一种用于防治犬外耳炎的药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于防治犬外耳炎的药物组合物，属于兽药领域。本发明药物组合物的组成成分及其比例为：每100ml溶液中含有氟苯尼考2.0～3.0g，甲硝唑0.2～0.4g，丁香提取物0.5～3.0g，茶树油0.5～3.0ml，丙二醇为溶剂。本发明还公开了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物组合物对犬外耳炎的疗效高；其次，本发明药物组合物含有组成成分复杂的天然提取物，减少了细菌产生耐药性的可能性，能够长久保持其药效，便于准确用药；此外，因本发明药物组合物药效高，可减少治疗犬外耳炎的时间和治疗次数，减少动物的痛苦，增加动物福利。
【专利说明】一种用于防治犬外耳炎的药物组合物
【技术领域】
[0001]本发明属于兽药领域，具体涉及一种用于防治犬外耳炎的药物组合物。
【背景技术】
[0002]犬外耳炎是指犬外耳道上皮的急性或慢性炎症，有时伴发耳廓疾病或中耳炎。主要症状为耳朵瘙痒，耳廓和耳道红斑，耳内分泌物过多并有异味，严重时可能化脓并发出恶臭，甚至增生闭塞耳道。病犬食欲减退，频频摇头擦耳，致使耳壳抓伤、擦伤、出血或血肿、上皮溃烂，甚至是听力减退等严重后果。犬外耳炎患病率较高，犬外耳炎发病率在5%~20%之间(张迪等.中国兽医杂志，2007，43 (12):90-91.)。
[0003]引起犬外耳炎的因素很多，机械性损伤、细菌、真菌和寄生虫感染都是引起犬外耳炎的重要原因。其中细菌主要有金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌等；真菌主要有马拉色菌、酵母等；寄生虫主要有犬耳螨和蠕形螨等(张迪等.中国兽医杂志，2007，43 (12):90-91;王秀云等.中国牧业通讯，2006:72 ;姜涛等.中国工作犬业，2010，7:16 ;夏兆飞等.中国兽医杂志，2003，39 (6):44-45)。40%的犬外耳炎中有一个或多个耳痒螨，许多被诊断为细菌或马拉色菌的病例实际上是由寄生虫感染引发的(夏兆飞等.中国兽医杂志，2003，39 (6):44-45)。
[0004]犬外耳炎的治疗方法主要抗生素药物及手术治疗，如未出现严重增生的病例，一般使用抗生素进行治疗。由于临床上犬耳炎病因复杂，常常呈现混合感染的情况，而治疗使用的抗生素只有少数对细菌、真菌、螨虫均有较好效果，如氟苯尼考-甲硝唑在较强的抗菌作用下对犬耳螨和蠕形螨也有较好的杀灭作用(李冰等.中国工作犬业，2005，4:10-12.)。但使用抗生素易产生耐药性。氟苯尼考在中国批准使用未超过14年，但其对肠球菌、葡萄球菌的耐药率在2001~2009年间出现明显的上升趋势(Dai L等.FEMS Microbiol Lett,2008,286 =178—183 ;戴磊.中国农业大学博士论文，2010);甲硝唑的使用也使细菌产生了耐药基因，已成为细菌治疗失败的重要原因之一(Cover TL等.Gastroenterogy, 2009,136(6):1863-1873)。而天然植物提取物因其有效成分多且含量低，可作用于细菌的不同靶位点和代谢繁殖的不同阶段，作用缓慢，故不易产生耐药性，保持治疗效果。如用黄岑、连翘、黄柏等10中植物提取物对大肠杆菌进行了耐药性诱导试验，结果显示传代菌对中药不易形成耐药性(曹翠萍等.西南农业学报，2007，20 (5):1101-1104.)。利用含黄连、丹参提取液的培养基对耐喹诺酮类药物的大肠杆菌进行培养，结果表明植物提取物可部分逆转大肠杆菌耐药性的作用(罗音久等.中兽医医药杂志，2006，5:7-9.)。目前植物提取物已成为抗生素重要的替代物之一。
