一种中草药组合物的制作方法

文档序号:11092601阅读:277来源:国知局
一种中草药组合物的制造方法与工艺
本发明涉及天然药物化学和化妆品领域,具体涉及一种具有油脂分泌调节作用、抗氧化作用、抗炎作用和保湿作用的中草药组合物。将该中草药组合物应用于皮肤后,能够帮助皮肤达到神清气爽的平衡肌肤状态。
背景技术
:皮脂膜是皮脂腺分泌的内源性皮脂和表皮细胞崩解产生的外源性皮脂及水分、汗液经过乳化作用在皮肤表面形成的一层脂质膜,它在保持皮肤表面水分、调节皮肤pH、保持表皮完整、促进局部外用药物和化妆品吸收等方面起重要作用。影响皮脂腺分泌的因素有多种,包括性别、年龄、激素水平、饮食、生理周期、季节和环境等等。皮脂分泌过多,不仅使皮肤外貌污秽油光、毛孔粗大,还易引发痤疮和炎症等皮肤病;而皮脂分泌过少,则会导致皮肤干燥、粗糙等多种问题。因此,有效地调节和修复皮脂腺的油脂分泌功能,是建立皮肤屏障功能的第一步。当皮脂腺过度活跃时,除了会出现毛孔粗大、单纯油性皮肤,还会引发其他一些常见的皮肤问题,如痤疮和脂溢性皮炎。因此,有效地调节皮脂腺分泌,控制好油脂的排放对于维持健康的中性皮肤状态十分重要。目前市场上大多数控油类日化产品,只是简单清理油脂、强调补水保湿,通过电解质来收缩毛孔,只能一定程度上缓解油性皮肤却无法真正令皮肤摆脱油光。氧化是肌肤衰老的最大威胁,是一切肌肤问题的根源。当肌肤细胞比氧化后,会产生自由基侵害和破坏肌肤的胶原蛋白,使肌肤失去弹性和光泽,令皮肤暗黄、缺水、出现皱纹等皮肤问题。引起皮肤氧化的因素有多种,除了机体内因以外,电脑辐射、紫外线、压力、环境污染等诸多外因也容易产生过多的自由基,使细胞活力和代谢功能下降,从而造成皮肤氧化和衰老现象的产生。因此,抗氧化是美容护肤的本质,是保持皮肤保湿和美白的基础。目前,清除过量的自由基往往是通过抗氧化剂来实现的,抗氧化剂大致分为两类:一类是酶类抗氧化剂,如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、辅酶Q等;另一类是非酶类抗氧化剂,如维生素E、维生素C、硒及其化合物等。一些天然抗氧化剂如绿茶、葡萄汁、石榴等植物的提取液,以及芦丁、黄芩苷等天然的黄酮类化合物,也具有显著的抗氧化作用。目前,抗氧化活性的研究方法主要有DPPH·法、超氧阴离子自由基法、羟自由基法、硫代巴比妥酸法(TBARS)、ABTS+法、铁离子还原能力法(FRAP)等,其中,DPPH·法可以综合性地反映物质的抗氧化能力强弱,故常用于试验样品抗氧化活性的研究和评价。炎症是机体中的活性组织对抗和清除损伤因子的一种防御反应,同时,多种疾病的发生也与炎症有着密切的关系,如皮肤炎症、动脉粥样硬化、糖尿病、关节炎、恶性肿瘤等。皮肤发生炎症可对皮肤造成一定程度的损伤,从而引发各种炎症性皮肤病,最为常见的皮肤炎症为痤疮,即“青春痘”。研究表明,多种皮肤性疾病是由细菌感染和炎症等引发的,因此抗菌和抗炎试验的已经成为美容保健品研发的重要药效学指标。药物抗炎的作用机制主要包括调节内分泌系统、抑制环氧化酶COX-2的释放、调节免疫系统功能、以及清除体内氧自由基等。研究发现,具有清热解毒、清热燥湿作用的中草药,如黄连、黄芩、丹皮、金银花等可以通过上述作用机制发挥其抗炎活性。皮肤保护内部组织的屏障功能有赖于皮肤的水合保湿能力,皮肤的储水量占全身的18%-20%。空调、环境污染、季节转换带来的温度变化与压力,以及皮肤衰老、代谢减缓等因素都会造成肌肤水分过度流失,令肌肤粗糙、黯哑、形成干纹、引发诸多肌肤问题。防止皮肤水分过度流失,对于保持良好的皮肤屏障功能和皮肤的健康,乃至皮肤美丽的外观是非常重要的。为了达到保持皮肤水分,减少水分过度散失的目的,通常在皮肤外用剂中加入保湿成分。保湿剂种类很多,常用的保湿成分可以分为封闭型保湿剂和吸湿性保湿剂两大类。