芎栀口服制剂及其制备方法与流程

本发明涉及芎栀中药口服制剂及其制备方法，属于医药技术。

背景技术：

据2002年卫生部组织的全国居民27万人营养与健康状况调查资料显示，我国年龄>60岁老年人群高血压的患病率为49％。即约每2位老年人中就有1例高血压。高血压的知晓率、治疗率和控制率是高血压流行病和防治研究的重要参数。尽管许多试验结果显示，老年人高血压能从降压治疗中获益，但其治疗率及控制率均较低。随着年龄增长，接受降压治疗的高血压患者血压控制率下降。在年龄<60岁、60一79岁和≥80岁的人群中，血压控制正常率分别为38％、28％和23％。而在我国仅32.2％的老年高血压患者接受治疗，控制率仪为7.6％。

高血压是心血管疾病最重要的危险因素，老年高血压患者较年轻人发生心脑血管事件的危险性明显升高，我国2003年第3次国家卫生服务调查显示，我国高血压的直接疾病负担201.5亿人民币，由高血压造成冠心病和脑卒中的直接经济负担达190.8亿元人民币。因此老年高血压防治是我们迫切需要解决的问题。

目前上市的一些老年高血压的中药复方制剂，有些属于治标不治本，有些使用价格昂贵的成分，有些在开发过程中由于疗效不确切而中断开发。

本发明的目的根据祖国中医中药理论，研发了一种针对老年高血压动脉粥样硬化发展变化的有效治疗药物。

技术实现要素：

本发明提供一种芎栀口服制剂，由以下重量配比的中药原料药制备而成：

优选的本发明所述的口服制剂，由以下重量配比的中药原料药制备而成：

另一优选的本发明所述的口服制剂，由以下重量配比的中药原料药制备而成：

以上配比的中药原料，重量是以药材量计算的，药材经过提炼加工制成可制成药物制剂。

以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，如重症或轻症，肥胖或瘦小的病人，可以相应调整组成的量的配比，增加或减少不超过一倍，药效不变。

以上组成中的单味中药，尤其是臣药和佐药，也可以被适当的具有相同药性的中药替换，替换后的中药制剂其药物作用不变。

本发明的口服制剂，是通过将上述配方组成的中药原料经过提取或其他方式加工，制成药物活性物质，随后，以该物质为原料，需要时加入药物可接受的载体，按照制剂学的常规技术制成的。所述活性物质可以通过分别提取中药原料得到，也可以通过共同提取中药原料得到，也可以通过其他方式得到，如：通过粉碎、压榨、煅烧、研磨、过筛、渗漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、层析等方法得到、这些活性物质可以是浸膏形式的物质，可以是干浸膏也可以是流浸膏，根据制剂的不同需要决定制成不同的浓度。

本发明的口服制剂中的药物活性物质，其在制剂中所占重量百分比可以是0.1-99.9％，其余为药物可接受的载体。本发明的药物组合物，以单位剂量形式存在，所述单位剂量形式是指制剂的单位，如片剂的每片，胶囊的每粒胶囊，口服液的每瓶，颗粒剂每袋等。

本发明的口服制剂可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、混悬剂、粉剂、滴剂、滴丸剂。本发明的制剂，优选的是口服剂型，如：胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂等。

本发明的口服制剂，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。

适用的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂。适宜的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠。适宜的润滑剂包括，例如硬脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。

可通过混合，填充，压片等常用的方法制备固体口服组合物。进行反复混合可使活性物质分布在整个使用大量填充剂的那些组合物中。

口服液体制剂的形式例如可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂，或者可以是一种在使用前可用水或其它适宜的载体复配的干燥产品。这种液体制剂可含有常规的添加剂，诸如悬浮剂，例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪，乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇一油酸酯或阿拉伯胶；非水性载体(它们可以包括食用油)，例如杏仁油、分馏椰子油、诸如甘油的酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需要，可含有常规的香味剂或着色剂。

本发明的口服制剂，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载体，所述药物可接受的载体选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β－环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。

