本发明属轻工业领域，涉及一种水解液的制备方法，具体是一种利用益生菌发酵制备珍珠水解液的方法。
背景技术：
珍珠是一种名贵的中药材，具有安神、明目、解毒和美容保健的功效。现代科学分析表明，珍珠含有近20种氨基酸、20多种微量元素、卟啉和丰富的钙类。但是珍珠具有有机/无机杂化纳米结构，两层霞石结构的碳酸钙中间夹着一层厚度为几个到十几个纳米的蛋白质层，这使得珍珠具有很高的硬度和韧性，加工十分困难。传统珍珠粉的加工方法，如水飞法和振动磨法，所得的珍珠粉的粒径一般在几十个微米，人体的吸收利用率较低。为了提高人体对珍珠粉的吸收利用率，人们主要通过两个方面的途径来解决利用率低的问题：一是制取可溶性的珍珠液(水解液)，二是制备更小粒径的纳米级珍珠粉。由于珍珠水解液中各种有效成分呈游离状态，容易被人体所吸收，因此，水解液已经成为珍珠应用的主要途径。
现有的珍珠水解液主要采用酶水解法、酸水解法制备：酶水解法是先用无机酸或有机酸将珍珠溶化，添加酶进行水解，得珍珠水解液；酸水解法是用盐酸、硫酸等强无机酸直接水解。酶水解法基本不破坏珍珠的有效成分，但因为酶水解功能单一，大多数酶只能剪切特定基团，而珍珠水解过程中只能添加一种或少数几种酶，每一种酶只能剪切特定基团，所以酶水解程度较低，珍珠功效成分利用率不高。酸水解法由于采用强酸作用，在水解的同时会较大程度破坏珍珠的有效成分，导致水解液中珍珠的有效成分含量过低，实用性不高。目前，有研究人员利用酸水解的特点，采用冰醋酸、乳酸等有机酸直接水解制备珍珠水解液，能规避无机酸水解会较大程度破坏珍珠的有效成分的风险，但利用有机酸进行水解所得水解液中呈游离状态的珍珠有效成分含量较低，同样存在实用性不高的缺陷。
技术实现要素：
本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种利用益生菌发酵制备珍珠水解液的方法，将有机酸水解、益生菌发酵相结合，能有效地将珍珠成分中的不溶性物质转化成处于游离状态的可溶性物质，水解程度高，珍珠营养成分损失小，解决了现有技术中珍珠有效成分利用率低、破坏程度大等问题。
本发明所采用的技术方案：
一种利用益生菌发酵制备珍珠水解液的方法，其步骤如下：
1、珍珠溶解
取珍珠粉碎，过100目筛，然后按重量比：珍珠粉：食用有机酸＝1：1～2的比例在珍珠粉中加入食用有机酸，搅拌溶解得有机酸珍珠溶解液。
2、发酵水解
由于珍珠成分中的蛋白难以溶解，有机酸珍珠溶解液发酵水解采用两种方式进行：
A、以珍珠粉重量为基准，在有机酸珍珠溶解液中加入1/5～1/3倍的糖分、4～6倍的水，搅拌混合后高温高压灭菌；于38～45℃按重量比：珍珠粉：益生菌＝200：2～3的比例接种益生菌，发酵培养24～48小时；压滤得到滤液，100℃灭菌，过滤，得珍珠全成分水解液。所述益生菌按干重计。
B、将有机酸珍珠溶解液过滤，得到不溶性珍珠蛋白，然后以不溶性珍珠蛋白的重量为基准加入2～3倍的糖分、20～30倍的水，搅拌混合后高温高压灭菌；于38～45℃按重量比：不溶性珍珠蛋白：益生菌＝5：0.8～1.5的比例接种益生菌，发酵培养24～48小时；压滤得到滤液，100℃灭菌，过滤，得珍珠蛋白水解液。所述益生菌按干重计。
所述糖分是葡萄糖或乳糖。
所述益生菌是双歧杆菌或乳酸杆菌。
本发明工艺简单，将有机酸水解、益生菌发酵相结合，能有效地将珍珠成分中的不溶性物质转化成处于游离状态的可溶性物质，水解程度高，珍珠营养成分损失小，解决了现有技术中珍珠有效成分利用率低、破坏程度大等问题，能进一步提高珍珠的营养价值，所得水解液可以作为保健食品或化妆品营养添加物使用。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。
一、珍珠全成分水解液制备
实施例一
