专利名称：治疗癌症的冻干蜀羊泉的制作方法
技术领域：
本发明涉及药品，特别涉及一种治疗癌症的冻干蜀羊泉，属医药技术领域。
背景技术：
蜀羊泉为爺科植物青杞(Solanum septemlobum Bunge)的干燥地上部分。别名有:羊泉，青杞，漆姑草，红葵，野枸杞，野茄，小孩拳，红耳坠等。夏末采割，除去杂质，晒干。性苦、寒，归肝，胃经。具清热解毒之功效。用于热毒疮肿，咽喉肿痛，皮肤痒疹。《本草纲目》中蜀羊泉项下恭曰:“此草俗名漆姑，叶以菊，花紫色，子类枸杞子，根如远志,无心有惨。”《中药大辞典》中为白英(白毛藤)和千年不烂心。《陕西中草药》中说在陕北叫蜀羊泉，陕南叫白毛藤，其基原植物是白英。《中国高等植物图鉴》中青杞项下别名有蜀羊泉。《中药材简介》中蜀羊泉为青柜。《全国中草药汇编》下册蜀羊泉项下别名有青把。《新编中药学》中蜀羊泉是青杞。本发明所述蜀羊泉为爺科植物青杞(Solanum septemlobumBunge) ο 白英(Solanum lyratum Thunb)和千年不烂心(Solnum dnlcamars L),非本发明所述的蜀羊泉。经过试验我们发现，冻干蜀羊泉抗癌活性高于晒干的蜀羊泉。
发明内容
本发明的目的是以蜀羊泉为原料制备高活性的治疗肿瘤的药物。本发明的目的是这样实现的，以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物。以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物，特征在于以冻干蜀羊泉全草为原料制备治疗肿瘤的药物。本发明所述的以冻 干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物，优选以冻干蜀羊泉果为原料制备治疗肿瘤的药物。本发明所述的冻干，特征在于用以下工艺冻干:
鲜蜀羊泉全草，洗净去杂，切成小段；装盘，装盘重量为5-8 kg/m%逐渐降温至-20°C -60°C进行预冻；升华干燥抽真空至系统绝对压力为40 60Pa，开始加热升温至30°C 60°C，升华干燥15 24小时；解析干燥保持物料温度在35°C 65°C，使含水量达到2 3%,得冻干蜀羊泉。本发明所述的冻干，特征在于用以下工艺冻干蜀羊泉果:取蜀羊泉果用水洗净；装盘，装量为5-8Kg/ rtf左右；冻结温度控制在-28 -32°C之间；达到控制温度后，立即开启真空泵抽真空至干燥室压力40-50Pa，然后启动加热开关，促进升华；升华的温度应控制在40°C以下；解析阶段的温度应控制在45°C以下，当物料温度与加热温度接近时干燥结束，得冻干蜀羊泉果。冻干蜀羊泉的目的是解决晒干有效成分损失较大，抗癌活性低等技术问题。在蜀羊泉收获季节直接用鲜蜀羊泉制备本发明的药物可以降低成本。据此，本发明所述的冻干蜀羊泉在蜀羊泉收获季节本发明的冻干蜀羊泉可以替换为鲜蜀羊泉，或冻干蜀羊泉果可以替换为鲜蜀羊泉果，其用量按干品折算。本发明所述的以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物，是在现有技术的基础上，采用中药制剂常规方法制备成任何可药用的制剂。例如，将冻干蜀羊泉全草或冻干蜀羊泉果粉碎，制成散剂冲服；将冻干蜀羊泉全草或冻干蜀羊泉果通过进一步提取，提取物加入辅料制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂，但这并不限制本发明的保护范围。本发明所述的提取是低温提取；用水、乙醇、甲醇或它们的溶液回流提取、浸溃、渗漉。本发明所述的以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物，是以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肺癌、膀胱癌、子宫颈癌、食道癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、乳癌等多种癌症的药物。下面通过试验例说明本发明的有益之处。—、晒干蜀羊泉和冻干蜀羊泉水溶性浸出物和生物碱含量比较
1、制备晒干蜀羊泉和冻干蜀羊泉
制备晒干蜀羊泉:取蜀羊泉除去杂质，喷淋清水，少润，切段，晒干。制备冻干蜀羊泉:
1)鲜蜀羊泉原料,去除杂质,切成2-5cm的小段；
2)将小段装盘， 装盘重量为3kg / m%逐渐降温至-40°C进行预冻，冻结速度约为
0.5-1.(TC /min。3)升华干燥抽真空至系统绝对压力为50Pa，开始加热升温至50°C，升华干燥24小时；
4)解析干燥保持物料温度在45°C，使含水量达到2 3%，得冻干蜀羊泉。2、晒干蜀羊泉和冻干蜀羊泉水溶性浸出物、生物碱含量测定
