2. O %的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为II型胶原溶于O. 2mol/L盐酸，搅拌均匀后，搅拌4小时，环境温度15°C。用2. Omol/L氢氧化钠溶液调pH值至6. 3。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为2 I。实施例12、取市售羟丙基纤维钠4. 2g，缓慢倒进IOOml浓度为I. 8%的胶原溶液中，边搅拌边 倒入。其中胶原溶液为III型胶原溶于0. 2mol/L盐酸，搅拌均匀后，搅拌4小时，环境温度8°C。0.8mol/L氢氧化钠溶液调pH值至8。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为7 3。实施例13、取市售壳聚糖盐酸盐2. 5g和羟丙基纤维钠2. 0g，分别缓慢倒进IOOml浓度为
I.5%的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原溶于I. 0mol/L盐酸。搅拌均匀后，搅拌8小时，环境温度35°C。用3.8mol/L氢氧化钠溶液调pH值至6。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为3 I。实施例14、取市售壳糖胺聚糖10. 5g，缓慢倒进IOOml浓度为I. 5 %的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原溶于I. Omol/L盐酸。搅拌均匀，搅拌12小时环境温度30°C。用1.8mol/L氢氧化钠溶液调PH值至6。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为7 I。实施例15、取市售壳蛋白聚糖3. 0g，缓慢倒进IOOml浓度为4. 5%的胶原溶液中，边搅拌边倒入。胶原溶液为I型胶原溶于I. 0mol/L盐酸。搅拌均匀后，搅拌24小时，环境温度23°C。用0.8mol/L氢氧化钠溶液调pH值至7。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为2 3。实施例16、取市售壳聚糖盐酸盐I. 2g和海藻酸钠I. 5g，分别缓慢倒进IOOml浓度为I. 5%的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原溶于I. Omol/L盐酸。搅拌均匀后搅拌20小时，环境温度23°C。用2. 0mol/L氢氧化钠溶液调pH值至7. 5。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为9 5。实施例17、取市售海藻酸钠0. 5g和羟丙基纤维钠2. Og,分别缓慢倒进IOOml浓度为I. 5%的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原溶于I. 0mol/L盐酸。搅拌均匀后，搅拌8小时，环境温度5°C。用2.8mol/L氢氧化钠溶液调pH值至6。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为5 3。
实施例18、取市售壳聚糖盐酸盐I. 5g和羧甲基纤维素钠I. 5g，分别缓慢倒进IOOml浓度为
I.5%的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原溶于O. 5mol/L盐酸，搅拌均匀后，搅拌18小时，环境温度25°C。用2. Omol/L氢氧化钠溶液调pH值至8。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为2 I。实施例19、取市售壳聚糖盐酸盐8. Og,缓慢倒进IOOml浓度为10. 0%的胶原溶液中，边搅拌边倒入。其中胶原溶液为I型胶原溶于O. 01mol/L盐酸。搅拌均匀后，搅拌20小时，环境 温度23°C。用2. Omol/L氢氧化钠溶液调pH值至7. 5。将所得复合材料铺板交联成膜。多糖与胶原的质量比为4 5。
权利要求
1.一种由多糖与胶原的复合支架材料，是多糖和胶原溶液混合进行结构重建而形成的复合材料，并在包装前进行交联成膜。其特征包括下列步骤 (1)、市售I型胶原、II型胶原、III型胶原之一或多种，溶于O.Olmol/L O. 5mol/L的盐酸，搅拌均匀，制得浓度为O. I % 15. 0% (w/w)的溶液。
(2)、市售壳聚糖盐酸盐、羧化壳聚糖、糖胺聚糖、蛋白聚糖、壳聚糖乳酸盐、壳聚糖季胺盐、壳聚糖硫酸脂、类透明质酸壳聚糖、海藻酸钠、透明质酸、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维钠或羟丙基纤维素钠其中的一种或两种多糖与胶原溶液中的胶原按质量比为(I 10) (10 I)的比例搅拌混合，形成复合组分。
(3)、复合组分在温度为(1°C 40°C)的环境下混合搅拌，O.5h 24h后，碱溶液调pH值，使最终pH值为出 8)。最后将所得溶液进行铺板交联成膜。
全文摘要
本发明描述了一种可用于临床角膜重建的支架材料及其制备方法。属于医用生物材料领域。主要解决目前临床中角膜供体的来源困难及手术成功率低的问题，通过为角膜受体提供角膜细胞生长基质来实现角膜重建的目的。通过此方法制备所得的材料是多糖、胶原溶液在一定环境温度下，通过调节pH值到一定范围内，然后交联成膜的方法制得，为稳定的、均匀的、透光的、有一定的防水及抗压性的、具有良好生物相容性的材料。有助于角膜移植受体的角膜重建。
文档编号A61L27/26GK102908666SQ201210382499
公开日2013年2月6日 申请日期2012年10月11日 优先权日2012年10月11日
发明者张春红, 王宗龙, 万力 申请人:天津市赛瑞生物技术有限公司