1,3,4-三-O-(E)-咖啡酰基-β-D-葡萄吡喃糖在制备降糖药或食品的用途的制作方法

文档序号:14365574阅读:384来源:国知局

本发明涉及从植物中提取1,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖在制备降糖药或食品的用途。



背景技术:

假升麻(aruncussylvesterkostel.),属蔷薇科(rosaceae)绣线菊亚科(spiraeoideaeagardh)假升麻属(aruncusadans.)。假升麻的干燥根被称为“金毛三七”,常常作为中国传统中药应用于治疗肌肉劳损,有舒筋活络的功效。

中国专利zl201310134172.3公开了抗氧化活性化合物及用途,其中一种抗氧化活性化合物为1,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖,并公开了其“在制备抗氧化药物、食品或化妆品中的应用。”目前,尚未有该化合物抗α-葡萄糖苷酶生物活性的报道。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供1,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖在制备降糖药或食品的用途。

本发明的技术方案概述如下:

1,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖在制备降糖药或食品的用途,所述1,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖如式(i)所示:

实验证明,1,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖对α-葡萄糖苷酶抑制活性远优于阿卡波糖。可以制备降糖药或降糖食品。

具体实施方式

下面对过具体实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

式i所示的1,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖的制备按照中国专利zl201310134172.3说明书实施例1制备。

实施例1

本发明是以假升麻干燥块根为原料,粉碎,依次用2.5倍量的体积浓度为95%、95%和60%的乙醇水溶液回流提取3次,每次2小时,过滤,合并提取液,减压回收至无醇味,残留物分散至蒸馏水中配成体积浓度为40%的水混悬液,依次用石油醚,乙酸乙酯进行萃取,乙酸乙酯萃取部分减压回收至干,经多次硅胶柱色谱,聚酰胺柱色谱,得到两种苯丙素类化合物,采用了核磁共振光谱技术,确定了该化合物的结构。得到化合物i和化合物ii。

物理常数光谱数据如下:

化合物i:黄色无定形粉末,meoh;分子式c33h30o15;1hand13cnmr:见表1and表2.

表1化合物i的氢谱数据

表2化合物i的碳谱数据

实施例2

α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定方法

反应溶液的制备

配制磷酸缓冲液:称取1.167g的磷酸氢二钾和0.9118的磷酸二氢钾,加适量蒸馏水溶解,再用容量瓶定容至100ml,配置成ph=6.8的磷酸盐缓冲液,备用。

配制底物pnpg(4-硝基苯基-α-d-吡喃葡萄糖苷)溶液:称取90.375mgpnpg,加适量磷酸盐缓冲液(ph=6.8)溶解,再用容量瓶准确定容到25ml,配制成12mmol/l的母液。再将母液稀释成4mmol/l的溶液,备用。

配制α-葡萄糖苷酶的酶溶液:将冻干酶粉(酶活力为14u/mg)用磷酸缓冲液(ph=6.8)溶解,配制成0.15u/ml的母液,备用。

配制na2co3溶液:称取2.12g无水na2co3于烧杯中,加适量蒸馏水溶解,并再用容量瓶定容至100ml,备用。

配制待测样品溶液(抑制剂):精确称取1mg的1,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖样品,加适量5%的dmso水溶液(v/v)溶解,再用容量瓶定容至10ml,配制成100μg/ml的母液。将母液用5%的dmso水溶液(v/v)分别稀释成0.5、1.0、1.5、2.0、2.5μg/ml五个不同梯度的标准品溶液,备用。

实验分为药物反应组、药物对照组、空白反应组和空白对照组,各反应物按下表中剂量在ep管中进行加样,每组3个平行。依次加入磷酸盐缓冲液、酶溶液、待测样品溶液和5%dmso水溶液,混合均匀后于37℃水浴保温10min。结束后,取出,加入pnpg溶液,充分混匀后于37℃水浴反应30min。结束后加入200μl的na2co3溶液中止反应。然后在紫外波长405nm处测定每组样品的吸光度,每组样品平行测定3次,取其均值。按式(1)计算各待测样品对dpph自由基的清除率。

式中:a1为药物反应组吸光度;a2为药物对照组吸光度;a3空白反应组吸光度;a4为空白对照组吸光度。

表3各组添加试剂及其计量(单位:μl)

表41,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖的实验测定结果

表5阿卡波糖的实验测定结果

将所得数据绘制浓度-吸光度曲线,拟合曲线方程,得到ic50值(半数抑制率),以阿卡波糖的ic50值为阳性对照。结果表明,1,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖具有很强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,可应用于抗糖尿病的食品和药品的制备。

表61,3,4-三-o-(e)-咖啡酰基-β-d-葡萄吡喃糖ic50值

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