重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶在修复玫瑰痤疮皮损中的应用的制作方法

本发明属于医药领域，涉及一种药物的新用途，尤其是涉及一种修复玫瑰痤疮皮损的药物及临床中的应用。

技术背景

玫瑰痤疮是一种常见的慢性炎症性皮肤病，累及面部皮肤血管和毛囊皮脂腺。玫瑰痤疮的发生与遗传、皮肤屏障的破坏、神经与免疫、血管与淋巴管改变等有关，皮损以一过性或持久性红斑、毛细血管扩张、丘疹及脓疱及鼻赘等为特点。玫瑰痤疮的病理学改变因病期而不同。红斑与毛细血管扩张主要表现为真皮内毛细血管扩张，血管周围非特异性炎症浸润。丘疹皮损中可见真皮内弥漫性炎性细胞浸润，毛囊或皮脂腺周围有大量淋巴细胞，少量组织细胞和浆细胞，部分病例可见上皮样细胞和巨噬细胞，可见毛囊周围炎伴毛囊内肉芽肿形成。鼻赘期主要是皮脂腺增多，腺体增大，腺口扩张并充满角质细胞和皮脂，并有皮下结缔组织增生和毛细血管扩张，血管周围炎性细胞浸润或毛囊内肉芽肿形成。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子（recombinantbovinebasicfibroblastgrowthfactor，rbfgf）（珠海亿胜生物制药有限公司）属于成纤维细胞生长因子类药物。重组牛碱性成纤维细胞生长因子应用于创面修复，主要用于烧伤创面、慢性创面治疗和新鲜创面及帕金森症等神系统疾病和角膜损伤修复的治疗，但其应用于玫瑰痤疮皮损的修复还未见报道。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶在修复玫瑰痤疮皮损中的应用，所要解决的技术问题是扩大重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗范围、提高玫瑰痤疮的临床治愈率、缩短玫瑰痤疮的治疗时间。

玫瑰痤疮部分患者皮损不经重组牛碱性成纤维细胞生长因子修复会出现破溃、形成瘢痕，严重影响了患者的身心健康。我们将重组牛碱性成纤维细胞生长因子应用于临床治疗玫瑰痤疮，观察其治疗效果，发现有确切的治疗作用（图2-6），重组牛碱性成纤维细胞生长因子可明显提高患者的生活质量，有益于患者身心健康。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子能促进血管、组织再生，阻止皮损进一步发展，甚至完全修复玫瑰痤疮皮损。

本发明的机理说明

已发现的碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor，简写为bfgf）参与体内多种组织的创伤修复过程，是重要的创伤愈合因子之一，具体如下：趋化作用，吸引炎性细胞、成纤维细胞进入创面，对抗炎症反应；促进创面毛细血管再生，改善局部血液循环；直接刺激成纤维细胞和细胞外基质的蛋白合成，以形成胶原蛋白，增加创面抗张力强度；诱导临近细胞产生细胞因子；促进真皮细胞的移行、分裂、分化。综上所述，bfgf能促进皮肤的修复，从而加速创面愈合。大量基础研究和临床试验证实，碱性成纤维细胞生长因子对烧伤、外伤及各种慢性难愈合创面具有显著的促修复作用，并且安全、有效、无不良反应。

而本发明所述的重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶对来源于中胚层和外胚层的细胞（如上皮细胞、真皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等）具有促进修复和再生作用。

所述重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶为外用制剂。

所述重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶的成份及理化特性为：

成份：主要成份为重组牛碱性成纤维细胞生长因子，系由含有高效表达牛碱性成纤维细胞生长因子基因的大肠杆菌，经发酵、分离和高度纯化后制成。辅料为蛋白保护剂（人血白蛋白），凝胶基质（羟丙基甲基纤维素和卡波姆），ph调节剂（氢氧化钠或盐酸）适量，加工而成。

性状：无色透明凝胶。

规格：21000iu/5g/支。

用法用量：温度适中的清水洁面后，将重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶直接涂擦于皮损处，300iu/cm²，每日2次，2周为1个疗程。

贮藏：2～8℃避光保存和运输。

包装：铝质软管，每盒1支。

注意事项：本品为无菌包装，操作过程中，尽量保持无菌；勿将本品置于高温或冷冻环境中；高浓度碘酒、酒精、双氧水、重金属等蛋白变性剂会影响本品活性，常规清创后用生理盐水冲洗后在使用本品；运动员慎用。

附图说明

图1为显微镜下观察到的玫瑰痤疮皮损病理图。

图2为面部红斑丘疹玫瑰痤疮皮损修复前后对比图。

图3为口周红斑丘疹玫瑰痤疮皮损修复前后对比图。

图4为面部弥漫性红斑丘疹玫瑰痤疮皮损修复前后对比图。

图5为面部鳞屑性红斑丘疹玫瑰痤疮皮损修复前后对比图。

图6为面部弥漫性红斑玫瑰痤疮皮损修复前后对比图。

具体实施方式

以下用临床试验案例对本发明作进一步阐述：

我们对2015年3月至2015年12月期间在我院皮肤科门诊进行治疗的205例丘疹脓疱型玫瑰痤疮患者，其中女性151例，男性54例，随机分为两组：重组牛碱性成纤维细胞生长因子修复组103人；无修复空白组102人。修复组使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶局部涂抹于皮损处，空白组不使用任何外用药物，2周后观察疗效。修复组患者皮损均有不同程度好转，总有效率为82.35%～98.33%（表一）；空白组患者总有效率为18.99%～66.67%（表二），对比修复组和空白组的疗效指数（表三），可见使用重组牛碱性细胞生长因子可使玫瑰痤疮皮损的红斑、丘疹、脱屑及干燥明显地好转。

