专利名称：雪菊活性部位在制备抗衰老化妆品中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及植物提取物和日化领域，具体为雪菊活性部位在具有抗衰老化妆品领域中的应用。
背景技术：
近年来，随着人们生活水平和审美标准的提高，越来越多的人追求、渴望白皙及洁润的肌肤。因此，具有防止由太阳光线及其它原因引起的色斑、色素沉着作用的美白类化妆品以及皮肤美白制剂的研究与开发，正日益受到各国化妆品生产商和研究者的重视，美白化妆品已成为护肤类化妆品的主流品种之一。然而，随着化学合成化妆品中毒事件的频频发生，人们开始热衷于植物化妆品及 回归自然的美容方法。美白机理美白剂的作用是通过抑制酪氨酸酶活性或者阻断酪氨酸生成黑色素的氧化途径，从而减少黑色素生成达到美白皮肤的效果。皮肤美白剂就是作用于皮肤黑色素生成、代谢过程中，抑制黑色素生成且符合规范的物质，但传统的皮肤美白剂，往往采用化学性物质，如具有增白作用的汞盐和祛斑作用的氢醌。这些化合物虽然有快速达到美白之功效，但对皮肤有毒副作用，长期使用会引起接触性皮炎或引起永久脱色等不良作用，在许多国家已被禁用。目前要求的皮肤美白剂应该符合两个标准一是对酪氨酸酶活性有较高的抑制率，能显著的减少黑色素的生成；二是有较高的安全性，以人体皮肤无毒无刺激。熊果苷、VC及其衍生物和曲酸是目前国内外美白化妆品中较常使用的美白成分。为了开发符合“回归大自然”要求的化妆品，特别是安全，无副作用的美白产品，一些具有很好美白效果的中草药目前越来越受到消费者的青睐。在国际上化妆品发展最有代表性的国家美国、日本、法国和德国等国家中，中草药因其天然药效温和且不良作用少而被广泛认同，从中了解到近年来崇尚自然，远离化学污染的理念。特别是日本化妆品工业的发展趋势看，各化妆品公司使用的中草药已达200余种，目前，在日本含天然中草药的化妆品已占整个化妆品市场的50%以上。因此，寻找开发高效且对人体无副作用或副作用小的天然中草药皮肤美白祛斑制剂已成为目前化妆品领域的一个较被重视的课题。雪菊不是一个独立的物种,其实是生长在新疆的蛇目菊(Coreopsis tinctoria)的商品名称，其学名是蛇目菊、双色金鸡菊。在新疆人们称之为雪菊、昆仑雪菊、昆仑血菊、天山雪菊、高寒雪菊、高寒香菊等。《新华本草纲要》记载雪菊味甘，性平。有清热解毒、化湿的功能。用于急、慢性痢疾，目赤肿痛、湿热痢、痢疾等。目前，已从雪菊中分离鉴定出300多种天然成分，其中包括30多种黄酮类物质，30多种人体必需的矿物元素，20多种氨基酸，数十种芳香族化合物，还有丰富的有机酸、萜烯类、维生素、木脂体、酶类、多糖等具有生物活性的天然成分。现代药理研究表明，雪菊中的挥发油、总皂苷、氨基酸、黄酮类物质，可抵抗病原体，增强毛细血管抵抗力，其中，总黄酮含量达到12%，远远超过了其他各种菊类。黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧化齐U，可有效地清除体内的氧自由基，这种阻止氧化的能力是维生素E的10倍以上，可以阻止细胞的退化、衰老及癌变的发生，雪菊中富含的这些生物总黄酮、萜类物质、含硫化合物，被统称为具免疫调节功能的因子，是降血压、降血脂、调节血糖、抗肿瘤与抗衰老相关药物中重要的元素。综合现有文献资料，未发现雪菊及其所含成分具有抗衰老作用的文献和专利报道。
发明内容
本发明旨在提供一种雪菊活性部位的用途，将该雪菊活性部位应用于制备具有抗衰老效果的化妆品。本发明所要解决的技术问题是在于寻找开发高效且对人体无副作用或副作用小的天然植物抗氧化剂。本发明提供了一种在抗衰老领域有应用潜能的雪菊活性部位。
一种雪菊活性部位在制备具有抗衰老作用的化妆品领域中的应用。所述的雪菊活性部位的提取方法，步骤包括(I)取干燥的雪菊粉末，加入乙醇溶液冷浸后提取2 5次，取滤液；提取方法为常温(10 30°C )下用体积浓度为30% 95%乙醇溶液(优选为60% 75%)冷浸、超声提取10 60分钟；每次提取时，乙醇溶液与雪菊粉末的用量比为5 15ml/g ;(2)合并滤液，去除乙醇后用大孔吸附树脂吸附，再用体积浓度为30% 90%的乙醇溶液(优选为50% 80%，最优选70%)洗脱，收集流分干燥；所述的大孔吸附树脂优选为AB-8树脂。本发明的技术方案为，取雪菊，干燥、粉碎成粗粉，取干燥粉末，以乙醇提取，滤液合并，减压回收溶剂，得到雪菊粗提物；雪菊粗提物经大孔吸附树脂吸附，以乙醇洗脱，收集流份，蒸干，得到雪菊活性部位。测定所得到的活性部位清除自由基能力，其中50% 80%(体积浓度)乙醇溶液洗脱部位具有良好的抗衰老作用，尤其是70% (体积浓度)乙醇溶液洗脱部位，效果最佳。通过上述方法得到的雪菊活性部位，是一种天然的植物抗氧化剂，对人体无副作用，在抗衰老领域有应用潜能。这种雪菊活性部位可用于制备具有抗衰老效果的化妆品如化妆水、爽肤水、乳液、霜膏、洁面霜等。
