防治禽流感的复方黄芪多糖颗粒的制作方法
【专利摘要】本发明涉及防治禽流感的复方黄芪多糖颗粒，可有效解决禽流感用药的问题，其解决的技术方案是，是由以下重量计的：黄芪多糖550-650g、牛膝多糖180-220g、猫爪草多糖110-130g和木鳖子霜75-85g作原料药物，再添加原料药物重量3%的辅料制备成颗粒，所述的辅料为淀粉、糖粉、糊精的一种或两种以上的混合，本发明原料丰富，价格低廉，用药安全，无毒副作用，使用效果好，是防治禽流感的中兽药物上的创新。
【专利说明】防治禽流感的复方黄芪多糖颗粒
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药，特别是一种防治禽流感的复方黄芪多糖颗粒。
【背景技术】
[0002] 禽流感病毒感染的对象主要为禽类，但近年来，尤其是H5N1高致病性禽流感病 毒可致多种哺乳动物感染与死亡，如发生于我国动物园中虎以及泰国动物园中虎、豹禽流 感的感染发病，造成了大量死亡，其他动物如猪、猫、犬等的感染发病与死亡也时有报道。当 然，在许多哺乳动物的禽流感病毒感染中，以猪禽流感的感染对人类的危害为最大。一旦人 流感病毒和禽流感病毒共同感染猪后，很可能产生在人之间传播与流行的变异株。研究认 为，1957至1968年亚洲流行的H2N2亚型病毒，其HA、NA和PB1基因皆来自于禽流感病 毒，其它基因保留了当时流行于人群中的H1N1病毒的基因；1968年香港流行的H3N2亚 型病毒，其HA和PB1也来自禽流感病毒，其它基因来自于当时流行于人群中的H2N2病 毒。即引起两次人流感大流行的病毒，都是人源毒株和禽源毒株的杂合病毒。由于猪在这 种杂合病毒的形成过程中起重要作用，被认为是"混合器"。另外，禽流感病毒感染哺乳动物 后，在体内经过一段时间的适应后，其受体特异性可能发生改变，也有可能变成可感染人类 的毒株。
[0003] 从目前哺乳动物的感染与发病情况来看，猫科动物中的虎、豹、猫等动物和鼬科动 物中的貂类动物如雪貂、水貂、石貂等对禽流感病毒非常敏感，雪貂也是流感病毒的理想实 验动物。结合水貂在我国特种经济动物养殖上的重要地位以及我国不断有高致病性禽流感 发生的现实，提醒我们对水貂禽流感的发生与影响必须要给予高度的重视。
[0004] 遗传和变异是任何一种生物的基本特性；尤其在不良环境压力下，更会促进其变 异，如抗体的压力会导致病毒抗原性的改变。在我国，应用H9N2亚型禽流感疫苗已至少有 10年的历史，而目前流行的H9亚型禽流感病毒至少有3组不同类型的抗原群，不同抗原组 之间交叉反应性较差；而H5亚型流感疫苗的应用也有一定时间，依据现有的报道资料，我 国广西、云南、江西以及湖南等地的高致病性禽流感血凝素抗原性都存在较大的差别，而且 动物实验表明，对鸭接种的病毒，后期所排放的病毒与原接种病毒相比就有数量不等氨基 酸的差异，充分说明了 H5亚型禽流感病毒抗原容易发生变异，而且禽流感病毒抗原变异似 乎进入了一个活跃期。因此，禽流感病毒抗原性的改变，无论是对动物还是对人类疫苗免疫 防控都造成了很大的困难。
[0005] 目前对于禽流感的防治药物缺乏：金刚烷胺等西药作为人和畜禽治疗流感的药物 已经用了几十年了。但是，人的H3NUH3N2已经产生了抗金刚烷胺的毒株。最近有媒体报 道，有人用"达菲"也已经开始产生新的毒株，这是我们非常关心的，但是这主要出现在人的 身上。对于西药抗病毒用于防治禽流感我国是不允许使用的。按照现行的兽药管理条例， 只要发现把金刚烷胺等西药抗病毒药用于兽药销售和生产，就要给予行政处罚。所以，目前 在防治禽类的禽流感方面尚无抗病毒兽药。
