一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽及其制备方法与流程

文档序号:15273258发布日期:2018-08-28 22:41阅读:381来源:国知局
本发明涉及人体保健品
技术领域
,尤其涉及一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽及其制备方法。
背景技术
:人体因为与外界的持续接触,包括呼吸、外界污染、放射线照射等因素不断的在人体体内产生自由基。科学研究表明,癌症、衰老或其它疾病大都与过量自由基的产生有关联。牛骨中主含胶原蛋白,具有高营养价值、抗氧化活性、提高人体免疫力的功效。牛骨通常以食用或者煎服的方式进入人体,其胶原蛋白一般要被消化液酶解为低聚肽或氨基酸而被机体吸收和利用,因此上述服用不仅会造成患者消化系统的负担,而且也达不到应有的药效。技术实现要素:有鉴于此,本发明实施例提供了一种具有抗氧化活性的的牛骨胶原蛋白肽及其制备方法。本申请提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽,所述牛骨胶原蛋白肽由下列重量份的原料制备而成:牛骨胶原蛋白肽粉2400-3600份,红景天10-30份、夜交藤5-15份、鱼腥草3-7份、朱砂七10-20份、玳玳花1-3份、冬虫夏草10-20份、忍冬藤4-12份、芡实3-7份、菝葜叶4-12份、凤凰衣8-16份、鸡内金4-8份、贯众3-7份、角蒿5-15份、枫香脂2-6份、金樱子1-3份。优选地,所述牛骨胶原蛋白肽由下列重量份的原料制备而成:牛骨胶原蛋白肽粉3000份,红景天20份、夜交藤10份、鱼腥草5份、朱砂七15份、玳玳花2份、冬虫夏草15份、忍冬藤8份、芡实5份、菝葜叶8份、凤凰衣12份、鸡内金6份、贯众5份、角蒿10份、枫香脂4份、金樱子2份。本发明还提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽的制备方法,所述方法包括如下步骤:1)按重量份选取红景天、夜交藤、鱼腥草、朱砂七、玳玳花、冬虫夏草、忍冬藤、芡实、菝葜叶、凤凰衣、鸡内金、贯众、角蒿、枫香脂和金樱子烘干30h,粉碎制成干粉;2)将步骤1)制得的干粉加入中药提取罐中并与去离子水按1:20的比例混合均匀,搅拌,加热6h,过滤得第一滤液;3)收集第一滤液中的滤渣,按1:8的比例加入去离子水,搅拌,60℃条件下加热3h,过滤得第二滤液,然后将第二滤液加入第一滤液中,搅拌混合,蒸馏使体积缩小至1/5得中药浓缩液;4)将步骤3)制得的中药浓缩液置于发酵罐中,在发酵罐中加入和中药浓缩液等体积的去离子水,搅拌均匀后杀菌,加入0.2份的α-淀粉酶,再于55℃条件下搅拌1h,降温至50℃,加入0.2份的果胶酶,搅拌2h,得发酵液;5)对步骤4)制得的发酵液进行萃取、层析、洗脱、减压浓缩和干燥后得中药提取物;6)将按重量份取牛骨胶原蛋白肽粉,并将其与步骤5)充分混匀,即得牛骨胶原蛋白肽。本发明还提供了一种口服制剂,所述口服制剂为散剂或胶囊剂,所述散剂或胶囊剂包括上述具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽和辅料,所述牛骨胶原蛋白肽与辅料的重量份数比为:1:6。优选地,所述口服制剂为散剂,所述辅料包括如下重量份数的成分:丙烯酸树脂ⅳ5-15份、低取代羟丙基纤维素10-30份、三硅酸镁1-5份、木糖醇1-5份、山嵛酸三甘油酯0.1-0.5份。优选地,所述口服制剂为胶囊剂,所述辅料包括如下重量份数的成分:玉米阮4-10份、香兰素1-3份、波拉克林钾2-5份、乳糖4-10份、肝素钠1-3份和枸橼酸脂肪酸甘油酯5-15份。