[0005]丁香提取物是以乙醇为溶剂，从丁香中萃取得到，成分较为复杂。丁香中含有多种抑菌成分，如丁香酚、乙酰丁香酚、丁香烯、甲基正成基酮、苯甲醛、乙酸卞酯等，主要抑菌成分为丁香酚(关文强等.食品科学，2005，26 (12):227—230)。这些物质对假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌等多种细菌有一定的抑制作用(关文强等.食品科学，2005，26 (12):227— 230 ;周建新等.食品工业，2003(3):24— 25.)。丁香对人体螨虫也有较好的杀灭作用(黄丽娟等.中国中医眼科杂志，2007，17(4):211-214.)。目前，丁香提取物主要用于食品防腐、杀蝴虫等相关领域。
[0006]茶树油是通过蒸馏方式从港木桃金娘科白千层液提取出的植物精油。主要成分复杂，主要含有4-萜品醇和 1，8_桉油素等(Cox SD等.J Appl Microbiol, 2001,91 (3):492—497.)。因具有广谱抗细菌、抗真菌和抗炎等活性(王懿等.Herald of Medicine, 2004,23(1):363-365.),常用于治疗口腔溃疡、牙龈炎、手足癣、皮肤感染等疾病，也是生产护肤品的原料。研究表明，对人体螺形螨有较好的杀灭活性(walton SF等.Arcb Deematol,2004，140(5):563—566)。
【发明内容】
[0007]针对当前在治疗犬外耳炎的药物中存在的治疗范围单一、抗生素耐药性的问题，本发明目的在于提供一种用于防治犬外耳炎的药物组合物，该药物组合物对犬外耳炎的疗效高、防治谱广。
[0008]实现本发明的技术方案如下:
[0009]本发明一种用于防治犬外耳炎的药物组合物，其组成成分及其比例为:每100ml溶液中含有氟苯尼考2.0~3.0g,甲硝唑0.2~0.4g，丁香提取物0.5~3.0g,茶树油
0.5~3.0ml，丙二醇为溶剂。
[0010]上述用于防治犬外耳炎的药物组合物，其所述的含有氟苯尼考的比例优选为每100ml溶液中含有氟苯尼考2.5g。
[0011]上述用于防治犬外耳炎的药物组合物，其所述的含有甲硝唑的比例优选为每100ml溶液中含有甲硝唑0.3g。
[0012]上述用于防治犬外耳炎的药物组合物，其所述的含有丁香提取物的比例优选为每100ml溶液中含有丁香提取物1.0g。
[0013]上述用于防治犬外耳炎的药物组合物，其所述的含有茶树油的比例优选为每100ml溶液中含有茶树油1.0ml0
[0014]上述用于防治犬外耳炎的药物组合物，其组成成分及其比例为:每100ml溶液中含有氟苯尼考2.5g，甲硝唑0.3g，丁香提取物1.0g，茶树油1.0ml，丙二醇为溶剂。
[0015]所述的的丁香提取物和茶树油均可于市场上购买得到，如丁香提取物可于西安昌岳植物化工有限公司购买；茶树油可于江西吉安海瑞天然植物有限公司购买。
[0016]上述用于防治犬外耳炎的药物组合物的剂型为滴耳剂或其他外用溶液剂。
[0017]上述用于防治犬外耳炎的药物组合物的滴耳剂的制备方法，包括如下步骤:
[0018](I)、按照比例将氟苯尼考溶解于丙二醇中，得氟苯尼考溶液；将甲硝唑溶解于丙二醇中，得甲硝唑溶液；将氟苯尼考溶液和甲硝唑溶液混合均匀，得混合物I;