封闭型保湿剂作用是通过在皮肤表面形成膜层,阻挡皮肤水分蒸发,从而使角质层保持一定的含水量,这一类保湿剂包括矿物油和蜡如凡士林,植物油与动物脂肪如羊毛脂,磷脂、胆固醇等。吸湿性保湿剂是一类 类似于表皮中天然保湿因子,可以与水强力结合而达到使角质层保湿的效果。此类保湿成分有:天然保湿因子、蛋白质、多糖、神经酰胺、各种维生素等。动物和矿物来源的保湿剂容易引起皮肤过敏、皮肤刺激等问题,从植物中寻找天然保湿剂符合人们对源于自然的化妆品的需求。人参(PanaxginsengC.A.Mey.),又名神草、地精,是五加科植物人参的干燥根,首载于《神农本草经》,具有“补五脏、安精神、定魂魄、止惊悸、除邪气、明目开心益智”之功效,为中草药中的“上品”。人参中含有多糖、皂苷、挥发油、多肽、氨基酸、有机酸、黄酮和生物碱等多种生物活性物质,其中人参皂苷为其主要活性成分,相关的研究报道也较为完善,此外人参多糖也具有多种药理活性。药理研究表明,人参对中枢神经系统和心血管系统具有双向调节作用,能显著增强机体免疫力,调节内分泌系统,影响物质代谢,此外,人参还具有保护肝脏、抗肿瘤等多种药理作用,具有极高的药用价值。在美容保健方面,人参中的人参皂苷具有护肤、抗氧化和抗紫外线的功能,能有效增加人角质形成细胞内抗氧化酶活性、抑制脂质过氧化反应,从而对抗皮肤光老化,保护人体皮肤,延缓衰老。此外人参提取液具有很强的抑菌消炎作用,是高档化妆品的天然添加物,对雀斑、褐斑以及老年皮肤色素沉着具有显著的功效。黄芩(ScutellariabaicalensisGeorgi),又作山茶根,为唇形科植物黄芩的干燥根,具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效,现代药理研究表明,黄芩具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、抗衰老、保肝、利胆等多种药理作用。黄芩中含有多种成分,其主要有效成分为黄酮类化合物。据报道,黄芩苷具有显著的抗光损伤作用和抗炎作用,对紫外线辐射损伤的皮肤具有保护作用;黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素等具有显著的抗炎、抗氧化等作用。麦冬(Ophiopogonjaponicus),又名沿阶草、书带草,为百合科沿阶草植物的块根,性甘,味微苦,具有养阴润肺、益胃生津、清心除烦之功效,麦冬与天门冬、雪梨一起煲汤,具有滋阴润肺、润肤瘦身的作用。麦冬中含有多糖、多种皂苷和黄酮类化合物,其麦冬多糖和麦冬总皂苷对心血管系统和免疫系统具有显著的影响,而麦冬中含有的高异黄酮类成分能有效清除自由基,从而起到抗氧化的作用,麦冬多糖还具有降低血糖、保护胃黏膜等多种药理活性。实 验研究发现,麦冬水提物具有对抗自由基、抗脂质过氧化和降低血浆浓度等作用,从而发挥其抗衰老、延年益寿的作用。淡竹叶(Lophatherumgracile),又作竹叶麦冬、金鸡米,为禾本科植物淡竹叶的干燥茎叶,性寒、味甘淡,具有清热泻火、除烦止渴、利尿通淋的功效。淡竹叶中含有多种活性成分,其中的黄酮类成分具有抑菌、抗氧化、收缩血管、保肝、抗病毒、心肌保护等多种药理活性,其多糖对多种体外自由基具有显著的清除效果。淡竹叶中的挥发性成分使淡竹叶含有独特的清香味,可用于食品添加剂和化妆品领域的研究开发。此外,淡竹叶中还含有丰富的茶多酚、叶绿素等物质,使淡竹叶具有显著地抗氧化活性。另有研究表明,淡竹叶提取物具有较好的酪氨酸酶抑制能力,从而减少黑色素的形成,起到皮肤美白效果。中医理论背景解析:人参:助力皮肤清气升发为本,兼能生津液、去热排浊,调理油性肌肤问题本原,为君药。黄芩:性味苦寒,善清泄上焦皮肤之热,兼以祛湿化浊,净化浊腻,为臣药。