一种从板栗总苞提取植物多酚的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从板栗总苞提取植物多酚的方法，包括如下步骤：将所述板栗总苞粉末加入至乙醇水溶液中得到所述板栗总苞的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声辅助提取后，离心，真空旋转蒸发浸提液，将浓缩浸提液利用大孔吸附树脂进行纯化，收集乙醇洗脱液，减压旋蒸浓缩，干燥至粉末，得到棕红色的板栗总苞提取物粉末。本发明具有如下优点:板栗总苞提取物得率高，其中植物多酌含量高，质量好；该生产工艺简单、操作简便、成本低，无污染，高提取率，适合工业化生产。该发明使占板栗产量1.8倍的板栗总苞废弃物得到最大利用，提高板栗产业附加值；同时为食品和饲料工业开辟了一种的天然植物多酚抗氧化剂新资源。
【专利说明】一种从板栗总苞提取植物多酚的方法
【技术领域】
[0001]一种从板栗总苞提取植物多酚的方法。
【背景技术】
[0002]板栗(castanea mollissina Blume)属壳斗科(Fagceae)栗属乔木经济植物，素有〃干果之王〃的美称，是世界著名的干果之一。我国大部分地区均有分布，尤其以华北和长江流域栽培集中，产量居世界第一。近年来，我国板栗产量达到全世界年产量的60%以上，现在仍以年11%的速度增加。板栗总苞又名风栗壳、板栗壳斗，具有健脾益气、补肾强筋、散结解毒之功效，治疗丹毒、肿毒等疾病，板栗总苞的水煎液、醇溶物、乙酸乙酯提取物具有极强的抗菌、消炎作用和抗凝血、升高白细胞等生物活性，同时还具有抗氧化作用、抗衰老作用和抗糖尿病作用，可以被用来制成具有抗病促生长作用的天然食品添加剂、化妆品添加剂和饲料添加剂。同时板栗毛壳资源丰富，成本低廉，对其开发利用可以替代饲用抗生素的使用。抗生素、激素类药品和化学合成药物在畜牧业中的大量使用，带来严重的化学药品残留、耐药性和毒副作用，使消费者对现在的望而却步。而多酚是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物，包括烷醇类、花色苷类、黄酮醇类、酚酸类，原花青素等，儿茶素类。目前对板栗总苞的开发仅有中国专利CN102140123A报道了从板栗栗蓬中提取鞣花酸鞣质的方法，此方法公开了鞣质中鞣花酸的提取及其含量的测定方法，CN102115611A报道了板栗苞汽爆联产色素、栲胶和活性炭的方法，CN101402657A报道了板栗壳多酚的制备方法，CN101407640A报道了板栗壳棕色素的提取方法。但是板栗总苞多酚提取的专利国内还没有，如何处理这些废弃物，提高其利用率，实现其循环产业发展，增加传统板栗种植业新的经济增长点己成为新的研究方向，具有良好的开发前景和经济社会效益，同时，减少环境污染，提高板栗的附加值，增加农民的副收入，带动农村经济发展。本发明公开了板栗总苞多酚超声波辅助提取的方法，提取工艺的优劣直接影响多酚的利用率，一般来说，常用的提取植物中多酚类物质的方·法主要有溶剂萃取法、超声辅助提取法、微波辅助提取法、超临界CO2萃取法等。本发明采用超声辅助提取法，对板栗总苞多酚进行提取，并优化提取条件。近几年来，利用超声波提取植物中的活性物质取得了良好的效果，超声波辅助提取技术是利用弹性机械振动波，空化效应、机械效应和热效应三大效应，破坏植物细胞，使溶媒渗透到植物细胞中，从而加速植物多酚成分溶解，以提高其浸出率。己有研究表明，超声波技术己经开始广泛地应用于天然植物提取研究领域。超声波辅助提取与水浴提取方法相比，具有工艺简单、提取时间短、提取温度低、回收率高、氧化损耗小、节时、节能、提取率高、成本低廉等特点，具有潜在的工业化生产推广价值。张立华等对石榴叶多酚提取方法进行了研究，结果表明，不管是采用何种提取溶剂，超声波提取的效果都比水浴提取的效果好，其中以50%乙醇和70%丙酮为溶剂的提取率比水浴提取率大约提高了 5%。Virot等研究了超声辅助提取食品加工过程副产物中的抗氧化成分，与传统方法相比，超声辅助萃取可显著提高产品得率，是一种相对快速的提取方法，可以替代传统方法。Hemwimol等研究超声辅助提取海巴戟中的抗氧化活性物质，与浸泡和索氏抽提相比，超声辅助提取可以提高提取效率。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种从板栗总苞中提取多酚的方法。