[0006] 部分养殖场户违反国家规定仍采用金刚烷胺等西药抗病毒药用于防治禽流感：① 由于禽类感染禽流感后首先破坏机体的免疫防御系统，导致机体的抵抗力和自身修复能力 丧失；②西药抗病毒药用于临床后对病毒颗粒有部分拮抗作用，但是对于禽类的机体细胞 也同样有毒副作用，所以，兽医临床上西药抗病毒药物用于对禽类的禽流感防治效果并不 理想；③在禽类的饲养过程中使用西药抗病毒药物后会导致食品安全等严重问题，从而影 响到了人类的身体健康和人类疾病的防控安全。在人类对于禽类的禽流感的临床防治研究 与探索中发现部分中兽药品种如黄芪、木鳖子等用于防治禽类的禽流感的临床效果尚且不 错，而且研究还发现黄芪等中兽药不但具有较强的临床抗病毒能力，同时还具有增强机体 免疫力和抗病力，提高机体自身的修复能力。传统的中兽药由于加工工艺比较简单，相对加 工粗糙，多以简单的粗粉或细粉或传统熬制后直接拌入禽类饲料或饮水中，中兽药的有效 成分得不到充分有效的吸收利用，导致临床应用效果不太理想。因此，防治禽流感的药物上 的改进是目前亟需解决的问题。
【发明内容】
[0007] 针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种防治禽流感 的复方黄芪多糖颗粒，可有效解决禽流感用药的问题。
[0008] 本发明解决的技术方案是，是由以下重量计的：黄芪多糖550_650g、牛膝多糖 180-220g、猫爪草多糖110-130g和木鳖子霜75-85g作原料药物，再添加原料药物重量3% 的辅料制备成颗粒，所述的黄芪多糖为干燥的黄芪，加水，浸提三次，第一次浸提，先用黄芪 12倍重量的水浸泡30-60min，煎沸，再文火煮1. 5小时，过滤，得第一滤液，药渣加入黄芪 10倍重量的水，进行第二次浸提，煮沸，再文火煮1. 5小时，过滤，得第二滤液，药渣再加黄 芪10倍重量的水，进行第三次浸提，煮沸，再文火煮1小时，过滤，得第三滤液，合并三次滤 液，浓缩至1 :1的浓缩液，用浓缩液4倍体积量的无水乙醇沉淀，沉淀物干燥，得黄芪多糖； 所述的牛膝多糖是，将干燥的牛膝，加水，料液比1:15,100°C浸提2h，浸提液加牛膝5倍重 量的质量浓度95%的乙醇，浸提2次，每次2小时，合并滤液，浓缩，干燥，得牛膝多糖；所述 的猫爪草多糖是，将猫爪草加水，浸提2次，每次加水量为猫爪草重量的12倍，每次浸提3 小时，合并两次浸提液，浓缩至相当于含生药800g/L的浓缩液，加浓缩液体积50%的无水乙 醇，净置6小时，弃去上部液体，得沉淀物，沉淀物干燥，即为猫爪草多糖；所述的木鳖子霜 为将木鳖子仁，装入挤压式制霜机压制，控制温度为100°C，待含油量达17-20%时，停止压 榨，将药渣粉碎混合均匀，得木鳖子霜；所述的辅料为淀粉、糖粉、糊精的一种或两种以上的 混合。
[0009] 本发明原料丰富，价格低廉，用药安全，无毒副作用，使用效果好，是防治禽流感的 中兽药物上的创新。
【具体实施方式】
[0010] 以下结合实施例对本发明的【具体实施方式】作进一步详细说明。