具体实施例方式实施例I雪菊干燥粉末20g，室温下(10 30°C)以体积浓度为30%乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次IOmin (500W),取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成O. 5mg/ml溶液备用，测定其清除DPPH自由基能力，以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。结果雪菊粗提物清除DPPH自由基能力测试作用IC5tl为428. 3 μ g/mL。实施例2雪菊干燥粉末20g，室温下以体积浓度为60%乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次30min (500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成O. 5mg/ml溶液备用，测定其清除DPPH自由基能力，以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。结果雪菊粗提物清除DPPH自由基能力测试作用IC5tl为120. 8 μ g/mL。实施例3雪菊干 燥粉末20g，室温下以体积浓度为70%乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次30min (500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成O. 5mg/ml溶液备用，测定其清除DPPH自由基能力，以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。结果雪菊粗提物清除DPPH自由基能力测试作用IC5tl为5L 2 μ g/mL。实施例4雪菊干燥粉末20g，室温下以体积浓度为75%乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次30min (500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成O. 5mg/ml溶液备用，测定其清除DPPH自由基能力，以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。结果雪菊粗提物清除DPPH自由基能力测试作用IC5tl为174. 5 μ g/mL。实施例5雪菊干燥粉末20g，室温下(10 30°C)以体积浓度为95%乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次30min (500W),取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成O. 5mg/ml溶液备用，测定其清除DPPH自由基能力，以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。结果雪菊粗提物清除DPPH自由基能力测试作用IC5tl为277. 2 μ g/mL。实施例6活性部位富集取雪菊干燥粉末50g，室温下(10 30°C )以体积浓度为70%乙醇500ml冷浸、超声提取2次，每次30min (500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至无醇味；经AB-8大孔吸附树脂吸附，依次以体积浓度为30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇和90%乙醇洗脱，分别收集各流份、蒸干，分别得到30%乙醇洗脱部位、40%乙醇洗脱部位、50%乙醇洗脱部位、60%乙醇洗脱部位、70%乙醇洗脱部位、80%乙醇洗脱部位和90%乙醇洗脱部位的雪菊活性部位，并配制成不同浓度的溶液备用。实施例7清除DPPH自由基能力测试在化妆品领域，通常抗衰老性能的优劣是用清除DPPH自由基能力测试来表征的，清除DPPH自由基能力测试原理如下I, I-二苯基-2-三硝基苯餅[1，I-Diphenyl-2-pi cry Ihydrazy I radical2, 2~Diphenyl-1- (2, 4, 6-trinitrophenyl) hydrazyl, DPPH]是一种稳定的氮中心有机自由基。