本发明涉及眼科手术用医疗用品
技术领域：
，特别是涉及一种保护角膜的组合物及其制备方法与应用。
背景技术：
：在眼部检查和眼科手术时，角膜暴露在外界，失去了泪液的保护，会因干燥而受到损伤。目前大多临床的解决办法是在检查和手术中在角膜表面频繁使用生理盐水或市售粘弹剂。然而由于生理盐水在角膜表面滞留时间较短，需频繁使用，这就使得手术间断，给临床医生带来不便，另外生理盐水使用过多会使病患眼部肿胀，也给患者带来不适。而粘弹剂由于较为粘稠，在角膜表面分散性较差，不能迅速形成保护层，需等待其分散均匀，或再次滴注粘弹剂时，先后滴注的粘弹剂之间会有间断或气泡，不能起到充分保护角膜的作用，也会使视野不清晰，给临床操作带来不便。其它已公开用于保护角膜的产品也存在很多缺陷，如公开号为CN102225220A的专利申请中公开了一种眼科手术粘弹剂，是将透明质酸钠和羟丙甲纤维素分别溶于磷酸盐缓冲液中，然后混合，过滤、灭菌、分装而成。将该粘弹剂在手术中被注射到角膜后的前房中，起到支撑作用，便于手术操作，因此粘度和弹性都要求较高，才能起到支撑前房的作用，但是粘度高就必然存在分散性差的问题。此外，该产品中的主要成分透明质酸钠需要在低温条件下保存，否则性质不稳定，会发生变质；由于无法高温灭菌，因此其中的菌落数和内毒素含量无法得到有效的控制，用于眼科手术，会增大感染的风险。在该产品的制备过程中需要对缓冲液进行加热，有水分会蒸发，从而渗透压就会发生变化，后续组分(透明质酸钠)的加入，也会引起渗透压的变化，最终使用在前房中的产品与环境渗透压差别较大，这时会引起机体组织不良反应，如组织肿胀或失水。公开号为TWI290050的专利申请中公开了一种改良的眼内注洗溶液，用在眼内手术过程中，用来降低干燥条件对眼内组织的伤害，该注洗溶液主要以羟丙基甲基纤维素为粘度与表面张力改良剂，利用其他无机盐为调节剂。与CN102225220A中的眼科手术粘弹剂类似，该产品也用于眼球内部，粘度和弹性都要求较高，仍然存在分散性差的问题。公开号为CN104083396的专利申请中公开了一种角膜表面保护剂，该产品由透明质酸钠或硫酸软骨素或壳聚糖及缓冲液组成。其中透明质酸钠、壳聚糖成分原料成本较高；且产品高温下不稳定，运输和储存需冷藏；使得降低微粒数、菌落数和内毒素含量的手段无法用在这些物质上，使其洁净度不容易达到手术用要求。虽然现有技术公开了多种含保湿润滑成分的用于眼部的产品，但仍然没有一种产品能够同时满足以下条件：保湿润滑性能良好，在角膜表面分散性能良好，组分性质稳定，菌落数、微粒数、内毒素含量均容易达到手术用要求。技术实现要素：本发明的目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，第一方面，提供一种具有良好保湿润滑和分散效果的保护角膜的组合物，其主要成分为固体保湿润滑成分、液体保湿润滑成分、渗透压调节成分和水；其中，各主要成分的含量为：按质量百分含量计0.05％-10％固体保湿润滑成分、0.1％-55％液体保湿润滑成分，0.8％-1.4％渗透压调节成分和余量的水。所述固体保湿润滑成分质量百分含量优选0.1％-5％、1％-2％、1％-3％或1％-4％；液体保湿润滑成分质量百分含量优选10％-45％、10％-55％、10％-25％或10％-40％；渗透压调节成分质量百分含量优选1％-1.2％、0.83％-1％、0.9％-1.4％或1％-1.4％。也就是说，当固体保湿润滑成分质量百分含量选自0.1％-5％时，液体保湿润滑成分质量百分含量可以是10％-45％、10％-55％、10％-25％或10％-40％，渗透压调节成分质量百分含量可以是1％-1.2％、0.83％-1％、0.9％-1.4％或1％-1.4％；以此类推。当液体保湿润滑成分质量百分含量选自10％-45％时，固体保湿润滑成分质量百分含量可以是0.1％-5％、1％-2％、1％-3％或1％-4％，渗透压调节成分质量百分含量可以是1％-1.2％、0.83％-1％、0.9％-1.4％或1％-1.4％；以此类推。