用于检测癫痫发作和癫痫的生物标志物和方法与流程

文档序号：16989721发布日期：2019-03-02 00:52阅读：753来源：国知局

本申请主张2016年1月4日提交的美国临时申请号62/274,551和2016年1月4日提交的美国临时申请号62/274,578的权益，所述申请的完整内容通过引用并入本文。

政府支持

本发明是在美国国立卫生研究院授予的拨款号1r43ns079029-01a1下的政府支持进行的。政府可以具有本发明中的某些权利。

发明领域

癫痫性癫痫发作难以诊断，并且经常难以与具有相似表现的几种病况区分开，因此，癫痫发作的诊断经常是漫长、昂贵且不可靠的过程。预测模型(evoscore^tm)使临床医生能够通过排除癫痫来快速对患者进行分类。预测模型将允许患者立即进行至最有可能导致有效治疗的诊断方案，节省大量时间和金钱，并使患者节约免于不必要的测试。

本教导通常涉及与炎症和癫痫发作相关的生物标志物，以及通过对来自受试者样品的定量数据集进行评分来表征生物学病况的方法以及本文所述的各个其他实施方案。

本申请涉及在所有临床设置中的癫痫发作和癫痫诊断和病因学分类的血液测试。在一些实施方案中，提供了指示癫痫发作或具有癫痫发作的倾向的个别生物标志物和生物标志物的组/阵列，包括用于检测癫痫发作的方法，用于评价治疗癫痫发作的有效性、具有癫痫发作的倾向或治疗导致癫痫发作的任何潜在病症的方法以及诊断试剂盒。在其他实施方案中，提供了预测模型，其提供预测与癫痫发作和癫痫相关的阶段性和强直性变化的定量和定性评分。该评分可用于通过提供数字“定量”或高、中或低“定性”或正或负“定性”来评定阶段性和强直性变化的等级和/或测量阶段性和强直性变化，划入或排除事件，评估患者生活质量和治疗有效性。

发明背景

癫痫发作和癫痫是非常常见的神经系统病症，其与显著的发病率、健康护理成本和甚至死亡率相关。癫痫是偏头痛、中风和阿尔茨海默氏症后第四常见的神经系统病症。癫痫是一种常见的神经系统疾病，其影响美国超过230万患者和全球6500万患者，具有巨大的经济负担。目前的估计是癫痫影响世界人口的大约1％。目前治疗癫痫的总活动病例的患病率为1780万，其中印度(750万)，中国(490万)和美国(230万)领先于其他国家。癫痫护理的经济负担是巨大的，其中由适当诊断所需的测试贡献主要费用。据估计，美国的癫痫和癫痫发作引发直接和间接成本的176亿美元的估计每年成本。为具有癫痫发作的患者提供护理的主要限制是缺乏诊断性血液测试以将临床事件鉴定为癫痫发作而不是其他病症，诸如短暂性脑缺血发作、昏厥、睡眠障碍和精神性事件。

由自发性和复发性癫痫发作定义的癫痫是一种非常普遍的公共健康问题。也称为“癫痫发作病症”，直到患者已具有两次不是由已知的医学病况引起的癫痫发作之后才诊断出癫痫。在70％的新病例中，没有原因是明显的。大约30-50％的已具有单次无端癫痫发作的人将发展复发性癫痫发作(癫痫)。三分之一的具有癫痫的患者忍受不受控制的癫痫发作，因为没有可用的治疗对他们起作用。

尽管许多研究已致力于开发新的抗癫痫药物(aed)，但“金标准”诊断方案–其经常取决于eeg-一直保持不变和不足。当患者呈现疑似癫痫发作时，诊断该事件是否由癫痫或另一病症引起的过程最经常是漫长且昂贵的。患者经历漫长的检查，其通常包括血液测试、成像研究、eeg和视频eeg(在可获得的情况下)。在其他医疗病况被“排除”的情况下，诊断经常是排除者之一；并且如果eeg记录癫痫性癫痫发作“事件”，则通常进行癫痫的明确诊断，尽管其通常在住院患者癫痫监测单元中漫长和昂贵的停留期间发生。

