一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用，可有效解决了鲜百合地黄汤无法常年应用治疗抑郁症的用药问题，其解决的技术方案是，将鲜百合、鲜地黄以重量比1:1混合在一起，置于匀浆机中制成浆液，在真空冷冻干燥机于温度-80°C、真空度0.008-O.Olmpa条件下干燥、制粉，得干粉，密封包装，阴凉储存，具有抗抑郁作用，有效解决了鲜百合地黄汤无法常年应用治疗抑郁症的用药问题，本发明原料丰富，易制备，按给出的重量比，可制得任意量的鲜百合地黄粉，服用方便，可常年应用，具有抗抑郁作用，效果好，是治疗抑郁症药物上的创新，经济和社会效益巨大。
【专利说明】一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药，特别是一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 抑郁症是一种常见多发病，又称抑郁障碍，以显著而持久的心境低落为主要临床 特征，是心境障碍的主要类型。临床可见心境低落与其处境不相称，情绪的消沉可以从闷闷 不乐到悲痛欲绝，自卑抑郁，甚至悲观厌世，可有自杀企图或行为；甚至发生木僵；部分病 例有明显的焦虑和运动性激越；严重者可出现幻觉、妄想等精神病性症状。每次发作持续至 少2周以上、长者甚或数年，多数病例有反复发作的倾向，每次发作大多数可以缓解，部分 可有残留症状或转为慢性。慢性应激可诱发抑郁症。
[0003] 慢性应激反应简称慢性应激。即指个体处于一种长期慢性的压力状态之中。这种 压力不是某一个突发的紧急事件，而是让当事人感到无助无望的一种情境，而其结局也常 常是"出乎意料之外，又在情理之中"。
[0004] 由慢性应激引发的抑郁症称为慢性应激抑郁症，目前治疗慢性应激抑郁症的药物 有多种多样，但由于种种原因，均不尽人意。
[0005] 百合，学名（Lilium brownii var. viridulum Baker)又名强蜀、番亜、山丹、倒仙、 重迈、中庭、摩罗、重箱、中逢花、百合蒜、大师傅蒜、蒜脑薯、夜合花等，是百合科百合属（学 名：Lilium)多年生草本球根植物，甘、微苦、微寒，入心、肺经，养阴润肺、清心安神，主：阴 虚久嗽、痰中带血、热病后期、余热未清，或情志不遂所致的虚烦惊悸、失眠多梦、精神恍惚， 痈肿、湿疮，刚收获的百合洗净泥土，称为鲜百合。
[0006] 鲜地黄（拉丁学名：Rehmannia glutinosa(Gaetn. )Libosch. ex Fisch. et Mey.), 玄参科地黄属多年生草本植物，玄参科植物地黄的新鲜块根，洗净泥土，甘、苦，寒，归心、 肝、肾经，清热生津，凉血，止血，用于热病伤阴，舌绛烦渴，发斑发疹，吐血，衄血，咽喉肿痛。
[0007] 那么能否将鲜百合和鲜地黄相复配是中医著名的百合地黄汤，但鲜药受时间、季 节的限制，无法常年应用。本发明采用鲜地黄、鲜百合按1:1比例配比，匀浆机匀浆后真 空冷冻干燥，然后密闭阴凉处保存，保存了鲜药的疗效特点，又可常年应用于治疗（慢性应 激）抑郁症患者，未见有公开报导。
【发明内容】
[0008] 针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种鲜百合地黄 粉在制备治疗（慢性应激）抑郁症药物中的应用，可有效解决了鲜百合地黄汤无法常年应 用治疗抑郁症的用药问题。
[0009] 本发明解决的技术方案是，将鲜百合、鲜地黄以重量比1 : 1混合在一起，置于匀 浆机中制成浆液，在真空冷冻干燥机于温度-80°C、真空度0. 008-0. Olmpa条件下干燥、制 粉，得干粉，密封包装，阴凉储存，具有抗抑郁作用，有效解决了鲜百合地黄汤无法常年应用 治疗（慢性应激）抑郁症的用药问题。
[0010] 本发明原料丰富，易制备，按给出的重量比，可制得任意量的鲜百合地黄粉，服用 方便，可常年应用，具有抗抑郁作用，效果好，是治疗（慢性应激）抑郁症药物上的创新，经 济和社会效益巨大。
【具体实施方式】
[0011] 以下结合实施例对本发明的【具体实施方式】作详细说明。
