一种利拉鲁肽的注射用缓释微球制剂的制作方法

一种利拉鲁肽的注射用缓释微球制剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种利拉鲁肽的注射用缓释微球制剂，由利拉鲁肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇组成，其中利拉鲁肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇的重量比为1:15:30。其制备方法采用复乳法制备，离心得缓释微球后冻干既得。本发明的制剂稳定性良好，载药量大，包封率高，加速试验条件不发生降解、聚集，且体内安全性良好。
【专利说明】一种利拉鲁肽的注射用缓释微球制剂

【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种药物制剂，尤其涉及一种多肽类药物利拉鲁肽的注射用缓释微球 制剂。

【背景技术】
[0002] 利拉鲁肽，英文通用名为liraglutide，是一种人工合成的人胰高血糖素样肽-1 类似物，由31个氨基酸残基构成，其氨基酸序列为：H-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser -Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(N-ε-(Ν-α -Palmitoyl-L-y-glu tamyl))-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-〇H 〇
[0003] 目前市场上可以获得的利拉鲁肽制剂为注射剂，给药途径为皮下注射。由于多肽 药物进入体内易被降解，血浆半衰期较短，因此需要每日给药三次，由此导致患者顺应性较 低，容易忘记给药，不利于患者自行给药。
[0004] 多肽药物的缓释制剂通常采用化学修饰方法或采用缓释制剂技术。其中对多肽药 物进行PEG修饰或融合蛋白修饰对延长多肽药物的体内半衰期较为有效，但所制备的缓释 制剂价格昂贵，导致患者经济负担过重。
[0005] 缓释制剂技术在多肽药物中的应用目前仅有及少数案例获得成功。其中一种人胰 高血糖素样肽-1类似物艾塞那肽（Exenatide)的缓释制剂（商品名BYDURE0N)已在国外 被批准上市。其缓释制剂采用聚乙丙交酯和蔗糖作为辅料，具有显著的缓释效果，能够有效 降低用药频率。但近年研宄证实，BYDURE0N与艾塞那肽的普通注射剂相比能够显著增加甲 状腺C细胞癌的风险，因此存在显著的不良作用。该药目前已被美国食品药品管理局在说 明书中标识黑框警告。
[0006] 关于利拉鲁肽的缓释制剂目前尚无该类产品上市。国内公开的专利文献 CN102429876A(
【公开日】2012年5月2日）公开了一种利拉鲁肽的缓释微球制剂，由利拉鲁 肽和生物可降解材料组成，其中生物可降解材料选自聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚 物，乙交酯-丙交酯共聚物，聚乙醇酸、聚己内酯、聚乳酸-羟基乙酸-聚己内酯共聚物或 PLCG-聚己内酯，或其中任意两种或两种以上的混合物。该缓释微球制剂的体外累计释放实 验显示其缓释可达28-30天。但该文献说明书附图部分给出的体内药效学实验结果显示， 该缓释微球给药后第1、7、14、28天采血样测定血糖浓度，结果采样日均表现出显著的血糖 峰谷现象，说明其体内药物释放存在不稳定的突释现象，从而导致了血糖忽高忽低的问题， 以上问题在体外累计释放实验中未能被发现，且上述制剂的体内安全性尚未得到证实。对 于缓释效果达到28-30天的缓释制剂而言，随有利于降低给药频率，但由于载药量过大， 一旦出现药物突释即会导致血糖的急剧降低诱发低血糖昏迷等问题，因此，目前治疗糖尿 病的多肽药物的缓释剂型或者经化学修饰的缓释多肽，通常设计为每日或每周给药一次， 每月给药一次的降血糖药物，相对于其突释风险而言，其缓释效果的收益已不再重要，因此 此类缓释制剂尚见被批准上市。
[0007] 本发明人对利拉鲁肽的缓释微球制剂进行了研宄，发现使用现有技术中的方法和 常规方法制备的利拉鲁肽缓释制剂存在不稳定，突释、包封率和载药量不理想等诸多缺点， 而目前药物缓释微球制剂的研宄中，虽然根据药物的理化性质解决微球的载药量和包封率 等技术问题已有一定的经验可供遵循，但对提高微球的稳定性以及有效避免药物突释问 题，尚缺乏可供普遍遵循的经验和技术教导。尤其是对于人胰高血糖素样肽-1类似物多肽 乙交酯-丙交酯共聚物缓释微球制剂引发的甲状腺C细胞癌风险，尚未见降低其发病率的 有效手段。


