一种治疗肺部感染性疾病的药物及其应用的制作方法
【专利摘要】一种治疗肺部感染性疾病的药物及其应用，属于药物【技术领域】。该药物包含从四方蒿或风轮菜提取的总黄酮、新橙皮苷二氢查耳酮、柚皮苷二氢查耳酮、7-甲氧基汉黄芩素、6,7-二甲氧基黄芩素或其药学上可接受的盐中任意1种物质或任意2种以上物质的组合物。本发明一方面提供了一种治疗肺部感染性疾病的药物，该药物具有抗病毒，抑制病毒诱导的肺损伤、肺水肿、肺炎，降低支气管黏液分泌等药理作用，本发明另一方面确定了一种治疗肺部感染性疾病的药物的应用，其可作为治疗急性肺炎、病毒性肺炎、肺水肿或支气管炎药物使用。
【专利说明】一种治疗肺部感染性疾病的药物及其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于药物【技术领域】，具体涉及一种治疗肺部感染性疾病的药物及其应用。【背景技术】
[0002]肺部感染在呼吸系统疾病或感染性疾病中占有较大的比重。由于目前医疗条件的限制，医源性及续发性肺部感染的几率日趋严重。尽管近年来抗生素和其它抗微生物药物的应用，有效控制了病情的发展，但随着病原微生物基因变异速度的加快及耐药菌(如超级细菌)的出现，以及患者药敏性的降低，肺部感染总体发病率和死亡率并无明显降低，且抗生素类药物的长期使用，具有较为明显的毒副作用。天然药物在治疗肺部感染性疾病方面具有一定的优势，可通过多途径，多靶点而发挥疗效。
[0003]四方蒿 Elsholtzia blanda Benth.或风轮菜 Clinopodium chinense (Benth.)
0.Kuntze [Calamintha Chinensis Benth.]为传统中药材,具有疏风清热、解毒消肿的功效，临床用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、肝炎、肠炎等症。在江浙地区资源丰富。但其药效物质及药理作用尚不清楚。
【发明内容】
[0004]针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种治疗肺部感染性疾病的药物及其应用的技术方案。
[0005]所述的一种治疗肺部感染性疾病的药物，其特征在于包含从四方蒿或风轮菜提取的总黄酮、新橙皮苷二氢查耳酮、柚皮苷二氢查耳酮、7-甲氧基汉黄芩素、6，7-二甲氧基黄芩素或其药学上可接受的盐中任意I种物质或任意2种以上物质的组合物。
[0006]所述的一种治疗肺部感染性疾病的药物，其特征在于活性成分占总重量的1%。~99.9%，所述的活性成分为从四方蒿或风轮菜提取的总黄酮、新橙皮苷二氢查耳酮、柚皮苷二氢查耳酮、7-甲氧基汉黄芩素、6，7- 二甲氧基黄芩素或其药学上可接受的盐。
[0007]所述的一种治疗肺部感染性疾病的药物在制备治疗肺部感染性疾病药物中的应用。
[0008]所述的一种治疗肺部感染性疾病的药物的应用，其特征在于所述的肺部感染性疾病为急性肺炎、病毒性肺炎、肺水肿或支气管炎。
[0009]本发明一方面提供了一种治疗肺部感染性疾病的药物，该药物具有抗病毒，抑制病毒诱导的肺损伤、肺水肿、肺炎，降低支气管黏液分泌等药理作用，本发明另一方面确定了一种治疗肺部感染性疾病的药物的应用，其可作为治疗急性肺炎、病毒性肺炎、肺水肿或支气管炎药物使用。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]图1药物对病毒感染小鼠肺损伤保护作用的HE染色病理观察图(放大倍数X 200) 图2药物对病毒感染小鼠肺组织AQP5蛋白表达的影响结果图(放大倍数X200)图3药物对病毒感染小鼠气管及肺组织MUC5AC蛋白表达的影响结果图(放大倍数 X200)。
【具体实施方式】
[0011 ] 以下结合实施例来进一步说明本发明。
[0012]实施例1:四方蒿或风轮菜总黄酮、新橙皮苷二氢查耳酮、柚皮苷二氢查耳酮、7-甲氧基汉黄芩素、6，7-二甲氧基黄芩素的制备
1)将5Kg四方蒿或风轮菜根茎粉碎后，加药材质量10倍的水提取，浓缩至流浸膏(含水量12%左右)，趁热加浸膏体积5倍量的95%乙醇醇沉；
2)减压浓缩乙醇提取物，至流浸膏(含水量12%左右)，加浸膏体积3倍量的蒸馏水混悬，以乙酸乙酯萃取4 - 5次，每次用量为混悬液体积3倍量的乙酸乙酯，减压或真空干燥浓缩乙酸乙酯提取物至干浸膏，即得到四方蒿或风轮菜总黄酮；
3)取20g四方蒿或风轮菜总黄酮湿法装柱，进行硅胶柱层析，以乙酸乙酯和石油醚(溶剂比例1:20 — 10:1)或乙酸乙酯和氯仿(溶剂比例1:5 — 5:1)洗脱；