[0011] 实施例1 本发明在具体实施时，可由以下重量计的：黄芪多糖550g、牛膝多糖180g、猫爪草多糖 110g和木鳖子霜75g作原料药物，添加原料药物重量3%的辅料制备成颗粒，所述的辅料为 淀粉、糖粉、糊精，按重量比1 :3 :1混配均匀而成。
[0012] 实施例2 本发明在具体实施时，可由以下重量计的：黄芪多糖600g、牛膝多糖200g、猫爪草多糖 120g和木鳖子霜80g作原料药物，添加原料药物重量3%的辅料制备成颗粒，所述的辅料为 淀粉、糖粉，按重量比淀粉：糖粉=1 :3混匀而成。
[0013] 实施例3 本发明在具体实施时，还可由以下重量计的：黄芪多糖650g、牛膝多糖220g、猫爪草多 糖130g和木鳖子霜85g作原料药物，添加原料药物重量3%的辅料制备成颗粒，所述的辅料 为淀粉、糊精，按重量比1 :1混配均匀而成。
[0014] 上述本发明组方中， 黄苗：为豆科植物蒙古黄苗胱?eraflaceiAs (Fisch. ) Bge · var · ffioflgAo/iciAs (Bge. ) Hsiao 或膜荚黄苗 J . (Fisch. ) Bge.的根。主产于 内蒙古、山西、黑龙江等地。 _5] 纖..甘，微温。归脾、肺经。滅森·：补气健脾，升阳举陷，益卫固表，利尿消肿，脱毒 生肌。
[0016] 观/?厥究:主要含苷类、多糖、黄酮、氨基酸、微量元素等。黄芪能促进机体代谢、抗 疲劳、促进血清和肝脏蛋白质的更新；有明显的利尿作用，能消除实验性肾炎尿蛋白；能改 善贫血动物现象；能升高低血糖；能兴奋呼吸；能增强和调节机体免疫功能，对干扰素系统 有促进作用可提高机体的抗病力；对流感病毒等多种病毒所致细胞病变有轻度抑制作用， 对流感病毒感染小鼠有保护作用；有较广泛的抗菌作用；黄芪子啊细胞培养中，可使细胞 数明显增多，细胞生长旺盛，寿命延长；能增强心肌收缩力，保护心血管系统，抗心律失常， 扩张冠状动脉和外周血管，降低血压，能降低血小板粘着力，减少血栓形成；还有降血脂、抗 衰老、抗缺氧、抗辐射、保肝等作用。近年来的研究发现黄芪中含多糖、皂甙、黄酮、氨基酸 等多种有效成分，这些活性成分均有促进抗体生成和免疫反应的作用，其中以对黄芪多糖 (Astragalus Polysacharin，APS)的研究报道为多。黄苗多糖是黄苗的主要活性成分之一， 经过高科技萃取、分离而得到的。黄芪多糖是黄芪发挥作用的主要成分。
[0017] 牛膝：为苋科植物牛膝(怀牛膝B1.和川牛膝(甜牛膝） Cya thula officinalis Kuan _8] 药性：苦、甘、酸、平。归肝、肾经。功效：活血通经、补肝肾、强筋骨、利水通淋、引火 (血）下行。
[0019] 现代研究：牛膝含有三萜皂苷(经水解后成为齐墩果酸和糖)、蜕皮留酮、牛膝甾 酮、紫茎牛膝留酮等留体类成分和多糖类成分。此外，牛膝还含有精氨酸等12种氨基酸以 及生物碱类、香豆素类等化合物及铁、铜等微量元素。牛膝总皂苷对子宫平滑肌有明显的兴 奋作用，怀牛膝苯提取物有明显的抗生育、抗着床及抗早孕的作用，抗生育的有效成分为蜕 皮甾醇。牛膝醇提物对试验小动物心脏有抑制作用，煎剂对麻醉犬心肌亦有抑制作用。煎 剂和醇提液有短暂的降压和轻度利尿作用，并伴有呼吸兴奋作用。怀牛膝能降低大鼠全血 黏度、血细胞比容、红细胞聚集指数，并有抗凝作用。蜕皮甾酮有降脂作用，并能明显降低血 糖。牛膝具有抗炎、镇痛作用，能提高机体免疫功能。