本发明的另一个目的在于提供一种本发明的口服制剂的制备方法。

发明的口服制剂虽然可以采用现有技术中的任何一种方法进行加工提取制备，但作为严格的研究者，本发明人在对工艺进行了筛选后，发现以下工艺特别适合本发明的口服制剂，而且效果优异。

本方的制备方法，步骤如下：

川芎的提取

取川芎饮片，稍粉碎，用95％乙醇于索氏回流提取装置中回流提取9小时。溶媒用量为8～10倍。提取液用布氏抽滤器抽滤，抽滤液减压浓缩至干，再加适量水，加热使溶解，抽滤，滤液回到已处理好的大孔树脂柱(干膏和树脂的比例为1：15～1：20)上，控制加样流速为3秒/滴，慢慢滴加完后，先用水洗，(1～2秒/滴)洗至还原糖反应呈阴性，(1ml水洗脱液加入甲基萘酚0.5％试液2～3滴。沿试管壁缓缓加入0.5ml浓硫酸，阴性为二界面处出现棕色环)约用30％乙醇洗脱至无色，合并30％乙醇洗脱液减压回收乙醇，冷却后用乙醚萃取，醚提取液用1N硫酸溶液萃取，酸液经饱和碳酸钠溶液碱化至pH9～10。用氯仿提取，提取液减压回收氯仿至干，得到总生物碱。取总生物碱石油醚溶解部分，减压蒸发石油醚，得橙黄的膏状物，上碱性AL2O3柱，层析分离，石油醚－氯仿(8∶2)的洗脱部分，减压浓缩，经升华结晶得无色的针状结晶，备用。

栀子的提取

取栀子果实粗粉，加乙醇乙酯回流提取5h，趁热抽虑后，冷却，用水萃取，收集水相，减压干燥得到粘稠状浓缩物，备用。

决明子的提取

取决明子粗粉，用水提取三次，第一次8倍量水(1.5小时)，第二次6倍量水(1小时)，第三次6倍量水(45分)，过滤，合并提取液，放冷，经wld树脂吸附。先用水冲洗至近无色，再用70％的乙醇冲洗至近无色，回收乙醇，浓缩，干燥，备用。

杜仲的提取

取杜仲叶干粉，水浴加热，乙醇回流提取；提取液经粗滤，于60℃减压浓缩，回收乙醇；加蒸馏水，搅拌后静置2h，超滤,取上清液，浓缩干燥，备用；

随后，以上述四种提取物为药物活性成分，需要时加入药物可接受的载体，按照制剂学的常规技术制成本发明口服制剂。

本发明口服制剂，经过研究发现，具有补肾活血，化浊通脉之功效。用于高血压患者肝肾亏虚，痰浊瘀阻之证。症见头晕头胀，头昏蒙，腰膝酸软，肢体麻木，身体重着等症，舌暗苔腻，脉沉细或弦滑或涩。本发明口服制剂，还能增加机体抵抗力，提高免疫力，具有扶正祛邪之功。

以下通过实验数据进一步说明本发明的有益效果：

药效学实验资料：

1 一般情况

实验药物采用本发明实施例1的芎栀胶囊(实验中称为芎栀组)，实验过程中除空白对照组外，其他各组兔均因进食高脂饲料存在不同程度的食欲不振、饮食量减少、腹泻等不适，以实验中期最频繁、严重。造模及给药第15周末,因腹泻(肠炎)及腹胀(肠梗阻)共死亡兔9只,分别是空白对照组2只,芎栀小剂量组4只,芎栀中剂量组、芎栀大剂量组及辛伐他汀组各1只。并于12周末提前处死模型组兔1只查看AS斑块形成情况。最终剩余兔空白对照组8只,模型组9只,芎栀小剂量组6只,芎栀中剂量组9只,芎栀大剂量组9只,辛伐他汀组9只。