除了与健康系统长期接触相关的高成本之外，目前的癫痫诊断状态代表了另一个关键问题：在不存在良好的早期诊断分类工具的情况下，因其他潜在病况而经历怀疑的癫痫发作的患者可能用aed错误地过度治疗或治疗不足，在此时间期间，他们的潜在病况实际上仍未得到治疗，同时他们经历不期望的药物副作用。因此，患者的病况(无论癫痫与否)的及时诊断仍然是重要的未满足的医疗需求。

癫痫诊断方法

准确诊断癫痫是非常有挑战性和耗时的，因为临床医生很少观察到实际的癫痫发作，而且存在许多不同类型的癫痫发作和癫痫综合征，其具有不同的表现。此外，其他神经系统病症可以模拟癫痫发作，导致错误诊断，不适当的治疗(其具有显著的潜在不良事件)，不正确的预后以及显著的医疗护理资源的浪费。临床事件，诸如运动障碍，例如震颤、抽动、运动障碍、昏厥/晕厥、短暂性脑缺血发作(tia)、睡眠障碍/异睡症和躯体精神障碍(somatiformpsychiatricdisorders)可以甚至被经验丰富的临床医生误认为是癫痫发作。对癫痫发作进行明确诊断对于长期患者健康和结果至关重要，这将导致早期治疗，随后的随访和监测、咨询和支持。目前，获得癫痫发作或癫痫的明确诊断对于患者是昂贵且不方便的，因为它可能需要住院患者评估和一系列昂贵的测试。癫痫的诊断多年来依赖于广泛昂贵且经常繁琐的医学神经学评估，其包括：

·“金标准”测试是脑电图(eeg)。如果在记录期间捕获癫痫发作，则癫痫发作活动将在eeg上显示为快速尖峰波。脑损伤，即肿瘤、中风，可以引起正常电脑节律的减慢。eeg的挑战在于其通常作为事后测定进行，即在临床事件结束后进行，并且实际上可能是正常的。连续eeg是在医院进行以获得延长的模式并试图在发生时“捕获”癫痫发作的24小时eeg。这需要昂贵的住院患者医院停留，并且无法确切知道在停留期间是否会发生临床事件。显然，这为门诊和急诊室(ed)设置中的护理人员提供了重大的后勤挑战，因为大多数患者在事件已结束后来到ed并且仅收集历史信息；单次癫痫发作的明确诊断基本上是不可能的，并且充其量是经验性的。eeg充其量只有约30％至50％的敏感度(测量正确鉴定的阳性比例)和50％特异性。

·病史，以确定围绕首次癫痫发作样事件、事件的持续时间和频率以及发病年龄的情况。经常，患者或护理人员无法给出准确诊断所需的细节水平。由于护理人员不在场或未能保持准确记录的事实，缺失的信息通常包括发病时间和事件持续时间。癫痫发作样事件是患者、护理人员和反应者的创伤性事件，其中第一反应是照顾患者而不是跟踪诊断所必需的时机或其他信息。

·实验室研究，包括全血计数(cbc)、化学代谢组(cmp)和毒理学筛选测试。这些不能诊断“癫痫发作”本身，而是可以提供解释神经功能障碍的线索。催乳素水平的测量是不可靠的。eeg用于评估几种类型的脑部病症。

·mri是一种用于创建脑部的图像或扫描的技术。mri扫描可用于检查人的脑部结构。mri扫描本身不能确定该人是否具有癫痫，但当与其他信息一起考虑时，可以帮助临床医生确定癫痫是否是癫痫发作样事件的可能原因。

·pet扫描可用于定位引起癫痫发作样事件的脑部部分，因为其可为临床医生提供关于身体中的细胞如何发挥功能的额外信息。尽管pet扫描在一些情况下是有帮助的，但它们通常显示与癫痫无关的异常，并且不那么经常是诊断过程的一部分。