[0020] 猫爪草：为毛茛科植物小毛茛沿//wflcWiAs temaiiAs Thunb.的块根。
[0021] 药性：甘、辛，微温。归肝、肺经。功效：化痰散结，解毒消肿。
[0022] 现代研究：猫爪草含小毛茛内酯、原白头翁素、花生酸、肉豆蘧酸十八烷基酯、豆甾 醇、谷留醇、葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖，还含油类及植物碱。
[0023] 1.抗结核菌和其他细菌：猫爪草的抗结核菌机制，有人通过对其进行微量元素 分析后认为，结核患者头发中微量元素 Zn、Fe、Μη含量明显比正常人低，猫爪草中较高的 Zn(40. l)、Fe(1306. 4)、Μη(74. 6)含量对抗了由于Ζη降低导致的肌体免疫细胞抑制，从 而减弱了对感染的易感性，但这种杀菌机理的理由并不充分。詹莉等采用反转录聚合酶链 反应半定量（QC-RT PCR)方法及PCR方法，对猫爪草的有效成分小毛莨内酯（Tern)进行了 抗结核菌分子免疫学机理的研究，结果表明Tern可能诱导周围血管GLS基因高水平表达， 杀灭胞内致病菌MTB，并呈剂量依赖性，对耐药的与未治疗的肺结核患者诱导水平无显著差 异。进一步研究表明，Tern可能通过促进GLSmRNA的表达，增强机体细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的杀菌能力，从而达到抗结核体眠落的作用，另外还可能通过减少结核体眠16KDa小 热体克蛋蠡（16KDaSHSP)基因的表达，在激活体眠菌的同时促进GLS高水平表达，增强机体 CTL杀菌能力，达到抗耐药菌的作用Η弓丨.谢建平等利用双向电泳技术，发现猫爪草提取物 作用盾的结核分枝杆菌临床分离株的企细胞蛋臼表达图谱中，有22个蛋白质斑点的浓度 具有差异，利用基质辅助激光鳃吸/电离飞行时间质谱技术分橱，其中孓腺营甲硫氨酸合 成酶、碍I哚一 3-甘油磷酸合酶、烯酰一 CoA水合酶、琥珀酰辅酶Α合成酶表达明显下调， 其研究表明，猫瓜草提取物作用在结核菌的多条途径的多个靶标，这蝗途径包括氮基酸代 谢及相关的多胺合成、脂肪酸代谢、中枢代谢途径以及可能参与蹑自质分泌、运输和免疫的 分子伴侣η弓|，这与中药提取物多成分的性质棚符。在应用上，猫瓜草豹永蘸裁、生药粉末 及醇提液在试警内对强毒入登结核蔼（H37RV)均有不同程度的抑制作用.猫爪草的煎剂及 生药粉末的抑菌浓度为1 :10,其醇提液的抑菌浓度为1 :1000,且抑菌作用较异烟肼稍强。 "将猫爪草、青篙水浸液过滤后以1 :200浓度制成改良罗氏中药培养基和对照培养基，经灭 菌后分剃接释结核蓊混悬液，放置予37°C恒瀑温箱中培养，络果对照培养基中结核菌生长 良好，两中药培养基无结核菌生长.猫爪草水提液对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、四链 球菌、痢疾杆菌等均有抑制作用，且可抑制耐药性结核杆菌、能抗约氏鼠癌杆菌、降低原虫 感染率。
[0024] 2.抗肿瘤研究 猫爪草注射液对小鼠 S180、$37、EAC等肿瘸株有显著的抑制作用。有关其抗肿瘤的机 制，曾有人从微量元素与健康的角度认为，癌症患者血清中Cu / Ζη值升高，而猫爪草Cu / Ζη值趋向与癌症患者Cu / Ζη相反，因此可能有助予调节患者体内Cu、Zn平衡而发挥抗癌 效果。