2 芎栀胶囊对各组AS兔斑块形成的大体病理观察

造模及给药15周后,各组兔主动脉壁病理形态各不相同,对比如图1。空白对照组兔主动脉管壁光滑,未见脂质沉积病变；模型组兔主动脉管壁可见明显脂质条纹形成,斑块满布整个管壁；芎栀小剂量组兔主动脉管壁也可见明显斑块,但较模型组范围小,斑块多集中于管壁两端；芎栀中剂量组兔动脉管壁两端可见散在斑块形成；芎栀大剂量及辛伐他汀组兔见动脉管壁散在脂斑,范围很小。结果提示芎栀胶囊及辛伐他汀能够减轻高脂喂养兔AS斑块的形成。

3 各组AS兔血管斑块病理形态结构的比较

HE染色后100倍光学显微镜下见各组AS兔形成斑块结构形态如图2:空白对照组平滑肌细胞排列整齐、紧密有序,内皮细胞层连续,内皮下未见脂质沉积；模型组内皮层脱落,管壁内满布斑块,内弹力板尚完整,内膜增生严重,可见大量泡沫细胞,中外膜不规则增厚,可见泡沫细胞浸润；芎栀小剂量组见明显斑块,但厚度较模型组变薄,中外膜增厚,未见典型泡沫细胞浸润；芎栀中剂量组见内皮细胞尚连续,斑块厚度明显减小,内膜下见脂质沉积,中膜层弹力纤维排列较模型组及小剂量组整齐；芎栀大剂量及辛伐他汀组管壁内皮细胞尚连续,见散在薄斑块,内膜下少量泡沫细胞沉积,中外膜与对照组厚度相当,较模型组薄。HE染色结果显示芎栀胶囊能够减少斑块形成,抑制血管平滑肌细胞增殖重构。

4 各组AS兔斑块脂质沉积的病理学变化比较

油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色,故染色后斑块内的脂肪颗粒着色为红色。冷冻切片后各组兔主动脉标本经油红O染色后结果如图3。空白对照组兔动脉管壁未见脂质沉积；模型组见明显斑块,内有大量脂质沉积；芎栀小剂量组平滑肌细胞外有斑块形成,但脂质沉积较模型组减少；芎栀中剂量组斑块较模型组明显减少,内有脂质沉积；芎栀大剂量组见散在斑块形成,内有少量脂质沉积；辛伐他汀组未见明显斑块,内皮下见少量脂质沉积。结果提示,芎栀胶囊能够减少脂质在内皮下的沉积,减少泡沫细胞的形成。

5.芎栀胶囊对AS兔血管平滑肌细胞TC及FC的影响

采用ELISA试剂盒直接测定血管平滑肌细胞内的TC及FC，因各组织研磨后取得的样本浓度不一致,同时测定各样本蛋白浓度进行校准,取各样本测定的TC及FC值与蛋白浓度相比得出最终结果,各组兔主动脉平滑肌细胞内的TC及FC含量如图4及表9。15周末模型组兔主动脉平滑肌细胞内TC明显升高,与空白对照组相比有显著性差异(P＝0.006,P<0.01)；FC呈现相同的趋势(模型组与空白对照组比较P＝0.008,P<0.01)。各治疗组较模型组相比细胞内的TC及FC均有不同程度的降低。芎栀小剂量组及辛伐他汀组TC有减少趋势,但未达到统计学差异(P＝0.145；P＝0.065,P>0.05)；芎栀中剂量组较模型组细胞内TC明显减少(P＝0.035,P<0.05),芎栀大剂量组降低效果更加明显(P＝0.004,P<0.01)。FC结果显示药物治疗效果更加显著,芎栀小剂量组较模型组FC即有明显减少(P＝0.024,P<0.05)；芎栀中剂量组、大剂量组(P＝0.001,P<0.01)及辛伐他汀组FC水平则有更明显的降低(P＝0.006,P<0.01)。

表1 各组兔主动脉平滑肌细胞内TC/FC含量比较(单位:mmol/l)