[0012] 本发明在具体实施中，一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用，所述 的鲜百合地黄粉是，将鲜百合600g、鲜地黄600g的重量比放至匀浆机内匀浆，在真空冷冻 干燥机于温度-80°C、真空度0. 008-0. Olmpa条件下干燥、制粉，得干粉，密封包装，阴凉储 存，该干粉具有抗抑郁之功效，有效用于制备治疗（慢性应激）抑郁症的药物，并经试验取 得了非常满意的有益技术效果，有关试验资料如下：
[0013] 一、动物试验
[0014] 1材料与方法
[0015] 1.1实验材料
[0016] 1.1.1药品试剂
[0017] 本发明鲜百合地黄干粉；盐酸氯米帕明，上海信谊九福药业有限公司生产；MDA检 测试剂盒，南京建成生物工程研究所生产；SOD检测试剂盒，南京建成生物工程研究所生 产；邻苯二甲醛，上海化学试剂采购供应五联化工厂生产；正丁醇，天津市凯通化学试剂有 限公司生产；盐酸，莱阳市双双化工有限公司生产；正庚烷，天津市四通化工厂生产；去甲 肾上腺素（NE)，Sigma公司；多巴胺（DA)，Sigma公司；5-羟色胺（5-HT)，Sigma公司；高碘 酸钠，天津市福晨化学试剂厂生产；EDTANa2,宝信生物科技有限公司生产；磷酸氢二钠，天 津市凯通化学试剂有限公司生产；磷酸二氢钠，天津市福晨化学试剂厂生产；醋酸钠，天津 市化学试剂三厂生产；亚硫酸钠，天津市凯通化学试剂有限公司生产；无水乙醇，莱阳市双 双化工有限公司生产；碘，天津市科密欧化学试剂有限公司生产。
[0018] 动物给药剂量换算：鲜百合地黄（百合地黄汤，两者比例按1 : 1)每天临床用量 按两者各60g/60kg计。大鼠给药按临床用量的20、15、10倍。鲜百合地黄出粉率：约为6 %。
[0019] 则大鼠用量为：鲜百合地黄粉：大、中、小剂量分别为2. 4g鲜粉/kg、1. 8g鲜粉/ kg、l. 2g 鲜粉 /kg。
[0020] 1. 2实验动物Wistar大鼠，150?180g，雄性，由河北省医学实验动物中心提供，许 可证号：701022
[0021] 1.3实验仪器
[0022] F-4500型荧光分光光度计，日立公司生产；UV-2000紫外可见分光光度计，尤尼柯 (上海）仪器有限公司生产；恒温水浴锅，北京市光明仪器厂生产；离心机，北京医疗仪器修 理厂生产；FA(N)/JA(N)系列电子天平，上海民桥精密仪器有限公司生产；可调式移液器， 上海雷勃分析仪器有限公司生产；恒温箱，北京市永光明医疗仪器厂生产；TGL-16G高速冷 冻离心机，上海安亭科学仪器厂生产；大鼠敞箱，自制。
[0023] 1. 4统计学处理
[0024] 数据分析用SPSS 10. 0 for windows统计软件，计量结果采用X 土 s表示；计量资 料组间比较采用单因素方差分析，等级资料采用Ridit分析。
[0025] 1· 2实验方法
[0026] 1· 2· 1实验分组及给药
[0027] 所有大鼠适应环境一周后采用Open-filed法评分，选取评分相近的大鼠72只，同 时注意体重，糖水消耗量无显著差别，将动物随机分为6组，其中5组造大鼠慢性应激抑郁 模型，另1组为空白对照组。造模型5组分别灌服盐酸氯米帕明混悬液（阳性对照，给药 剂量为20mg/kg,临用前用生理盐水配成2mg/ml, lml/100g),大、中、小剂量鲜百合地黄干 粉混悬液（2. 4g/kg、l. 8g/kg、l. 2g/kg,含生药浓度分别为 0· 24g/ml、0. 18g/ml、0. 12g/ml, lml/100g，分别相当于临床用量的20、15、10倍），模型组和空白对照组灌服同体积的生理 盐水，给药体积均为lml/100g。造模型同时给药，每天给药1次，连续给药21d。
[0028] 1. 2. 2造模方法
[0029] 正常组每笼5只饲养，正常饮食饮水，不给任何刺激外。造模型5组均为每笼饲 养1只大鼠，每天随机给予不同刺激。7种应激因子按随机方法在21d内应用：①通宵照明 (24h);②禁食（24h);③禁水（24h);④4°C冷水游泳5min，⑤lmin夹尾，⑥5min高速水平 振荡；⑦2h行为限制。每天随机给予一种刺激，每种刺激不能连续出现，连续21d。
[0030] 1. 2. 3造慢性应激抑郁模型日程安排
[0031] Π 期 实验项π DO 称吣糖水消耗测试：敵筘实验 PI 2 h彳+/'为阪制（.11丨胶布将人鼠),1腿 1)2 停水 2.1 h D3 强迫游泳U *€ ) ,5 min D4 划d 1 min (将人鼠放入丨，V|定)1Ψ,丨劍Ud部，丨丨j!ML謝火fK Η?+&+戈I cm处(川力小Κ:过人％使λΙ(发出如》1声眼'，持 找]minH,将人鼠拉出放|"Γ/ΙΨ) D5 照明 2..I h 9:00-9:00 D6 fv;ff 2·1 h 9:00-9:00 07 称氓，热5 min