·腰椎穿刺是一种通过针吸抽取脊髓周围流体并在实验室中分析的程序。进行其以排除感染，诸如脑膜炎或脑炎，作为癫痫发作样事件的原因。

及时诊断：未满足的需求

在临床事件被查明为癫痫性癫痫发作之前，诊断过程可能花费几个月，并且临床护理经常主要是经验性的，其基于支持但不是明确的证据–经常导致诊断和治疗不足或过度。因此，及时且准确的癫痫发作诊断仍然是未满足的医疗需求。诊断过程不仅长，而且对健康护理系统有很大的负担，仅在美国，癫痫诊断方法的每年数据总计超过150亿美元。因此，我们在几乎每种临床设置中对癫痫发作的临床评估中的一个关键缺口是癫痫发作的准确诊断血液测试，其可用于单次或复发事件以鉴定脑部活动中的阶段性和强直性变化。可以设想许多临床情景，其中癫痫发作的临床诊断测试对于解释患者的临床状况是宝贵的：1)个体在家中塌下后被带到ed；2)个体被发现困惑且街上徘徊；3)住院患者具有短暂情节的无反应或精神状态改变；4)没有eeg、ct或mri可容易得到的第三世界国家的患者。一种可以提供临床事件的即时和明确的解释且具有可操作的结果的简单的血液测试将是一个巨大的诊断进展，并且可以朝向(“划入”)或远离(“排除”)癫痫指导进一步研究，节省资源、时间和费用。简而言之，对癫痫发作的简单血液测试将是一项重大创新。

准确诊断癫痫是非常有挑战性和耗时的，因为临床医生很少观察到癫痫发作，且存在许多不同类型的癫痫发作和癫痫综合征，其具有不同的表现。癫痫的诊断多年来依赖于“金标准”，以包括患者病史(包括全血计数和化学代谢概况)和脑电图(eeg)。一旦分析这些，临床医生还可以在可用的情况下进行磁共振成像(mri)和连续视频eeg(veeg)。额外诊断技术可以包括正电子发射断层摄影(pet)扫描和腰椎穿刺(脊椎穿刺)。使用金标准eeg诊断癫痫的主要挑战是eeg对癫痫的灵敏度低(范围在25-56％之间)的事实。特异性更好，但也在78-98％变化-因为特异性取决于阅读eeg的医生的技能。此外，尽管通常足以适当诊断癫痫发作病症，但对于具有癫痫的患者，eeg可以表现为持续正常。实际上，在我们的研究中，eeg被证明具有37-55％的灵敏度，98-99％的特异性，98％的ppv和64-66％的npv，这证实了在诊断癫痫发作时需要进行使灵敏度最大化的测试。

重要的是，如上所述，尽管患者正在经历数月的癫痫诊断操作，但他们通常进行一段时间的aed药物试验和错误，以确定哪种药物(如果有的话)控制其癫痫发作。特别是当考虑aed的副作用负担和一些情况下致畸后果时，这种不必要的药物成本是巨大的，并且当与长诊断过程组合时，对健康护理系统的负担很大，仅在美国，癫痫诊断方法的每年数据总计超过150亿美元。

为了简化癫痫诊断，已观察到癫痫发作后催乳素水平升高。催乳素应用于癫痫发作诊断的进一步临床评估表明，如果在癫痫发作的10至20分钟之间收集样品，则催乳素仅仅是癫痫发作的可行生物标志物。此外，催乳素仅适用于癫痫发作的子集，包括原发性或继发性全身性强直-阵挛性癫痫发作和颞叶起源的部分复杂性癫痫发作。因此，可行性的短窗口(之后数分钟)，以及诊断灵敏度、特异性和准确度不足，排除了催乳素作为实际的癫痫发作生物标志物，并且如果如今在临床设置中曾经使用，则很少。