[0025] 3.抗炎作用 复方猫爪草水提物的抗急性炎症作用显著，原因可能是通过抑制毛细血管的扩张，降 低遥透性，使渗出液减少以达到抗炎作用…弓丨，猫爪草既粟毛壳本用于治疗菲结核性的淋 巴结炎。
[0026] 4.保护性抑制作用 研究认为猫爪草对动物中枢神经系统、心脏、呼吸系统及肠壁具有不同程度的抑制作 用，并可使血压一时性下降，对血管却无扩张作用，推断该药对人体可能起保护性抑制作 用，有利于改善体质和增强对疾病的抵抗力。
[0027] 木鳘子：为葫芦科植物木鳘 Momordica cochinchinensis (Lour.) Spreng. 的成熟种子。
[0028] 药性：苦、微甘，凉。有毒。归肝、脾、胃经。功效：攻毒疗疮，消肿散结。
[0029] 现代研究：含木鳖子皂苷、木鳖子酸、木鳖子素、齐墩果酸、甾醇、氨基酸，以及油 35. 72%、蛋白质30. 59%、海藻糖等。木鳖子皂苷有抗炎及降血压作用，并能抑制离体蛙心和 离体兔十二指肠。水浸液.乙醇-水浸出液和乙醇浸出液，试验于狗、猫及兔等麻醉动物，有 降压作用。但毒性较大，无论静脉或肌肉注射，动物均于数日内死亡。大鼠静脉注射木鳖子 皂甙，血压暂时下降，呼吸短暂兴奋，心搏加快。注射于狗股动脉可暂时增加下肢血流量，其 作用强度约为罂粟碱的1/8。对离体蛙心和离体兔十二指肠均为抑制作用，而对豚鼠回肠则 能加强乙酰胆碱的作用、拮抗罂粟碱的作用，高浓度时且引起不可逆性收缩。大鼠口服或 皮下注射木鳖子皂甙，能显著抑制角叉菜胶引起的足滕浮肿。对兔红细胞有溶血作用。种 子的皂甙：6. 6mg/kg给大鼠静脉注射可致短暂的呼吸兴奋和血压下降，并能增加狗后肢末 梢血管的血流，对离体娃心有抑制作用；2X10 (-4) g/ml浓度能增加乙酰胆碱对豚鼠回肠 的兴奋作用；灌胃或皮下注射对角叉菜胶引起的大鼠足部肿胀炎症有抑制作用；有溶血作 用；对小鼠的半数致死量静脉注射为32. 35mg/kg，腹腔注射为37. 34mg/kg。木鳖子提取物 对麻醉狗，猫及兔等有降压作用，大鼠静脉注射木鳖子皂甙，可使血压暂时下降，心搏加快， 呼吸短暂兴奋。注射于狗股动脉可暂时增加下肢血流量，其作用强度约为罂粟碱的1/8。另 外具有抗炎及溶血作用。
[0030] 木鳖子脂肪油含量测定：分别取样品粗粉lg，精密称定，用滤纸包好，置索氏提 取器中，加入乙醚80ml安装提取装置，水浴加热回流提取8 h，至提净脂肪油，收集提取 液置恒重好的蒸发皿中，在水浴上低温挥干乙醚，置电热恒温干燥箱内，l〇〇°C干燥1 h， 取出移置干燥器内，冷却30 min，精密称定，计算，得出木鳖子生品中脂肪油平均含量为 40. 74%，木鳖子霜脂肪油平均含量17. 13%，平均去油率19. 80%。本发明控制木鳖子霜含 17?20%的脂肪油，是有一定道理的。
[0031] 本发明组分使用黄芪多糖、牛膝多糖、猫爪草多糖及木鳖子霜科学、合理配伍，互 相支持，有效用于治疗禽流感，疗效好，用药安全，并经试验得到了充分证明，有关试验资料 如下： 一、黄芪多糖药理活性试验： 1. 1试验材料 本发明黄芪多糖。
