肝素修饰的阿霉素脂质体制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种肝素修饰的阿霉素脂质体(Hep-DOX-Lip)制剂，其特征是由阿霉素1份、肝素1～4份、大豆卵磷脂5～30份、胆固醇0.5～4份、阳离子材料0.5份，本发明还公开了这种肝素修饰的阿霉素脂质体的制备方法。本发明用肝素修饰阿霉素脂质体，具有类似PEG化的效果，可显著提高阿霉素脂质体的稳定性，延长药物的体内半衰期，提高药物的生物利用度，同时可显著降低化疗药物的毒副作用，提高患者的顺应性。
【专利说明】肝素修饰的阿霉素脂质体制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种肝素修饰的阿霉素脂质体(Hep-DOX-Lip)制剂，本发明还公开了这种!fep-D0X-Lip制剂的制备方法。
【背景技术】 [0002]肝素(heparin, Hep)是一种酸性的粘多糖，被证明可以安全、广泛、有效的预防癌症并发的静脉血栓。研究者们还兴奋地发现辅助使用肝素进行治疗，可显著延长恶性肿瘤患者的寿命。因此，肝素不仅是一种临床可用的抗血栓药，肝素的其它生物活性使其具有更广泛的应用价值。例如:大量动物实验证实，肝素可以通过抑制选择素介导的细胞间黏附从而抑制肿瘤细胞的转移。肝素也可以促进组织因子旁路途径抑制物(Tissue FactorPathway Inhibitor, TFPI)的释放并干预肿瘤组织血管新生。
[0003]不仅如此，肝素还可以代替PEG作为药物载体的亲水性修饰材料。一般的纳米药物载体在体内循环的时候，会很快被肝脏脾脏的巨噬细胞所吞噬，从而丧失疗效。为了降低对载体的吞噬，阻碍血浆蛋白对纳米粒子的吸附，延长纳米粒子在血液中的循环时间，以进一步提高靶向效果，人们进行了大量的研究。结果发现，用亲水性聚合物材料修饰可使给药载体取得满意的长循环效果(亦被称之为隐形效果)。亲水性材料PEG常用于载体修饰，以达到长循环的目的。但是，PEG修饰的载体在体内中也存有诸多弊端和一些不能忽视的问题，如静脉重复注射PEG化脂质体可加速血液清除(accelerated blood clearance, ABC),这种ABC现象是指间隔几天向同一动物重复注射PEG化脂质体时，第2次注射的PEG化脂质体在血液循环中被迅速清除，肝脾分布显著增加，从而大大限制了其临床应用。肝素是一种天然的粘多糖，带大量负电荷呈强酸性，并极溶于水。Byung Cheol Shin等人发现，肝素作为亲水性修饰材料，具有类PEG化的作用，修饰后的载体表现出更为出色的长循环效果和血清稳定性。
[0004]本发明选择的模型药物为阿霉素(Doxorubicin, D0X)。D0X最早是1969年从松链丝菌浅灰色变株(Str.Peucetius var caesius)中提取分离到的，为橙红色结晶粉末，另ll名多柔比星、羟柔红霉素、14-羟正定霉素，熔点204-205°C，分子量为579.98。其结构中带有羟基，呈弱碱性。由于其自身脂溶性较强而难溶于水，常将其制备成盐酸阿霉素，以增加其水溶解度。阿霉素具有很强的抗癌活性，被广泛用于治疗黑色素瘤、急性白血病、非何杰金氏淋巴瘤、肉瘤、多发性骨髓瘤及乳腺癌，肝癌、胃癌、小细胞型肺癌、宫颈癌、卵巢癌等多种恶性肿瘤。但是，阿霉素在发挥治疗作用的同时，也会产生很多毒副作用如呕吐、恶心、脱发、骨髓抑制及胃肠道毒性等常见不良反应。除此之外，由于阿霉素类化合物与心肌的亲和力明显高于其他组织，并能产生半醌代谢物损害心肌细胞，因而导致严重的剂量依赖性心脏毒性，表现为各种心率失常，甚至是不可逆的心肌损伤及充血性心力衰竭。这些毒副作用使其临床应用受到极大的限制。