【发明内容】

[0008] 针对上述现有技术，本发明的目的在于提供一种利拉鲁肽的缓释制剂，具体的说 是一种利拉鲁肽的注射用缓释微球制剂。
[0009] 本发明的另一方面还提供了一种利拉鲁肽注射用缓释微球制剂的制备方法。
[0010] 为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
[0011] 一种利拉鲁肽的注射用缓释微球制剂，其配方中包括利拉鲁肽、聚乙丙交酯和聚 乙烯醇，其中，利拉鲁肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇的重量比为1:15:30。
[0012] 所述聚乙丙交酯中乙交酯、丙交酯的摩尔比例为30:70。
[0013] 本发明还提供本发明利拉鲁肽的注射用缓释微球制剂的制备方法，包括以下步 骤：
[0014] 1)将利拉鲁肽溶于灭菌注射用水，调整溶液浓度为6mg/ml，用pH调节剂调节pH 为 8. 0 ?8. 3 ;
[0015] 2)将聚乙丙交酯溶于二氯甲烧，调整溶液浓度为90mg/ml，用pH调节剂调节pH为 8. 0 ?8. 3 ;
[0016] 3)将内水相与油相混合，冰浴条件下15000转/分钟搅拌30分钟，4°C下静置24 小时得初乳；
[0017] 4)将聚乙烯醇溶于灭菌注射用水，用pH调节剂调节pH为8. 0?8. 3 ;
[0018] 5)将步骤4)所得溶液加入步骤3)所得初乳，30000转/分钟搅拌30分钟得复 乳；
[0019] 6)将步骤5)所得复乳6000转/分钟离心30分钟，收集微球，用灭菌注射用水冲 洗，冻干得利拉鲁肽注射用缓释微球。
[0020] 所述步骤1)中调节pH值采用的调节剂为碳酸氢钠溶液；
[0021] 所述步骤2)中调节pH值采用的调节剂为氢氧化钠溶液；
[0022] 所述步骤4)中调节pH值采用的调节剂为磷酸二氢钠缓冲溶液。
[0023] 本发明人对利拉鲁肽的缓释制剂进行了大量研宄。在研宄过程中，本发明人惊奇 的发现，采用利用缓释微球技术结合特殊材料的使用可获得利拉鲁肽的稳定性良好、载药 量大、包封率高的缓释微球制剂，且采用本发明组方和制备工艺，能够有效提高利拉鲁肽缓 释微球的稳定性，避免药物体内突释，且体外致突变实验表明本发明的缓释微球制剂无诱 癌风险。本发明所采用的制备方法简单，工艺条件易控制，适于大规模工业化生产，并易于 得到质量稳定的产品，批间差异小，便于质量控制。

【专利附图】

【附图说明】：
[0024] 附图I :本发明实施例1制备的利拉鲁肽缓释微球制剂的药时曲线，横坐标给药后 时间-小时，纵坐标血药浓度-ng/ml，采血时间点为给药后第0、12、24、48、72、96、120、144、 168、192、216、240h ;
[0025] 附图2 :本发明实施例2制备的利拉鲁肽缓释微球制剂的药时曲线，横坐标给药后 时间-小时，纵坐标血药浓度-ng/ml，采血时间点为给药后第0、12、24、48、72、96、120、144、 168、192、216、240h ;
[0026] 附图3本发明实施例3制备的三种利拉鲁肽缓释微球制剂对比制剂的药时曲线， 横坐标给药后时间-小时，纵坐标血药浓度-ng/ml，采血时间点为给药后第0、12、24、48、 72、96、120、144、168、192、216、240h。