优选地,所述胶囊剂由如下方法制备而成:a、制备牛骨胶原蛋白肽;b、将重量份的玉米阮用超微粉碎机粉碎至平均粒径小于100μm,加入体积分数为90%的乙醇水溶液将玉米阮溶解5次,每次加入乙醇水溶液为玉米阮2倍重量,得玉米阮乙醇溶液;c、取步骤a制得的牛骨胶原蛋白肽加入到湿法混合颗粒机中,设定搅拌速度600r/min,切碎速度1200r/min,混合15min,再将步骤b制得的玉米阮乙醇溶液加入到湿法混合颗粒机中制软材,将软材过15目筛制湿颗粒,将湿颗粒放置于50℃条件下干燥90min,取出,用15目筛整粒,得混合颗粒;d、取重量份的香兰素、波拉克林钾、乳糖、肝素钠和枸橼酸脂肪酸甘油酯与步骤c制得的混合颗粒混合均匀;按照0.25±10%/粒的装量填充入胶囊壳中,即得胶囊剂。进一步地,本申请所述的牛骨胶原蛋白肽在制备用于抗氧化活性的产品中的应用。上述技术方案中的一个技术方案具有如下有益效果:本发明提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽及其制备方法,工艺先进、工序合理、可操作性强,易于工业化生产,该方法制备的牛骨胶原蛋白肽具有补气安神、扶正固体、清除自由基、抗氧化活性、延缓衰老的功效,添加的中药组份可以与牛骨胶原蛋白肽粉进行协同,更容易吸收,效果远远优于单味药材的效果叠加,可以抑制人体自身产生自由基的速率,并可以一定程度上清理体内产生的自由基,适合中老年人群或慢性病人长期服用,达到抗衰老,降低自由基引起的疾病的发生几率,缓解亚健康状态,提高生活质量和工作效率。【具体实施方式】为了更好的理解本发明的技术方案,下面对本发明实施例进行详细描述。应当明确,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例,都属于本发明保护的范围。在本发明实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的,而非旨在限制本发明。在本发明实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式,除非上下文清楚地表示其他含义。应当理解,本文中使用的术语“和/或”仅仅是一种描述关联对象的关联关系,表示可以存在三种关系,例如,a和/或b,可以表示:单独存在a,同时存在a和b,单独存在b这三种情况。另外,本文中字符“/”,一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。实施例1实施例1提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽,该牛骨胶原蛋白肽由下列重量份的原料制备而成:牛骨胶原蛋白肽粉2400g,红景天10g、夜交藤5g、鱼腥草3g、朱砂七10g、玳玳花1g、冬虫夏草10g、忍冬藤4g、芡实3g、菝葜叶4g、凤凰衣8g、鸡内金4g、贯众3g、角蒿5g、枫香脂2g、金樱子1g。该牛骨胶原蛋白肽的制备方法为:1)按重量份选取红景天、夜交藤、鱼腥草、朱砂七、玳玳花、冬虫夏草、忍冬藤、芡实、菝葜叶、凤凰衣、鸡内金、贯众、角蒿、枫香脂和金樱子烘干30h,粉碎制成干粉;2)将步骤1)制得的干粉加入中药提取罐中并与去离子水按1:20的比例混合均匀,搅拌,加热6h,过滤得第一滤液;3)收集第一滤液中的滤渣,按1:8的比例加入去离子水,搅拌,60℃条件下加热3h,过滤得第二滤液,然后将第二滤液加入第一滤液中,搅拌混合,蒸馏使体积缩小至1/5得中药浓缩液;4)将步骤3)制得的中药浓缩液置于发酵罐中,在发酵罐中加入和中药浓缩液等体积的去离子水,搅拌均匀后杀菌,加入0.2份的α-淀粉酶,再于55℃条件下搅拌1h,降温至50℃,加入0.2份的果胶酶,搅拌2h,得发酵液;5)对步骤4)制得的发酵液进行萃取、层析、洗脱、减压浓缩和干燥后得中药提取物;6)将按重量份取牛骨胶原蛋白肽粉,并将其与步骤5)充分混匀,即得牛骨胶原蛋白肽。实施例2实施例2提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽,该牛骨胶原蛋白肽由下列重量份的原料制备而成:牛骨胶原蛋白肽粉3000g,红景天20g、夜交藤10g、鱼腥草5g、朱砂七15g、玳玳花2g、冬虫夏草15g、忍冬藤8g、芡实5g、菝葜叶8g、凤凰衣12g、鸡内金6g、贯众5g、角蒿10g、枫香脂4g、金樱子2g。