注:与空白对照组比△△P<0.01；与模型组比▲P<0.05,▲▲P<0.01。

6.各组兔动脉管壁cav-1/亲环素A蛋白表达水平比较

各组兔动脉壁蛋白WB结果如图5,通过软件分析目标条带及内参蛋白β-actin灰度值,做相对定量分析,由图可知目标蛋白特异性良好。

正常组织丰富表达cav-1,AS模型兔表达量明显下降(P＝0.001,P<0.01),与模型组相比,芎栀中、大剂量组cav-1表达增加(P＝0.022<0.05,P＝0.002<0.01),辛伐他汀组及芎栀小剂量组与模型组相比cav-1表达也有增加趋势,但无统计学意义(P＝0.063,P＝0.179)，见图6、表2。空白对照组正常表达亲环素A,AS模型组兔表达量较对照组明显增加(P＝0.013,P<0.05),芎栀中、大剂量组及辛伐他汀组较模型组亲环素A表达减少(P＝0.017<0.05,P＝0.006,0.000<0.01)见图7、表2。

7.各组兔动脉管壁cav-1/亲环素A基因转录水平比较

根据real-time PCR结果绘制基因扩增曲线及熔解曲线峰值基本一致,扩增产物特异性高。根据Ct值,以对照组为1,使用2-ΔΔCt方法计算各组基因的相对表达量(表2)。与对照组相比,模型组cav-1mRNA表达量明显下降(P＝0.001,P<0.01),辛伐他汀组及芎栀大剂量组较模型组增加(P＝0.014,P<0.05；P＝0.001,P<0.01),如图6。模型组兔亲环素A mRNA表达量与对照组相比有下降趋势,但无统计学差异(P＝0.884,P>0.05)；芎栀大剂量组及辛伐他汀组较模型组相比明显增加(P＝0.003,P＝0.004<0.01),余治疗组较模型组无明显差异,如图7。

表2 各组兔动脉管壁cav-1及亲环素A蛋白水平及mRNA表达量比较

注:与空白对照组比△P<0.05,△△P<0.01；与模型组比▲P<0.05,▲▲P<0.01。

8.芎栀胶囊对AS兔肝脏LXRα蛋白表达及LXRαmRNA转录水平的影响

采用检测试剂盒在酶标仪上直接测定LXRα蛋白浓度(单位:ng/ml),用于统计。LXRαmRNA转录水平如实验二中,以空白对照组为1,进行相对定量比较。如表3 显示,检测结果为空白对照组兔肝脏组织正常表达LXRα,AS模型兔表达量较空白对照组略下降(P＝0.798,P>0.05),但没有统计学差异。与模型组相比芎栀大剂量组表达增加(P＝0.005,P<0.01),余治疗组与模型组相比表达有增加趋势,但无统计学意义,见图8。与空白对照组相比,模型组LXRαmRNA表达量明显增加(P＝0.000,P<0.01),各治疗组较模型组无明显差异(P>0.05)如图9。

表3 各组AS兔肝脏LXRα及LXRαmRNA水平比较

注:与空白对照组比△△P<0.01；与模型组比▲▲P<0.01。

9.芎栀胶囊对AS兔肝脏SR-BⅠ蛋白表达及mRNA转录水平的影响

WB结果显示(如图10),模型组与空白对照组兔相比肝脏SR-BⅠ蛋白表达量有减少趋势,但无统计学差异(P＝0.281,P>0.05)。相比与模型组芎栀胶囊各治疗组蛋白表达量有增多趋势,但仍无统计学差异。辛伐他汀组兔与模型组相比,SR-BⅠ蛋白表达量增多,有统计学差异(P＝0.049,P<0.05),但与芎栀大剂量组相比表达量无明显差异。基因检测结果显示,设定空白对照组兔肝脏组织表达SR-BⅠmRNA水平为1,AS模型兔表达量较空白对照组明显增加(P＝0.021,P<0.05)。各给药组与模型组相比,基因转录水平无明显增多(P>0.05)。但芎栀中剂量组、芎栀大剂量组及辛伐他汀组兔SR-BⅠ基因转录水平有升高趋势,且大剂量组较中剂量组更加明显,如图11,表4。