取珍珠粉碎，过100目筛。取2000g珍珠粉放入玻璃容器内，加入水10000g，含量为80％的乳酸4000g，搅拌溶解得有机酸珍珠溶解液。检测pH值为3.7，缓慢加入珍珠粉并搅拌调节pH，直到pH到达5-7间，共消耗珍珠粉7.35g。
在有机酸珍珠溶解液中加入葡萄糖500g，混合，置于高压锅内，压力升至103.4kPa(1.05kg/cm2)，温度达121.3℃，保持30分钟灭菌，冷却后取出，然后于培养箱内42℃接种双歧杆菌20g。42℃发酵培养24小时。取出，100摄氏度灭菌，即得珍珠全成分水解液。
实施例二
取珍珠粉碎，过100目筛。取2000g珍珠粉放入玻璃容器内，加入水10000g，冰醋酸2600g，搅拌溶解得有机酸珍珠溶解液。检测pH值为3.1，缓慢加入珍珠粉并搅拌调节pH，直到pH到达5-7间，共消耗珍珠粉8.63g。
在有机酸珍珠溶解液中加入乳糖600g，混合，置于高压锅内，压力升至103.4kPa(1.05kg/cm2)，温度达121.3℃，保持30分钟灭菌，冷却后取出，然后于培养箱内40℃接种乳酸杆菌28g。42℃发酵培养38小时。取出，100摄氏度灭菌，即得珍珠全成分水解液。
二、珍珠蛋白水解液制备
实施例三
取珍珠粉碎，过100目筛。取2000g珍珠粉放入玻璃容器内，加入水10000g含量为80％的乳酸4600g，搅拌溶解得有机酸珍珠溶解液。
将有机酸珍珠溶解液过滤，得到不溶性珍珠蛋白57.3g(以干品计)，放入玻璃容器内，加葡萄糖120g、水加到1000g，混合，置于高压锅内，压力升至103.4kPa(1.05kg/cm2)，温度达121.3℃，保持30分钟灭菌，冷却后取出，然后培养箱内42℃接种双歧杆菌10g。42℃发酵培养24小时。取出压滤得到滤液，100摄氏度灭菌，即得珍珠蛋白水解液。
实施例四
取珍珠粉碎，过100目筛。取2000g珍珠粉放入玻璃容器内，加入水10000g，冰醋酸2800g，搅拌溶解得有机酸珍珠溶解液。
将有机酸珍珠溶解液过滤，得到不溶性珍珠蛋白54.3g(以干品计)，放入玻璃容器内，加葡萄糖150g、水加到1300g，混合，置于高压锅内，压力升至103.4kPa(1.05kg/cm2)，温度达121.3℃，保持30分钟灭菌，冷却后取出，然后培养箱内42℃接种双歧杆菌13g。42℃发酵培养38小时。取出压滤得到滤液，100摄氏度灭菌，即得珍珠蛋白水解液。
三、珍珠水解效果鉴定
1、上述各实施例中，在珍珠粉中加入有机酸溶解后，取少量有机酸珍珠溶解液，过滤，得不溶性固形物、滤液，检测不溶性固形物中蛋白质(总蛋白、以干重计)含量、检测滤液中有效成分含量，三次重复，取平均值，实施例一、实施例二的结果见表1，实施例三、实施例四的结果见表2。
2、上述各实施例中，分别取少量珍珠全成分水解液、珍珠蛋白水解液进行检测，三次重复，取平均值，实施例一、实施例二的结果见表1，实施例三、实施例四的结果见表2。
3、检测方法：凯氏定氮法。
表1珍珠水解效果
注：蛋白质或蛋白的含量单位为：g/100g。维生素的含量单位为：mg/100g
表2珍珠蛋白水解效果
注：蛋白质或蛋白的含量单位为：g/100g。维生素的含量单位为：mg/100g
上述水解效果表明，单纯采用食用有机酸(乳酸或冰醋酸)对珍珠进行水解，水解液中珍珠的有效成分含量过低，本发明将有机酸水解、益生菌发酵相结合，可以使珍珠蛋白质被水解成为小的分子(小的肽链和氨基酸等)，水解液中可溶性蛋白的含量显著高于未经发酵的水解液，且发酵过程还可产生人体营养所必须的多种维生素，如VB1、VB2、VB6、VB12等，进一步提高珍珠的营养价值，所得水解液可以作为保健食品或化妆品营养添加物使用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。