【具体实施方式】
[0027] 下面结合实施例对本发明作进一步的解释。应当理解的是，以下实施例仅用于解 释本发明，而不是限制本发明的保护范围。
[0028] 实施例1利拉鲁肽注射用缓释微球的制备
[0029] 配方
[0030] 利拉鲁肽 IOmg
[0031] 聚乙丙交酯 150mg
[0032] 聚乙稀醇 300mg
[0033] 制备方法
[0034] 1)将利拉鲁肽溶于灭菌注射用水，调整溶液浓度为6mg/ml，用碳酸氢钠溶液调节 pH 为 8. 0 ?8. 3 ;
[0035] 2)将聚乙丙交酯溶于二氯甲烷，调整溶液浓度为90mg/ml，用氢氧化钠溶液调节p 为 8. 0 ?8. 3 ;
[0036] 3)将内水相与油相混合，冰浴条件下15000转/分钟搅拌30分钟，4°C下静置24 小时得初乳；
[0037] 4)将聚乙烯醇溶于灭菌注射用水，用磷酸二氢钠缓冲溶液调节pH为8. 0?8. 3 ;
[0038] 5)将步骤4)所得溶液加入步骤3)所得初乳，30000转/分钟搅拌30分钟得复 乳；
[0039] 6)将步骤5)所得复乳6000转/分钟离心30分钟，收集微球，用灭菌注射用水冲 洗，
[0040] 冻干得利拉鲁肽注射用缓释微球。
[0041] 实施例2利拉鲁肽注射用缓释微球的制备
[0042] 配方
[0043] 利拉鲁肽 IOmg
[0044] 聚乙丙交酯 150mg
[0045] 聚乙稀醇 300mg
[0046] 制备方法
[0047] 1)将利拉鲁肽溶于灭菌注射用水，调整溶液浓度为6mg/ml，用磷酸二氢钠缓冲溶 液调节pH为8. 0?8. 3 ;
[0048] 2)将聚乙丙交酯溶于二氯甲烷，调整溶液浓度为90mg/ml，用碳酸氢钠溶液溶液 调节pH为8.0?8.3 ;
[0049] 3)将内水相与油相混合，冰浴条件下15000转/分钟搅拌30分钟，4°C下静置24 小时得初乳；
[0050] 4)将聚乙烯醇溶于灭菌注射用水，用磷酸二氢钠缓冲溶液调节pH为8. 0?8. 3 ;
[0051] 5)将步骤4)所得溶液加入步骤3)所得初乳，30000转/分钟搅拌30分钟得复 乳；
[0052] 6)将步骤5)所得复乳6000转/分钟离心30分钟，收集微球，用灭菌注射用水冲 洗，冻干得利拉鲁肽注射用缓释微球。
[0053] 实施例3利拉鲁肽注射用缓释微球的处方对比
[0054] 以利拉鲁肽组方，制备成不同的缓释制剂，测定包封率和载药量等技术指标，为对 比效果，设对比制剂三种，分别如下：
[0055] A :利拉鲁肽，乙交酯、丙交酯摩尔比为50:50的聚乙丙交醋，聚乙烯醇三者重量比 为1:0. 5:20,采用实施例1的制备方法制备。
[0056] B :利拉鲁肽，乙交醋、丙交醋摩尔比为10:90的聚乙丙交醋，聚乙烯醇三者重量比 为1:10:70,采用实施例2的制备方法制备。
[0057] C:利拉鲁肽，乙交酯、丙交酯摩尔比为40:60的聚乙丙交醋，聚乙烯醇三者重量比 为1:30:10,采用实施例1的制备方法制备。
[0058] 实施例1和实施例2的制剂分别用D、E代表。包埋率（％)按照如下公式计算包 埋率（％)=(微球载药量/头要比）X100%，其中投药比（％)=[处方中药物量八处 方中药物量+处方中辅料量）]X100%。载药量（％)按照如下公式计算：载药量（％)= (微球中药物含量/微球重量）X100%。
[0059]

【权利要求】
1. 一种利拉鲁肽的注射用缓释微球制剂，其特征在于，由利拉鲁肽、聚乙丙交酯和聚乙 烯醇组成，其中利拉鲁肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇的重量比为1:15:30。乙交酯丙交酯。
2. 根据权利要求1所述的利拉鲁肽注射用缓释微球制剂，其特征在于，所述聚乙丙交 酯中乙交酯、丙交酯的摩尔比例为30:70。
3. 权利要求1或2所述的利拉鲁肽注射用缓释微球制剂的制备方法，其特征在于，包括 以下步骤： 1) 将利拉鲁肽溶于灭菌注射用水，调整溶液浓度为6mg/ml，用pH调节剂调节pH为8. 0 ?8. 3 ;2) 将聚乙丙交酯溶于二氯甲烧，调整溶液浓度为90mg/ml，用pH调节剂调节pH为 8. 0 ?8. 3 ;3) 将内水相与油相混合，冰浴条件下15000转/分钟搅拌30分钟，4°C下静置24小时 得初乳；4) 将聚乙烯醇溶于灭菌注射用水，用pH调节剂调节pH为8. 0?8. 3 ;5) 将步骤4)所得溶液加入步骤3)所得初乳，30000转/分钟搅拌30分钟得复乳；6) 将步骤5)所得复乳6000转/分钟离心30分钟，收集微球，用灭菌注射用水冲洗，冻 干得利拉鲁肽注射用缓释微球。
4. 根据权利要求3所述的利拉鲁肽注射用缓释微球制剂的制备方法，其特征在于，所 述步骤1)中调节pH值采用的调节剂为碳酸氢钠溶液；所述步骤2)中调节pH值采用的调 节剂为氢氧化钠溶液；所述步骤4)中调节pH值采用的调节剂为磷酸二氢钠缓冲溶液。
【文档编号】A61K47/34GK104434817SQ201410475284
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年9月17日 优先权日:2014年9月17日
【发明者】苏庆, 冷国庆, 厉保秋, 张琪, 苏宏健, 赵丽, 刘怀萍 申请人:黑龙江泰华源生物技术有限责任公司