《本草正》载黄芩:“尤祛肌表之热”。麦冬:生津润燥之品,润泽修复受损肌肤屏障,为佐药。淡竹叶:性质清轻升宣,助肌肤清气升发,引全方上达肌表,兼能祛热净肤,为使药。共成升清降浊之效,使肌肤疏通畅达,自净机能有序发挥,呈现通透爽洁平衡。但是,文献中均未提及采用上述黄芩、麦冬、淡竹叶和/或人参几味草药复配得到一种复方中草药组合物。因此,本发明首次提出一种中草药组合物,该中草药组合物具有上述调节油脂分泌、抗氧化、抗炎和保湿的综合功效。将该中草药组合物作为活性添加剂应用于化妆品中,可帮助达到神清气爽的平衡肌肤状态。这种神清气爽的平衡肌肤状态正是该中草药组合物油脂分泌调节、抗氧化、抗炎和保湿等综合作用的结果。技术实现要素:本发明基于在达到控油的同时还需要和“气”的理论背景下,以几味中草药根据君臣佐使组成一种复方中草药组合物。该中草药组合物可以作为活性添加剂应用于产品中,以帮助达到神清气爽的平衡肌肤状态。因此,在本发明的一方面,提供了一种中草药组合物,所述中草药组合物采用以下配比的原料药提取得到:黄芩2-4重量份麦冬1-3重量份淡竹叶1-3重量份在一个优选的实施方式中,本发明所述的中草药组合物还包含6-8重量份的人参。在一个实施方式中,本发明中草药组合物的提取包括以下步骤:a)将黄芩、麦冬、淡竹叶浸泡,提取后得到提取物A;b)将人参浸泡,提取后得到提取物B;c)将提取物A和提取物B合并得到所述中草药组合物。在一些实施方式中,所述步骤a)或b)包括溶媒浸泡。在一些实施方式中,所述溶媒选自:水、乙醇溶液、多元醇溶液以及其他极性相似的溶剂。在一些实施方式中,所述步骤a)或b)的提取包括:煎煮、回流提取、浸渍或渗漉。在一个具体的实施方式中,本发明中草药组合物的提取包括一些步骤:a)将黄芩、麦冬、淡竹叶药材以适宜溶媒浸泡约0.5-1h,以相应方法提取,取滤液,静置过滤,浓缩至药材总量的2.5倍左右(V/W),制成含生药量0.1-0.5g/ml的溶液;b)将人参药材以适宜溶媒浸泡约0.5-1h,以相应方法提取,取滤液,静置过滤,浓缩至药材总量的1倍左右(V/W),制成含生药量0.1-0.5g/ml的溶液;c)将步骤a)得到的提取物与步骤b)得到的提取液按比例混合,最终制成含生药量0.1-0.5g/ml的控油复方提取液。在本发明中,配方中中药材可按照比例适当放大或缩小。适宜溶媒包括水(蒸馏水、去离子水、纯净水),不同浓度的乙醇溶液,不同浓度的多元醇溶液以及其他极性相似的溶剂;提取方法可以是煎煮、回流提取、浸渍、渗漉等方法等。在本发明的另一方面,提供了一种中草药组合物在调节油脂分泌、抗氧化、抗炎和保湿中的应用,该中草药组合物采用以下配比的原料药提取得到:黄芩2-4重量份麦冬1-3重量份淡竹叶1-3重量份。优选地,所述中草药组合物还保护6-8重量份的人参。在本发明的另一方面,提供了一种化妆品,该化妆品包含中草药组合物以及化妆品上可接受的赋形剂,其中,中草药组合物采用以下配比的原料药提取得到:黄芩2-4重量份麦冬1-3重量份淡竹叶1-3重量份。优选地,所述中草药组合物还保护6-8重量份的人参在一些优选的实施方式中,以所述化妆品的总重量计,化妆品中所述中草药组合物的重量百分比用量为0.001-20%(w/w),优选的重量百分比为0.008-10%(w/w),更优选的重量百分比为0.01-5%(w/w),最优选的重量百分比为0.01-2%(w/w)。本发明所述的中草药组合物的提取物可应用于皮肤外用剂、保健食品和医药,尤其是可应用于化妆品中,根据制剂的不同类型添加不同的用量。在本发明的另一方面,提供了一种具有油脂分泌调节和/或抗氧化和/或抗炎和/或保湿抗氧化作用的皮肤外用剂,所述皮肤外用剂包含按照本发明方法制备得到的中草药组合物的提取物以及化妆品领域可接受的赋形剂。