一种荸荠皮抗炎提取物及其制备方法与流程

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种荸荠皮抗炎提取物及其制备方法。

背景技术：

荸荠(eleochairistoberosa)，又名马蹄(waterchestnut)，是莎草科荸荠属多年水生草本植物荸荠的地下球茎，我国长江流域以南各省均有栽培。马蹄不仅汁多味甜，营养丰富，而且有良好的药用价值，自古有“地下雪梨”和“江南人参”的美誉。祖国传统医学认为，马蹄性寒味甘，有清热、化痰、消积等功效，能治疗黄疽、热淋、痞积、目赤、咽喉肿痛等症，乃药中佳品。《中药大辞典》记载，马蹄的活性组分富集于马蹄的果皮与果肉之间的部位。

中国的荸荠产量占世界95%以上。在荸荠加工过程中产生的废弃荸荠皮约占新鲜荸荠重量的30%。据不完全统计，我国现有荸荠种植面积超过50万亩，年总产量超过80万吨，这样每年产生的荸荠皮在24万吨以上。大量废弃的荸荠皮，不仅浪费资源，而且污染环境。开发利用废弃荸荠皮，有着重大的应用前景和实用意义。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种制备工艺简单的荸荠皮抗炎提取物的制备方法，所得的荸荠皮抗炎提取物抗炎活性好，为荸荠在抗炎药物或保健品研究中的应用奠定了一定的基础。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

一种荸荠皮抗炎提取物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将荸荠皮粉碎后，置于微波-超声波协同萃取仪的萃取釜中，加入乙醇溶液进行微波-超声波协同萃取，将萃取液进行过滤，精馏滤液，得到粗制提取液；

（2）将步骤（1）得到的提取液置于分子蒸馏仪的反应釜中，进行分子蒸馏，收集馏余物，得到荸荠皮抗炎提取物。

优选的，所述步骤（1）中，所述荸荠皮为干燥后的荸荠皮，所述乙醇溶液的质量浓度为80～85%，所述干燥后的荸荠皮与乙醇溶液的质量比为1∶4～5。

优选的，所述步骤（1）中，萃取温度为室温，萃取时间为30min～60min，萃取压力1.0×10⁶pa～2.0×10⁶pa，微波辐射功率400～500w，超声功率为100w～150w。

优选的，所述步骤（2）中，所述分子蒸馏温度为43℃～48℃，蒸馏压力为150pa～250pa，进料速度为1.5ml/min～3ml/min，转速为200r/min～300r/min。

作为一个总的发明构思，本发明还提供一种荸荠皮抗炎提取物，所述荸荠皮抗炎提取物由上述的制备方法所制得。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

本发明通过微波的破壁效应和热效应以及超声波的空化作用和机械振动作用，加速荸荠果皮细胞中抗炎有效成分的溶出，并能避免高温对提取成分的影响；再以分子蒸馏技术将抗炎有效成分提取出来，与传统的分离方法相比，蒸馏温度低，且受热时间短，能避免高温对抗炎提取成分的影响。试验表明，制得的提取物抗炎活性好；实验结果显示：荸荠提取物具有抑制炎症介质no、pge2的作用，并且呈现剂量依赖性。证明荸荠提取物具有较好的抗炎作用，能有效抑制炎症介质的产生。

附图说明

图1为实施例1制备的荸荠抗炎提取物对lps诱导raw264.7细胞产生no的影响图。

图2为实施例1制备的荸荠抗炎提取物对lps诱导raw264.7细胞产生pge2的影响图。

具体实施方式

以下结合具体优选的实施例对本发明作进一步描述，但并不因此而限制本发明的保护范围。

实施例1：

一种荸荠皮抗炎提取物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将50g荸荠皮经高速中药粉碎机粉碎后，置于微波-超声波协同萃取仪的萃取釜中，加入200g质量百分比浓度95%的乙醇溶液，进行微波-超声波协同萃取，萃取温度为室温，萃取时间30min，萃取压力1.21×10⁶pa，微波辐射功率为500w，超声功率为100w。萃取完毕后将萃取液进行过滤，精馏滤液，得到粗制提取液；

（2）将步骤（1）得到的提取液置于分子蒸馏仪的反应釜中，进行分子蒸馏，分子蒸馏温度为45℃，蒸馏压力为200pa，进料速度为2.0ml/min，转速为200r/min，收集馏余物，得到荸荠皮抗炎提取物。

本实施例的荸荠抗炎提取物的体外抗炎实验

1、细胞株，试剂以及仪器

小鼠巨噬细胞raw264.7，dmem培养基(美国gibico公司)，胎牛血清(天津市灏阳生物制品科技有限公司)，胰蛋白酶(美国sigma公司)，dmso（分析纯，amresco），青霉素(sigma)，链霉素（sigma），大肠杆菌来源lps（amresco），96孔板，co2培养箱(日本sanyo公司)，96孔板酶标仪bio-rad680(美国bio-rad公司)，生物操作台（吴江市绿岛净化设备厂）。

2、巨噬细胞培养方法

基础培养基dmem+10%fbs（胎牛血清）+1%双抗青链霉素，培养条件为37℃，5%co2浓度及饱和湿度；当细胞生长至对数期时，用胰蛋白酶消化细胞，洗涤吹散细胞，以每孔1×10⁴个细胞100μl接种于96孔板，以备实验。

3、no含量检测

将处于对数生长期的小鼠巨噬细胞raw264.7，铺板于96孔板培养30min。在0.1μg/mllps存在的条件下，以不同浓度（50-300μg/ml）的荸荠提取物孵育细胞24小时。采用greiss试剂，通过no2^-的标准曲线定量分析raw264.7细胞产生的no量。结果如图1所示，由图可知，本实施例制备的荸荠提取物具有抑制炎症介质no的作用，并且呈现剂量依赖性。证明荸荠提取物具有较好的抗炎作用，能有效抑制炎症介质no的产生。

4、前列腺素e2（pge2）含量检测：

将处于对数生长期的小鼠巨噬细胞raw264.7，铺板于96孔板培养30min。在0.1μg/mllps存在的条件下，以不同浓度（50-300μg/ml）的荸荠提取物孵育细胞24小时。离心收集培养上清液,检测pge2浓度。结果如图2所示，由图可知，本实施例制备的荸荠提取物具有抑制炎症介质pge2的作用，并且呈现剂量依赖性。证明荸荠提取物具有较好的抗炎作用，能有效抑制炎症介质pge2的产生。

以上所述，仅是

本技术：
的较佳实施例，并非对本申请做任何形式的限制，虽然本申请以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限制本申请，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本申请技术方案的范围内，利用上述揭示的技术内容做出些许的变动或修饰均等同于等效实施案例，均属于技术方案范围内。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种荸荠皮抗炎提取物的制备方法，包括以下步骤：（1）将荸荠皮粉碎后，置于微波‑超声波协同萃取仪的萃取釜中，加入乙醇溶液进行微波‑超声波协同萃取，将萃取液进行过滤，精馏滤液，得到粗制提取液；（2）将步骤（1）得到的提取液置于分子蒸馏仪的反应釜中，进行分子蒸馏，收集馏余物，得到荸荠皮抗炎提取物。该方法制备工艺简单，所得的荸荠皮抗炎提取物抗炎活性好，为荸荠在抗炎药物或保健品研究中的应用奠定了一定的基础。

技术研发人员：杨金凤
受保护的技术使用者：贺州学院
技术研发日：2017.10.12
技术公布日：2018.01.12