实施例2中牛骨胶原蛋白肽的制备方法和实施例1相同。实施例3实施例3提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽,该牛骨胶原蛋白肽由下列重量份的原料制备而成:牛骨胶原蛋白肽粉3600g,红景天30g、夜交藤15g、鱼腥草7g、朱砂七20g、玳玳花3g、冬虫夏草20g、忍冬藤12g、芡实7g、菝葜叶12g、凤凰衣16g、鸡内金8g、贯众7g、角蒿15g、枫香脂6g、金樱子3g。实施例3中牛骨胶原蛋白肽的制备方法和实施例1相同。实施例4散剂实施例4提供了一种口服制剂,口服制剂为散剂,该散剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽2.85g、丙烯酸树脂ⅳ5g、低取代羟丙基纤维素10g、三硅酸镁1g、木糖醇1g、山嵛酸三甘油酯0.1g。该散剂的制备方法为常规方法。实施例5散剂实施例5提供了一种口服制剂,口服制剂为散剂,该散剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽6.05g、丙烯酸树脂ⅳ10g、低取代羟丙基纤维素20g、三硅酸镁3g、木糖醇3g、山嵛酸三甘油酯0.3g。该散剂的制备方法为常规方法。实施例6散剂实施例6提供了一种口服制剂,口服制剂为散剂,该散剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽9.25g、丙烯酸树脂ⅳ15g、低取代羟丙基纤维素30g、三硅酸镁5g、木糖醇5g、山嵛酸三甘油酯0.5g。该散剂的制备方法为常规方法。实施例7胶囊剂实施例7提供了一种口服制剂,口服制剂为胶囊剂,该胶囊剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽2.83g、玉米阮4g、香兰素1g、波拉克林钾2g、乳糖4g、肝素钠1g和枸橼酸脂肪酸甘油酯5g。该胶囊剂的制备方法具体如下:a、制备牛骨胶原蛋白肽;b、将重量份的玉米阮用超微粉碎机粉碎至平均粒径小于100μm,加入体积分数为90%的乙醇水溶液将玉米阮溶解5次,每次加入乙醇水溶液为玉米阮2倍重量,得玉米阮乙醇溶液;c、取步骤a制得的牛骨胶原蛋白肽加入到湿法混合颗粒机中,设定搅拌速度600r/min,切碎速度1200r/min,混合15min,再将步骤b制得的玉米阮乙醇溶液加入到湿法混合颗粒机中制软材,将软材过15目筛制湿颗粒,将湿颗粒放置于50℃条件下干燥90min,取出,用15目筛整粒,得混合颗粒;d、取重量份的香兰素、波拉克林钾、乳糖、肝素钠和枸橼酸脂肪酸甘油酯与步骤c制得的混合颗粒混合均匀;按照0.25±10%/粒的装量填充入胶囊壳中,即得胶囊剂。实施例8胶囊剂实施例8提供了一种口服制剂,口服制剂为胶囊剂,该胶囊剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽5.25g、玉米阮7g、香兰素2g、波拉克林钾3.5g、乳糖7g、肝素钠2g和枸橼酸脂肪酸甘油酯10g。该胶囊剂的制备方法和实施例7相同。实施例9胶囊剂实施例9提供了一种口服制剂,口服制剂为胶囊剂,该胶囊剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽8.17g、玉米阮10g、香兰素3g、波拉克林钾5g、乳糖10g、肝素钠3g和枸橼酸脂肪酸甘油酯15g。该胶囊剂的制备方法和实施例7相同。需要说明的是,本申请的牛骨胶原蛋白肽是通过如下方法制备的:1)选取新鲜洗净后的牛骨用锡箔纸完全包裹后,然后放入液氮中冷却1min,取出后用破碎机将牛骨粉碎至100目,加入提取溶液进行提取后得到固液混合物;其中,所述提取溶液是溶剂为水的混合溶液,各溶质的浓度分别为:氢氧化钠100mm、氯化钠50mm、蔗糖10mm,提取过程在400w的微波环境中进行;2)向固液混合物中加入混合酶,加入乳酸调节ph值为6,在38℃的恒温环境中酶解60min,得到第一酶解液,其中混合酶为重量份数比为4:1:5:2的胶原蛋白酶、脂肪酶、糖元酶和核酸酶混合酶体系;保持温度与ph值不变,向第一酶解液中加入和混合酶等重量份的蛋白内切酶,酶解90min后得到第二酶解液;3)将第二酶解液进行分离、浓缩和干燥后,得到牛骨胶原蛋白低聚肽制品。