经皮给予用wt1肽癌症疫苗组合物的制作方法

经皮给予用wt1肽癌症疫苗组合物的制作方法
【专利摘要】本发明提供经皮给予用WT1肽癌症疫苗组合物。本发明的目的在于，通过选择对WT1肽和/或经改变的WT1肽而言最适合的细胞免疫诱导促进剂，提供效能更高的癌症疫苗用组合物。本发明提供包含（i）WT1肽和/或经改变的WT1肽；以及（ii）细胞免疫诱导促进剂的用于诱导细胞免疫的经皮给予用癌症疫苗组合物。
【专利说明】经皮给予用WT1肽癌症疫苗组合物
【技术领域】
[0001]本发明涉及包含WTl肽和/或经改变的WTl肽、以及细胞免疫诱导促进剂的经皮
给予用癌症疫苗。
【背景技术】
[0002]癌症疫苗有为了预防由病毒引发的癌症而防止病毒感染的观点的疫苗，和通过使免疫系统、特别是细胞毒性T细胞(CTL)发挥重要的作用的细胞免疫系统识别肿瘤特异性抗原从而通过免疫体系特异性攻击癌细胞的观点的疫苗。前者对不是病毒引发的癌症完全没有效果，但后者属于将癌细胞自身具有的抗原作为靶的癌症治疗策略，因此，我们认为，通过确定抗原，对具有该抗原的癌症是广泛有效的。尤其是基于后者的观点的癌症疫苗能够治疗通过外科手术难以切除的尺寸的肿瘤，而且与化学疗法、放射线疗法等现有的治疗方法相比较副作用低。
[0003]WTl (肾胚细胞瘤(Wilm’ s肿瘤))基因在很多的造血器官肿瘤、实体肿瘤、例如急性骨髓性白血病、急性淋巴性白血病、慢性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征、多发性骨髓瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、肺癌、乳腺癌、胃癌、大肠?直肠癌、胰腺癌、胆管癌、头颈部扁平上皮癌、甲状腺癌、肾癌、前列腺癌、卵巣癌、子宫癌、骨与软组织肉瘤、恶性黑色素瘤、恶性间皮瘤、睾丸生殖细胞肿瘤及恶性胶质瘤中过量地表达，在癌细胞内产生过量的作为WTl基因产物的WTl蛋白。WTl蛋白在癌细胞内被片段化，产生由8~12个氨基酸构成的属于部分肽的WTl肽。WTl肽在癌细胞内与MHC I类分子结合而得到的物质转移到癌细胞表面，在癌细胞表面以与MHC I类分子结合的形态作为抗原提呈，成为癌细胞的标记。WTl肽的氨基酸序列成为与细胞的MHCI类分子的类型相符的序列。例如在具有HLA-A * 0201型MHC的细胞的情况下，作为WTl肽，产生由9个氨基酸构成的Db 126肽等HLA-A * 0201型MHC限制性肽，在具有HLA-A 2402型MHC的细胞的情况下，作为WTl肽，产生由9个氨基酸构成的Db235 肽等 HLA-A * 2402 型 MHC 限制性肽。在具有 HLA-A26 型(W02005/095598)、HLA-A *3303 型(W02007/097358)、HLA-A * 1101 型(W02008/081701)等其它 MHC 的细胞的情况下，产生各自的MHC限制性的WTl肽。作为抗原，将WTl肽、或者其一部分氨基酸被置换或者经过修饰了的经改变的WTl肽给予到生物体时(这里，将作为抗原给予的WTl肽或经改变的WTl肽成为“WT1抗原肽”)，WT1抗原肽在作为抗原提呈细胞的树突状细胞的表面与MHC ClassI分子结合、或暂时进入树突状细胞内而在树突状细胞内与MHC I类分子结合而得到的物质转移到树突状细胞表面，在树突状细胞表面以与MHC I类分子结合的形态作为抗原提呈。具有WTl抗原肽/MHC I类分子的复合体的激活了的树突状细胞转移到区域淋巴结，激活用于识别该WTl抗原肽/MHC I类分子复合体的CD8阳性T淋巴细胞，使其分化成细胞毒性T细胞(CTL)而增殖。CTL识别具备与WTl抗原肽具有相同的氨基酸序列的WTl肽(来源于内源性WTl蛋白)和MHC I类分子的复合体的肿瘤细胞、或者具备与WTl抗原肽具有交叉免疫反应性的氨基酸序列的WTl肽(来源于内源性WTl蛋白)和MHC I类分子的复合体的肿瘤细胞，并攻击该肿瘤细胞。因此，Db 126肽、Db235肽这样的上述各种MHC限制性的WTl肽、它们的一部分氨基酸被置换或者经过修饰了的经改变的WTl肽作为癌症疫苗是有用的(非专利文献I)。