在一些实施方式中,所述中草药组合物的提取物选自:洁面乳、化妆水、乳液、膏霜、啫喱、面膜。在一个优选的实施方式中,所述中草药组合物的提取物在皮肤外用剂中的重量百分比为0.001-20%(w/w)。优选的重量百分比为0.008-10%(w/w),更优选的重量百分比为0.01-5%(w/w),最优选的重量百分比为0.01-2%(w/w)。所述皮肤外用剂组合物是通常用于皮肤外部的所有成分的统称概念,例如可以是化妆料组合物或药学组合物。所述化妆料组合物中可以是基础化妆料、面部妆容化妆料、身体用化妆料、头发护理用化妆料等,对其剂型无特殊限制,根据不同目的可合理选择。所述化妆料组合物中根据剂型和目的的不同还含有不同的化妆品学层面允许的介质或基质赋形剂。可以用于本发明皮肤外用剂组合物的化妆品、皮肤病学或药学上可接受的赋形剂为水相、油相、凝胶、水包蜡型乳液、水包油型乳液或油包水型乳液的形式。水相为一种或多种水溶性或分散性组分的混合物,其在室温(25℃)下可以为液体、半固体或固体。赋形剂包括或可以为在水或水-醇赋形剂中的混悬液、分散液或溶液的形式,其可以含有增稠剂或凝胶剂。本领域技术人员可以基于本领域技术人员掌握的知识选择合适的产品形式,其中包含的组分。所述的组合物可以包括水相,该水相可以含有水或水与至少一种亲水性有机溶剂的混合物,所述的亲水性有机溶剂诸如醇,尤其是含有2-5个碳原子的直链或支链低级一元醇,如乙醇或丙醇;多元醇,如丙二醇、山梨醇、甘油、泛醇或聚乙二醇及其混合物。当发明的组合物为乳液形式时,该组合物还可以任选包含表面活性剂。所述的组合物还可以包含成膜聚合物,如聚氨基甲酸酯、聚丙烯酸均聚物或共聚物、聚酯、基于烃的树脂和/或硅氧烷树脂。可以将聚合物溶于或分散于化妆品可接受的赋形剂中并且任选与增塑剂合并。本发明的组合物还可以包含油相,所述的油相含有在室温(25℃)下为液体的油溶性或油分散性组分和/或在室温下为油状或蜡状的物质,如蜡、半固体、树胶及其混合物。该油相还可以含有有机溶剂。通常在室温下为液体,合适的油性物质包括:来源于动物的基于烃的油,如全氢化角鲨烯;基于烃的植物油,如液体的C4-10脂肪酸的甘油三酯类,例如庚酸或辛酸甘油三酯类,或油,例如向日葵油、玉米油、大豆油、葡萄籽油、蓖麻油、鳄梨油、辛酸/癸酸甘油三酯类、霍霍巴油;矿物或合成来源的直链或支链烃类,例如液体石蜡及其衍生物、凡士林;合成酯类和醚类,特别是脂肪醇的酯类,例如肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸2-乙基己酯、硬脂酸2-辛基十二烷基酯、异硬脂酸异硬脂醇酯;羟基化酯类,例如乳酸异硬脂醇酯、羟基硬脂酸辛酯、羟基硬脂酸辛酯、羟基硬脂酸辛基十二烷基酯、脂肪醇的庚酸酯类、辛酸酯类和癸酸脂类;多元醇酯类,例 如丙二醇二辛酸酯、新戊二醇二庚酸酯、二甘醇二异壬酸酯和季戊四醇酯类;含有C12-26的脂肪醇类,例如辛基十二烷醇、2-丁基辛醇、2-己基癸醇、2-十一烷基十五烷醇、油醇;基于部分烃的氟油和/或氟硅油,硅油,在室温下为液体或半固体的挥发性或非挥发性的直链或环状聚甲基硅氧烷,例如环状聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷,其任选包含苯基,例如苯基三甲基硅氧烷、硅氧烷及其混合物。本发明的组合物可以进一步包含常用于化妆品领域中的任何组分。这些组分包括防腐剂、水相增稠剂(提取物生物聚合物、合成聚合物)和脂肪相增稠剂、芳香剂、亲水性和亲脂性活性剂及其混合物。本发明的组合物还可以包含另外的颗粒相,所述的颗粒相可以为化妆品组合物中使用的颜料和/或珠光剂和/或填充剂。颜料可以存在于组合物中,合适的无机颜料包括氧化钛、氧化锆和氧化铈以及氧化锌、氧化铁和铁蓝;合适的有机颜料包括钡、锶、钙和铝色淀和碳黑。