对照例1对照例1提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽,该牛骨胶原蛋白肽由下列重量份的原料制备而成:牛骨胶原蛋白肽粉3000g,红景天20g、夜交藤10g、鱼腥草5g、朱砂七15g、黑老虎根2g、冬虫夏草15g、忍冬藤8g、芡实5g、菝葜叶8g、凤凰衣12g、鸡内金6g、贯众5g、角蒿10g、枫香脂4g、金樱子2g。对比例1中牛骨胶原蛋白肽的制备方法和实施例1相同。对照例2对照例2提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽,该牛骨胶原蛋白肽由下列重量份的原料制备而成:牛骨胶原蛋白肽粉3000g,红景天20g、夜交藤10g、鱼腥草5g、朱砂七15g、玳玳花2g、冬虫夏草15g、忍冬藤8g、芡实5g、菝葜叶8g、牛尾菜12g、鸡内金6g、贯众5g、角蒿10g、枫香脂4g、金樱子2g。对比例2中牛骨胶原蛋白肽的制备方法和实施例1相同。对照例3对照例3提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽,该牛骨胶原蛋白肽由下列重量份的原料制备而成:牛骨胶原蛋白肽粉3000g,红景天20g、夜交藤10g、鱼腥草5g、朱砂七15g、玳玳花2g、冬虫夏草15g、忍冬藤8g、芡实5g、菝葜叶8g、凤凰衣12g、鸡内金6g、贯众5g、角蒿10g、穿破石4g、金樱子2g。对比例3中牛骨胶原蛋白肽的制备方法和实施例1相同。对照例4对照例4提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽,该牛骨胶原蛋白肽由下列重量份的原料制备而成:牛骨胶原蛋白肽粉3000g、灵芝草20g、白花蛇舌草20g、辽五味20g、人参50g、蚤休2g、降香6g、三白草10g、夏枯球20g、枳椇子10g、余甘子20g、败酱草4g、胆南星6g、白茅根20g、冬虫夏草5g、芫根6g、鸡血藤2g、芡实4g、半枝莲6g、大金钱草20g。对比例4中牛骨胶原蛋白肽的制备方法选用常规方法制备,即将所有重要组份粉碎为预设的目数然后和牛骨胶原蛋白肽粉进行混合以得到对比例4中的牛骨胶原蛋白肽。对照例5散剂对照例5提供了一种口服制剂,口服制剂为散剂,该散剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽6.05g、丙烯酸树脂ⅳ10g、低取代羟丙基纤维素20g、三硅酸镁3g、木糖醇3g、山嵛酸三甘油酯0.3g。该散剂的制备方法为常规方法。对照例6散剂对照例6提供了一种口服制剂,口服制剂为散剂,该散剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽6.05g、乳糖10g、低取代羟丙基纤维素20g、三硅酸钙3g、木糖醇3g、聚α烯烃0.3g。该散剂的制备方法为常规方法。对照例7胶囊剂对照例7提供了一种口服制剂,口服制剂为胶囊剂,该胶囊剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽5.25g、玉米阮7g、香兰素2g、波拉克林钾3.5g、乳糖7g、聚乙烯吡咯烷酮2g和枸橼酸脂肪酸甘油酯10g。该胶囊剂的制备方法和实施例7相同。对照例8胶囊剂对照例8提供了一种口服制剂,口服制剂为胶囊剂,该胶囊剂由下列重量份的成分组成:实施例2制得的牛骨胶原蛋白肽5.25g、玉米阮7g、香兰素2g、波拉克林钾3.5g、乳糖7g、肝素钠2g和聚乙二醇单月桂酸酯10g。该胶囊剂的制备方法和实施例7相同。抗氧化活性实验选取健康小鼠,将小鼠分为试验1-3组、对照1-3组、模型组、空白组,每组10只。