所述固体保湿润滑成分可为羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、卡拉胶和卡波姆中的一种或几种的组合，优选羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和卡波姆中的一种或几种。所述羟丙基甲基纤维素可选用的标称粘度为6、15、50、100、250、750、1500、4000、10000和15000mPa·s中的一种或几种，优选15、50、100、250、750和1500mPa·s中的一种或几种；所述羧甲基纤维素钠可选用高粘度(羧甲基纤维素钠浓度在1wt％时的粘度范围为1000-4500mPa·s)、中粘度(羧甲基纤维素钠浓度2wt％时的粘度范围为300-3100mPa·s)或低粘度(羧甲基纤维素钠2wt％时浓度的粘度范围为25-100mPa·s)，优选中粘度或低粘度；所述羟丙基纤维素可选用的平均分子量为80000、95000、140000、370000、850000和1150000中的一种或几种，优选80000、95000、140000和370000中的一种或几种；所述卡拉胶优选医用级别；所述卡波姆可选用卡波姆910、卡波姆934、卡波姆940、卡波姆941，优选卡波姆934和卡波姆940。所述液体保湿润滑成分可为丙三醇、聚乙二醇-400、聚乙二醇-300和丙二醇中一种或几种的组合，优选丙三醇、聚乙二醇-400和丙二醇中的至少一种。所述渗透压调节成分为可使所述组合物渗透压为295-305mOsmol/kg的物质；所述渗透压调节成分可选自氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、葡萄糖酸锌、乳酸一种或多种的组合；所述渗透压调节成分优选在所述组合物中的终浓度(w/w)如下的物质：氯化钠(NaCl)0.505％-0.710％，氯化钾(KCl)0％-0.021％，磷酸二氢钠(NaH2PO4)0.052％-0.142％，磷酸二氢钾(KH2PO4)0.027-0.166％，葡萄糖酸锌0-0.5％和乳酸0-0.01％。第二方面，提供制备上述组合物的方法，将渗透压调节成分溶于水溶解后过滤除菌，得到渗透压调节溶液；吸附处理液体保湿润滑成分，得到液体保湿润滑溶液；将固体保湿润滑成分逐一缓慢加入渗透压调节溶液中并均匀分散成均一溶液，再加入液体保湿润滑溶液，用饱和氯化钠溶液或生理盐水调节渗透压至295-305mOsmol/kg，溶胀过夜，过滤除菌。包括以下步骤：1).称取渗透压调节成分溶于水中配制成盐溶液(优选在所述组合物中终浓度为0.505wt％-0.710wt％的氯化钠(NaCl)，0wt％-0.021wt％的氯化钾(KCl)，0.052wt％-0.142wt％的磷酸二氢钠(NaH2PO4)，0.027wt％-0.166wt％的磷酸二氢钾(KH2PO4)，0wt％-0.5wt％的葡萄糖酸锌和0wt％-0.01wt％的乳酸)，过0.22μm滤膜后，121℃蒸汽灭菌30min，得到渗透压调节溶液；2).称取液体保湿润滑成分中的至少一种，分别用活性炭吸附后除去活性炭，混合得到液体保湿润滑溶液；另配制氯化钠质量百分含量为26.5wt％的氯化钠溶液，121℃蒸汽灭菌30min；3).在65±5℃、搅拌条件下将固体保湿润滑成分逐一缓慢加入渗透压调节溶液中，待固体保湿润滑成分均匀分散开形成均一溶液(若固体保湿润滑成分不止一种，则先加入一种均匀分散成均一溶液后，再加另一种，以此类推)后，再加入步骤2)得到的液体保湿润滑溶液搅拌30min，用26.5wt％的氯化钠溶液或生理盐水调节渗透压至295-305mOsmol/kg，得到溶液A；4).将步骤3)得到的溶液A在室温下过夜溶胀(＞12h)得到溶液B，依次过0.8μm、0.5μm、0.3μm滤膜压滤；5).将步骤4)压滤后的液体置于蒸汽灭菌锅中121℃蒸汽灭菌30min，蒸汽灭菌后搅拌，得到透明均匀粘稠状液体；充分静置至无气泡，即得到所述保护角膜的组合物。第三方面，提供上述方法制备得到的保护角膜的组合物，粘度为350mPa·s-500mPa·s，内毒素含量＜0.5EU/mL，透过率＞99％，＞10μm的微粒数少于600，＞25μm的微粒数少于15。第四方面，提供上述组合物在制备避免角膜干燥的药物中的应用，所述药物为滴眼剂、冲洗剂或涂抹剂。