[0032] 1. 2试验方案 本试验旨在研究饲粮中添加不同水平黄芪多糖对蛋鸡免疫功能及肠道菌群的影响。试 验选取健康且生产性能相近的380日龄海兰灰商品蛋鸡1440只，随机分为6组，每组4 个重复，每个重复60只鸡。以玉米-豆柏型饲粮为基础饲粮，各组分别在基础饲粮中添 加 〇( I，对照组）、50( II组）、100(111 组）、150(IV组）、200( V组）和 250 mg/kg(VI组） 黄芪多糖，预试期1周，试验期8周。自由采食和饮水，按常规免疫程序免疫。基础饲粮组 成及营养水平见表1。观察各实验组蛋鸡脾脏和法氏囊系数、盲肠扁桃体淋巴小结数量和绒 毛长度，观察对蛋鸡免疫功能的影响(见表2)。
[0033] 表1基础饲粮组成
【权利要求】
1. 一种防治禽流感的复方黄芪多糖颗粒，其特征在于，是由以下重量计的：黄芪多糖 550-650g、牛膝多糖180-220g、猫爪草多糖110-130g和木鳖子霜75-85g作原料药物，再添 加原料药物重量3%的辅料制备成颗粒，所述的黄芪多糖为干燥的黄芪，加水，浸提三次，第 一次浸提，先用黄芪12倍重量的水浸泡30-60min，煎沸，再文火煮1. 5小时，过滤，得第一 滤液，药渣加入黄芪10倍重量的水，进行第二次浸提，煮沸，再文火煮1. 5小时，过滤，得第 二滤液，药渣再加黄芪10倍重量的水，进行第三次浸提，煮沸，再文火煮1小时，过滤，得第 三滤液，合并三次滤液，浓缩至1 :1的浓缩液，用浓缩液4倍体积量的无水乙醇沉淀，沉淀 物干燥，得黄芪多糖；所述的牛膝多糖是，将干燥的牛膝，加水，料液比1:15,100°C浸提2h， 浸提液加牛膝5倍重量的质量浓度95%的乙醇，浸提2次，每次2小时，合并滤液，浓缩，干 燥，得牛膝多糖；所述的猫爪草多糖是，将猫爪草加水，浸提2次，每次加水量为猫爪草重量 的12倍，每次浸提3小时，合并两次浸提液，浓缩至相当于含生药800g/L的浓缩液，加浓缩 液体积50%的无水乙醇，净置6小时，弃去上部液体，得沉淀物，沉淀物干燥，即为猫爪草多 糖；所述的木鳖子霜为将木鳖子仁，装入挤压式制霜机压制，控制温度为l〇〇°C，待出油量 达17-20 %时，停止压榨，将药渣粉碎混合均匀，得木鳖子霜；所述的辅料为淀粉、糖粉、糊 精的一种或两种以上的混合。
2. 根据权利要求1所述的防治禽流感的复方黄芪多糖颗粒，其特征在于，是由以下重 量计的：黄芪多糖550g、牛膝多糖180g、猫爪草多糖110g和木鳖子霜75g作原料药物，添加 原料药物重量3%的辅料制备成颗粒，所述的辅料为淀粉、糖粉、糊精，按重量比1 :3 :1混配 均匀而成。
3. 根据权利要求1所述的防治禽流感的复方黄芪多糖颗粒，其特征在于，是由以下重 量计的：黄芪多糖600g、牛膝多糖200g、猫爪草多糖120g和木鳖子霜80g作原料药物，添 加原料药物重量3%的辅料制备成颗粒，所述的辅料为淀粉、糖粉，按重量比淀粉：糖粉=1 :3 混匀而成。
4. 根据权利要求1所述的防治禽流感的复方黄芪多糖颗粒，其特征在于，是由以下重 量计的：黄芪多糖650g、牛膝多糖220g、猫爪草多糖130g和木鳖子霜85g作原料药物，添加 原料药物重量3%的辅料制备成颗粒，所述的辅料为淀粉、糊精，按重量比1 :1混配均匀而 成。
【文档编号】A61P31/16GK104083427SQ201410368695
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月30日 优先权日:2014年7月30日
【发明者】王一硕, 赵云生, 郭守义, 杨成祥, 陈丽芬, 胡泽翔 申请人:河南中医学院