[0004]本发明提供的一种从板栗总苞中提取多酚的方法，包括如下步骤:将所述板栗总苞粉末加入至乙醇水溶液中得到所述板栗总苞的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声辅助提取后，离心，真空旋转蒸发浸提液，将浓缩浸提液利用大孔吸附树脂进行纯化，收集乙醇洗脱液，减压旋蒸浓缩，干燥至粉末，得到棕红色的板栗总苞提取物粉末。
[0005]上述方法中，所述板栗总苞粉末的粒度为60目。
[0006]上述方法中，所述乙醇水溶液中乙醇质量百分含量为35% -75%，如40%。
[0007]上述方法中，所述板栗总苞的乙醇水分散液为液料比:每Ig板栗总苞粉末加15-35mL的乙醇水溶液，液料比可为10: 1.5: 1、20:1等。
[0008]上述方法中，所述超声辅助提取中设有超声温度和超声时间两个因素，其中超声温度为 25°C -75°C，如，25°C >35°C 等；超声时间为(20-60) min 如 20min、30min 等。
[0009]上述方法中，所述离心的条件是4000r/min, 15min。
[0010]上述方法中，所述真空旋蒸浓缩板栗总苞多盼的条件，0.1MP ,400C。
[0011]上述方法中，所述大孔吸附树脂纯化多酌浸提液，即是富集过程:将多酚粗提液泵入筛选出的己平衡好的大孔吸附树脂，对多酌进行富集；先用蒸馏水冲洗柱子，再用40%-70%乙醇水溶液洗脱多酚，收集洗脱液。
[0012]本发明提供的方法采用超声辅助提取，具有如下优点:
(1)利用超声机械波强化萃取，不破坏药材中的活性功能成分，保存了板栗总苞中的所有的活性成分。
(2)采用乙醇常压萃取，安全性好，操作简单易行，维护保养方便；
(3)超声波辅助提取技术是利用弹性机械振动波，空化效应、机械效应和热效应三大效应，破坏植物细胞，使溶媒渗透到植物细胞中，从而加速植物多酚成分溶解，以提高其浸出率；
(4)具有广谱性，适用性广，绝大多数的中药材各类成分均可超声提取；
(5)超声波提取对溶剂和目标提取物的性质关系不大，因此可供提取溶剂的种类多，目标提取范围广泛;
(6)药材原料处理量大，有效成分易于分离、净化；
(7)提取工艺成本低，综合经济效应显著。大孔树脂吸附法具有选择性好、吸附容量大、再生处理方便、吸附迅速及解吸容易等优点。
[0013]本发明的优点是(I)提取过程采用乙醇水溶液，条件温和，所制出来的多酚安全无毒，对人体没有任何伤害。(2)工艺简单、成本低，可以推广到大范围的工业生产去。
(4)板栗总苞的多酚提取率高，且具有较强的抗氧化能力，清除自由基，同时，有抗病毒，抗诱变，抑菌作用。
[0014]具体实施方法
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0015]下述实施方法中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可以从商业途径买到。[0016]本发明下述实施例中的板栗总苞多酚提取物的含量是按照以下方法进行测定的:准确称职5mg没食子酸标准品，定容50mL,配成0.lmg/mL的标准液,分别吸取0.5、1.0、1.5、2.0和2.5mL没食子酸标准液(0.lmg/mL)定容至IOmL，配制成质量浓度为
0.005 ,0.010 ,0.015 ,0.020、0.025mg/mL的标准溶液。精确吸取上述标准液。0.4mL于IOmL离心管中，加入0.2mol/L FC试剂ImL, 15% Na2 CO3溶液2mL,蒸懼水定容至8mL, 25°C反应2h。 另精确吸取蒸馏水0.4mL，同法操作作为空白对照。在765nm处测量其吸光度A。绘制以吸光度(A)与浓度(C)的标准曲线，并拟合线性回归方程。
[0017]所得标准曲线的线性回归方程为:
y = 4.323χ+0.0166，相关系数为 R2 = 0.9998 (I)
式中y吸光度值；x没食子酸标品浓度，mg/mL 总多酌提取率和含量的计算:
多酚浓度(mg/mL)=(吸光度值=0.=0166)/4.323*稀释倍数/1000(2)
多酌含量(%)=提取多酌质量/提取物质量X 100% (3)
多酚得率(％ ) 二提取物质量/原料质量X 100% (4)