炎症和癫痫发作之间的联系

癫痫发作在癫痫发作开始的脑组织中诱发炎性反应。例如，在顽固性癫痫患者的切除脑标本中可能存在强烈的炎性反应，包括关键的促炎细胞因子和趋化因子诸如肿瘤坏死因子α(tnfα、白介素-8(il-8)、白介素-6(il-6)和干扰素γ(ifnγ)的表达。在小鼠癫痫发作模型中也已检测到tnfα、il-8、il-6和ifnγ水平的增加，突出了这样的观点：脑中的炎性过程有助于癫痫发作的发病机制和慢性癫痫病灶的建立。同样在癫痫发作后立即在癫痫发作患者的脑脊液中检测到这些细胞因子中的许多。几种细胞因子受体亚型的表达也在神经元和星形胶质细胞上被上调，表明活化的细胞内信号传导的机制，突出了脑中细胞因子的自分泌和旁分泌作用。细胞因子和经典神经递质诸如谷氨酸和gaba之间的功能性相互作用表明这些相互作用是确立的细胞因子介导的神经元兴奋性变化的基础、因此促进癫痫发作的可能性。还有明显的证据证明急性癫痫发作可以诱导血-脑屏障通透性增加。已显示该作用促进活化的t细胞和巨噬细胞进入脑组织，促进脑中的炎性反应，并助长脑特异性炎性细胞因子和趋化因子向外周血液中的渗漏。

icam5是一种神经元糖蛋白，其仅在脑中表达，并经由t细胞移动性和趋化作用的抑制而作为抗炎蛋白发挥功能。icam5局限于神经元中的胞体和树突，并且其在树突丝状伪足中富集，在更成熟的树突棘中表达较少。icam5具有复杂的结构，其具有9个外部免疫球蛋白结构域，随后是跨膜和细胞质结构域。外部部分结合β1-和β2-整联蛋白和基质蛋白玻连蛋白，而其跨膜结构域结合早老素且细胞质结构域结合α-辅肌动蛋白和细胞质蛋白的erm家族。当切割和释放时，icam5变成可溶形式(sicam5)并且可以释放至细胞外空间和血液中。sicam5强烈刺激神经突向外生长。在免疫电子显微镜研究中，发现icam5位于锥体细胞树突的突触后棘的表面膜，但不位于海马ca1区的轴突末端的表面膜。通过用抗icam5抗体或重组sicam5蛋白阻断icam5，抑制海马中的schaffer侧支-ca1突触的长时程增强(ltp)。这些观察结果表明sicam5介导的细胞-细胞相互作用作为ltp发展的关键步骤的作用。随后的研究显示，sicam5可以充当白细胞与脑中的神经元结合的主要粘附分子。在一个小群组中，在具有颞叶癫痫的患者的脑脊液和血清中报道sicam5水平增加，在多发性硬化症或阿尔茨海默氏病中则没有报道变化。nmda受体的活化通过金属蛋白酶(mmp)介导的icam-5切割促进树突棘发育，并有助于神经元兴奋性。另外，证明了sicam5在调节小鼠脑炎模型中脑中趋化因子产生中发挥关键作用。使用单细胞记录发现，icam-5胞外域刺激ampa微型兴奋性突触后电流(mepsc)的频率而非幅度的增加。使用生物素化和沉淀测定，已发现icam-5胞外域引起glua1、但非glua2、ampar亚基的膜水平增加。发现icam-5相关的glua1磷酸化增加。同时，icam-5引起glua1表面染色沿着树突的增加，而不引起树突棘数量的增加。这表明sicam-5增加谷氨酸能传递并且可能受脑网络活动变化的影响。

tarc(胸腺和活化调节的趋化因子；ccl17)是一种趋化因子(即细胞因子，其负责t和b淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞在过敏和其他炎性状态下的运动)，其主要在胸腺和血液单核细胞中表达。tarc作为促炎细胞因子和淋巴细胞化学引诱物发挥功能，其特异性结合t细胞上的ccr4受体并诱导t细胞系中的趋化性。由于tarc结合ccr4，因此其被认为是th2型趋化因子。tarc由多种细胞类型(包括树突细胞、内皮细胞、角质形成细胞和成纤维细胞)产生。血清tarc水平已被显示是特应性皮炎(影响儿童和成人的皮肤的炎性病症)中的疾病活动的有用测定。实际上，tarc是一种确定的炎症的全身变阻物。tarc在脑中的脉络丛中表现出低水平表达，但神经元或星形胶质细胞表达最少。然而，由于癫痫发作，对血浆tarc表达的变化知之甚少。

