本发明涉及生物制药领域的药物新用途，特别涉及曲美他嗪作为免疫抑制剂在治疗免疫相关疾病中的应用。
背景技术：
盐酸曲美他嗪，化学名称为：1-(2，3，4-三甲氧基苯甲基)哌嗪二盐酸盐。长期以来，人们主要将其用于心绞痛发作的预防治疗，属于其他类抗心绞痛心血管药物。曲美他嗪通过保护细胞在缺氧或缺血情况下的能量代谢，阻止细胞内atp水平的下降，从而保证了离子泵的正常功能和透膜钠－钾流的正常运转，维持细胞内环境的稳定，是一种有效的抗心肌缺血的药物。申请人前期发现曲美他嗪具有免疫抑制的特殊作用，
能够抑制静止t淋巴细胞(和巨噬细胞)向淋巴细胞活化和促进活化免疫细胞(淋巴细胞和巨噬细胞)静止化，减少多种炎性细胞因子的释放，具有免疫抑制的作用，使得曲美他嗪具有作为免疫抑制剂治疗免疫相关性疾病的临床应用前景。
免疫抑制剂是指能够使机体发生明显免疫抑制效应的一类药物。所谓免疫抑制效应不是指药物的一般毒性反应，而是指它作用于免疫反应过程中不同环节而产生的效应，如抑制免疫细胞的分化与发育、干扰抗原的识别与加工、抑制细胞的活化与增殖、抑制效应细胞的功能等。因此，免疫抑制剂可进一步定义为：在治疗剂量下，至少能降低或抑制免疫反应的制剂。
目前，常用的免疫抑制剂主要有五类：
1)糖皮质激素类，如可的松和强的松。糖皮质激素作为免疫抑制药物用于临床的历史已经很长。糖皮质激素免疫学作用主要表现在减少淋巴细胞产生细胞因子，影响t细胞激活，影响细胞间的免疫黏附。还可通过直接作用造成淋巴细胞溶解和凋亡，以达到快速有效地抑制免疫反应的目的。
2)微生物代谢产物，如环孢菌素和藤霉素等；环孢菌素是一种被广泛用于预防器官移植排斥的免疫抑制剂，其最主要的作用是降低t细胞的活性及t细胞所产生的免疫反应。选择性作用于t淋巴细胞亚群，抑制t抑制细胞的激活和增殖，抑制产生il-2和γ干扰素。
3)抗代谢物，如硫唑嘌呤和6-巯基嘌呤等；4)多克隆和单克隆抗淋巴细胞抗体，如抗淋巴细胞球蛋白(alg)；5)烷化剂类，如环磷酰胺等。硫唑嘌呤为具有免疫抑制作用的抗代谢剂。通过抑制核酸的生物合成，防止细胞的增生，并可引起dna的损害。由于淋巴细胞比其它细胞更依赖于核酸的合成途径，故主要抑制t-淋巴细胞而影响免疫，所以可抑制迟发过敏反应，器官移植的排斥反应。
4)抗淋巴细胞球蛋白目前主要用于年龄大于40岁或无合适供髓者的严重型再障以及常规治疗无效的再障患者，是以人淋巴细胞作免疫抗原，为强效免疫控制剂。作用机制在于抑制经抗原识别后的淋巴细胞激活过程，并在补体协助下，对淋巴细胞产生特异性的细胞溶解作用。
5)环磷酰胺是已知的最强的烷化剂类免疫抑制剂，作用强而持久，其本身并无烷化作用和细胞毒化作用，经机体吸收后在肝中代谢产生具有活性的代谢产物而发挥作用，环磷酰胺对t、b细胞均有抑制作用，对b细胞的抑制比t细胞强，环磷酰胺可以有效抑制b细胞活性和自身抗体的形成。
据研究，ctx对免疫系统的影响是同剂量相关的，较大剂量下可导致免疫系统的损伤，如诱导淋巴细胞核损伤，代谢功能受抑，增殖受抑，b细胞比t细胞对ctx更敏感。因此，我们针对免疫性疾病的治疗是利用较大剂量下可导致免疫系统的损伤进行的，因此多许多器官及组织均有不良影响。
目前免疫抑制剂在多种疾病中都用着广泛应用，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝病、病毒或者药物介导的肝脏损伤、移植术后排斥反应等等，在临床中应用非常广泛。但是免疫抑制剂所带来的副作用在临床中十分常见，给患者及医生都带来困扰，极大的限制了免疫抑制剂在临床中的安全应用。例如糖皮质激素引起的股骨头坏死、重症感染、胃肠道出血和高血压等副反应；环孢菌素的肾脏毒性和肝脏毒性；硫唑嘌呤的骨髓抑制副反应；环磷酰胺的骨髓抑制副反应等。因此，寻找新型的、副反应较少的免疫抑制药物具有非常广泛的临床价值和社会意义。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种曲美他嗪作为免疫抑制剂在治疗免疫相关疾病中的应用，其解决了目前临床中应用的免疫抑制剂药物具有的明显副反应的问题。
本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：
曲美他嗪作为免疫抑制剂在治疗免疫相关疾病中的应用。
优选地，上述技术方案中，所述曲美他嗪用于治疗或预防系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝病、病毒或者药物免疫介导的肝脏损伤或移植术后排斥反应。