[0019](2)、按照比例将丁香提取物溶解于丙二醇中，得丁香提取物溶液；将茶树油溶解于丙二醇中，得茶树油溶液；将丁香提取物溶液和茶树油溶液混合均匀，得混合物II;
[0020](3)、将混合物I和混合物II混合，并用丙二醇定容,搅拌均匀。
[0021]本发明药物组合物的使用方法:滴耳，一次3~4滴，一日2次；视病情，连用5~7天。
[0022]上述药物组合物在制备防治犬外耳炎药物上的应用。[0023]与现有得氟本尼考-甲硝唑滴耳液相比，本发明具有如下优点和有益效果:(1)、本发明药物组合物对犬外耳炎的疗效高，疗效可达93.3%。而氟苯尼考和甲硝唑滴耳液的疗效仅为76.7%，两者防治效果有显著差异。(2)、本发明药物组合物含有组成成分复杂的天然提取物，减少了细菌产生耐药性的可能性，能够长久保持其药效，便于准确用药。(3)、本发明药物组合物药效高，可减少治疗犬外耳炎的时间和治疗次数，减少动物的痛苦，增加动物福利。
【具体实施方式】
[0024]以下通过具体实施例对本发明做进一步的说明，但是对本发明的保护范围不构成任何限制。 [0025]实施例1本发明用于防治犬外耳炎的药物组合物制备
[0026](I)、将氟苯尼考2.5g溶解于丙二醇中，得氟苯尼考溶液；将甲硝唑0.3g溶解于丙二醇中，得甲硝唑溶液；将氟苯尼考溶液和甲硝唑溶液混合均匀，得混合物I ;
[0027](2)、将丁香提取物(购自西安昌岳植物化工有限公司)1.0g溶解于丙二醇中，丁香提取物溶液；将茶树油(购自江西吉安海瑞天然植物有限公司)1.0ml溶解于丙二醇中，得茶树油溶液；将丁香提取物溶液和茶树油溶液混合均匀，得混合物II ;
[0028](3)、将混合物I和混合物II混合，用丙二醇定容至100ml，搅拌均匀即得本发明用于防治犬外耳炎的药物组合物。
[0029]实施例2利用本发明药物组合物防治细菌对比药效试验
[0030]按照如下方法进行
[0031](一)、供试菌种:金黄色葡萄球菌(编号:CAU0509)、大肠杆菌(编号:CAU0507)、变形杆菌(编号:CVCC1971)，以上菌株均购自国家兽医微生物菌种保藏中心(北京市海淀区中关村南大街8号)。
[0032](二)试验处理:
[0033]处理1:氟苯尼考-甲硝唑滴耳液，规格20ml:氟苯尼考500mg+甲硝唑60mg (相当于每100ml溶液中含有氟本尼考2.5g和甲硝唑0.3g，南京金盾动物药业有限责任公司生产)。
[0034]处理I1:丁香提取物溶液(重量体积比(g/ml)为:1.0:100)，将丁香提取物(购自西安昌岳植物化工有限公司)1.0g溶解于100ml丙二醇中而得。
[0035]处理II1:茶树油溶液(体积比1%)，将茶树油(购自江西吉安海瑞天然植物有限公司)1.0ml溶于100ml丙二醇中而得。
[0036]处理IV:实施例1制备的本发明药物组合物
[0037](三)试验方法
[0038](I)、菌悬液的制备。挑取供试菌种进行斜面活化后，置于37°C恒温培养箱培养24h，重复2次。在无菌条件下，在活化好的供试菌中挑取单菌落，接种于营养肉汤培养基中，摇床培养过夜(37°C，120rpm)，调节菌种浓度到IXlO6 ~ IXlO7Cfu / ml。
[0039](2)、含菌平板的制备。在无菌条件下，吸取0.1ml的菌悬液加入灭菌好的培养皿中，倒入15ml左右融化冷却至40°C的牛肉膏蛋白胨培养基，轻轻摇动使培养基与菌种混合均匀。[0040](3)、抑菌直径的测定。采用滤纸片法。用打孔器将定性滤纸打成直径为6_的滤纸片，于160°C干热灭菌15min，在无菌条件下加入灭菌药液(处理1、I1、II1、IV)，充分浸泡lh，干燥，每个含菌平板均匀贴3片，每组作3个平行作为重复，于37°C恒温培养箱中培养24h，然后测量各处理的抑菌圈直径(mm)。