tnf-α是一种分泌的细胞因子，其已牵涉于一定范围的神经系统病症，包括中风、阿尔茨海默氏病、癌症和孤独症。许多研究已经检查了实验性癫痫模型系统以及人类样品(包括csf和血清)中的tnfα水平。大鼠中的红藻氨酸诱导的癫痫发作诱导海马中tnf-α的表达。在具有自发性癫痫发作的狗中，tnf-α水平在csf中升高，并且在小鼠癫痫发作模型中操纵tnf-α信号传导级联可以减弱癫痫发作。tnf-α水平在具有颞叶癫痫的患者中稳健升高，表明它是脑中炎症的广泛标志物，尤其是在癫痫发作的设置中。

如本文所示，所述发明改善了本领域的缺陷。实际上，基于实验模型和具有癫痫的人中炎症和癫痫发作之间的联系，患者血浆中的初始蛋白质组学筛选用于探测与炎性细胞因子相关的一组生物标志物，其被假设在我们的研究中响应于癫痫发作表现出阶段性或强直性变化。据推测，特定血浆蛋白水平的可测量变化可以产生癫痫发作的诊断血液测试。在20名癫痫患者的群组中，通过基线(癫痫发作前)和癫痫发作后24小时(通过eeg记录在emu中记录)时的多重elisa分析血浆样品。发现与正常对照相比，在癫痫发作患者中胸腺和活化调节的趋化因子(tarc或ccl17)与细胞间粘附分子5(sicam5或端脑素(telencephalin))的可溶性同种型的比率是统计学差异的。随后，发现与对照个体相比，已患有癫痫发作的患者中的血浆tnfα水平也是统计学显著差异的。在另一组131名进入癫痫监测单元的神经病学患者和30名正常对照中，在癫痫发作前和癫痫发作后1小时至超过72小时分析患者样品，并设计可以区分癫痫和非癫痫事件血浆样品的涉及tnfα、tarc和sicam5的算法。

发明概述

在一个实施方案中，本发明包括evoscore，一种基于血液的诊断测试，其有效地筛选来自患者的血浆以鉴定癫痫发作后所选蛋白的可测量变化。三种与炎性过程相关的蛋白，tarc、sicam5和tnf-α，用于生成具有相关评分的预测算法(evoscore预测模型^tm)，其可以转化为癫痫发作的诊断测试。该算法(其组合蛋白水平与患者人口统计学特征)，已经以强大的诊断性能表明，具有癫痫发作和癫痫的患者中的阶段性和强直性变化(急性和慢性)的预测-既排除患者，又划入具有癫痫发作和癫痫的患者，具有随着时间和随着治疗过程监测患者的能力。evoscore可用于所有临床和健康护理设置中。

在一个实施方案中，本发明包括用于诊断哺乳动物受试者中的癫痫和/或癫痫发作的方法。在一些实施方案中，所述方法可以包括使获得自哺乳动物受试者的血浆或血清样品与能够测量或检测可溶性icam-5(sicam-5)的表达水平的诊断试剂接触的步骤。在一些实施方案中，所述方法可以包括使所述获得自哺乳动物受试者的血浆或血清样品与能够测量或检测tarc的表达水平的诊断试剂接触的步骤。在一些实施方案中，所述方法可以包括使所述获得自哺乳动物受试者的血浆或血清样品与能够测量或检测tnf-α的表达水平的诊断试剂接触的步骤。在一些实施方案中，所述方法可以包括比较sicam5、tarc和tnf-α的浓度与正常对照浓度的步骤。在一些实施方案中，所述方法可以包括比较sicam5、tarc和tnf-α的浓度比与正常对照浓度比的步骤。在一些实施方案中，所述方法可以包括诊断哺乳动物受试者中的癫痫的步骤。