[0004]为了提高WTl肽和/或经改变的WTl肽的作为癌症疫苗的作用，还已知利用佐剂。作为WTl肽和/或经改变的WTl肽的佐剂，例如已知氢氧化铝这样的矿物凝胶；溶血卵磷脂、PLURONIC POLYOL这样的表面活性剂；聚阴离子；肽；或油乳剂(专利文献I);或者GM-CSF、BCG-CWS或Montanide ISA51 (非专利文献I)。除此以外，还已知各种各样的疫苗佐剂，可以列举出:例如IH-咪唑并〔4，5_c〕喹啉-4-胺、例如咪喹莫特(Imiquimod)(专利文献2)、环状二 GMP (c-d1-GMP)这样的环状二核苷酸类似物(专利文献3及专利文献4)、TLR2，3，7，8，9配体(专利文献5 )。另外还已知，通过在含咪喹莫特的肽透皮免疫中加入P印tide-25，可以进一步增强免疫(非专利文献2)。[0005]作为疫苗的给予途径，皮下或皮内注射是最一般的，除此以外，也尝试了利用各种各样的给予途径例如经皮给予(专利文献5及非专利文献2)、颊部给予、鼻腔给予、舌下给予等粘膜给予(非专利文献3、专利文献6、专利文献7)的免疫诱导。
[0006]现有技术文献
[0007]专利文献
[0008]专利文献1:日本专利第4422903号公报
[0009]专利文献2:日本特表平7-505883号公报
[0010]专利文献3:日本特表2007-529531号公报
[0011]专利文献4:美国专利申请公开US2008/0286296号
[0012]专利文献5:美国专利申请公开US2008/0193487号
[0013]专利文献6:日本特表2002-531415号公报
[0014]专利文献7:美国专利申请公开US2008/0112974号
[0015]非专利文献
[0016]非专利文献1:Yoshihiro Oka et al., Current Opinion in Immunology, 20:211-220 (2008)非专利文献 2:Hosoi Akihiro et al.，Cancer Research, 68, 3941-3949(2008)非专利文献 3:Zhengrong Cui et al., Pharmaceutical Research, Vol.19, N0.7,947-953 (2002)

【发明内容】

[0017]发明要解决的问题
[0018]为了提高疫苗的效能而使用佐剂是大家所周知的，但适合的佐剂通常随着抗原的种类、给予途径、想要诱导的免疫(即细胞免疫或体液免疫)等而改变。另外，除佐剂以外，还存在各种各样的用于促进免疫诱导的物质。因此，本发明的目的在于，提供效能更高、便利性更高的癌症疫苗用组合物。
[0019]被广泛使用的疫苗是为了诱导免疫而给予微生物或者病毒自身或它们的一部分的物质。通常，微生物、病毒由于其尺寸的原因，其侵入会被皮肤阻止，因此，疫苗需要侵入式地给予到体内。因而，免疫通常使用注射。但是，注射存在如下的问题:疼痛、恐惧心理、注射伤痕及注射伤痕发展而成的疤痕、只有医务工作者才能进行注射、免疫效果高的皮内注射的给予手艺难、存在医务工作者的针扎感染事故的风险、进行反复给予时需要经常去医院而成为患者的生活负担、产生注射针等需要特殊废弃的医疗废弃物等，因此，其并不能说是最佳的给予途径。
[0020]WTl肽和/或经改变的WTl肽可以借助MHC I类分子激活CTL(细胞毒性T细胞)，即可以诱导细胞免疫。另外，WTl肽和/或经改变的WTl肽为由8~12个氨基酸构成的分子量约700~约1600的分子，虽然说不上是低分子，但比微生物、病毒自身小非常多，因此，也可以考虑通过注射以外的给予途径给予的可能性，但这样的制剂尚未开发出来。其理由多种多样，例如为适合的细胞免疫诱导促进剂尚不明确、是否能将抗原送达至适合于诱导细胞免疫的组织尚不明确等。尤其是在除注射以外的给予途径中为了诱导细胞免疫而给予抗原时能够使用的细胞免疫诱导促进剂尚不明确。
[0021]用于解决问题的 方案
[0022]本发明人发现，通过经皮给予，可以得到良好的细胞免疫诱导效果。本发明人还对适合于利用WTl肽和/或经改变的WTl肽的经皮给予来进行的细胞免疫诱导的物质进行了研究，结果发现，适宜使用的是:TLRl/2配体、TLR2及Dectinl配体、TLR2/6配体、TLR3配体、TLR4配体、TLR5配体、TLR7和/或TLR8配体、以及TLR9配体这样的TLR配体；环状二 GMP及环状二 AMP这样的环状二核苷酸；贝他定、匹多莫德及左旋咪唑盐酸盐这样的免疫调节低分子药物；依托度酸及洛索洛芬这样的环氧酶抑制剂；EP2受体拮抗剂、EP4受体拮抗剂、DP受体拮抗剂、IP受体拮抗剂这样的前列腺素受体拮抗剂；EP3受体激动剂这样的前列腺素受体激动剂；盐酸小檗碱及柚皮素这样的TSLP产生抑制剂；2’，5’ -双脱氧腺苷及烟酸这样的腺苷酸环化酶抑制剂；二十碳五烯酸及二十二碳六烯酸这样的ω-3脂肪酸；PPAR-α激动剂、PPAR-δ激动剂、PPAR-Y激动剂这样的PPAR激动剂；D1受体拮抗剂、D5受体拮抗剂这样的多巴胺受体拮抗剂；D2受体激动剂、D3受体激动剂、D4受体激动剂这样的多巴胺受体激动剂；H1受体拮抗剂、H2受体拮抗剂这样的组胺受体拮抗剂；H1受体激动剂、H3受体激动剂、H4受体激动剂这样的组胺受体激动剂；5-HT2受体拮抗剂、5-HT4受体拮抗剂、5-HT6受体拮抗剂、5-HT7受体拮抗剂这样的血清素受体拮抗剂；5_HT1受体激动剂、5-HT2受体激动剂这样的血清素受体激动剂；V2受体拮抗剂这样的加压素受体拮抗剂；Vl受体激动剂这样的加压素受体激动剂；M1受体拮抗剂、M3受体拮抗剂、M5受体拮抗剂这样的毒蕈碱受体拮抗剂；M1受体激动剂、M2受体激动剂、M3受体激动剂、M4受体激动剂、M5受体激动剂这样的毒蕈碱受体激动剂；α