[0041](4)、联合抑菌试验。采用单药纸片搭桥法。将(3)中制备的纸片分别贴于含菌平板上，将含丁香提取物和茶树油的纸片分别放置于氟苯尼考-甲硝唑药敏纸片旁边，两种药敏纸片的距离略大于已测得的氟苯尼考-甲硝唑抑菌圈范围。若氟苯尼考-甲硝唑抑菌圈向丁香提取物或茶树油纸片迁移，判定为正相关；若抑菌圈逆向迁移，判定为减小作用；若抑菌圈没有变化，判定为无关作用。
[0042](5)、数据分析:所有数据采用SPSS13.0软件进行统计学分析，差异显著性分析通过PS 0.05水平检验。
[0043]结果抑菌圈直径(见表1)显示本发明药物组合物(处理IV)对三种细菌的抑菌圈直径显著大于其他处理的抑菌圈直径(P ( 0.05)，说明加入了丁香提取物和茶树油的本发明药物组合物的抑菌效果显著增强。
[0044]联合抑菌试验(见表1)显示，金黄色葡萄球菌培养基中氟苯尼考-甲硝唑抑菌圈向丁香和茶树油都有迁移；大肠杆菌培养基中氟苯尼考-甲硝唑抑菌圈向丁香有明显迁移，向茶树油方向的抑菌圈没有变化；变形杆菌培养基中抑菌圈向丁香和茶树油方向有轻微迁移，但不明显。说明针对引起犬外耳炎的三种主要细菌，氟苯尼考-甲硝唑与丁香、茶树油的抑菌效果呈正相关，即抑菌呈协同作用。
[0045]表1本发明药物组合物防治细菌对比药效试验结果
【权利要求】
1.一种用于防治犬外耳炎的药物组合物，其特征在于其组成成分及其比例为:每100ml溶液中含有氟苯尼考2.0~3.0g,甲硝唑0.2~0.4g，丁香提取物0.5~3.0g,茶树油0.5~3.0ml，丙二醇为溶剂。
2.按照权利要求1所述的药物组合物，其特征在于其所述的含有氟苯尼考的比例为每100ml溶液中含有氟苯尼考2.5g。
3.按照权利要求1所述的药物组合物，其特征在于其所述的含有甲硝唑的比例为每100ml溶液中含有甲硝唑0.3g。
4.按照权利要求1所述的药物组合物，其特征在于其所述的含有丁香提取物的比例为每100ml溶液中含有丁香提取物1.0g。
5.按照权利要求1所述的药物组合物，其特征在于其所述的含有茶树油的比例为每100ml溶液中含有茶树油1.0ml0
6.按照权利要求1所述的药物组合物，其特征在于其组成成分及其比例为:每100ml溶液中含有氟苯尼考2.5g，甲硝唑0.3g，丁香提取物1.0g，茶树油1.0ml，丙二醇为溶剂。
7.权利要求1所述的药物组合物的剂型为滴耳剂。
8.权利要求1所述的药物组合物的滴耳剂的制备方法，包括如下步骤: (1)、按照比例将氟苯尼考溶解于丙二醇中，得氟苯尼考溶液；将甲硝唑溶解于丙二醇中，得甲硝唑溶液；将氟苯尼考溶液和甲硝唑溶液混合均匀，得混合物I ; (2)、按照比例将丁香提取物溶解于丙二醇中，得丁香提取物溶液；将茶树油溶解于丙二醇中，得茶树油溶液；将丁香提取物溶液和茶树油溶液混合均匀，得混合物II ;` (3)、将混合物I和混合物II混合,并用丙二醇定容,搅拌均匀。
9.权利要求1所述的药物组合物在制备防治犬外耳炎药物上的应用。
【文档编号】A61K31/4164GK103550303SQ201310587175
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年11月20日 优先权日:2013年11月20日
【发明者】李忠生, 冯秀娟, 王智群, 贺星亮, 李冰, 刘新贵, 冒勇 申请人:南京金盾动物药业有限责任公司