在一个实施方案中，本发明包括用于诊断哺乳动物受试者中的癫痫和/或癫痫发作的方法，其可以包括使获得自哺乳动物受试者的血浆或血清样品与能够测量或检测tarc的表达水平的诊断试剂接触的步骤。在一些实施方案中，所述方法可以包括使所述获得自哺乳动物受试者的血浆或血清样品与能够测量或检测tnf-α的表达水平的诊断试剂接触的步骤。在一些实施方案中，所述方法可以包括比较tarc和tnf-α的浓度与正常对照浓度的步骤。在一些实施方案中，所述方法可以包括比较tarc和tnf-α的浓度比与正常对照浓度比的步骤。在一些实施方案中，所述方法可以包括诊断哺乳动物受试者中的癫痫的步骤。

在一个实施方案中，本发明包括用于为患者生成定量数据的试剂盒。在一些实施方案中，所述试剂盒可以包括能够测量取自患者的血浆或血清样品中可溶性icam-5(sicam-5)的表达水平的诊断试剂。在一些实施方案中，所述试剂盒可以包括能够测量取自患者的血浆或血清样品中tarc的表达水平的诊断试剂。在一些实施方案中，所述试剂盒可以包括能够测量取自患者的血浆或血清样品中tnf-α的表达水平的诊断试剂。在一些实施方案中，所述试剂盒可以包括用于比较sicam-5、tarc和tnf-α的表达水平与正常对照的表达水平的分析单元。

在一个实施方案中，本发明包括用于对样品评分的系统，所述系统比较sicam5、tarc和tnf-α的表达水平与正常对照以确定癫痫。

在一个实施方案中，本发明包括具有软件的计算机，其中所述软件比较sicam5、tarc和tnf-α的表达水平与正常对照以确定癫痫。

在一个实施方案中，本发明包括治疗sicam5、tarc和tnf-α的血浆或血清表达水平或其组合的比率相对于正常对照改变的患者中的癫痫发作病症的方法，所述方法包括向患者施用癫痫的疗法。

附图简述

当结合附图阅读时，将更好地理解本发明的前述概述以及以下详述。

图1说明不同类型的癫痫发作的标准。

图2说明算法的目标和最终可操作结果。

图3说明通过逻辑回归从对个别事件诊断(24小时)建模获得的roc曲线。

图4说明通过逻辑回归从对患者诊断(24小时)建模获得的roc曲线。

图5说明通过逻辑回归从对患者诊断(24小时)建模获得的roc曲线。

图6说明分类树算法使用分类和回归树算法正确地对来自对照样品的癫痫发作事件进行分层的性能。

图7说明通过多元逻辑回归(包括由分类树分析定义的风险组)从对个别事件诊断(24小时)建模获得的roc曲线。

图8说明通过多元逻辑回归(包括由分类树分析定义的风险组)从对个别事件诊断(所有小时)建模获得的roc曲线。

图9说明通过多元逻辑回归(包括由分类树分析定义的风险组)从对患者诊断(24小时)建模获得的roc曲线。

图10说明通过多元逻辑回归(包括由分类树分析定义的风险组)从对患者诊断(24小时)建模获得的roc曲线。

图11说明通过多元逻辑回归(包括由分类树分析定义的风险组)从对门诊患者结果建模获得的roc曲线。

发明详述

在癫痫中，在癫痫发作开始的区域内生成免疫反应。在几种不同的组织损伤类型(诸如结节性硬化症(tsc)和内侧颞叶硬化症(mts))中，促炎细胞因子诸如il-1β、il-6、tnf-α、fas和fas-配体被活化。此外，存在补体固定和沉积、改变的血-脑屏障通透性和巨噬细胞浸润。炎症可以生成各种各样的下游效应，包括il-1β产生的上调，tlr4、nfκb、mtor和mapk级联的活化，活化的淋巴细胞、小胶质细胞和巨噬细胞的吸引，以及星形胶质细胞生理学的改变。此外，还可以调节与抗炎细胞因子的相对平衡，表明细胞因子如il-4、il-10和il-13的水平的变化。不受理论所束缚，这些变化可以是导致癫痫发作、由癫痫发作引起的疾病过程的结果，和/或是癫痫发作的结果(参见图1)。所开发的诊断测试和算法能够区分癫痫发作与无癫痫发作，以及癫痫与正常(参见图2)。本申请解决了本领域中对与癫痫发作相关的标志物的需求。