珠光剂可以存在于组合物中,合适的珠光剂包括涂覆了氧化钛、氧化铁或天然颜料的云母。填充剂可以存在于组合物中,合适的填充剂包括滑石粉、二氧化硅、硬脂酸锌、云母、高岭土、尼龙粉末、聚乙烯粉末、特氟龙、淀粉、一氮化硼、共聚物微球,例如硅氧烷树脂微珠。本发明组合物的油相可以包含一种或多种蜡、树胶或其混合物。蜡包括基于烃的蜡、氟蜡和/或硅氧烷蜡,并且可以来源于植物、矿物、动物和/或合成来源。合适的蜡包括蜂蜡、巴西棕榈蜡、小烛树蜡、石蜡、微晶蜡、地蜡;合成蜡包括聚乙烯蜡、含有C16-45的硅氧烷蜡。树胶一般为聚二甲基硅氧烷或羧甲基纤维素钠或提取物类,并且半固体物质一般为基于烃的化合物,如羊毛脂及其衍生物。可以将本发明的组合物配制成任何合适的产品形式。这类产品形式包括,但不限于气溶胶型喷雾剂、霜剂、乳液、固体、液体、分散体、泡沫、凝胶、化妆水、摩丝、软膏、粉剂、贴剂、润发油、溶液、手按泵型喷雾剂、棒状物、面膜和湿纸巾。可以将本发明的组合物通过本领域众所周知 的各种方法便利地用于制备或作为化妆品、皮肤病学或药物局部施用产品。本发明的皮肤外用剂组合物可以包括一种或多种下列成分:抗过敏剂、抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂、着色剂去色素剂、润肤剂、乳化剂、表皮脱落剂、成膜剂、香料、保湿剂、昆虫驱避剂、润滑剂、药物活性剂、增湿剂、耐光剂、防腐剂、护肤剂、皮肤渗透增强剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、维生素或其任意组合。附图说明图1A-1B显示了空白孔细胞在干燥前和干燥后的显微镜照片。其中,图1A显示了空白孔细胞在干燥前的显微镜照片。图1B显示了空白孔细胞在干燥后的显微镜照片。图2A-2B显示了加入阳性对照透明质酸钠的孔细胞在干燥前和干燥后的显微镜照片。其中,图2A显示了加入0.1%透明质酸钠的孔细胞在干燥前的显微镜照片。图2B显示了加入0.1%透明质酸钠的孔细胞在干燥后的显微镜照片。图3A-3B显示了加入人参的孔细胞在干燥前和干燥后的显微镜照片。其中,图3A显示了加入5000ug/ml人参的孔细胞在干燥前的显微镜照片。图3B显示了加入5000ug/ml人参的孔细胞在干燥后的显微镜照片。图4A-4B显示了加入本发明中草药组合物的孔细胞在干燥前和干燥后的显微镜照片。其中,图4A显示了加入5000ug/ml本发明中草药组合物的孔细胞在干燥前的显微镜照片。图4B显示了加入5000ug/ml本发明中草药组合物的孔细胞在干燥后的显微镜照片。具体实施方式本发明描述了以人参、黄芩、麦冬、淡竹叶几味草药作为原料,提取得到一种中草药组合物。经相关体外功效验证,本发明的中草药组合物具有调节油脂分泌和/或抗氧化和/或抗炎和/或保湿,以及同时具有调节油脂分泌、抗氧化、抗炎和保湿的综合功效。本发明的中草药组合物可以作为功效添加剂加入到化妆品中,帮助达到神清气爽的平衡肌肤状态。文献中均未涉及本发明所述以人参、黄芩、麦冬、淡竹叶几味草药作为原料的中草药组合物,也未提及将其作为功能添加剂加入化妆品中。因此,本发明首次提出了以上述几味药为原料的中草药组合物,该中草药组合物具有本发明所述令人意想不的技术效果,即具有调节油脂分泌和/或抗氧化和/或抗炎和/或保湿,以及同时具有调节油脂分泌、抗氧化、抗炎和保湿的综合功效。在一些实施方式中,本发明中草药组合物的使用浓度可以是5毫克/毫升或更高,6毫克/毫升或更高,7毫克/毫升或更高,8毫克/毫升或更高,9毫克/毫升或更高,10毫克/毫升或更高,12毫克/毫升或更高,16毫克/毫升或更高,18毫克/毫升或更高。在一些实施方式中,本发明中草药组合物的使用浓度可以是5-150毫克/毫升,6-150毫克/毫升,7-150毫克/毫升,8-150毫克/毫升,9-150毫克/毫升,10-150毫克/毫升,12-150毫克/毫升,16-150毫克/毫升,18-150毫克/毫升。