表4 各组AS兔肝脏SR-BⅠ及SR-BⅠmRNA水平比较

注:与空白对照组比△P<0.05；与模型组比▲P<0.05。

10.芎栀胶囊对AS兔血浆白介素-2及TNF-α水平的影响

对四个时间点测量的白介素-2(interleukin-2,IL-2)及TNF-α采用重复测量方差分析。不同时间段IL-2存在差异(F＝50.526,P＝0.000,P<0.01),造模及用药时间与治疗方法之间存在交互作用(F＝7.214,P＝0.000,P<0.01),不同治疗方法间IL-2水平存在差异(F＝2.875,P＝0.023,P<0.05)。组间两两比较结果示模型组与空白对照组相比IL-2水平增加,但无统计学差异(P＝0.790,P>0.05)；与模型组相比,芎栀中、大剂量组及辛伐他汀组兔血浆IL-2水平均明显降低,且有统计学意义(P＝0.004<0.01,P＝0.026、P＝0.013,P<0.05),见图12、表5。

表5 AS兔各时间段血浆白IL-2浓度(单位:pg/ml)

不同测量时间点各组兔TNF-α水平存在差异(F＝79.099,P＝0.000,P<0.01)。造模及给药时间与治疗方法间存在交互作用(F＝2.276,P＝0.006,P<0.01)。各组间TNF-α水平存在差异(F＝5.803,P＝0.000,P<0.01),组间两两比较示模型组兔TNF-α水平较空白对照组高,但无统计学差异(P＝0.120,P>0.05),芎栀中、大剂量组及辛伐他汀组较模型组兔TNF-α水平明显降低(P＝0.032,P＝0.013,P＝0.049,P<0.05),各时间点各组兔血浆TNF-α均值见图13、表6。

表6 AS兔各时间段血浆TNF-α浓度(单位:pg/ml)

11.芎栀胶囊对AS兔主动脉NF-κBp65蛋白水平影响

11.1兔NF-κB蛋白量化学发光图结果如图14、15、16。

看图可初步判断模型组比空白对照组NF-κBp65蛋白表达量增多,各给药组相比模型组表达量减少明显,使用Gelpro32软件分析上图,根据阳性对照蛋白值得出每个样本的IOD值,进行定量分析(见表7、图17)。

11.2相对定量后比较各组兔NF-κBp65蛋白表达量

模型组与空白对照组兔相比,主动脉NF-κBp65表达量增多,但并无统计学差异(P＝0.169,P>0.05),各给药组与模型组相比蛋白表达量减少,其中芎栀大剂量组(P＝0.035,P<0.05)、辛伐他汀组(P＝0.001,P<0.01)与模型组相比下降更明显,有统计学差异,且辛伐他汀组表达量更低。

12.各组兔主动脉NF-κBmRNA表达水平比较

Real-timePCR结果示模型组NF-κBmRNA表达与空白对照组相比略有减少,但无统计学差异(P＝0.893,P>0.05)。芎栀大剂量组表达量较模型组增加(P＝0.031,P<0.05),各给药组基因表达量与空白对照组相比无明显差异(P>0.05),如表7、图18。

表7 各组兔动脉壁NF-κB及其mRNA相对表达量比较

注:与模型组比▲P<0.05,▲▲P<0.01。

13.芎栀胶囊对AS兔血浆PON1及MPO水平的影响

如图19、20及表8,各治疗组兔PON1水平无明显差异(P>0.05),模型组兔与空白对照组兔血浆PON1亦无差异(P＝0.697,P>0.05)。模型组兔血浆MPO水平与空白对照组相比明显升高(P＝0.025,P<0.05),各治疗组兔较模型组相比血浆MPO水平均有一定程度的下降。其中芎栀中剂量组及大剂量组、辛伐他汀组下降更为明显,与模型组相比有统计学差异(P＝0.028,P＝0.013,P<0.05；P＝0.004,P<0.01),芎栀中、大剂量组与辛伐他汀组比较无差异(P>0.05)。

表8.各组兔血浆PON1及MPO水平比较 (单位:ng/ml)

注:与空白对照组比△P<0.05；与模型组比▲P<0.05,▲▲P<0.01。

通过以上实验，可以得到以下结果：

研究显示：芎栀胶囊能够抑制AS兔主动脉斑块形成,减少动脉壁细胞内脂质沉积。

研究显示：.芎栀胶囊能够通过保护AS兔主动脉平滑肌细胞内cav-1蛋白表达,增加主动脉细胞内胆固醇跨膜转运促进细胞内胆固醇流出,从而减少主动脉细胞内TC及FC含量，起到抗AS作用。