I)采用《中国药典》2010年版一部，附录XA方法进行水溶性浸出物含量测定，结果:晒干蜀羊泉水浸出物含量为12.32%,冻干蜀羊泉水溶性浸出物含量为19.68%ο2)用以下方法测定晒干蜀羊泉和冻干蜀羊泉的生物碱含量。取龙葵晒干药材和冻干龙葵药材样品细粉各约2.0g,精密称定，分别加入无水乙醇50ml，浸泡过夜(12时)，超声提取40min，滤过，滤液置50°C恒温水浴上蒸干，残渣加20mll0%醋酸溶液使溶解，用等体积石油醚多次萃取，至石油醚层无色，水层转入蒸发皿中，用浓氨水调PH至9-10，置50°C恒温水浴上蒸干，残渣加20mllmol盐酸乙醇溶液使溶解，回流水解Ih,取出，放冷，用浓氨水调PH至9-10，再用氯仿萃取3次(30ml, 20ml, 10ml),合并氯仿萃取液，置50°C恒温水浴上蒸干，残渣用氯仿转移至IOml容量瓶中，氯仿定容，取5ml转移至分液漏斗中，加入7ml0.1%的溴甲酚绿乙醇溶液显色，收集氯仿层，多次萃取至氯仿层无色，合并氯仿层，置50°C恒温水浴上蒸干，残渣加氯仿少量多次溶解并定容至10ml，各在414nm处测吸光度值，计算蜀羊泉生物碱含量。结果:晒干蜀羊泉和冻干蜀羊泉的生物碱含量分别为1.11%和2.42%,冻干蜀羊泉生物碱含量明显高于晒干蜀羊泉。水溶性浸出物常被作为评价药材质量的重要指标。蜀羊泉中的生物碱是抗肿瘤的主要有效成分，其含量越高生物活性越高。以上实验结果可以看出冻干蜀羊泉水溶性浸出物含量明显高于晒干蜀羊泉，冻干蜀羊泉生物碱含量明显高于晒干蜀羊泉，进而可知药理活性高于晒干蜀羊泉。
二、晒干蜀羊泉和冻干蜀羊泉对人肝癌细胞株SMMC-7721, HepG2和胃癌细胞株MGC-803增殖的抑制作用试验。1、制备晒干蜀羊泉和冻干蜀羊泉提取物分别取晒干蜀羊泉和冻干蜀羊泉粉碎，各加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2小时，第二次加水8倍量，煎煮I小时，合并药液，药液滤过，取滤液，浓缩至相对密度为1.10 (60°C)时，加入乙醇使含醇量达到75%，沉淀，静置36小时，吸取上清液，回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎；得晒干蜀羊泉和冻干蜀羊泉提取物。2、方法MTT法SMMC-7721、!fepG2和MGC-803三种细胞株用含有10%灭活新生小牛血清，100U/ml的青霉素和100 μ g/ml链霉素的DMEM培养基在37°C，5%C02条件下培养，取对数生长期细胞用于实验。分别取浓度为2X 106/ml的SMMC-7721、HepG2和MGC-803细胞株90μ I于96孔板中培养，空白对照组加入10μ 1PBS，给药组分别加入10 μ I不同剂量的受试药液，药物终浓度(按生药计算)。设阴性对照组，阴性对照组是在不含细胞的培养液中加入不同剂量的药液。设6个平行孔，细胞给药后培养24h，每孔加入5.0 mg/mlMTT溶液20 μ 1，振荡混匀后，置于培养箱中继续孵育4h，弃去各孔中的上清液，再加入100 μ 1DMS0中止反应，振荡混匀10 min，待其各孔中的紫色结晶完全溶解后，用酶标仪在490nm处测定其吸光值(A490)。按下面公式计算细胞抑制率:
生长抑制率(%) = (N组OD均值-B组OD均值)一 (T组OD均值-TC组OD均值)/N组OD均值-B组OD均值X 100%。3、结果见表1、表2、表3。表I 对SMMC-7721的抑制率结果
权利要求
1.以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物。
2.根据权利要求1的以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物，特征在于以冻干蜀羊泉全草或冻干蜀羊泉果为原料制备治疗肿瘤的药物。
3.根据权利要求1或权利要求2的以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物，特征在于用以下工艺冻干龙葵全草:鲜龙葵全草，洗净去杂，切成小段；装盘，装盘重量为5-8 kg /m2，逐渐降温至-20°C -60°C进行预冻；升华干燥抽真空至系统绝对压力为40 60Pa，开始加热升温至30°C 60°C，升华干燥15 24小时；解析干燥保持物料温度在35°C 65°C，使含水量达到2 3%，得冻干蜀羊泉全草。
4.根据权利要求1或权利要求2的以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物，特征在于用以下工艺冻干蜀羊泉果:取蜀羊泉果用水洗净；装盘，装量为5-8Kg/nf左右；冻结温度控制在-28 -32°C之间；达到控制温度后，立即开启真空泵抽真空至干燥室压力40-50Pa，然后启动加热开关，促进升华；升华的温度应控制在40°C以下；解析阶段的温度应控制在450C以下，当物料温度与加热温度接近时干燥结束，得冻干蜀羊泉果。
5.根据权利要求1或权利要求2或权利要求3的以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物，特征在于冻干蜀羊泉替 换为鲜蜀羊泉全草或鲜蜀羊泉果，其用量按干品折算。
全文摘要
本发明涉及以冻干蜀羊泉为原料制备治疗肿瘤的药物，特征在于以冻干蜀羊泉全草或冻干蜀羊泉果为原料制备治疗肿瘤的药物，优选以冻干蜀羊泉果为原料制备治疗肿瘤的药物。冻干蜀羊泉的疗效好于晒干的蜀羊泉。
文档编号A61P35/00GK103181978SQ20131006576
公开日2013年7月3日 申请日期2013年3月3日 优先权日2013年3月3日
发明者李诗标, 张为胜, 孙志芳, 牛凤菊, 苏静 申请人:济南康众医药科技开发有限公司