在一些实施方式中,本发明中草药组合物的使用浓度可以是5-100毫克/毫升,6-100毫克/毫升,7-100毫克/毫升,8-100毫克/毫升,9-100毫克/毫升,10-100毫克/毫升,12-100毫克/毫升,16-100毫克/毫升,18-100毫克/毫升。在一些实施方式中,本发明中草药组合物的使用浓度可以是5-75毫克/毫升,6-75毫克/毫升,7-75毫克/毫升,8-75毫克/毫升,9-75毫克/毫升,10-75毫克/毫升,12-75毫克/毫升,16-75毫克/毫升,18-75毫克/毫升。在一些实施方式中,本发明中草药组合物的使用浓度可以是5-50毫克/毫升,6-50毫克/毫升,7-50毫克/毫升,8-50毫克/毫升,9-50毫克/毫升,10-50毫克/毫升,12-50毫克/毫升,16-50毫克/毫升,18-50毫克/毫升。可以将本发明实施例1-3中制备的中草药组合物用于皮肤外用剂的制备。所述皮肤外用剂优选为化妆品组合物,例如化妆水、精华液、乳霜等。所述中草药组合物在皮肤外用剂中的重量百分比为0.001-20%(w/w)。优选的重量百分比为0.008-10%(w/w),更优选的重量百分比为0.01-5%(w/w),最优选的重量百分比为0.01-2%(w/w)。下面结合具体的实施例进一步阐述本发明。但是,应该明白,这些实施例仅用于说明本发明而不构成对本发明范围的限制。下列实施例中未注 明具体条件的试验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。除非另有说明,所有的百分比和份数按重量计。下面各实施例中使用的中草药材的来源如下:实施例1:本发明中草药组合物的制备称取重量比为4:1:3的黄芩:麦冬:淡竹叶适量,用10倍去离子水提取1h,棉花过滤2次,合并滤液后,过50nm陶瓷膜,加入去离子水充分膜分离,得到透析液后,再过RO反渗透膜,得到截留液,最终配制成0.2g/ml的溶液,即为提取物A1。称取人参适量,粉碎后,用10倍70%乙醇浸泡过夜,滤纸过滤,滤液于55℃条件下浓缩,4℃静置过夜,再滤纸过滤,最终配制成0.2g/ml的溶液,即为提取物B1。将提取物A1与提取物B1重量比1:1混合,最终配制成0.2g/ml的本发明中草药组合物。实施例2:本发明中草药组合物的制备称取重量比为3:2:1的黄芩:麦冬:淡竹叶适量,用10倍去离子水提取1h,棉花过滤2次,合并滤液,过50nm陶瓷膜,加入去离子水充分膜分离,得到透析液后,再过RO反渗透膜,得到截留液,最终配制成0.1g/ml的溶液,即为提取物A2。称取人参适量,粉碎后,用10倍70%乙醇浸泡过夜,滤纸过滤,滤液于55℃条件下浓缩,4℃静置过夜,滤纸过滤,最终配制成0.1g/ml的溶液,即为提取物B2。将提取物A2与提取物B2重量比1:1混合,最终配制成0.1g/ml的本发明中草药组合物。实施例3:本发明中草药组合物的制备称取重量比为2:3:2的黄芩:麦冬:淡竹叶适量,用10倍去离子水提取1h,棉花过滤2次,合并滤液,过50nm陶瓷膜,加入去离子水充分膜分离,得到透析液后,再过RO反渗透膜,得到截留液,最终配制成0.1g/ml的溶液,即为提取物A3。称取人参适量,粉碎后,用10倍70%乙醇浸泡过夜,滤纸过滤,滤液于55℃条件下浓缩,4℃静置过夜,滤纸过滤,最终配制成0.1g/ml的溶液,即为提取物B3。将提取物A3与提取物B3重量比1:1混合,最终配制成0.1g/ml的本发明中草药组合物。实施例4:5α-还原酶抑制试验5α-还原酶是参与雄激素代谢的一种重要酶,它的过分活跃,可能会促使皮脂腺功能失常性地增大,使皮脂腺体积增大、分泌增加,从而带来毛孔粗大、皮肤过油等皮肤问题。