如本文所用，缩写“a1at”和“a1at”是指α1-抗胰蛋白酶，也称为丝氨酸蛋白酶抑制肽酶抑制剂，进化枝a(α-1抗蛋白酶、抗胰蛋白酶)，成员1。

术语“包含”和“包括”可互换使用，除非另有说明。

术语“隐原性”在本文中用于指未知来源的癫痫发作或癫痫。

术语“阶段性”在本文中用于指与立即或突发事件或癫痫发作直接相关的血液生物标志物的变化。血液中的变化是短暂的，并在事件后的特定时间段内消退。

术语“强直性”在本文中用于指与患者的首要病况相关的血液生物标志物的持续或恒定变化。所述水平可与对照受试者中的那些区分，并且不会基于患者是否已经历有其病况的症状的事件而显著波动。

术语“急性”在本文中用于指与立即或突发事件或癫痫发作直接相关的血液生物标志物的变化。血液中的变化是短暂的，并在事件后的特定时间段内消退。

术语“慢性”在本文中用于指与患者的首要病况相关的血液生物标志物的持续或恒定变化。所述水平可与对照受试者中的那些区分，并且不会基于患者是否已经历有其病况症状的事件而显著波动。

术语“疾病”、“病症”或“病况”在本文中用于指被认为或诊断为导致、引起或影响癫痫发作的任何表现、症状或表现或症状的组合。该术语包括但不限于创伤、炎性和自身免疫反应、生理学畸形和遗传缺陷。

缩写“gm-csf”是指粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子。

缩写“hgf”是指肝细胞生长因子。

缩写“icam-1”是指细胞间粘附分子1。

术语“猝发的”是指生理状态或事件，诸如癫痫发作。

术语“指示(indicative)”(或“指示(indicativeof)”)涵盖预测(包括倾向)和检测(接近发生癫痫发作)，并且除非另有说明，否则涵盖该术语的实施方案旨在限定和涵盖特定于预测、特定于检测以及用于预测以及用于检测过去或当前事件的实施方案。结合术语“倾向”使用术语指示仅旨在强调过去事件相比于未来事件的倾向的证据，但仅使用指示旨在涵盖倾向，除非另有说明。

缩写“bdnf”是指脑源性神经营养因子。

缩写“mcp-1”是指单核细胞趋化蛋白-1，也称为趋化因子(c-c基序)配体2(ccl2)或其变体。

缩写“mdc”是指巨噬细胞源性细胞因子，也称为c-c基序趋化因子22(ccl-22)或其变体。

缩写“mip-1β”是指巨噬细胞炎性蛋白-1β，也称为趋化因子c-c基序配体4(ccl-4)或其变体。

缩写“ip-10”是指干扰素γ诱导的蛋白10、小诱导型细胞因子b10、c-x-c基序趋化因子10(cxcl10)或其变体。

嗜酸性粒细胞趋化因子，也称为嗜酸性粒细胞趋化因子-1，是指趋化因子(c-c基序)配体11(ccl11)或其变体。

嗜酸性粒细胞趋化因子-3是指趋化因子(c-c基序)配体26(ccl26)或其变体。

术语“样品”在本文中用于指血浆或血清样品，除非另有说明。在本文所述的每个实施方案中，血浆的使用被认为是独立于血浆或血清的替代物的实施方案。在本文所述的每个实施方案中，血清的使用被认为是独立于血浆或血清的替代物的实施方案。在本文所述的每个实施方案中，根据本领域中用于获得样品和分析样品的常规技术考虑使用另一种生物样品，包括但不限于脑脊髓液(csf)，通过切除获得的组织样品，唾液和尿液。可以在使用前处理样品，例如从血液制备血浆，稀释粘性流体等。处理方法可以涉及过滤，蒸馏，提取，浓缩，失活干扰组分，添加试剂等。