研究显示：芎栀胶囊能够促进AS兔肝脏表达LXRα,促进肝脏内胆固醇代谢,推动RCT过程,其对SR-BⅠ促进作用不明显。

研究显示，芎栀胶囊能够降低AS兔血浆IL-2、TNF-α水平,降低主动脉细胞核内NF-κB p65的活性水平,抑制AS中的炎症反应。

研究显示，芎栀胶囊能够降低AS兔血浆中MPO水平,保护HDL抗炎功能,维持其正常运载脂质的作用,其对血浆PON1水平作用不明显。

以上实验研究结果说明芎栀胶囊治疗老年高血压是通过多种作用途径来实现的，并且药物安全可靠，各组分相互间具有协同增效作用。

附图说明

图1.各组兔主动脉AS病变大体样本比较

1.空白对照组 2.模型组 3.芎栀小剂量组 4.芎栀中剂量组 5.芎栀大剂量组 6.辛伐他汀组

图2.各组兔主动脉AS的HE染色比较(×100)

1.空白对照组 2.模型组 3.芎栀小剂量组 4.芎栀中剂量组 5.芎栀大剂量组 6.辛伐他汀组

箭头所示为动脉管壁斑块,其长度与斑块厚度相关。

图3.各组兔主动脉AS油红O染色比较(×100)

1.空白对照组 2.模型组 3.芎栀小剂量组 4.芎栀中剂量组 5.芎栀大剂量组 6.辛伐他汀组

箭头所示为动脉管壁斑块,其长度与斑块厚度相关。

图4各组兔主动脉平滑肌细胞内总胆固醇(TC)/游离胆固醇(FC)含量(单位:mmol/l)

注:▲▲与空白对照组比P<0.01；与模型组比P<0.05,P<0.01。

图5.各组间cav-1/亲环素A蛋白表达(WB)

A 空白对照组；B模型组；C芎栀小剂量组；D芎栀中剂量组；E芎栀大剂量组；F辛伐他汀组，

图6.各组间cav-1/cav-1mRNA表达量比较

注:▲与空白对照组比P<0.05；与模型组比P<0.05,P<0.01。

图7.各组间亲环素A/亲环素A mRNA表达量比较

注:▲与空白对照组比P<0.05；与模型组比P<0.05,P<0.01。

注:与空白对照组比△P<0.05,△△P<0.01；与模型组比▲P<0.05,▲▲P<0.01。

图8各组AS兔肝脏LXRα水平比较(单位:ng/ml)

注:与模型组比P<0.01。

图9各组AS兔肝脏LXRαmRNA水平比较

注:▲▲与空白对照组比P<0.01。

图10.各组间肝脏SR-BⅠ蛋白表达(WB)

A 空白对照组；B模型组；C芎栀小剂量组；D芎栀中剂量组；E芎栀大剂量组；F辛伐他汀组

图11各组AS兔肝脏SR-BⅠ及SR-BⅠmRNA水平比较

注:▲与空白对照组比P<0.05,与模型组比P<0.05。

图12.不同时间段各组兔IL-2均值水平图。

注:1.空白对照组 2.模型组 3.芎栀小剂量组 4.芎栀中剂量组 5.芎栀大剂量组

6.辛伐他汀组

图13.不同时间段各组兔TNF-α均值水平图。

注:1.空白对照组 2.模型组 3.芎栀小剂量组 4.芎栀中剂量组 5.芎栀大剂量组

6.辛伐他汀组

图14.NF-κBp65蛋白表达(1)

各泳道对应样本:泳道A阳性对照6789.5,泳道B阴性对照,泳道C冷探针竞争泳道1-23目的基因 1.空白对照组 2.模型组 3.芎栀小剂量组

图15.NF-κBp65蛋白表达(2)