4)硅胶薄层检测层析流份，每50mL收集一流份，以石油醚-乙酸乙酯-冰醋酸(7: 3:0.5)为展开剂，经碘熏后日光下检识，具有相同斑点的流份合并，浓缩至干，分别得到新橙皮苷二氢查耳酮、新柚皮苷二氢查耳酮、7-甲氧基汉黄芩素和6，7- 二甲氧基黄芩素。
[0013]实施例2:药效试验 I材料与方法
利巴韦林泡腾片(批号:091210)，浙江艾康礼德制药有限公司。
[0014]甲型流感病毒 小鼠肺适应株A/PR/8/34，病毒效价为1: 512。本实验在浙江省医学科学院ABSL2生物安全实验室中进行。
[0015]1.1动物与分组
清洁级ICR小鼠，雌雄各半，18~22g，由浙江省实验动物中心提供，实验动物许可证号:SCXK(浙)2008-0033。按体重随机分为6组:正常对照组、模型对照组、利巴韦林给药组和新橙皮苷二氢查尔酮(NHDC)给药组、柚皮苷二氢查尔酮(NDC)给药组，四方蒿或风轮菜提取的总黄酮(TF)给药组，每组10只。
[0016]1.2模型建立及给药
除正常对照组给予等剂量生理盐水滴鼻外，其余各组在乙醚轻度麻醉下以10 LD50病毒量滴鼻感染小鼠，30 μ L/只。于感染后24 h开始灌胃给药。正常对照组和模型对照组在同等条件下给予生理盐水灌胃，每天I次，连续4d。
[0017]1.3取材及保存
于末次给药后禁食禁水8 h，称重，摘眼球取血后处死，迅速取肺组织，用生理盐水洗净并用无菌滤纸吸干后称全肺重，并计算肺指数及肺指数抑制率。取左侧肺叶称湿量(W)，80°C烘箱中烘烤48 h后称干量(D)，计算肺组织W/D比值。取右侧肺组织10%福尔马林液固定，用于HE染色和免疫组化分析。
[0018]L 4血清炎性介质的测定
将摘眼球后所取血液置试管中4°C，3000 rpm/min离心20min，吸取上清，置_20°C冰箱中，备用。采用双抗体夹心ABC-ELISA法，分别测定小鼠血清中IL-6、LTB4和ICAM-1含量。检测程序按照试剂盒说明书进行。
[0019]1.5肺脏形态学观察
将固定后的肺组织样本行石蜡包埋切片，切片5 μ m，经HE染色、中性树胶封固后显微镜观察照相。
[0020]1.6免疫组化分析
肺组织常规包埋切片后，脱蜡、透明。采用一步法，一抗浓度为4 mg/mL，同时设立阴性对照片(用抗体稀释液体PBS替代一抗)，DAB颜色，苏木精复染，中性树胶封片。阳性结果为细胞膜(AQP5或MUC5AC)上显棕黄色颗粒沉淀；阴性对照片显示细胞核及细胞膜呈蓝色，胞质及整片组织呈淡蓝色背景。采用ImagepiO-Plus 4.0软件分析，计算图像光密度值。
[0021]1.7药物对病毒增殖的抑制作用
取对数生长期细胞ifep-2或MDCK，以RPM1-1640培养液稀释至浓度约I X IO4个/mL，接种于96孔板，每孔加入50 UL (100 TCID5tl)呼吸道合胞病毒或流感病毒溶液，置37°C，50mL/LC02培养箱中培养2h，弃上清，加入不同浓度的含药维持液，每孔0.2mL,继续培养48h。当细胞病变达到75%以上时，每孔加入含5.0 g/L MTT的培养液50 μ L，继续培养2h，弃上清，每孔加DMSO溶解液100 μ L，混匀10 min，于570 nm波长处，测其吸光度(OD)值。计算药物对RSV抑制率。
[0022]2.0统计方法 实验数据采用SPSS 17.0统计分析软件进行统计学处理，所得结果以均数土标准差(7 土s)表不。取？ < 0.05作为显著性差异水平。
[0023]3 结果
3.1药物对病毒感染小鼠肺损伤及肺水肿的保护作用结果 表1药物对病毒感染小鼠肺损伤及肺水肿的保护作用(n=10，I ±s)
【权利要求】
1.一种治疗肺部感染性疾病的药物，其特征在于包含从四方蒿或风轮菜提取的总黄酮、新橙皮苷二氢查耳酮、柚皮苷二氢查耳酮、7-甲氧基汉黄芩素、6，7-二甲氧基黄芩素或其药学上可接受的盐中任意I种物质或任意2种以上物质的组合物。
2.如权利要求1所述的一种治疗肺部感染性疾病的药物，其特征在于活性成分占总重量的1%。~99.9%，所述的活性成分为从四方蒿或风轮菜提取的总黄酮、新橙皮苷二氢查耳酮、柚皮苷二氢查耳酮、7-甲氧基汉黄芩素、6，7- 二甲氧基黄芩素或其药学上可接受的盐。
3.如权利要求1所述的一种治疗肺部感染性疾病的药物在制备治疗肺部感染性疾病药物中的应用。
4.如权利要求3所述的一种治疗肺部感染性疾病的药物的应用，其特征在于所述的肺部感染性疾病为急性肺炎、.病毒性肺炎、肺水肿或支气管炎。
【文档编号】A61P11/00GK103463183SQ201310414363
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年9月12日 优先权日:2013年9月12日
【发明者】余陈欢, 应华忠, 陈勤, 钟宇森, 臧家娜, 方杰 申请人:浙江省医学科学院