本发明涉及一种紫苏叶注射液的制备方法。
背景技术：
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄类动物疾病。口蹄疫是影响畜牧业发展的最重要的动物传染病，在世界动物卫生组织列为A类传染病中的头号传染病，在我国，该病也列为一类动物疫病。口蹄疫的爆发会给当地畜牧业造成严重的损失。2001年英国爆发口蹄疫瘦隋，扑杀700万头牲畜，造成85亿英镑的损失，同时，该疫情还波及法国、荷兰、爱尔兰等国，这些国家共扑杀多达36万头牲畜。在发展中国家，注射口蹄疫疫苗是预防口蹄疫最有效的措施之一。但由于口蹄疫病毒是RNA病毒，病毒的基因和病毒的抗原特性改变很快，因此，这显著增加了研制高效的口蹄疫疫苗的难度。虽然发达国家采用动物扑杀可以有效预防El蹄疫，但一旦爆发口蹄疫，大量没有免疫的动物面临更大的感染风险口。因此，口蹄疫的防控依然是畜牧业中动物疫控研究最重要的研究课题之一。采用有效的卫生措施也是预防口蹄疫的技术措施之一。口蹄疫病毒是一种对酸高度敏感的病毒。这是因为口蹄疫病毒在酸性条件下脱下蛋白衣壳进行繁殖；如果它还没有侵染进入动物细胞，提前脱下蛋白衣壳将会影响病毒的繁殖而导致病毒的死亡。中草药红茶菌是一种利用红茶菌发酵茶叶、罗汉果、甘草、野菊花等中草药提取液的新型红茶茵菌液。由于它保留了红茶菌的产酸特性，因此中草药红茶菌制剂可以体外有效杀灭口蹄疫病毒。茶叶、罗汉果、甘草、野菊花是一些具有药食两用的中草药植物，这些植物的提取液普遍具有提高动物免疫力、拮抗病原细菌、病毒等方面的作用。
技术实现要素：
本发明提出一种紫苏叶注射液的制备方法。
一种紫苏叶注射液的制备方法，包括以下步骤：
（1）取紫苏叶放入烘箱中35℃烘干，用中草药粉碎机进行初步粉碎，最后过40目筛得到粗粉；
(2)精确称取紫苏叶粗粉400g置于圆底烧瓶中，按物料液比1：12(W／V)，于100℃下热水浸提4次，每次1h，每次之间用纱布进行粗滤，合并提取液，旋转蒸干多余水分，即得紫苏叶浸膏；
(3)在制备的紫苏叶浸膏中加入60％的乙醇溶液，静置24h；
（4）待沉淀稳定析出后用滤纸过滤，利用水提醇沉原理除去部分杂质，并用旋转蒸发仪回收溶液中的乙醇；
（5）用18％的盐酸调节pH值至2.0～2.5，按照料液比5：3的比例，加入乙酸乙酯多次萃取，直到乙酸乙酯层溶液无色为止；
（6）合并萃取液，旋转蒸干乙酸乙酯，即得紫苏叶迷迭香酸萃取物；
（7）在制备好的紫苏叶迷迭香酸萃取物中加入0.9％氯化钠注射液360ml溶解浸膏，并同时加入亚硫酸氢钠0.1％、苯酚0.25％分别作为抗氧化剂和抑菌剂，在0．45微米的微孔滤膜抽滤，用盐酸调节pH值至6．0；
（8）以注射用水定容至l000ml，充分振荡混匀，无菌分装，在121℃环境下湿热灭菌30min，后即得，封蜡避光保存。
优选地，所述步骤步骤（5）中PH值调节为2.5。
本发明所述方法制备的紫苏叶注射液，安全性好，刺激好，本发明所述方法降低了能耗，节省了成本，可实用性强，可工业化生产。
具体实施方式
实施例1。
一种紫苏叶注射液的制备方法，包括以下步骤：
（1）取紫苏叶放入烘箱中35℃烘干，用中草药粉碎机进行初步粉碎，最后过40目筛得到粗粉；
(2)精确称取紫苏叶粗粉400g置于圆底烧瓶中，按物料液比1：12(W／V)，于100℃下热水浸提4次，每次1h，每次之间用纱布进行粗滤，合并提取液，旋转蒸干多余水分，即得紫苏叶浸膏；
(3)在制备的紫苏叶浸膏中加入60％的乙醇溶液，静置24h；
（4）待沉淀稳定析出后用滤纸过滤，利用水提醇沉原理除去部分杂质，并用旋转蒸发仪回收溶液中的乙醇；
（5）用18％的盐酸调节pH值至2.0～2.5，按照料液比5：3的比例，加入乙酸乙酯多次萃取，直到乙酸乙酯层溶液无色为止；
（6）合并萃取液，旋转蒸干乙酸乙酯，即得紫苏叶迷迭香酸萃取物；
（7）在制备好的紫苏叶迷迭香酸萃取物中加入0.9％氯化钠注射液360ml溶解浸膏，并同时加入亚硫酸氢钠0.1％、苯酚0.25％分别作为抗氧化剂和抑菌剂，在0．45微米的微孔滤膜抽滤，用盐酸调节pH值至6．0；
（8）以注射用水定容至l000ml，充分振荡混匀，无菌分装，在121℃环境下湿热灭菌30min，后即得，封蜡避光保存。
实施例2。
一种紫苏叶注射液的制备方法，包括以下步骤：
（1）取紫苏叶放入烘箱中35℃烘干，用中草药粉碎机进行初步粉碎，最后过40目筛得到粗粉；
(2)精确称取紫苏叶粗粉400g置于圆底烧瓶中，按物料液比1：12(W／V)，于100℃下热水浸提4次，每次1h，每次之间用纱布进行粗滤，合并提取液，旋转蒸干多余水分，即得紫苏叶浸膏；
(3)在制备的紫苏叶浸膏中加入60％的乙醇溶液，静置24h；
（4）待沉淀稳定析出后用滤纸过滤，利用水提醇沉原理除去部分杂质，并用旋转蒸发仪回收溶液中的乙醇；
（5）用18％的盐酸调节pH值至2.0～2.5，按照料液比5：3的比例，加入乙酸乙酯多次萃取，直到乙酸乙酯层溶液无色为止；
（6）合并萃取液，旋转蒸干乙酸乙酯，即得紫苏叶迷迭香酸萃取物；
（7）在制备好的紫苏叶迷迭香酸萃取物中加入0.9％氯化钠注射液360ml溶解浸膏，并同时加入亚硫酸氢钠0.1％、苯酚0.25％分别作为抗氧化剂和抑菌剂，在0．45微米的微孔滤膜抽滤，用盐酸调节pH值至6.0；
（8）以注射用水定容至l000ml，充分振荡混匀，无菌分装，在121℃环境下湿热灭菌30min，后即得，封蜡避光保存。
本实施例所述步骤步骤（5）中PH值调节为2.5。