I受体拮抗剂、β I受体拮抗剂、β 2受体拮抗剂、β 3受体拮抗剂这样的肾上腺素受体拮抗剂；α I受体激动剂、α 2受体激动剂这样的肾上腺素受体激动剂；ΑΤ2受体激动剂这样的血管紧张素受体激动剂；GABAb受体激动剂这样的GABA受体激动剂；PAR-1受体拮抗剂这样的凝血酶受体拮抗剂；PAR_1受体激动剂这样的凝血酶受体激动剂；丁丙诺啡这样的阿片类受体激动剂；CysLTl受体拮抗剂、CysLT2受体拮抗剂这样的白三烯受体拮抗剂；BLT受体激动剂这样的白三烯受体激动剂；腺苷二磷酸这样的ADP受体激动剂；褪黑素这样的褪黑素受体激动剂；奥曲肽这样的生长抑素受体激动剂；屈大麻酚这样的大麻素受体激动剂；芬戈莫德这样的鞘氨醇1-磷酸受体激动剂；mGluR2受体激动剂、mGluR3受体激动剂、mGluR4受体激动剂、mGluR6受体激动剂、mGluR7受体激动剂、mGluRS受体激动剂这样的代谢型谷氨酸受体激动剂；甘草酸这样的磷脂酶A2抑制剂；吡非尼酮这样的TGF-β产生抑制剂；甲磺司特这样的Th2细胞因子抑制剂。进而还发现通过用Peptide-25、及hWTl35这样的辅助肽(helper peptide)代替它们或在它们的基础上使用P印tide-25、及hWTl35这样的辅助肽，能够促进利用WTl肽和/或经改变的WTl肽的经皮给予来进行的细胞免疫诱导。即，发现利用下述组合能特别显著地增强细胞免疫:TLR配体和辅助肽的组合、环状二核苷酸和辅助肽的组合、免疫调节低分子药物和辅助肽的组合、环氧酶抑制剂和辅助肽的组合、前列腺素受体拮抗剂和辅助肽的组合、前列腺素受体激动剂和辅助肽的组合、TSLP产生抑制剂和辅助肽的组合、腺苷酸环化酶抑制剂和辅助肽的组合、ω-3脂肪酸和辅助肽的组合、PPAR激动剂和辅助肽的组合、多巴胺受体拮抗剂和辅助肽的组合、多巴胺受体激动剂和辅助肽的组合、组胺受体激动剂和辅助肽的组合、组胺受体拮抗剂和辅助肽的组合、血清素受体激动剂和辅助肽的组合、血清素受体拮抗剂和辅助肽的组合、加压素受体拮抗剂和辅助肽的组合、加压素受体激动剂和辅助肽的组合、毒蕈碱受体拮抗剂和辅助肽的组合、毒蕈碱受体激动剂和辅助肽的组合、肾上腺素受体拮抗剂和辅助肽的组合、肾上腺素受体激动剂和辅助肽的组合、血管紧张素受体激动剂和辅助肽的组合、GABA受体激动剂和辅助肽的组合、凝血酶受体拮抗剂和辅助肽的组合、凝血酶受体激动剂和辅助肽的组合、阿片类受体激动剂和辅助肽的组合、ADP受体激动剂和辅助肽的组合、白三烯受体拮抗剂和辅助肽的组合、白三烯受体激动剂和辅助肽的组合、褪黑素受体激动剂和辅助肽的组合、生长抑素受体激动剂和辅助肽的组合、大麻素受体激动剂和辅助肽的组合、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂和辅助肽的组合、代谢型谷氨酸受体激动剂和辅助肽的组合、磷脂酶Α2抑制剂和辅助肽的组合、TGF-β产生抑制剂和辅助肽的组合、Th2细胞因子抑制剂和辅助肽的组合能够显著增强细胞免疫。在优选的实施方式中，利用TLR配体和辅助肽的组合、或环状二核苷酸和辅助肽的组合。进而发现，通过在低刺激条件下进行给予，能够得到高的细胞免疫诱导效果。具体而言，通过在选择作为给予经皮给予用癌症疫苗组合物前的皮肤刺激评价用动物模型的皮肤状态的指标的、经皮水分散发量(TEWL)(g/h -m2)为50以下的低刺激状态的基础上，给予经皮给予用癌症疫苗组合物，能够获得高的细胞免疫诱导效果。或者，通过将经皮给予用癌症疫苗组合物的皮肤刺激特性设为给予结束时的皮肤刺激评价用动物模型的皮肤内TSLP水平(pg/mg蛋白质)为10000以下的低刺激特性，也能够获得高 的细胞免疫诱导效果。
[0023]因此，本发明的第一实施方式提供以下列举的实施方式:
[0024](I) 一种经皮给予用癌症疫苗组合物，其用于诱导细胞免疫，所述组合物包含:(i )WT1肽和/或经改变的WTl肽；以及(ii )细胞免疫诱导促进剂，其选自TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂、及它们的2种以上的组合；