本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：
曲美他嗪作为免疫抑制剂在制备免疫相关疾病的药物中的应用，所述指药物是用于预防或治疗系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝病、病毒或者药物介导的肝脏损伤或移植术后排斥反应的药物。
优选地，上述技术方案中，所述药物为注射剂或口服剂。
优选地，上述技术方案中，所述药物包含曲美他嗪以及药学上可接受的辅料，所述药物为口服型片剂、皮下注射剂或其冻干形式，或静脉注射形式。
优选地，上述技术方案中，所述曲美他嗪作为免疫抑制剂治疗免疫相关疾病的药物剂量为：曲美他嗪20mg，每天三次。
本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：
一种药物组合物，所述药物组合物包含曲美他嗪，所述药物组合物还包括内科治疗药物和/或抗病毒药物。
优选地，上述技术方案中，所述药物组合物还包括药学上可接受的辅料。
本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：
一种药物组合物用于制备治疗免疫相关疾病的药物的应用。
优选地，上述技术方案中，所述免疫相关疾病包括系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝病、病毒或者药物免疫介导的肝脏损伤或移植术后排斥反应。
本发明所提供的曲美他嗪作为免疫抑制剂治疗免疫相关性疾病的新用途主要通过以下几个功能实现：
(1)曲美他嗪能够抑制巨噬细胞和淋巴细胞的抗原递呈，抑制巨噬细胞的合成il-1；
(2)曲美他嗪能够抑制t淋巴细胞的激活，抑制产生il-2/3/4/6和γ干扰素；
(3)曲美他嗪能够抑制t淋巴细胞的dna合成；
(4)曲美他嗪能够抑制肿瘤坏死因子(tnfα)细胞因子的转录；
(5)曲美他嗪能够减少细胞毒性t淋巴细胞对肝脏细胞的特异性免疫损伤；所述的曲美他嗪作为免疫抑制剂治疗免疫相关疾病以口服方式或者针剂方式给药。
本发明上述技术方案，具有如下有益效果：
本发明所提供的曲美他嗪作为免疫抑制剂治疗免疫相关性疾病的新用途，能够提高通过抑制t淋巴细胞和巨噬细胞的活化和激活，发挥免疫抑制的作用。同时曲美他嗪作为治疗心脏的药物，在临床中已经应用很长时间，安全性极高，无明显副作用，能够极大的解决目前临床应用的免疫抑制剂副反应较大的不足。同时，曲美他嗪可联合其他药物制备具有免疫抑制作用的新药。
附图说明
图1为本发明提供的曲美他嗪对人巨噬细胞分泌il-1、il-2、il-3、il-4、il-6、γ干扰素水平、肿瘤坏死因子(tnfα)细胞因子转录的对比影响图。
图2为本发明实施例5提供的曲美他嗪抑制慢性乙型肝炎急性发作患者hbv特异性ctl细胞毒性t淋巴细胞比例的影响图。
图3为本发明实施例提供的曲美他嗪抑制慢性乙型肝炎急性发作患者淋巴细胞的影响图。
图4为本发明实施例提供的曲美他嗪对慢性乙型肝炎急性发作患者肝功能的影响图。
图5为本发明实施例提供的曲美他嗪对慢性乙型肝炎急性发作患者肾功能影响图。
图6为本发明实施例提供的曲美他嗪对自身免疫性肝炎患者肝功能指标的影响图。
图7为本发明实施例提供的曲美他嗪对酒精性肝炎患者肝功能指标的影响图。
图8为本发明实施例提供的曲美他嗪对系统性红斑狼疮患者免疫学相关多个指标的影响图。
图9为本发明实施例提供的曲美他嗪对类风湿性关节炎患者免疫学相关多个指标的影响图。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施例进行详细描述，以便于进一步理解本发明。
实施例1曲美他嗪对病毒性肝炎患者特异性细胞毒性t淋巴细胞免疫应答的免疫抑制作用的疗效及安全性评价。
一、试验目的
评价曲美他嗪能否通过病毒性肝炎患者中特异性细胞毒性t淋巴细胞免疫应答起到抑制作用。
二、试验设计
1、试验方法
采用单中心队列研究的临床试验方法。
2、病例数估计及分配
曲美他嗪试验组20例，安慰剂对照组20例
3、队列分组
其中2017年8月01日至2018年03月28日所有入组的病毒性肝炎患者为实验人群，患者随机分入曲美他嗪组实验组和安慰剂对照组。
三、病例选择
1、入选标准：
诊断为病毒性肝炎患者；
转氨酶水平大于5倍正常上限；