与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明保护角膜的组合物采用双重保湿润滑成分——固体保湿润滑成分和液体保湿润滑成分，通过对两种保湿润滑成分种类和含量的组配，使该组合物更利于在角膜表面的铺展和滞留，能在角膜表面迅速形成一层保护层，先后滴注时不会产生气泡或断面，透光率已大大超出临床需求，从而保证更好的保湿润滑度和术野的清晰度，更好地保护角膜上皮层，避免因干燥受到损害。该组合物通过对渗透压调节成分的调控，保证最终产品中的渗透压与人工泪液基本相同，为295-305mOsmol/kg(pH为：6.5-7.5)。本发明的组合物中各组分性质稳定，不受低温或高温的影响，能够通过无菌、内毒素、微粒等安全指标的检验，安全无副作用，临床患者可放心使用；各组分能够参与人体代谢而随粪便被带出体外，不需其他冲洗或去除的操作，不会引起病患的不适、不良反应；所用原料成本低廉，不会给病患带来经济负担，可被大众所接受。此外，本发明组合物的制备过程无需将溶液加热至沸腾，制备操作更简单，制备周期小于48h，运输和储存时无需冷藏，降低了运输和使用成本。具体实施方式本发明提出了一种在眼部检查或眼科手术操作中所有需要暴露角膜或角膜干燥的情况下用来保护角膜上皮层的组合物。该组合物按质量百分含量，包括0.15wt％-65wt％的保湿润滑成分、0.8wt％-1.4wt％渗透压调节成分和余量的水。其中的保湿润滑成分由0.05wt％-10wt％固体保湿润滑成分和0.1wt％-55wt％液体保湿润滑成分组成。固体保湿润滑成分可以是羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、卡拉胶和卡波姆中一种或几种，混合比例不限，最好是羟丙基甲基纤维素和卡波姆中的一种或两种。羟丙基甲基纤维素作为本发明组合物中的主要有效成分，一是为组合物提供合适的粘度，使其具有粘附性，满足手术过程中所需要的分散性和滞留时间要求；二是足够润湿和润滑，使角膜表面不因暴露在外界干燥而引起损害；三是安全性，不会为患者带来任何安全隐患。羧甲基纤维素钠具有保湿性，其水溶液可粘附于角膜表面形成保护层。本发明组合物中羧甲基纤维素钠和羟丙基甲基纤维素的含量直接关系到组合物的粘度，进而影响到的是临床适用性；含量过高，则粘度大，分散缓慢，临床操作不方便；含量过低，则粘度低，不能满足临床手术滞留时间的要求。本发明中羟丙基甲基纤维素选用标称粘度为6、15、50、100、250、750、1500、4000、10000和15000mPa·s中的一种或几种的组合，优选15、50、100、250、750和1500mPa·s中的一种或几种的组合；羧甲基纤维素钠可选用高粘度(羧甲基纤维素钠浓度在1wt％时粘度范围为1000-4500mPa·s)、中粘度(羧甲基纤维素钠浓度在2wt％时粘度范围为300-3100mPa·s)或低粘度(羧甲基纤维素钠浓度在2wt％时粘度范围为25-100mPa·s)三种，优选中粘度或低粘度；羟丙基纤维素的平均分子量为80000、95000、140000、370000、850000和1150000中的一种或几种的组合，优选80000、95000、140000和370000中的一种或几种的组合。卡拉胶水溶液有一定的粘度，可增加组合物本身的粘度，也具有较强的保水性。卡波姆可粘着在角膜表面，在眼球表面形成液体储库，以保持眼部湿润。卡波姆可以增加在眼球表面的粘着和保留时间，在眼部的滞留时间大约为2小时，可选用卡波姆910、卡波姆934、卡波姆940和卡波姆941中的一种或几种的组合，优选卡波姆934和卡波姆940。液体保湿润滑成分可以是丙三醇、聚乙二醇-400、聚乙二醇-300和丙二醇中一种或几种，混合比例不限，最好是丙三醇、聚乙二醇-400和丙二醇中的一种或几种。本发明组合物中的丙三醇、聚乙二醇-400、聚乙二醇-300和丙二醇起的是保湿作用。其中丙三醇粘度较大，聚乙二醇-400、聚乙二醇-300和丙二醇粘度较小，可以组配起来共同调节组合物的分散性和透明度。