[0025](2)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为TLR配体；[0026](3)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为环状二核苷酸；
[0027](4)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为免疫调节低分子药物；
[0028](5)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为环氧酶抑制剂；
[0029](6)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为前列腺素受体拮抗剂，进而，前列腺素受体拮抗剂为EP2受体拮抗剂、EP4受体拮抗剂、DP受体拮抗剂、IP受体拮抗剂；
[0030](7)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为前列腺素受体激动剂，进而，前列腺素受体激动剂为EP3受体激动剂；
[0031](8)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为TSLP产生抑制剂；
[0032](9)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为腺苷酸环化酶抑制剂；
[0033]( 10)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为ω-3脂肪酸；
[0034](11)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为PPAR激动剂，进而，PPAR激动剂为PPAR- α激动剂、PPAR- δ激动剂、PPAR- Y激动剂；
[0035](12)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为多巴胺受体拮抗剂，进而，多巴胺受体拮抗剂为Dl受体拮抗剂、D5受体拮抗剂；
[0036]( 13)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为多巴胺受体激动剂，进而，多巴胺受体激动剂为D2受体激动剂、D3受体激动剂、D4受体激动剂；
[0037](14)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为组胺受体拮抗剂，进而，组胺受体拮抗剂为Hl受体拮抗剂、Η2受体拮抗剂；
[0038]( 15)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为组胺受体激动剂，进而，组胺受体激动剂为Hl受体激动剂、Η3受体激动剂、Η4受体激动剂；
[0039]( 16)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为血清素受体拮抗剂，进而，血清素受体拮抗剂为5-ΗΤ2受体拮抗剂、5-ΗΤ4受体拮抗剂、5-ΗΤ6受体拮抗剂、5-ΗΤ7受体拮抗剂；
[0040]( 17)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为血清素受体激动剂，进而，血清素受体激动剂为5-ΗΤ1受体激动剂、5-ΗΤ2受体激动剂；
[0041 ] ( 18)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为加压素受体拮抗剂，进而，加压素受体拮抗剂为V2受体拮抗剂；
[0042]( 19)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为加压素受体激动剂，进而，加压素受体激动剂为Vi受体激动剂；
[0043](20)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为毒蕈碱受体拮抗剂，进而，毒蕈碱受体拮抗剂为Ml受体拮抗剂、M3受体拮抗剂、Μ5受体拮抗剂；
[0044](21)根据(1)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为毒蕈碱受体激动剂，进而，毒蕈碱受体激动剂为Ml受体激动剂、M2受体激动剂、M3受体激动剂、M4受体激动剂、M5受体激动剂；
[0045](22)根据(1)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为肾上腺素受体拮抗剂，进而，肾上腺素受体拮抗剂为α I受体拮抗剂、β I受体拮抗剂、β 2受体拮抗剂、β 3受体拮抗剂；