实施例1
将板栗总苞粉碎至60目，称取IOg板栗总苞粉末加入200mL的30%乙醇水溶液混合，与55 V >500ff功率下超声提取30min ,在4000r/min条件下离心15min ,真空减压旋蒸浸提液(40°C、0.1MP)，将浓缩浸提液以2mL/min 的速度泵入己平衡好的LSA-21大孔树脂柱，先用2倍柱体积的蒸馆水冲洗柱子，再用70%乙醇水溶液以2mL/min的流速洗脱，收集70%乙醇洗脱液`，于40°C ,0.1MP下减压旋蒸浓缩，干燥至粉末，得到1.368g棕红色的板栗总苞提取物粉末，提取物的得率为13.68%，其中多盼的含量为 74.90%。
[0018]实施例2
将板栗总苞粉碎至60目，称取IOg板栗总苞粉末加入250mL的40%乙醇水溶液混合，与65°C >500ff功率下超声提取40min ,在4000r/min条件下离心15min ,真空减压旋蒸浸提液(40°C、0.1MP)，将浓缩浸提液以2mL/min的速度泵入己平衡好的LSA-21大孔树脂柱，先用2倍柱体积的蒸馏水冲洗柱子，再用70%乙醇水溶液以2mL/min的流速洗脱，收集70%乙醇洗脱液，于40 V、0.1MP下减压旋蒸浓缩，干燥至粉末，得到1.445g棕红色的板栗总苞提取物粉末，提取物的得率为14.45%，其中多酚的含量为 74.27% 。
[0019]实施例3
将板栗总苞粉碎至60目，称取IOg板栗总苞粉末加入300mL的50%乙醇水溶液混合,与75°C >500ff功率下超声提取50min ,在4000r/min条件下离心15min ,真空减压旋蒸浸提液(40°C、0.IMP)，将浓缩浸提液以2mL/min的速度泵入己平衡好的LSA-21大孔树脂柱，先用2倍柱体积的蒸馆水冲洗柱子，再用70%乙醇水溶液以2mL/min的流速洗脱，收集70%乙醇洗脱液，于40°C、0.1MP下减压旋蒸浓缩，干燥至粉末，得到1.337g棕红色的板栗总苞提取物粉末，提取物的得率为13.37%，其中多盼的含量为74.31%。
【权利要求】
1.一种从板栗总苞提取植物多酚的方法，包括如下步骤:将所述板栗总苞粉末加入至乙醇水溶液中得到所述板栗总苞的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声辅助提取后，离心，真空旋转蒸发浸提液，将浓缩浸提液利用大孔吸附树脂进行纯化，收集乙醇洗脱液，减压旋蒸浓缩，干燥至粉末，得到棕红色的板栗总苞提取物粉末，提取物的得率为15%以上，提取物中多酚含量75%以上。
2.根据权利要求1所述的方法中，其特征在于:所述板栗总苞粉末的粒度为60目10目。
3.根据权利要求1或2所述的方法中，其特征在于:所述乙醇水溶液中乙醇质量百分含量为35% -75%。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于:所述板栗总苞的乙醇水分散液为液料比，每Ig板栗总苞粉末加15-35mL的乙醇水溶液。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于:所述超声辅助提取中设有超声温度和超声时间两个因素，其中超声温度为25-75°C ;超声时间为20-60min。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于:所述离心的条件是4000r/min ，15min 。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于:所述真空旋蒸浓缩板栗总苞多酚的条件，0.1MP ,400C。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于:所述大孔吸附树脂纯化多酚浸提液，即是 富集过程:将多酚浸提液泵入筛选出的己平衡好的LSA-21大孔吸附树脂，对多酚进行富集；先用蒸馏水冲洗柱子，再用35% -75%乙醇水溶液洗脱多酚，收集洗脱液。
【文档编号】A61P39/06GK103585207SQ201310584392
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年11月20日 优先权日:2013年11月20日
【发明者】不公告发明人 申请人:青岛农业大学