一种多价联合疫苗的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种多价联合疫苗，每剂量含A群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20μg，C群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20μg，Y群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20μg，W135群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20μg，B群脑膜炎球菌减毒活疫苗10-20μg，麻疹减毒活疫苗10-20μg。多价联合疫苗可以减少免疫针次、降低免疫成本、增加疫苗的可接受性；为满足婴幼儿需求提供了研究方向，并有望减轻婴幼儿的痛苦和家长的精神负担；利用不同疫苗间的协同作用，能够降低菌血症的爆发概率，增强B群脑膜炎球菌LOS类疫苗的免疫原性，或者B群脑膜炎球菌外模蛋白的免疫作用、延长免疫时间。
【专利说明】一种多价联合疫苗
【技术领域】
[0001]本发明属于生物医药【技术领域】，涉及一种多价联合疫苗。
【背景技术】
[0002]脑膜炎双球菌，又名脑膜炎奈瑟菌或脑脊髓膜炎双球菌，简称为脑膜炎球菌，是一种革兰氏阴性菌，因其所导致的脑膜炎而闻名。 [0003]脑膜炎双球菌主要导致人体流行性脑脊髓膜炎的发生，也可引起肺炎等其他呼吸道疾病。病菌存在于病人或带菌者的鼻咽分泌物中，通过呼吸道传染。流脑的流行有明显的季节性和周期性，冬春季发病率高，一般从每年I月份开始发病，三四月份是高峰期。据统计，每年的2到4月，“流脑”的发病率占全年的60%左右，其特点使起病急、病情重、变化多、传播快、流行广，来势凶猛，病死率高，危害极大。人群对流脑球菌普遍易感，在各年龄组人群中均可发生，但更易于发生在小年龄段儿童，患者主要是15岁以下的少年儿童，特别是6个月至2岁的婴幼儿。近年来，临床上也发现有成年人患此病，而成人的病死率不高。
[0004]根据其荚膜多糖的特异性可以将脑膜炎球菌分成A、B、C、D、29E、H、1、K、L、W135、X、Y和Z13个血清群，所有血清群的细菌均可致病。但A、B、C、Y和W135最厉害，差不多是造成所有人类患病个案的血清群。
[0005]国际上，针对A、C、Y和W135血清群的单价疫苗或者多价联合疫苗已经非常成熟。但是由于B群多糖由于结构与人体神经组织中的一个成份类似，在人体中基本不产生免疫应答。业已证实，人体免疫系统对B群荚膜多糖耐受，因其具有存在于神经或其它组织的人表面粘附分子N-CAMl的表位。
[0006]近年来，人们已尝试研制各种类型的疫苗用于B类脑膜炎疾病的预防和控制。主要包括蛋白类疫苗(0MV)、荚膜多糖类疫苗、LOS类疫苗及减毒活疫苗。OMV的缺陷:①候选抗原具有高度变异性从流行株的分离到疫苗的应用需要一个相对长期的过程；③婴幼儿是N群脑膜炎的主要感染人群，而这种疫苗在婴幼儿体内的保护性较低；④只产生短期的免疫保护作用。LOS类疫苗作为B群脑膜炎球菌疫苗的缺陷:①从目前流行病学资料来看，以LOS作为主要抗原的B群脑膜炎球菌疫苗还不足以具有覆盖全球的保护性；@L0S本身的性质决定了其弱的免疫原性，若要发展此类疫苗首先必须提高其免疫原性；③LOS疫苗的临床试验对象主要为大龄人群，在婴幼儿体内其免疫原性较差。
[0007]B型嗜血流感杆菌(Hib)是引起儿童细菌性脑炎、肺炎、蜂窝组织炎等疾病的主要病原体在使用有效的疫苗前，美国每年有1.6~2.5万多名儿童因Hib引起感染；其中60%的儿童患上最严重的永久性功能丧失。其他感染包括菌血症、肺炎、脓胸、心包炎、蜂窝组织炎、脓毒性关节炎及会咽炎等。
【发明内容】
[0008]本发明的目的在于针对上述现有技术的不足，提供一种多价联合疫苗，可同时预防A、B、C、Y、W135血清型的流行性脑膜炎球菌、麻疹、B型嗜血流感杆菌中多种菌类的感染，满足上述需要。
[0009]为达到上述目的，本发明采取的技术方案是:提供一种多价联合疫苗，其特征在于，其中每剂量含A群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，C群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 Ug, Y群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，W135群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，B群脑膜炎球菌减毒活疫苗10-20 μ g，麻疹减毒活疫苗10-20 μ g。
[0010]一种多价联合疫苗，其特征在于，其中每剂量含A群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，C群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，Y群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，W135群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，B群脑膜炎球菌减毒活疫苗10-20 μ g，麻疹减毒活疫苗10-20 μ g，B型流感嗜血杆菌荚膜多糖10-20 μ go