[0046](23)根据(1)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为肾上腺素受体激动剂，进而，肾上腺素受体激动剂为α I受体激动剂、α 2受体激动剂；
[0047](24)根据(1)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为血管紧张素受体激动剂，进而，血管紧张素受体激动剂为ΑΤ2受体激动剂；
[0048](25)根据(1)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为GABA受体激动剂，进而，GABA受体激动剂为GABAb受体激动剂；
[0049](26)根据(1)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为凝血酶受体拮抗剂，进而，凝血酶受体拮抗剂为PAR-1受体拮抗剂；
[0050](27)根据(1)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为凝血酶受体激动剂，进而，凝血酶受体激动剂为PAR-1受体激动剂；
[0051](28)根据(1)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为阿片类受体激动剂；
[0052](29)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为白三烯受体拮抗剂，进而，白三烯受体拮抗剂为CysLTl受体拮抗剂、CysLT2受体拮抗剂；
[0053]( 30)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为白三烯受体激动剂，进而，白三烯受体激动剂为BLT受体激动剂。
[0054](31)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为褪黑素受体激动剂。
[0055](32)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为生长抑素受体激动剂。
[0056](33)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为大麻素受体激动剂。
[0057](34)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为鞘氨醇1-磷酸受体激动剂。
[0058](35)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为代谢型谷氨酸受体激动剂，进而，代谢型谷氨酸受体为mGluR2受体激动剂、mGluR3受体激动剂、mGluR4受体激动剂、mGluR6受体激动剂、mGluR7受体激动剂、mGluR8受体激动剂。
[0059](36)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为ADP受体激动剂；
[0060](37)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为磷脂酶A2抑制剂；
[0061](38)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为TGF-β产生抑制剂；
[0062](39)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为Th2细胞因子抑制剂；
[0063](40)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为辅助肽；
[0064](41)根据(I)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为选自由TLR配体、环状二核苷酸、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上物质与辅助肽的组合；
[0065](42)根据(I)~(41)中任一项所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其在低刺激条件下进行给予；
[0066](43)根据(42)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的该组合物给予前的经皮水分散发量(TEWL)为50g/h.m2以下的条件；及
