一种治疗高尿酸血症的组合物及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于制药【技术领域】，具体而言，涉及一种治疗高尿酸血症的组合物及其应用。一种治疗高尿酸血症的组合物，其特征在于，包括向天果提取物；所述组合物由乌梅，虎杖，苍术，向天果，紫葡萄，冬瓜子，海带芽组成，其中，所述乌梅为10-20份，虎杖为50-70份，苍术为12-35份，向天果为100-120份，紫葡萄为26-40份，冬瓜子为55-80份，海带芽为10-20份。本发明的药物组合物适用于高尿酸血症或者通风或者尿酸性肾病，特别适用于治疗通风高尿酸血症。本发明的有益效果在于：1、通过实验验证，组合物有较好的降尿酸效果；2、采用中药配伍的方法，使得在治疗高尿酸血症的同时，提高机体的免疫力，无毒副作用。
【专利说明】一种治疗高尿酸血症的组合物及其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于制药【技术领域】，具体而言，涉及一种治疗高尿酸血症的组合物及其应用。
【背景技术】
[0002]向天果(学名Fructus Swietenia Macrophylla),属于楝科植物,又名天仙果,源产于南太平洋所罗门群岛，向天果树高约30公尺至40公尺，因其果实向天生长而得名，须经15年生长才能结果收成；向天果被誉为”植物之后”，可惜由于缺乏现代科学的科研与提练，多年来向天果实所蕴含的价值未被全部开发及广泛利用。
[0003]向天果有助于调节人体各器官之间的内环境平衡，保障每个细胞的正常活动，促进微循环系统的血液流量，提高人体免疫能力，确保人体器官组织功能操作健全，能增进血液循环和防止血管阻塞，能够帮助预防心脏病和中风。对治疗糖尿病，血压高、过敏性疾病、内分泌失调等有非常显著的功效；
痛风是长期嘌呤代谢障碍、血尿酸增高引起的代谢性疾病；高尿酸血症是痛风的重要生化基础，同时也成为许多疾病的危险因素,如高尿酸血症不仅能够诱发痛风性关节炎,尿石症、尿酸性肾病，而且血尿酸水平升高与脂质代谢异常、肥胖等疾病密切相关。
[0004]近年随着人们生 活方式的改变，高尿酸血症和痛风的患病率呈逐渐上升趋势，多发于男性，并有年轻化的倾向，已成为城市人群的一种常见病、多发病。高尿酸血症和痛风常常与其他代谢性疾病如高血压、冠心病、糖尿病等疾病同时发生，给人类健康带来严重危害。有研究显示，高尿酸血症是动脉粥样硬化的危险因素，心脑血管病伴发高尿酸血症患者的病死率呈上升趋势。
[0005]在临床治疗上，减少尿酸的再吸收，增加尿中尿酸的排泄量，是痛风和高尿酸血症治疗过程中有效降低血尿酸浓度的有效方法之一。在人肾脏中，尿酸的重吸收过程主要依赖于膜上的特殊的转运蛋白，即尿酸转运体I ( Urate Transporter I, URATI)。URATl是一种尿酸一阴离子交换体，负责肾小球滤过90%尿酸在近曲小管内的重吸收。
[0006]目前，临床常用的痛风治疗药物中，苯溴马龙对URATl的抑制效果最好，但由于其副作用较多，众多国外制药企业十分重视发现新的URATl抑制剂并投入了大量的人力物力，希望能从中发现效果更好，副作用更少的新的高尿酸血症治疗药物。
[0007]因此，迫切需要一种植物药组合，在不损害人体的生理机能的前提下，能够有效治疗高尿酸血症和痛风等症状。
【发明内容】
[0008]为解决上述技术问题，本发明提供一种一种治疗高尿酸血症的组合物及其应用。
[0009]一种治疗高尿酸血症的组合物，其特征在于，包括向天果提取物。
[0010]其中，所述组合物由乌梅，虎杖，苍术，向天果，紫葡萄，冬瓜子，海带芽组成，其中，所述乌梅为10-20份，虎杖为50-70份，苍术为12-35份，向天果为100-120份，紫葡萄为26-40份，冬瓜子为55-80份，海带芽为10-20份。
[0011]其中，所述乌梅为15-18份，虎杖为60-68份，苍术为15-32份，向天果为110-118份，紫葡萄为30-38份，冬瓜子为65-77份，海带芽为15-18份。
[0012]其中，包括药学上可接受的载体组成。
[0013]其中，其特征在于口服制剂可以为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、滴丸、软胶囊、悬浮液、溶液、糖浆、纳米乳、脂质体。
[0014]本发明的向天果提取物适用于高尿酸血症或者痛风或者尿酸性肾病，特别适用于治疗痛风高尿酸血症。
[0015]本发明的药物组合物适用于高尿酸血症或者痛风或者尿酸性肾病，特别适用于治疗痛风高尿酸血症。
[0016]本发明所述的药物制备方法为:向天果提取物制备方法:将向天果果实粉碎，过20目筛，加入10倍质量的水，在温度为60-70°C之间提取3-5小时，得到提取液离心，除杂后，在温度70°C以下浓缩至与原料等质量，得到向天果提取物。