渗透压调节成分按在组合物中的最终质量百分含量含有以下物质：氯化钠(NaCl)0.505％-0.710％，氯化钾(KCl)0％-0.021％，磷酸二氢钠(NaH2PO4)0.052％-0.142％，磷酸二氢钾(KH2PO4)0.027-0.166％，葡萄糖酸锌0-0.5％和乳酸0-0.01％。本发明组合物中所用的水为注射用水，即为蒸馏水或蒸馏去离子水所得的水。制备上述组合物的方法，包括以下步骤：1).称取渗透压调节成分溶于水中配制成盐溶液(盐溶液中按质量百分含量含有以下物质：氯化钠(NaCl)0.505％-0.710％，氯化钾(KCl)0％-0.021％，磷酸二氢钠(NaH2PO4)0.052％-0.142％，磷酸二氢钾(KH2PO4)0.027-0.166％，葡萄糖酸锌0-0.5％和乳酸0-0.01％)，过0.22μm滤膜后，121℃蒸汽灭菌30min，得到渗透压调节溶液；2).称取液体保湿润滑成分用活性炭吸附后过膜，得到液体保湿润滑溶液(若液体保湿润滑成分有多种，分别用活性炭吸附每种液体保湿润滑成分，去除活性炭后，混合得到液体保湿润滑溶液)；配制氯化钠质量百分含量为26.5wt％的氯化钠溶液，121℃蒸汽灭菌30min；3).在65±5℃条件下边搅拌边将固体保湿润滑成分逐一缓慢加入渗透压调节溶液中，待固体保湿润滑成分分散均匀形成均一溶液(若固体保湿润滑成分不止一种，则先加入一种均匀分散成均一溶液后，再加另一种，以此类推)后，再加入步骤2)得到的液体保湿润滑溶液，搅拌30min，取少量测试平均渗透压，通过公式用步骤2)得到的氯化钠溶液或生理盐水调节渗透压至295-305mOsmol/kg，pH为：6.5-7.5，得到溶液A；4).将步骤3)得到的溶液A在室温下过夜溶胀(＞12h)得到溶液B，依次过0.8μm、0.5μm、0.3μm滤膜压滤；5).将步骤4)过滤后的液体置于蒸汽灭菌锅中121℃蒸汽灭菌30min，蒸汽灭菌后搅拌，得到透明均匀粘稠状液体，充分静置至无气泡，灌装至灭菌后的容器中，即得到本发明保护角膜的组合物；测试组合物的粘度为350mPa·s-500mPa·s，若组合物粘度不在该范围内，则需重新配制。以下结合具体实施例，更具体地说明本发明的内容，并对本发明作进一步阐述，但这些实施例绝非对本发明进行限制。下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。实施例1-10、制备保护角膜的组合物本发明实施例1-10保护角膜的组合物及比较例的配方如表1-2所示。比较例1为按照CN102225220A中的方法制备得到的产品，比较例2为按照TWI290050B中的方法制备得到的产品，比较例3和4为按照CN104083396A中的方法制备得到的产品，比较例5和6为按照本发明的配方和方法制备得到的产品，仅是固体保湿润滑成分不在本发明的数值范围内。表1实施例1-5保护角膜的组合物及比较例1-3的配方(每1000g保护角膜的组合物中各组分的质量)表2实施例6-10保护角膜的组合物及比较例4-6的配方(每1000g保护角膜的组合物中各组分的克数)试验一、产品性能参数检测对实施例1-10制备的保护角膜的组合物、比较例1-6的产品和上市同类产品CORNEAPROTECT的性能参数进行检测，结果见表3和表4。上市产品CORNEAPROTECT，购自北京和邦思特科技发展有限公司，该产品是由羟丙基甲基纤维素(HPMC)、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸和注射用水组成。表3实施例1-10的保护角膜的组合物的性能参数表4比较例1-6的产品和CORNEAPROTECT的性能参数表3和表4中的眼损伤记分是参考《GBT16886.10-2005医疗器械生物学评价》第10部分：刺激与迟发型超敏反应试验中的附录B中的B.3眼刺激试验所规定的进行评定的。详细的记分系统见表5。表5眼损伤记分系统对比表3和4中性能参数的检测结果，可以看出相比实施例1-10的组合物，比较例1-6的产品及上市产品CORNEAPROTECT粘度不是太高就是太低、内毒素含量和透过率没办法同时满足临床需要，微粒数量也过高，说明本发明的组合物通过配方组成和含量上严格的组配和筛选，制备工艺的严格控制，才使得各项指标均优于比较例和上市产品。