[0067](44)根据(42)或(43)所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的该组合物给予结束时的皮肤内TSLP水平为10000pg/mg蛋白质以下的条件。
[0068]在其它的实施方式中，本发明的癌症疫苗可以用于癌症的治疗或预防。因此，本发明还提供以下列举的实施方式:
[0069](45)—种癌症的治疗或预防方法，其包括将对治疗有效的量的(i )WT1肽和/或经改变的WTl肽、以及(ii)细胞免疫诱导促进剂经皮给予到对象，所述细胞免疫诱导促进剂选自TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂、及它们的2种以上的组合；
[0070](46)—种癌症的治疗或预防方法，其包括将对治疗有效的量的(I)~(44)中任一项所述的经皮给予用癌症疫苗组合物给予到对象。
[0071] 在其它的实施方式中，本发明还提供TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂、或它们的2种以上的组合作为WTl肽和/或经改变的WTl肽的经皮给予用细胞免疫诱导促进剂的应用。因此，本发明还提供以下的实施方式。
[0072](47) TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂、或它们的2种以上的组合作为WTl肽和/或经改变的WTl肽的经皮给予用细胞免疫诱导促进剂的应用。
[0073]另外，本发明还提供以下的实施方式:
[0074](48) 一种细胞免疫诱导方法，其包括将(i) WTl肽和/或经改变的WTl肽、以及 (ii)细胞免疫诱导促进剂经皮给予到对象，所述细胞免疫诱导促进剂选自TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF- β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂及它们的2种以上的组合；
[0075](49) TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶A2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂、或它们的2种以上的组合在促进利用WTl肽和/或经改变的WTl肽的经皮给予来进行的细胞免疫诱导中的应用；
[0076](50) (i)WTl肽和/或经改变的WTl肽和(ii)细胞免疫诱导促进剂的组合在利用WTl肽和/或经改变的WTl肽的经皮给予来进行的细胞免疫诱导中的应用，所述细胞免疫诱导促进剂选自TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂及它们的2种以上的组合；
[0077](51) (i)WTl肽和/或经改变的WTl肽和(ii)细胞免疫诱导促进剂的组合在癌症的治疗或预防中的应用，所述细胞免疫诱导促进剂选自TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF- β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂及它们的2种以上的组合 '及
[0078](52) (i) WTl肽和/或经改变的WTl肽、以及(ii)细胞免疫诱导促进剂在用于诱导细胞免疫的经皮给予用癌症疫苗组合物的制造中的应用，所述细胞免疫诱导促进剂选自TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω -3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂及它们的2种以上的组合。
[0079]发明的效果
[0080]本发明的癌症疫苗由于能够经皮给予而具有以下优点:优异的依从性，例如非侵入式给予、无痛、不产生对注射的恐惧、因给予方便而患者可以自行给予、还可以避免医务工作者的针扎感染事故的风险、能够减少反复给予时的去医院的频率而有助于提高患者的生活品质、不产生注射针这样的需要特殊废弃的医疗废弃物。另外，为巴布剂、带状制剂(tapes)等贴剂形态时，具有能够可靠地给予规定的给予量、能够任意地控制药物释放速度、并且给予时不会附着在其它部位的优点。进而，贴剂可以容易地贴附/撕除，因此，还具有在产生副作用时等自应用部位除去贴剂从而患者自己便能立即终止给予的优点。进而，本发明的癌症疫苗还具有与单独给予WTl肽和/或经改变的WTl肽的情况相比效能显著提高的优点。进而，本发明的癌症疫苗的经皮给予还具有与注射给予相比诱导更强的细胞免疫的优点。
