多价肺炎球菌多糖结合疫苗及其制备方法与流程

文档序号:14660468发布日期:2018-06-12 17:41阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物,其特征在于由来自于肺炎链球菌的多糖与蛋白质组成缀合物,所述的多糖属于血清型为1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、16F、17F、18C、19A、19F、20、20F、23A、23F和33F的荚膜多糖。

2.根据权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物,其特征在于所述的蛋白质为CRM197蛋白。

3.一种制取权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物的方法,其特征在于:

将灭活的肺炎球菌离心,收集上清液,经超滤浓縮,加入十六烷基三甲基溴化铵,离心收集上清液;经离心的上清液经过几次乙醇沉淀后,离心收集沉淀即为粗制多糖;

将粗制多糖溶于水,经超滤膜浓缩透析,除菌过滤后上羟基磷灰石柱层析柱,分别收集各种组分,经超滤膜浓缩透析,透析收集液中加入乙醇,离心收集沉淀,即得精制的荚膜多糖;

将26种经纯化的血清型肺炎链球菌荚膜多糖或其各自降解的多糖分别制成浓度为5~10mg/ml的多糖溶液,然后向多糖溶液中分别加入50mg/ml~100mg/ml激活剂,后用0.2mol/L的三乙胺或氢氧化钠调整pH值,活化1分钟~5分钟后加入载体蛋白,再次用0.2mol/L的三乙胺或氢氧化钠调整pH值至8.90~9.60,室温下反应30分钟~60分钟,加入终止剂后再反应16小时~24小时,即得结合物原液。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于所述的各种组分为流穿液和1~3个柱体积的淋洗液。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于激活剂选自于1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟硼酸、溴化氰和高碘酸钠之一种或几种。

6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于所述的激活剂用量为多糖总量的50w/w%~100w/w%。

7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于所述的多糖与CRM197蛋白相互作用的pH为8.70~9.70。

8.根据权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物在制备肺炎链球菌结合疫苗中的应用。

9.一种肺炎链球菌结合疫苗,其特征在于包括权利要求1所述的具有免疫原性的多糖-蛋白质缀合物。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1