利用HPLC检测睾酮的含量,可以反映5-α还原酶的活力。将本发明中草药组合物浓缩至干后,以Tris缓冲溶液配制成生药浓度分别为10mg/ml,5mg/ml。每次实验之前都应对其中蛋白酶含量进行检测,并计算所需加入的蛋白酶溶液体积。酶量0.03g(以总蛋白含量计算);体系睾酮浓度150umol/L;萃取过程平行管同时涡旋20秒,2000转/min,离心2min。阳对度他雄胺添加量:预配制100mg/ml溶液,体系添加0.01ml。体系中乙醇浓度高于2%或带入其他溶剂,需要溶剂对照,实验步骤与样品溶液管一致,只是不含样品。下面的表1显示了反应体系的组成和用量表1表2显示了具体的实验步骤。表2实验结果:酶基础活性=[反应前T浓度-反应后T浓度(无抑制剂)]/(反应时间*酶量)=(C0—C0’)/(M酶×t)加入抑制剂后酶的活性=[反应前T浓度-反应后T浓度(有抑制剂)]/(反应时间*酶量)=(C0—Cn)/(M酶×t)抑制率=(酶基础活性-加入抑制剂后酶的活性)/酶基础活性×100%=[1-(C0—Cn)/(C0—C0’)]×100%本发明的中草药组合物5α-还原酶抑制作用评估结果如表3所示。表3浓度抑制率浓度抑制率实施例1组合物10mg/ml37.04%5mg/ml15.25%实施例2组合物10mg/ml62.91%5mg/ml20.18%实施例3组合物10mg/ml42.79%5mg/ml17.64%实施例1提取物A110mg/ml19.58%5mg/ml/实施例2提取物A210mg/ml10.9%5mg/ml/实施例3提取物A310mg/ml13.77%5mg/ml/在实际应用中,发现在10mg/ml浓度下,抑制率低于20%时,不具有明显效果。结果发现,本发明实施例1、2、3得到的中草药组合物具有一定的5α-还原酶抑制作用,其中实施例2中草药组合物的固含浓度为5mg/ml时可达20.18%的抑制率,10mg/ml时具有62.91%的抑制活性。实施例5:DPPH自由基清除试验自由基是一类性质活泼、具有极强氧化能力的化学物质。紫外线UVA/UVB的照射会产生大量自由基,对机体造成损伤,加速衰老。在此采用DPPH自由基清除法测定实施例中提取物的体外抗氧化活性。用蒸馏水将实施例中的提取物分别稀释到0.08mg/ml和0.4mg/ml两个浓度。然后取实施例提取物2ml、浓度为500μmol/L的DPPH乙醇溶液0.5ml和1.5ml水,先后加入同一试管中,摇匀,静置,30min后在517nm处测定其吸光度(OD),并以相应的混合液作为空白对照。实施例提取物对DPPH的清除率根据以下公式计算:其中:T—DPPH+实施例提取物的吸光度,T0—实施例提取物+溶剂的吸光度,C—DPPH+溶剂的吸光度。本发明的中草药组合物抗氧化能力评估结果如表4所示。表4浓度自由基清除率浓度自由基清除率实施例1组合物0.08mg/ml43.24%0.4mg/ml75.05%实施例2组合物0.08mg/ml73.4%0.4mg/ml93.94%实施例3组合物0.08mg/ml32.89%0.4mg/ml69.64%实施例1提取物A10.08mg/ml69.58%0.4mg/ml90.12%实施例2提取物A20.08mg/ml40.35%0.4mg/ml75.86%实施例3提取物A30.08mg/ml49.17%0.4mg/ml88.54%实验结果表明,实施例1、2、3的中草药组合物在体外0.08mg/ml和0.4mg/ml浓度均有较好清除自由基的抗氧化能力,以实施例2中草药组合物效果最好。实施例6:透明质酸酶抑制实验透明质酸的降解反应取决于透明质酸酶的活性,大分子透明质酸的降解产物会造成皮肤的炎症反应,因此对透明质酸酶活性抑制,作为物质抗 炎症反应的指标,透明质酸酶的抑制率越高代表抗炎活性越好。