【专利附图】

【附图说明】
[0081]图1是表示咪喹莫特的免疫刺激效果及与P印tide-25的协同效果的图。
[0082]图2是表示c-d1-GMP的免疫刺激效果及与P印tide-25的协同效果的图。
[0083]图3是表示物理刺激(皮肤预处理)对细胞免疫诱导水平的影响的图。
[0084]图4是表示物理刺激(皮肤预处理) 对抗原肽(Dbl26肽)及细胞免疫诱导促进剂(咪喹莫特)的皮肤渗透性的影响的图。
[0085]图5是表示化学刺激(表面活性剂)对细胞免疫诱导水平的影响的图。
[0086]图6是表示化学刺激(表面活性剂)对抗原肽(Dbl26肽)及细胞免疫诱导促进剂(咪喹莫特)的皮肤渗透性的影响的图。
[0087]图7是表示对正常皮肤或者物理性损伤皮肤给予带状制剂时的免疫比较图。
[0088]图8是表示咪喹莫特和洛索洛芬Na的协同效果的图。
[0089]图9是表示利用注射的细胞免疫诱导水平、和利用本发明的经皮给予用癌症疫苗组合物的细胞免疫诱导水平的图。
【具体实施方式】
[0090]为了更容易理解本发明，首先，定义本说明书中使用的术语。未进行定义的术语只要没有上下文不同的启示就表示本领域技术人员、尤其是医学、药学、免疫学、细胞生物学、生物化学、高分子化学等领域的从业者所通常理解的意思。
[0091]1.定义
[0092]在本说明书中使用时，术语“WT1肽”是指由癌基因WTl(Wilm’s肿瘤)的产物即WTl蛋白片段化而得到的、由约8~约15个、优选约8~约12个氨基酸构成的部分肽，其中包括Db 126肽、Db235肽等。另外，W0-2000/06602中公开的WTl产物的部分肽、W02005/095598中记载的来源于WTl的HLA-A26结合性癌抗原肽、W02007/097358中记载的HLA-A * 3303限制性WTl肽、及W02008/081701中记载的HLA-A * 1101限制性WTl肽也包含在本发明的“WT1 肽，，中。
[0093]术语“Dbl26妝”是指由序列 Arg Met Phe Pro Asn Ala Pro Tyr Leu (序列号 I)构成的WTl妝。术语“Db235妝”是指由序列Cys Met Thr Trp Asn Gln Met Asn Leu (序列号2)构成的WTl肽(专利文献I)。
[0094]在本说明书使用时，术语“经改变的WTl肽”是指WTl肽的全部或一部分氨基酸通过置换、修饰等而被改变了的肽。
[0095]经改变的WTl肽包括例如:(a)由在WTl肽的氨基酸序列中置换、缺失或附加I个~数个、例如I个、2个、3个、4个或5个氨基酸而得到的氨基酸序列构成的肽；及(b)由在WTl肽的氨基酸序列中全部或一部分氨基酸、例如I个或多个、例如I个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个或12个氨基酸经过修饰而得到的氨基酸序列构成的肽。
[0096]作为经改变的WTl肽可以具有的氨基酸的“修饰”，并不限定于此，例如可以列举出:乙酰化、甲基化等烷基化、糖基化、羟基化、羧基化、醛化、磷酸化、磺酰化、甲酰化、豆蘧酰化、棕榈酰化、硬脂酰化这样的脂肪链附加修饰、辛酰化、酯化、酰胺化、脱酰胺化、胱氨酸修饰、谷胱甘肽修饰、巯基乙酸修饰这样的二硫键形成修饰、糖化、泛素化、琥珀酰亚胺形成、谷酰化、异戊二烯化等。经改变的WTl肽也可以包含组合I个以上氨基酸的置换、缺失或附加、和I个以上氨基酸的修饰。
[0097]作为具体例子，Db235肽的一部分改变了的Db235m肽是由序列Cys Tyr Thr TrpAsn Gln Met Asn Leu (序列号3)构成的经改变的WTl肽(W02002/079253)，包含在本发明的经改变的WTl肽中。W02004/026897中记载的WTl置换型肽、W02007/063903A1中公开的訂1235_243肽衍生物、W02003/106682中公开的HLA-A24限制性癌抗原肽也包含在本发明的经改变的WTl肽中。作为W02003/106682中记载的HLA-A24限制性的经改变的WTl肽的具体例，可以列举出序列Arg Tyr Phe Pro Asn Ala Pro Tyr Leu (序列号4)的RYF妝、序列Ala Tyr Leu Pro Ala Val Pro Ser Leu (序列号 5)的 AYL 妝。