术语“癫痫发作”和“癫痫”可互换使用，除非另有说明，否则癫痫的临床诊断需要两次无端的癫痫发作。术语癫痫也可以通过对提交本申请时所理解的癫痫发作的理解或理论来定义。癫痫包括且不限于所有形式的癫痫。

术语“受试者”、“个体”和“患者”在本文中可互换用于指从中采集样品的哺乳动物，除非另有说明。该术语旨在涵盖对于人特定的实施方案。受试者、个体或患者可能患有、有风险或怀疑具有有癫痫发作或有癫痫发作症状的病症的倾向。该术语还包括用于食物或作为宠物繁殖的家畜，包括马、牛、绵羊、猪、猫、狗和动物园动物。用于治疗的典型受试者包括易患、患有或已患有一次或多次癫痫发作的人。具体而言，用于根据本发明的治疗的合适受试者是易患或已患有一次或多次癫痫发作的人。

缩写“tarc”是指'胸腺和活化调节的趋化因子'，并且在本文中可与趋化因子(c-c基序)配体17(ccl17)互换使用。

术语“端脑素(telencephalin)”、“tln”、“icam-5”和“icam5”在本文中可互换使用。

术语“倾向”，例如“具有癫痫发作的倾向”，意指事件(例如癫痫发作发生或复发)的合理医学概率。该术语还涵盖在持续治疗之前、之后或期间可以发生此类事件的频率。

如本文所用，术语“治疗(treat)”或“治疗(treating)”是指用于部分或完全减轻、改善、缓解、抑制、预防在任何临床环境中特定病况(例如癫痫发作或癫痫发作相关的病症)的一种或多种症状或特征，延迟其发作，降低其严重程度和/或降低其发生率的任何方法。治疗可以出于降低发生与病况相关的病理学的风险的目的施用于没有表现出病况的体征和/或仅表现出病况的早期体征的受试者。因此，取决于受试者的状态，该术语在本发明的一些方面可以指预防病况，并且包括预防病况的发作或预防与病况相关的症状。该术语还包括维持病况和/或症状，使得病况和/或症状的严重程度不会进展。治疗可以以急性或慢性方式进行。该术语还指在患有病况之前降低病况或与这种病况相关的症状的严重程度。这种在患病前预防或减轻病况的严重程度是指向在施用时未患有该病况的受试者施用疗法。预防还包括预防病况的复发、其频率或与这种病况相关的一种或多种症状。术语“治疗”和“治疗性”是指治疗的行为，因为“治疗”如上所定义。干预的目的是对抗该病况并包括施用疗法以预防或延迟症状或并发症的发作，或减轻症状或并发症，或消除病况。例如，治疗可用于改善与病症相关的症状或其频率(例如，癫痫发作的频率)。

术语“结节性硬化症”、“结节性硬化症复合症”和缩写/首字母缩略词“ts”和“tsc”在本文中可互换使用。

缩写“vcam-1”是指血管细胞粘附分子1。

缩写“vegf-a”是指血管内皮生长因子a。

sicam5

icam-5是相对于健康患者，在癫痫患者的血浆或血清中差异分布的神经元源性蛋白。可溶性icam-5(也称为sicam5、sicam-5或其变体)响应于炎症通过金属蛋白酶从icam-5切割。出乎意料的是，相对于健康患者，在癫痫发作患者的情况下发现sicam-5表达改变。sicam-和/或组合，sicam-5/tarc和/或sicam5/tnf-α比率与健康对照相比改变。

在一个实施方案中，提供了多肽表达组或阵列，所述组或阵列包含能够结合哺乳动物受试者的血浆或血清中的可溶性icam-5(sicam-5)的探针，其中sicam-5的血浆或血清浓度相对于健康对照改变表明癫痫发作或具有癫痫发作的倾向。