试验1-3组给予实施例1-3的牛骨胶原蛋白肽灌胃,对照1-3组给予对照例1-3的牛骨胶原蛋白肽灌胃,模型1组和空白组均给予相同剂量的生理盐水,给药剂量为50mg/天/只,连续给药15天,末次给药前小鼠禁食过夜,末次给药0.5小时后除空白对照组外各组均灌胃0.05mg/只溴苯溶液,24小时后处死动物,每只小鼠取同一叶肝脏相同部位的一块肝组织,称取一克,于0℃下快速制成肝匀浆,测定各组小鼠肝脏中mda和gsh-px的含量,结果见表1。表1各组牛骨胶原蛋白肽对mda和gsh-px的含量组别mda/nmol*mgprotein-1gsh-px/u*mgprotein-1空白组3.75±0.31994±108模型组4.91±0.46**721±99**试验1组3.12±0.29☆☆921±101☆☆试验2组2.87±0.27☆☆△△985±131☆☆△△试验3组3.31±0.30☆☆△908±116☆☆△对照1组3.62±0.35☆873±73☆对照2组3.70±0.41☆☆856±69☆☆对照3组3.51±0.39☆☆811±62☆☆从表1中可以看出,与空白组相比较,模型组小鼠肝脏中的mda含量显著升高、gsh-px活力显著降低,说明造模成功。和对照1-3组相比,试验1-3组对提高gsh-px活性和降低mda含量更为显著,这其中又以试验2组最为显著,故可以看出本发明的牛骨胶原蛋白肽可有效提高溴苯导致肝中毒小鼠体内的gsh-px活性,降低脂质过氧化终产物mda的含量,具有较好的抗氧化作用。吸湿率试验分别取实施例4-6和对照例4-6的散剂,放置于干燥器内自然冷却,将干燥后的样品放置于干燥后的带盖称量杯内,记录称量杯和样品的重量,将盛有干燥样品的称量杯放置于保湿器中,保持60%的恒湿条件,分别在2、4、6、8、24h后对样品进行称量,并计算吸湿率。结果如表2。吸湿率(%)=100(wa-wb)/wb×100%;其中,wa为样品放置前的质量,wb为样品放置后的质量。表2本发明样品的吸湿率试验结果由表2可知,实施例4-6的吸湿率显著的低于对照例5-6,证明本发明通过在散剂中加入丙烯酸树脂ⅳ、低取代羟丙基纤维素、三硅酸镁、木糖醇、山嵛酸三甘油酯的混合物,可以显著的降低本发明提供的散剂的吸湿性,防止其吸潮板结,当删除或替换其中任何一种成分,均会提高本发明提供的散剂的吸湿性。含量均匀度试验取实施例7-9的胶囊剂和对照例7-8的胶囊剂各10份,按照2015年版《中国药典》中的方法测定其内容物的含量均匀度,结果见表3。表3本发明胶囊剂的含量均匀度检测结果由表3可以看出,本发明实施例7-9提供的胶囊剂的内容物具有很好的含量均匀度,证明当在胶囊剂中加入玉米阮、香兰素、波拉克林钾、乳糖、肝素钠和枸橼酸脂肪酸甘油酯的混合物时,可以显著的提高胶囊剂的含量均匀度,当对本发明提供的辅料进行删除或替换时,制得的胶囊剂的含量均匀度不符合标准,实施例8的胶囊剂中内容物的含量均匀度明显高于实施例7和实施例9,证明本发明提供的胶囊剂的制备方法可以有效的提高胶囊剂内容物的含量均匀度。本发明提供了一种具有抗氧化活性的牛骨胶原蛋白肽及其制备方法,工艺先进、工序合理、可操作性强,易于工业化生产,该方法制备的牛骨胶原蛋白肽具有补气安神、扶正固体、清除自由基、抗氧化活性、延缓衰老的功效,添加的中药组份可以与牛骨胶原蛋白肽粉进行协同,更容易吸收,效果远远优于单味药材的效果叠加,可以抑制人体自身产生自由基的速率,并可以一定程度上清理体内产生的自由基,适合中老年群或慢性病人长期服用,达到抗衰老,降低自由基引起的疾病的发生几率,缓解亚健康状态,提高生活质量和工作效率。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所做的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明保护的范围之内。当前第1页12
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