[0017]组合物的制备方法:将前述的原料按相应的重量配比混合，先用清水清洗除杂，然后将其用等质量的30-50°C的温水浸泡l_3h，然后，加入原料重量3-5倍的水，在75_90°C提取3-5次，冷却过滤后，在65°C以下浓缩成为与原料等质量的流浸膏状，摇匀密封，至于阴凉通风处保存。上述浸膏可直接作药用，也可用于如动物降尿酸模型试验。
[0018]本发明所述的一种治疗高尿酸血症的组合物是针对高尿酸血症和痛风人群研制出的一款纯植物提取物，内含乌梅、冬瓜子、绿海藻、海带芽、紫葡萄等多种天然碱性植物，食用后其内含的浓缩植物精华可在人体代谢中生成生物碱，改善人体体液中的尿酸代谢，通过排尿和排便等新陈代谢将有害物质排出体外，使您充满活力、身体更健康。
[0019]组方中，乌梅含有枸橼酸，苹果酸等有机酸和挥发油，可帮助清扫血液，使血液流动量正常化，排除过量的酸素；虎杖含蒽醌类化合物，具有祛风，利湿，破瘀，通经的功效。苍术具有燥湿健脾，祛风湿的功效，可调整胃肠运动功能、抗溃疡、保肝。主要有效成分是以
桉叶醇及茅术醇为代表的挥发油。向天果含有皂角苷、向天果含有黄酮、异黄酮及多种天然蛋白质、维生素Α、B1、Β3、Β6、D、E及叶酸、铁、钾等人体必要营养成份，且比例适当，具有改善血液循环、清血、调补及提升免疫力等作用。紫葡萄中含的类黄酮是一种强力抗氧化剂，可清除体内自由基，可去水肿，通利小便；冬瓜子是常见蔬菜冬瓜的种子，富含天然植物油脂和矿物质，以及皂甙等物质，有较好的利尿作用，现代药理学证明冬瓜仁还能够增强机体免疫力；海带芽海带芽含有大量的矿物质、维生素、纤维素、钙、钾、碘，含有的褐藻酸可结合小肠内多余的钠排出体外，有助舒缓高血压；另外含有墨角藻留醇能将多余的胆固醇排出体外。
[0020]本发明的有益效果在于:1、通过实验验证，组合物有较好的降尿酸效果；2、采用中药配伍的方法，使得在治疗高尿酸血症的同时，提高机体的免疫力，无毒副作用。 【具体实施方式】
[0021 ] 下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
[0022]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。
[0023]实施例1:
在本实施例中，通过实验证明了向天果提取物在治疗高尿酸血症方面具有良好的效
果O
[0024]材料与方法
1.1测试化合物
名称:向天果提取物
1.2向天果提取物溶液的配制
向天果提取物制备方法:将 向天果果实500g粉碎，过20目筛，加入10倍质量的水，在温度为65°C之间提取4小时，得到提取液离心，除杂后，在温度70°C以下浓缩至与原料等质量，得到向天果提取物。
[0025]首先，将向天果提取物81.1mg溶解在4055 μ L DPBS中，涡旋lmin、超声lOmin，1000Orpm离心5min，得到浓度为20mg/mL的母液。然后用DPBS稀释母液，分别至最终浓度含有0.06，0.2，0.6，2，6，20 mg/mL的向天果提取物溶液。
[0026]检测系统 1.3.1材料
a.人药物转运体URATl基因稳定表达HEK293细胞:Human Embryonic Kidney 293 cells(HEK293细胞)是源于组织培养中生长的人胚胎肾细胞的特定细胞系。以插入了人药物转运体URATl基因的哺乳类动物表达pcDNA3.1载体转染该细胞，并以geneticin筛选耐性细胞，进而获得细胞膜表面尿酸转运体稳定高表达的细胞株。
[0027]b.培养基
含有 10% 胎牛血清(Lot N0.1227693，Invitrogen，s Gibco)的高糖 DMEM 培养基(LotN0.NYM1045, Hyclone)用于本研究的细胞培养。
[0028]c.胰酶
0.25% Trypsin-EDTA (IX) (Lot N0.1155732, InvitrogenJ s Gibco)
d.放射性标记探针底物
Uric acid, [8-14C]- (Lot N0.742-107-0578-B-20121130-SBA, Moravek)
Glucose D, [14C (U)]- (Lot N0.120319，ARC)
e.缓冲溶液
Dulbecco，s Phosphate Buffered Saline, DPBS(Lot N0.070M8306, Sigma-Aldrich)
1.3.2实验步骤
a.HEK293单层细胞培养