上述使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶103人与无修复空白组102人相比较，其临床试验表明：重组牛碱性成纤维细胞生长因子对玫瑰痤疮皮损具有显著的修复作用。

以下为临床观察典型病例

1、王某，女，44岁，2015年3月因“口周反复红斑丘疹伴痒1月”就诊于兰州总医院皮肤科门诊，诊断为“玫瑰痤疮”，患者面色暗沉，自觉面部干燥，有紧绷感，使用温度适中的清水洁面后，将重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶直接涂擦于皮损处，300iu/cm²，早、晚各1次，治疗2周，面部皮损基本消失，患者自觉面部瘙痒、紧绷感明显缓解，肤色好转，面部继续用药2周，面部皮损痊愈，随访12月皮损无复发（图3）。

2、张某，女，37岁，2015年3月因“面部弥漫性红斑丘疹2月”就诊于兰州总医院皮肤科门诊，诊断为“玫瑰痤疮”，使用温度适中的清水洁面后，将重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶直接涂擦于皮损处，300iu/cm²，早、晚各1次，治疗2周后，皮损基本消失，患者自觉面部感觉细腻，随访12月皮损无复发（图4）。

3、李某，女，40岁，2015年5月因“面部鳞屑性红斑丘疹伴痒、烧灼感半年”就诊于兰州总医院皮肤科门诊，诊断为“玫瑰痤疮”，患者自诉有时瘙痒难以忍受，使用温度适中的清水洁面后，将重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶直接涂擦于皮损处，300iu/cm²，早、晚各1次，治疗2周后，面部鳞屑减少，患者自觉面部瘙痒、烧灼感缓解，面部皮肤不再干燥，继续用药2周，面部红斑丘疹消失，继续巩固用药2周，患者皮损痊愈，随访12月皮损无复发（图5）。

4、于某，女，26岁，2015年6月因“面部弥漫性红斑半月”就诊于兰州总医院皮肤科门诊，诊断为“玫瑰痤疮”，患者面部颜色暗沉，使用温度适中的清水洁面后，将重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶直接涂擦于皮损处，300iu/cm²，早、晚各1次，治疗2周后，面部红斑消退，自诉皮肤较前光滑、细腻，有光泽，随访12月皮损无复发（图6）。

本发明应用于临床的试验观察步骤如下：

（1）临床资料：我们选取2015年3月至2015年12月期间在我院皮肤科门诊进行治疗的205例玫瑰痤疮患者，其中女性151例（73.66%），男性54例（26.34%），年龄20～45岁之间，平均（32.05+7.68）岁，病程0.11～20年，平均（3.52+4.12）年。所有患者随机分为两组：重组牛碱性成纤维细胞生长因子修复组103人；无修复空白组102人。两组患者一般临床资料相比，无显著性差异（p＞0.05），具有可比性。修复组使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶局部涂抹于皮损处，300iu/cm²，每日2次，2周为1疗程，疗效不明显者可适当延长疗程；空白组未使用任何外用药物。

（2）试剂和材料

重组牛碱性成纤维细胞生长因子21000iu/5g/支（生产企业：珠海亿胜生物制药有限公司）

（3）入组标准

纳入标准：临床表现符合玫瑰痤疮：在红斑的基础上成批出现痤疮样丘疹，无粉刺形成。

排除标准：孕妇和哺乳期妇女；合并有心血管、肝、肾和造血系统等严重原发性疾病患者；精神病、肿瘤病患者；曾诊断和治疗过玫瑰痤疮的患者；既往对重组牛碱性成纤维细胞生长因子过敏的患者。

所有入组患者均签署知情同意书。

（4）治疗方法

修复组：温度适中的清水洁面后，将重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶直接涂擦于皮损处，300iu/cm²，每日2次，2周为1个疗程；

空白组：不使用任何药物；

修复完成后随访12月。

（5）观测指标和疗效评定标准。

所有患者在重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗前后均由固定医生对其皮损进行评分，指标包括红斑、丘疹、脱屑、干燥，各指标均按照四级评分法进行评分：无计0分、轻度计1分、中度计2分、重度计3分。

疗效指数=（修复前-修复后）总积分/修复前总积分×100%。

痊愈：疗效指数≥90%，皮损临床表现为皮损基本消退；

显效：60%≤疗效指数<90%，皮损大部分消退；

好转：30%≤疗效指数<60%，皮损有所减轻；

无效：疗效指数<30%，皮损无明显改善。

总有效率按痊愈加显效计。

（6）结果

表一.rbfgf修复组2周后各项指标情况表（单位：人）

表二.无修复空白组2周后各项指标情况表（单位：人）

表三.修复组与空白组的皮损修复有效率对比表（单位：%）

从表3的各项指标的对比，可得出重组牛碱性成纤维细胞生长因子修复组患者的观测指标红斑、丘疹、脱屑、干燥的总有效率分别为97.09%、82.35%、98.33%、97.50%，空白组患者的观测指标红斑、丘疹、脱屑、干燥的总有效率分别为24.51%、66.67%、52.08%、18.99%。经х²检验可知，修复组的红斑、丘疹、脱屑、干燥四项观测指标的效果均好于空白组（p＜0.05）。据此可见，重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶可使玫瑰痤疮表现为红斑、丘疹、脱屑及干燥的皮损明显好转，重组牛碱性成纤维细胞生长因子能促进上皮细胞、真皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等细胞的修复和再生，而且治疗周期短，副作用小。