[0011]一种多价联合疫苗，其特征在于，其中每剂量含A群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，C群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，Y群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，W135群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g, B群脑膜炎球菌减毒活疫苗10-20 Ug, B型流感嗜血杆菌荚膜多糖10-20 μ g。
[0012]一种多价联合疫苗，其特征在于，其中每剂量含A群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，C群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，Y群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，W135群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g, B群脑膜炎球菌外模蛋白35-45 Ug, B型流感嗜血杆菌荚膜多糖10-20 μ g。
[0013]一种多价联合疫苗，其特征在于，其中每剂量含A群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，C群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，Y群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g，W135群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖15-20 μ g, B群脑膜炎球菌LOS类疫苗20-30 yg, B型流感嗜血杆菌荚膜多糖10-20 μ g。
[0014]本发明的重点在于发现:
[0015](一)将A群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，C群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，Y群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，W135群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，B群脑膜炎球菌减毒活疫苗，麻疹减毒活疫苗配制成联合疫苗后，能够降低菌血症的爆发概率，并增强麻疹减毒活疫苗的免疫作用；
[0016](二)将A群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，C群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，Y群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，W135群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，B群脑膜炎球菌LOS类疫苗，B型流感嗜血杆菌荚膜多糖配制成联合疫苗后，可增强B群脑膜炎球菌LOS类疫苗的免疫原性；
[0017](三)A群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，C群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，Y群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，W135群流行性脑膜炎奈瑟氏球菌荚膜多糖，B群脑膜炎球菌外模蛋白，B型流感嗜血杆菌荚膜多糖配制成联合疫苗，可以增强B群脑膜炎球菌外模蛋白的免疫作用，延长免疫时间。
[0018]需要强调的是，本发明并非是将流脑、B型流感嗜血杆菌或者麻疹抗原分别简单地混合成流脑-麻疹联合疫苗、流脑-麻疹-B型流行嗜血杆菌联合疫苗、流脑-B型流行嗜血杆菌联合疫苗，而是依据上述三项独立发现构成了本发明的核心内容。[0019]上述各多价联合疫苗还包含0.5-lmg的铝佐剂成份和可提高人体免疫反应的人细胞因子、单磷脂A等。
[0020]上述各多价联合疫苗可以通过以下制备工艺制备:
[0021]多糖原料:选用A、C、Y、W135群脑膜炎球菌菌种、B型流感嗜血杆菌菌种经过发酵培养生产出A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖、B型流感嗜血杆菌荚膜多糖，其纯化步骤可以为目前通用的常规步骤。
[0022]B群脑膜炎球菌减毒活疫苗，用DNA重组技术制备减毒活疫苗经鼻内免疫。参见Tang C，Moxon Rj Levine M M.For discussion live attenuated vaccines for group BMeningococcus[J].Vaccine, 1999，17(2):114-117。
[0023]麻疹减毒活疫苗，采用专利
【发明者】侯文礼, 冯晓 申请人:成都康华生物制品有限公司