健脾养正消症方在制备化疗后肾功能保护药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种健脾养正消症方在制备化疗后肾功能保护药物中的应用。尤其是在制备顺铂化疗后肾功能保护药物中的应用。本发明采用健脾养正消症方和化疗药物的联用，通过健脾养正消症方激活PI3K/AKT通路，增加PI3K、AKT的磷酸化水平，减少肾小管上皮细胞凋亡，从而起到在顺铂化疗后对肾功能保护的作用的。
【专利说明】健脾养正消症方在制备化疗后肾功能保护药物中的应用
【技术领域】
[0001]本发明属于复方组合中药的新应用，具体涉及一种健脾养正消症方在制备化疗后肾功能保护药物中的应用。
【背景技术】
[0002]顺钼是临床常用化疗药，对多种恶性肿瘤有较好的疗效，在一定范围内其疗效与剂量成正比，而顺钼的毒性很大程度限制了其应用。由于顺钼进入人体后主要通过肾排泄，所以其肾毒性尤为明显。顺钼在大剂量或连续使用时，使肾小管表现为不可逆的损伤，严重者导致肾衰竭甚至死亡。现代研究证实，顺钼引起肾损害的发病机制主要与包括细胞凋亡，氧化应激、炎症反应、肾脏血流学改变等因素有关。其中，又以顺钼诱导肾小管上皮细胞凋亡作用较为明显。因此，临床急需能够减轻钼类对肾功能损害的药物。
【发明内容】
[0003]为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种健脾养正消症方在制备化疗后肾功能保护药物中的应用。
[0004]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为:
[0005]健脾养正消症方在制备化疗后肾功能保护药物中的应用。
[0006]作为本发明的进一步改进，所述健脾养正消症方制备顺钼化疗后肾功能保护药物中的应用。
[0007]作为本发明更进一步的改进，所述健脾养正消症方用于激活顺钼化疗后的PI3K/AKT通路。
[0008]本发明中所采用的健脾养正消症方是江苏省名中医刘沈林教授的经验方。本方以党参，炒白术，茯苓，淮山药，生薏苡仁，炙甘草益气健脾，补肾涩精，淡渗利湿；气虚之证常兼气滞，谓之“虚气留滞”，方用陈皮，木香行气化滞，斡旋气机；当归，白芍养血活血；菝葜，石打穿解毒抗癌，消癥化积。诸药合用，补其中气，养其肾精，行其气滞，和其营血，解其癌毒，恢复脾胃受纳与健运之职，共凑健脾益气，补肾藏精，解毒消癥的作用，对肿瘤病人放化疗后，有良好的缓解症状、延长生存期的效果。为进一步了解该方对化疗后肾功能的保护作用，我们进行了此次研究。
[0009]有益效果:本发明采用健脾养正消症方和化疗药物的联用，通过健脾养正消症方激活PI3K/AKT通路，增加PI3K、AKT的磷酸化水平，减少肾小管上皮细胞凋亡，从而起到在顺钼化疗后对肾功能保护的作用的。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]图1为本发明各组小鼠肾脏病理组织学结果图；其中，A:荷瘤对照组(X100)；B:CP 组(X100) ；C:JPYZXZF 组(X100) ；D:CP+JPYZXZF 组(X100) ；E:荷瘤对照组(X400) ;F:CP 组(X400) ;G:JPYZXZF 组(X400) ;H: CP+JPYZXZF 组(X400)；
[0011]图2为本发明肾脏病理学变化图；
[0012]图3为本发明各组小鼠肾脏细胞凋亡情况图；其中，A:荷瘤对照组(X400) ；B:CP组(X400) ;C: JPYZXZF 组(X400) ;D:CP+JPYZXZF 组(X400)；
[0013]图4为蛋白免疫印迹检测对肾脏细胞中PI3K/AKT通路的影响。
【具体实施方式】
[0014]下面结合附图和实验例对本发明作进一步的详细说明。
[0015]健脾养正消症方在制备化疗后肾功能保护药物中的应用。下面通过实验例来进一步阐述健脾养正消症方如何激活顺钼化疗后的PI3K/AKT通路的。
[0016]实验例:
[0017]I材料与仪器
[0018]1.1动物及饲养环境:
[0019]BALB/c小鼠，40只，雌雄各半，10-12周龄，体重18_22g ;SPF级环境饲养，室内定期进行紫外线照射，鼠笼、垫料、饮水均严格消毒。
[0020]1.2药品及试剂:
[0021]健脾养正消症方由党参15g，炒白术10g，茯苓10g，生薏仁20g，当归10g，淮山药15g,木香1g,白苟1g,陈皮6g,菝葜30g,石见穿30g,炎甘草3g组成,药物由江苏省中医院提供。将上述药物加10倍双蒸水浸泡30min后，煮至沸腾后小火煮30min，倒出药液后，加5倍的双蒸水，小火煮30min。将两次的药液合并，水浴浓缩至2.5g.mrSfC保存。
[0022]RPM1-1640培养液(凯基公司)，胎牛血清(四季青公司)，顺钼(齐鲁制药有限公司),TUNEL试剂盒(德国Roche),鼠抗人β -actin单抗(美国Sigma公司),AKT、p_AKT、PI3K、p-PI3K、casepase_3单抗(美国Cell Signaling公司)，鼠抗人二抗、兔抗人二抗(北京中杉生物技术公司)。
[0023]1.3 仪器:
[0024]C02培养箱(美国FORMA公司);细胞培养超净台(苏州净化设备厂);全自动酶标仪(B1TeK公司)；倒置显微镜(日本OLYM PMS);低温离心机(德国Eppendorf公司)；超纯水机(Labconco)。
[0025]2研究方法
[0026]2.1造模及处理
[0027]取H22腹水瘤种鼠腹水，以冰生理盐水1:3稀释后，调整细胞浓度为5 X 17个/mL，BALB/c小鼠右腋下接种0.2mL,建立荷瘤小鼠模型。接种次日随机分为4组，荷瘤对照组，顺钼(CP)组，健脾养正消症方(JPYZXZF)组，顺钼+健脾养正消症方(CP+JPYZXZF)组，每组10只。具体给药方法如表I。实验第11天，眼眶取血处死小鼠.。
[0028]表I实验动物分组及给药
[0029]
【权利要求】
1.健脾养正消症方在制备化疗后肾功能保护药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述健脾养正消症方制备顺钼化疗后肾功能保护药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述健脾养正消症方用于激活顺钼化疗后的PI3K/ AKT通路。
【文档编号】A61K36/90GK104127767SQ201410380809
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年8月4日 优先权日:2014年8月4日
【发明者】吴坚, 邹玺, 张星星, 刘沈林, 陈敏 申请人:江苏省中医院