[0098]WTl肽和/或经改变的WTl肽可以为游离形态或药理学上容许的任意的盐形态，例如为酸盐(醋酸盐、TFA盐、盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、草酸盐、氢溴酸盐 、琥珀酸盐、硝酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、丙酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、苦味酸盐、苯磺酸盐、十二烷基硫酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、戊二酸盐、各种氨基酸盐等)、金属盐(碱金属盐(例如钠盐、钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐、镁盐)、铝盐等)、胺盐(三乙胺盐、苄胺盐、二乙醇胺盐、叔丁胺盐、二环己胺盐、精氨酸盐、二甲基铵盐、铵盐等)的形态。优选的药理学上容许的盐为醋酸盐或TFA盐。WTl肽和/或经改变的WTl肽可以使用利用公知的方法来合成或生产、并进行分离及精制而得到的肽。
[0099]在本说明书中使用时，术语“细胞免疫诱导促进剂”是指能够使一同给予的抗原的诱导细胞免疫的效率与没有给予其时的效率相比能够得到改善的所有物质，不受促进细胞免疫诱导的作用机制限定，但是指本申请说明书中特定的物质。
[0100]在本说明书中使用时，术语“TLR配体”是指Toll样受体(TLR)的配体，例如包括TLRl~9的配体。作为TLR配体，可以列举出TLR1/2配体、TLR2/6配体、TLR2及Dectinl配体、TLR3配体、TLR4配体、TLR5配体、TLR7和/或TLR8配体、TLR9配体等。本发明的优选的实施方式中，TLR配体为TLR1/2配体、TLR2及Dectinl配体、TLR3配体、TLR4配体、TLR7和/或TLR8配体、和/或TLR9配体。
[0101]在本说明书中使用时，术语“TLR1/2配体”是指Toll样受体(TLR) I及Toll样受体(TLR) 2的异质二聚体的配体，例如包括来源于细菌的细胞壁的三酰化脂蛋白及其盐，它们也可以是提取物、生成物或合成品，但并不限定于它们。
[0102]本发明的优选的实施方式中，TLR1/2配体为Pam3CSK4。Pam3CSK4具有式
[0103]
【权利要求】
1.一种经皮给予用癌症疫苗组合物，其用于诱导细胞免疫，所述组合物包含:(i)WTl肽和/或经改变的WTl肽；以及(ii)细胞免疫诱导促进剂，其选自TLR配体、环状二核苷酸、辅助肽、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF- β产生抑制剂、Th2细胞因子抑制剂、及它们的2种以上的组合。
2.根据权利要求1所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为辅助肽。
3.根据权利要求1所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，细胞免疫诱导促进剂为选自由TLR配体、环状二核苷酸、免疫调节低分子药物、环氧酶抑制剂、前列腺素受体拮抗剂、前列腺素受体激动剂、TSLP产生抑制剂、腺苷酸环化酶抑制剂、ω-3脂肪酸、PPAR激动剂、多巴胺受体拮抗剂、多巴胺受体激动剂、组胺受体激动剂、组胺受体拮抗剂、血清素受体激动剂、血清素受体拮抗剂、加压素受体拮抗剂、加压素受体激动剂、毒蕈碱受体拮抗剂、毒蕈碱受体激动剂、肾上腺素受体拮抗剂、肾上腺素受体激动剂、血管紧张素受体激动剂、GABA受体激动剂、凝血酶受体拮抗剂、凝血酶受体激动剂、阿片类受体激动剂、ADP受体激动剂、白三烯受体拮抗剂、白三烯受体激动剂、褪黑素受体激动剂、生长抑素受体激动剂、大麻素受体激动剂、鞘氨醇1-磷酸受体激动剂、代谢型谷氨酸受体激动剂、磷脂酶Α2抑制剂、TGF-β产生抑制剂、 及Th2细胞因子抑制剂组成的组中的I种以上与辅助肽的组合。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其在低刺激条件下进行给予。
5.根据权利要求4所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的所述组合物给予前的经皮水分散发量即TEWL为50g/h.m2以下的条件。
6.根据权利要求4或5所述的经皮给予用癌症疫苗组合物，其中，低刺激条件是皮肤刺激评价用动物模型的所述组合物给予结束时的皮肤内胸腺基质淋巴细胞生成素即TSLP水平为10000pg/mg蛋白质以下的条件。
【文档编号】A61P35/00GK103961307SQ201410043149
【公开日】2014年8月6日 申请日期:2014年1月29日 优先权日:2013年2月5日
【发明者】大久保胜之, 前田佳己, 冈崎有道, 浅利大介, 宍户卓矢, 堀光彦, 杉山治夫 申请人:日东电工株式会社, 国立大学法人大阪大学