DPPH法于1958年被提出，广泛用于地量测定生物试样、分类物质和食品的抗衰老能力。此法是根据DPPH自由基有单电子，在517nm处有一强吸收，其醇溶液呈紫色的特性。当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系，因而可用分光光度计进行快速的定量分析，来检测自由基清除情况，从而评价样品的抗衰老能力。其能力用清除率来表示，清除率越大，则表明其抗衰老能力越强。试验方法I)将不同稀释度的待测样品溶液2ml加入试管中；2)加入 2ml 76 μ mol/L DPPH 乙醇溶液，混匀； 3)室温下避光在黑暗处反应30min ；
4)在525nm处测定吸光度Abs ;每个浓度重复三次测试以保证实验结果的准确性，最后取平均值作为拟合数据。清除率I (%) = [I - (T - TO) /(C-CO) ] X 100%式中TO 2ml水或DMSO加2ml DPPH溶液的吸光度；T : 2ml样品液加2ml DPPH溶液的吸光度；C 2ml样品液加2ml 95%乙醇的吸光度；CO 2ml水或DMSO加2ml 95%乙醇的吸光度； 按照上面公式计算清除率，清除率越大抗衰老能力越强。半数抑制率(IC5tl)的计算=IC5tl值定义为清除率为50%时所需抗氧化剂的浓度。以样品的浓度对自由基清除率作图并进行拟合，读取计算IC5tl值，结果如表I。表I雪菊各部位清除DPPH自由基活性测试结果
部位粗 30%40%50% 乙60%70%80%90% 乙
提乙醇乙醇醇洗脱乙醇乙醇乙醇醇洗脱
物洗脱洗脱部位洗脱洗脱洗脱部位
部位部位部位部位部位
IC M 2 87.298 O108.548.23.451.0284.3
(pg/mL)实施例6所得30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇和90%乙醇洗脱得到的雪菊活性部位清除DPPH自由基的IC5tl分别为87. 2 μ g/mL,98. 6 μ g/mL、108. 5 μ g/mL、48. 2 μ g/mL、3. 4 μ g/mL、51. 0 μ g/mL 和 284. 3 μ g/mL。由此可见，70% 乙醇洗脱得到的部位清除DPPH自由基能力最强。实施例6中，分别用30%、60%、75%和95%乙醇溶液冷浸和超声提取雪菊干燥粉末，其余步骤操作相同。检测不同浓度乙醇洗脱部位的活性，结果与实施例7相似，70%乙醇洗脱部位的清除DPPH自由基能力最强，IC50为粗提物的约7%。
权利要求
1.雪菊活性部位在制备具有抗衰老作用化妆品中的应用。
2.根据权利要求I所述雪菊活性部位的应用，其特征在于，所述的雪菊活性部位的制备方法包括以下步骤 (1)取干燥的雪菊粉末，加入乙醇溶液冷浸后提取2 5次，取滤液； (2)合并滤液，去除乙醇后用大孔吸附树脂吸附，再用体积浓度为30 90%的乙醇溶液洗脱，收集流分干燥。
3.根据权利要求2所述雪菊活性部位的应用，其特征在于，步骤(I)中，所述乙醇溶液的体积浓度为30% 95%，提取方法为超声提取10 60分钟。
4.根据权利要求2或3所述雪菊活性部位的应用，其特征在于，步骤(I)中，所述乙醇溶液的体积浓度为60% 75%。
5.根据权利要求2或3所述雪菊活性部位的应用，其特征在于，步骤(I)中，所述乙醇溶液的体积浓度为70%。
6.根据权利要求2所述雪菊活性部位的应用，其特征在于，步骤(I)中，每次提取时，乙醇溶液与雪菊粉末的用量比为5 15ml/g。
7.根据权利要求2所述雪菊活性部位的应用，其特征在于，步骤(2)中，所述乙醇溶液的体积浓度为50% 80%。
8.根据权利要求2或7所述雪菊活性部位的应用，其特征在于，步骤(2)中，所述乙醇溶液的体积浓度为70%。
9.根据权利要求2所述雪菊活性部位的应用，其特征在于，所述大孔吸附树脂为AB-8大孔吸附树脂。
全文摘要
本发明涉及植物提取物在具有抗衰老作用的化妆品领域中的应用，公开了一种雪菊活性部位在具有抗衰老作用化妆品中的应用。这种雪菊活性部位的制备方法为取雪菊干燥粉末，以乙醇提取，滤液合并，减压回收溶剂，得到雪菊粗提物；雪菊粗提物经大孔吸附树脂吸附，以乙醇洗脱，收集流份，蒸干，得到雪菊活性部位。这种雪菊活性部位，是一种天然的植物抗氧化剂，对人体无副作用，在抗衰老领域有应用潜能。
文档编号A61K8/97GK102961280SQ20121046630
公开日2013年3月13日 申请日期2012年11月19日 优先权日2012年11月19日
发明者金家宏, 夏增华, 曹平 申请人:伽蓝(集团)股份有限公司