[)8 泠水 2.1 h 9:00-9:00 U9 火Μ 1 min Π 10 從荡 5 min D11 照明 2..1 Μ): 00-9:00 D12 强迫游泳5 min D13 f.>: -- 2...1 h9: 00-9:00 PH 称 C iCMl miru. D15 2 h彳r为限制 D16 Mf-? 1 min 1)17 照明 2...1 h 9:00-9:00 丨)18 强迫游泳5 min 1)19 震荡 5 min
[)20 停水 2'i h 9:00-9:00 1)21 停食 2...1 h 9:00-9:00 D22 称糖水消耗测试：敞筘实验：取材
[0032] 1. 2. 4实验动物处理
[0033] 1. 2. 4. 1糖水摄入量测试
[0034] 模型制备开始前1天和结束后第1天上午测试各组大鼠1%蔗糖水消耗量，测试前 禁水12h，测定lh内蔗糖水摄入量。
[0035] 1. 2. 4. 2 Open-filed 法测试
[0036] 实验装置为立方形敞箱，高40cm,长宽分别为80cm,周壁、底面为黑色，底面由面 积相等的25块组成，用白线划分。实验时将大鼠置于敞箱中心方格内，观察大鼠在3min内 穿越底面块数（四爪均进入的方格方可记数）的水平活动（crossing)得分，以及后肢直立 次数（两前爪腾空或攀附墙壁）的垂直活动（rearing)得分。每次实验完后须将粪便彻底 清除。每只动物于实验开始前1天和实验结束后1天上午各测定1次，比较各组得分差异。 此实验在安静的房间内进行。
[0037] 1. 2. 4. 3血浆中MDA水平与红细胞S0D活力的测定
[0038] 行为学测试完毕后，大鼠眼眶取血，肝素钠抗凝，3000r/min离心lOmin，分离血 浆，按试剂盒说明书分别测定血浆中MDA水平和红细胞S0D活力。
[0039] 1. 2. 4. 3. 1血浆中MDA水平测定
[0040] MDA试剂盒测试原理：过氧化脂质降解产物中的丙二醛（MDA)可与硫代巴比 妥酸（TBA)缩合，形成红色产物，在532nm出有最大吸收峰。因底物为硫代巴比妥酸 (Thibabituric Acid TBA)所以此法称 TBA 法。
[0041] 100T试剂盒组成与配制：
[0042] 试剂1 :液体20mlXl瓶，室温保存。（天冷时会凝固，每次测试前适当水浴加温以 加速溶解，直至透明方可应用。）
[0043] 试剂2 :液体6mlX 1瓶，用时每瓶加340ml双蒸水混匀，4°C冷藏。
[0044] 试剂3 :粉剂X 1支，用时将粉剂加入到90°C?100°C的热双蒸水60ml中，（在溶 解过程中可适当加热），充分溶解后用双蒸水补足至60ml，混匀，配好的试剂避光冷藏。
[0045] 试剂4 :标准品：10nmol/ml四乙氧基丙烧5mlX 1瓶，4°C冷藏。
[0046] 操作方法：混合试剂的配制：将样本总数η放宽4只量分别乘以1，2, 3号试剂，按 计算量将3种试剂混合在一起。混合试剂总量=[(η+4注）XI号试剂0. 15ml] + [(n+4) Χ2 号试剂3ml]+ [(n+4) X3号试剂lml]。注：按所需检测的样本数加上标准管及标准空白管 的数，再放宽2只（避免吸到最后试剂量不够）。混合试剂需现用现配，见表1。
[0047] 表1混合试剂的配制
[0048]
[00之
【权利要求】
1. 一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用，该鲜百合地黄粉是将鲜百 合、鲜地黄以重量比1 : 1混合在一起，置于匀浆机中制成浆液，在温度-80°c、真空度 0. 008-0. Olmpa条件下于真空冷冻干燥机干燥、制粉，得干粉，实现鲜百合地黄汤常年在治 疗抑郁症药物中的应用。
【文档编号】A61P25/24GK104208383SQ201410444555
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2014年9月3日 优先权日:2014年9月3日
【发明者】苗明三, 刘雅敏, 白明 申请人:河南中医学院