各泳道对应样本:泳道A阳性对照6654.43,泳道B阴性对照,泳道C冷探针竞争泳道1-18目的基因 4.芎栀中剂量组 5.芎栀大剂量组

图16.NF-κBp65蛋白表达(3)

各泳道对应样本:泳道A阳性对照 4998.2,泳道B阴性对照,泳道C冷探针竞争泳道1-9目的基因 6.辛伐他汀组

图17.各组AS兔NF-κBp65蛋白水平比较

注:与模型组比P<0.05,P<0.01。

图18.各组AS兔NF-κBmRNA转录水平比较

注:与模型组比P<0.05

图19.各组兔血浆PON1水平

图20.各组兔血浆MPO水平

注:▲与空白对照组比P<0.05；与模型组比P<0.05,P<0.01。

具体实施方式

以下通过实施例进一步说明本发明，但不限于下列实施例：

实施例1

一种中药胶囊剂，由四种中药材川芎，栀子，决明子，杜仲，制备而成，其组分配比(重量份)以生药计：川芎，栀子，决明子，杜仲，＝30％:20％:30％:20％制备方法如下：

取川芎饮片，稍粉碎，用95％乙醇于索氏回流提取装置中回流提取9小时。溶媒用量为8～10倍。提取液用布氏抽滤器抽滤，抽滤液减压浓缩至干，再加适量水，加热使溶解，抽滤，滤液回到已处理好的大孔树脂柱(干膏和树脂的比例为1：15～1：20)上，控制加样流速为3秒/滴，慢慢滴加完后，先用水洗，(1～2秒/滴)洗至还原糖反应呈阴性，(1ml水洗脱液加入甲基萘酚0.5％试液2～3滴。沿试管壁缓缓加入0.5ml浓硫酸，阴性为二界面处出现棕色环)约用30％乙醇洗脱至无色，合并30％乙醇洗脱液减压回收乙醇，冷却后用乙醚萃取，醚提取液用1N硫酸溶液萃取，酸液经饱和碳酸钠溶液碱化至pH9～10。用氯仿提取，提取液减压回收氯仿至干，得到总生物碱。取总生物碱石油醚溶解部分，减压蒸发石油醚，得橙黄的膏状物，上碱性AL2O3柱，层析分离，石油醚－氯仿(8∶2)的洗脱部分，减压浓缩，经升华结晶得无色的针状结晶，即得。

取栀子果实粗粉，加乙醇乙酯回流提取5h，趁热抽虑后，冷却，用水萃取，收集水相，减压干燥得到粘稠状浓缩物，即得。

取决明子粗粉，用水提取三次，第一次8倍量水(1.5小时)，第二次6倍量水(1小时)，第三次6倍量水(45分)，过滤，合并提取液，放冷，经wld树脂吸附。先用水冲洗至近无色，再用70％的乙醇冲洗至近无色，回收乙醇，浓缩，干燥，即得。

取杜仲叶干粉，水浴加热，乙醇回流提取；提取液经粗滤，于60℃减压浓缩，回收乙醇；加蒸馏水，搅拌后静置2h，超滤,取上清液，浓缩干燥，备用；

把上述制备的中药活性物质混合均匀装入胶囊，再装入瓶中密封。

实施例2

颗粒剂的制备：

以实施例1中的中药活性物质为原料，混合均匀，加入辅料，以乙醇适量制软材，制颗粒，低温干燥，整粒后，分装成袋。

实施例3

片剂的制备：

以实施例1中的中药活性物质为原料，混合均匀，加少量硬酯酸镁及其他辅料，压制成片，分装成袋。

实施例4

软胶囊剂的制备，

以实施例1中的中药活性物质为原料，混合均匀，装入软胶囊。

实施例5

滴丸剂的制备，

以实施例1中的中药活性物质为原料，混合均匀，制备成滴丸。

实施例6

一种中药胶囊剂，由四种中药材川芎，栀子，决明子，杜仲，制备而成，其组分配比(重量份)以生药计：

各组分的制备方法同实施例1.

实施例7

一种中药胶囊剂，由四种中药材川芎，栀子，决明子，杜仲，制备而成，其组分配比(重量份)以生药计：

各组分的制备方法同实施例1。