CORNEAPROTECT是目前国内市场上唯一一款专用于术中角膜保护的产品。CORNEAPROTECT与本发明组合物的区别在于该产品不含液体保湿润滑成分。由表中数据可知，本发明组合物因含有液体保湿润滑成分使得其具有的保湿润滑性能、表面张力、角膜表面附着力等性能均更适用于角膜表面的保护，且其分散性和透明度也优于未添加的产品。另外本发明组合物因含有液体保湿润滑成分和严格的制备工艺，使得本发明组合物在透过率和微粒指标上都优于现有同类产品。在本试验中，上市产品组观察到了超过正常的眼分泌物，有可能是因为微粒较多所致。综上比较，本发明的组合物更加适用于临床手术室眼科手术和眼科检查中维持角膜上皮层的保湿润滑，从而起到保护角膜的作用。试验二、角膜保护试验为了验证本发明保护角膜的组合物的使用有效性，选取实施例1-10、比较例1-6与上市产品CORNEAPROTECT进行以下角膜保护试验，其中比较例和上市产品作为本发明实施例的对照。具体试验方法如下：选用健康成年普通级新西兰白兔，雌雄不限，体重2.5-3.0Kg。饲养温度：20-26℃；相对湿度：40-70％；光照：15-20Lx；饲喂全价颗粒兔饲料，自由饮水。实验动物用2wt％戊巴比妥钠溶液经耳静脉注射麻醉，侧卧位固定于手术台上，保持角膜表面水平。分别将实施例组(使用实施例1-10的组合物)、比较例组(使用比较例1-6的组合物)、阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(上市产品CORNEAPROTECT)空白组(不使用任何物质)的样品作为角膜保护剂滴3滴在动物角膜上，并使其完全覆盖角膜。显微镜下观察样品对角膜表面的覆盖情况。角膜保护剂液面出现破裂时认为覆盖失效。记录从滴用角膜保护剂至其液面破裂时的时间，作为角膜保护剂的滞留时间。同时观察滴用角膜保护剂后2秒钟之内液面的反光情况，以此评价角膜保护剂液面的平滑程度，使用三级分级法，0级为平滑，1为部分平滑，2为不平滑。试验中考察样品在角膜表面分散至平滑液面的时间，分散越快越不会给临床操作带来不便。以实施例1-6的组合物和比较例1-5的产品为例，试验结果如表6所示，其它实施例与实施例1-6的结果无异。表6各实验组角膜保护剂的角膜保护作用实验组滞留时间平滑程度分散时间空白组---阴性对照组20”01”阳性对照组16’01”08010”实施例115’28”1303”实施例214’06”1902”实施例315’06”4402”实施例415’09”0403”实施例517’06”1804”实施例610’36”0603”比较例120’17”56251”比较例223’03”19255”比较例328’48”56248”比较例418’39”56137”比较例531’29”56259”表6中的结果可以看出，生理盐水能够在角膜表面迅速分散开，但滞留时间十分短暂，作为眼用粘弹剂的比较例1和比较例2滞留时间较长，但分散速度较慢，且实验中观察到同样一滴样品覆盖的角膜面积较小，需后续再滴加，再次滴加时两滴样品所形成的液面之间会有断层，也会有气泡出现，不能充分覆盖角膜起到保护作用。本发明所提供的样品，大都5秒内就可形成视野清晰的平滑液面，分散十分迅速，且滞留时间均在10-20分钟，能够满足眼部检查和眼科手术的要求。可见，在分散性和滞留时间上，本发明的组合物能够兼顾，因此优于现有产品。综合评价后本发明的组合物是临床操作的优先选择。本发明组合物通过在暴露角膜表面迅速形成一层术野清晰保护层，且其在角膜表面的滞留时间较长，不会含有气泡或形成断层。在临床手术和眼科检查中，此组合物的应用使得临床大夫操作更为方便，不需要再频繁的滴加生理盐水，也不需要在耗费时间等待粘弹剂类用品在角膜表面铺展，手术和检查过程中因术野更加清晰使得手术更为顺利；另一方面，此组合物成本低廉，制备简单，能被广大病患所接受，再加上其保湿润滑想能良好，具有和自然泪液相同的性能，使使用者更为舒适；因制备中各项指标控制严格，使用本组合物避免了使用者眼部肿胀和组织炎症的并发症的出现。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的内容。当前第1页1 2 3