近年来，大量文献报道指出纳米载体包裹阿霉素，能大大降低阿霉素的毒副作用，提高药物治疗的靶向性。阿霉素脂质体更成为了该领域的研究热点，目前已有多种阿霉素脂质体制剂上市销售。[0005]本发明是在构建阿霉素阳离子脂质体(DOX-Lip)的基础上，通过静电吸附的方式结合带大量负电荷的肝素。本发明用肝素修饰阿霉素脂质体，发现具有类似PEG化的效果。SD大鼠体内药动学实验证明，Hep-DOX-Lip能显著延长阿霉素的体内半衰期，提高阿霉素的体内生物利用度，同时降低了阿霉素的毒副作用。小鼠尾静脉急性毒性实验结果证明Hep-DOX-Lip的安全性大大提高，表明制剂可降低化疗药物的毒副作用，提高患者的顺应性。
【发明内容】
[0006]本发明公开了一种临床适用的肝素修饰阿霉素脂质体Ofep-DOX-Lip)及其注射用冻干粉，该ifep-DOX-Lip冻干粉在加入注射用生理盐水后能重新分散。
[0007]本发明的Η印-DOX-Lip制剂，含下列组分及重量比:
[0008]阿霉素1
[0009]肝素1~4
[0010]大豆卵磷脂 5~30
[0011]胆固醇0.5~4
[0012]阳离子材料 0.5
[0013]本发明的!fep-D0X-Lip制剂，各组分优选的重量比为:
[0014]阿霉素1
[0015]肝素4
[0016]大豆卵磷脂 10~20
[0017]胆固醇0.8~2
[0018]阳离子材料 0.5
[0019]本发明，首先构建了阿霉素阳离子脂质体(DOX-Lip)。其中，阿霉素、大豆卵磷脂和胆固醇三者的配比直接影响到阳离子脂质体的质量。
[0020]本发明所涉及的比例均为重量比。
[0021]当胆固醇取一个固定值，大豆卵磷脂取不同的重量时，DOX-Lip的平均粒径和包封率也不同。结果见表1。
[0022]表1:药物和大豆卵磷脂的比例对脂质体粒径和包封率的影响(n=3)
[0023]
【权利要求】
1.一种肝素修饰的阿霉素脂质体，其特征是含下列组分及重量比:阿霉素1肝素1~4大豆卵磷脂 5~30。胆固醇0.5~4阳离子材料 0.5
2.权利要求1的肝素修饰的阿霉素脂质体制剂，其特征是各组分的重量比为:阿霉素1肝素4大豆卵磷脂 10~20。胆固醇0.8~2阳离子材料 0.5
3.权利要求1或2的肝素修饰的阿霉素脂质体制剂，其中肝素选普通肝素、达肝素钠、依诺肝素、纳肝素钙、帕肝素钠、汀肝素钠中的一种或几种。
4.权利要求1或2的肝素修饰的阿霉素脂质体制剂，其中阳离子材料选氯化三甲基-2,3- 二油烯氧基丙基铵、溴化二甲基-2,3- 二油酰氧基丙基铵、二氟乙酸二甲基-2,3- 二油烯氧基丙基-2-(2-精胺甲酰氨基)乙基铵、溴化二甲基十二烷基铵、溴化二甲基十四烷基铵、溴化三甲基十六烷基铵、溴化二甲基双十八烷基铵、^(2-精胺甲酰基)4’，N’ -双十八烷基甘氨酰胺、1，2_ 二油酰-3-琥珀酰-sn-甘油胆碱酯、3β-[Ν-(Ν’，Ν’ - 二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇、脂质多聚-L-赖氨酸、硬脂胺中的一种或几种。`
5.权利要求1或2的肝素修饰的阿霉素脂质体制剂，还含有冻干保护剂。
6.权利要求5的肝素修饰的阿霉素脂质体制剂，其中冻干保护剂选自蔗糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇中的一种或几种。
【文档编号】A61P35/00GK103720658SQ201410005857
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2014年1月7日 优先权日:2014年1月7日
【发明者】柯学, 陈艺, 韩苗苗, 胡丹蓉, 鞠明珠 申请人:中国药科大学