方法对照:色甘酸钠(5mg/ml水溶液)。仪器与试剂:分光光度计、透明质酸酶(Sigma)、透明质酸(化妆品级,福瑞达提供)、显色剂等。样品处理:用pH3.5Buffer缓冲液溶解和稀释,将实施例中的提取物分别稀释到10mg/ml、5mg/ml和1mg/ml三个浓度选择10ml试管作为反应管,在样品管(T)和样品对照管(T0)中各加入400ul对应浓度的样品溶液,阳性对照管(C)和阴性对照管(C0)中以缓冲液代替;样品管和阳性对照管内加入50ul透明质酸酶溶液混匀,样品对照管和阴性对照管加入50ul乙酸缓冲液混匀(具体加样见下表),37℃水浴20分钟。1)反应管各加入12.5mM氯化钙100ul,37℃水浴20分钟。2)反应管各加入透明质酸钠250ul,37℃水浴40分钟。3)反应管各加入0.4N盐酸100ul和0.4M四硼酸钠100ul,沸水3分钟,冷却至室温。4)加入二甲基氨基苯甲醛溶液3ml,37℃水浴20分钟。5)将各反应溶液移入比色皿中,在分光光度计585nm比色测定光密度值(OD)。实施例提取物对透明质酸酶活性抑制率根据以下公式计算:式中:T:样品管OD;T0:样品对照管OD;C:阳性对照管OD;C0:阴性对照管OD。本发明的中草药组合物抗氧化能力评估结果如表5所示。表5实验结果表明,实施例中草药组合物在体外三个浓度下均有较好的透明质酸酶抑制作用,即表明一定的抗炎活性,其中,以实施例2中草药组合物效果最好,在1mg/ml固含浓度下仍具有近40%的透明质酸酶抑制活性。实施例7:表皮细胞体外保湿/抗干燥损伤的图像定性实验体外细胞角度,模拟自然干燥的过程,通过显微镜成像系统拍照记录细胞在相应时间点的形态。该定性实验能够较为直观的反映添加剂在细胞水平抵抗干燥、防止脱水死亡的能力。1.实验细胞:Hacat人表皮角质细胞系2.仪器设备:倒置显微镜成像系统3.测试样品、实验分组:4.操作步骤:(1)细胞同步化后,以5*104个/孔/500ul浓度接种于24孔板中(2)除了空白组,在各孔中加入相应样品,孵育24h(3)室温下,依次吸弃每孔培养基,在相应时间点(0min、相同干燥时间后)显微镜成像系统下进行拍照(×10倍)实验结果如图1所示。结果说明:在室内放置等同的一段时间后,未加药的空白细胞组细胞失水厉害,明显皱缩,变形,折光率增加,阳性对照组0.1%透明质酸钠的细胞则能基本维持正常状态。在室内放置等同的一段时间后,加有本发明中草药组合物的实验组细胞发生了程度较轻的失水现象,小部分细胞变性皱缩,折光率有所升高。在室内放置等同的一段时间后,加有人参提取物实验组细胞发生了较明显的失水现象,大部分细胞变性皱缩,折光率升高。实验结论:提示本发明的中草药组合物在体外具有一定的持水保湿作用。提示人参单味药本身在体外不具有持水保湿的作用。取实施例1-3中制备的中草药组合物,用于皮肤外用剂的制备。所述皮肤外用剂优选为化妆品组合物,例如化妆水、精华液、乳霜等。所述中草药组合物在皮肤外用剂中的重量百分比为0.001-20%(w/w)。优选的重量百分比为0.008-10%(w/w),更优选的重量百分比为0.01-5%(w/w),最优选的重量百分比为0.01-2%(w/w)。以下是本发明中草药组合物在皮肤外用剂中的具体应用的实施例以及这些剂型的配方和制备方法。以下各表中“-”表示无添加。实施例8:面霜的制备实施例9:乳液的制备实施例10:啫喱的制备实施例11:化妆水的制备实施例12:精华液的制备实施例13:面膜的制备实施例14:眼霜的制备实施例15:气雾(清洁泡)的制备实施例16:喷雾的制备实施例17:沐浴露的制备实施例18:洗面奶的制备当前第1页1 2 3 
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