胰酶消化后，药物转运体URATl基因表达细胞和药物转运体SGLT2基因表达细胞接种于赖氨酸包被24孔培养盘(Lot N0.20130801，CHI SCIENTIFIC)，细胞接种密度为IO5cell s/we 11，在37 °C、5% C02、饱和湿度的培养箱内培养2天。
[0029]b.放射性标记探针底物浓度
制备浓度为60μΜ的Uric acid, [8_14C]-，然后与待测化合物等体积混合，使其最终浓度为 30μΜ。
[0030]制备浓度为60μΜ的Glucose D，[14C (U)],然后与待测化合物等体积混合，使其最终浓度为30μΜ。
[0031]c.非标记化合物浓度
各种待测样品(2X终浓度)，并与60 μΜ放射性标记Uric acid, [8-14C]_和60μΜ的Glucose D，[14C (U)]等体积混合。向天果提取物的最终浓度为0.03,0.1,0.3、l、3、10mg/
mLo
[0032]d.细胞摄入试验
先移去培养板内培养液，将培养细胞用DPBS清洗两次，并在37° C DPBS缓冲液中温浴lOmin，然后以500μL含放射性标记的探针底物溶液置换DPBS开始药物的细胞内摄入；2min后，用冰浴DPBS缓冲液终止反应，并清洗3次；然后各孔添加500μ1 0.lmol/L NaOH裂解细胞；提取裂解液于闪烁瓶中，添加3mL的闪烁液(Aquasol-2)，并用Tr1-Carb 2910TR液闪仪(PerkinElmer,Waltham, USA)测定样品中的放射性强度。细胞摄入试验中每个浓度重复3次(n=3)。
[0033]结果分析
1.4.1抑制作用
将不含非放射性标记的探针底物和待测化合物物的放射性标记的探针底物的摄入活性定义为100% (control)，以 此为标准计算各种化合物存在条件下的吸收百分比。
[0034]统计学方法
Mean土standard error (SD)用 Microsoft? Excel 2010 软件计算。每个数值代表一个实验的两个测定值的平均值。GraphPad Prism 5.0软件用于绘制非线性回归曲线图，并计算化合物对药物转运体转运活性影响的IC5(I。
[0035]结果
向天果提取物对尿酸转运体(hURATl)介导的14C-UrICACID转运活性的影响见表1，没有添加抑制剂条件下，hURATl对14C-URIC ACID的摄入比例定义为100% (control)。不同浓度向天果提取物的添加，使hURATl介导的14C-URIC ACID摄入比例随浓度的增加明显下降，并具有显著的统计学差异。
[0036]向天果提取物对尿酸转运体(hURATl)介导的14C-URIC ACID转运活性影响非线性回归曲线。横轴为药物浓度的对数，纵轴为control摄入活性的百分比。各浓度点与曲线呈良好的相关性(R2=0.9827)，由各浓度点计算得到A2对尿酸转运体(hURATl)介导的14C-URIC ACID 的抑制作用 IC5Q=2.50mg/mL。
[0037]结论
试验结果显示，向天果提取物对hURATl的转运活性有较好的抑制作用，IC5tl值为
2.50mg/mLo
[0038]表1.向天果提取物对尿酸转运体介导的14C-URIC ACID转运活性的影响(n=3)
【权利要求】
1.一种治疗高尿酸血症的组合物，其特征在于，包括向天果提取物。
2.根据权利要求1所述的治疗高尿酸血症的组合物，其特征在于，所述组合物由乌梅，虎杖，苍术，向天果，紫葡萄，冬瓜子，海带芽组成，其中，所述乌梅为10-20份，虎杖为50-70份，苍术为12-35份，向天果为100-120份，紫葡萄为26-40份，冬瓜子为55-80份，海带芽为10-20份。
3.根据权利要求2所述的一种降尿酸组合物，其特征在于，所述乌梅为15-18份，虎杖为60-68份，苍术为15-32份，向天果为110-118份，紫葡萄为30-38份，冬瓜子为65-77份，海带芽为15-18份。
4.根据权利要求2所述的治疗高尿酸血症的组合物，其特征在于，包括药学上可接受的载体组成。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的降尿酸组合物，其特征在于口服制剂可以为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、滴丸、软胶囊、悬浮液、溶液、糖浆、纳米乳、脂质体。
6.一种如权利要求1所述的药物组合物作为有效成分在治疗高尿酸血症或者通风或者尿酸性肾病中的用途。
7.—种如权利要求2所述的药物组合物作为有效成分在治疗高尿酸血症或者通风或者尿酸性肾病 中的用途。
【文档编号】A61K36/58GK104000878SQ201410238113
【公开日】2014年8月27日 申请日期:2014年5月30日 优先权日:2014年5月30日
【发明者】金鑫 申请人:金鑫