年龄：18-50岁；
男女不限；
住院病人；
患者签署知情同意书，依从性好。
2、排除标准：
患者小于18岁或超过70岁；
诊断为休克肝(缺血性肝病)的患者。
妊娠性肝功能衰竭或hellp综合症；
难治性低血压患者；
败血症休克患者；
即将(8小时内)接受肝移植的患者；
对曲美他嗪药物过敏者；
对曲美他嗪药物药耐受者；
药物及/或酒精滥用；
孕妇或哺乳期妇女；
近期(半年内)有心肌梗塞的患者；
严重肾功能不全患者。
3、淘汰标准
不符合入选标准和病例报告表记录不规范的病例；
非因不良反应或疗效不佳而退出试验的病例。
4、受试者中途撤出标准
研究者从医学角度考虑受试者有必要中止试验；
患者自己要求停止试验；
出现严重不良事件。
四、试验用药及药品分配
1、试验组：曲美他嗪(trimetazidin，tmz)：20mg/片，由施维雅(天津)制药有限公司提供。用法用量：每天3次，每次1片，口服，疗程4周。
2、对照组：本试验采用安慰剂对照组。
3、基础治疗：包括入院时给予门冬氨酸鸟氨酸、还原型谷胱甘肽、异甘草酸镁和人血清白蛋白
4、抗病毒治疗：恩替卡韦或者替诺福韦抗病毒治疗
五、免疫指标指标检测
1、主要免疫学指标检测
血常规(包含白细胞，中性粒细胞，淋巴细胞，单核细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞分类和比例)
淋巴细胞分化抗原分类；
免疫球蛋白分类。
2、次要反应免疫学功能变化指标---肝功能：包括血清丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase，alt)，采用比色法，由罗氏诊断产品(上海)有限公司生产；天门冬氨酸氨基转移酶(aspartatetransaminase，ast)，同上。
六、检测结果分析
病例1
病例1：患者，男，35岁，以“发现乙肝表面抗原阳性10余年，肝功能损伤10天”为主诉入院。
入院后专科查体：全身皮肤及巩膜无黄染，腹平软，肝脾肋下未及，肝区叩击痛阳性，腹部无压痛及反跳痛，腹水移动性浊音阴性。
入院后完善相关检查提示：血常规：淋巴细胞比率：25％，淋巴细胞绝对计数：1.5×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例34.5％；谷丙转氨酶(alt)：356u/l，谷草转氨酶(ast)：289u/l，总胆红素(tb)56umol/l，直接胆红素(db)38umol/l。肾功能：肌酐(cr)：57umol/l，尿素(bun)2.9mmol/l。乙肝表面抗原阳性，hbvdna阳性。
入院诊断：慢性乙型肝炎急性发作。
入院后给与曲美他嗪20mg，每日三次进行治疗。
服用后1周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：21％，淋巴细胞绝对计数：1.2×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例30.5％；谷丙转氨酶(alt)：105u/l，谷草转氨酶(ast)：78u/l，总胆红素(tb)35umol/l，直接胆红素(db)18umol/l。肾功能：肌酐(cr)：59umol/l，尿素(bun)2.7mmol/l。
服用后2周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：14％，淋巴细胞绝对计数：0.9×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例22.1％；谷丙转氨酶(alt)：45u/l，谷草转氨酶(ast)：28u/l，总胆红素(tb)21umol/l，直接胆红素(db)14umol/l。肾功能：肌酐(cr)：52umol/l，尿素(bun)2.6mmol/l。
治疗效果：患者转氨酶迅速下降，好转出院。
病例2：患者，男，35岁，以“发现肝功能损伤7天，皮肤黄染4天”为主诉入院。
入院后专科查体：全身皮肤及巩膜轻度黄染，腹平软，肝肋下1cm，脾肋下未及，肝区叩击痛阳性，腹部无压痛及反跳痛，腹水移动性浊音阴性。戊型肝炎抗体igm阳性。
入院后完善相关检查提示：血常规：淋巴细胞比率：22％，淋巴细胞绝对计数：1.3×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例32.6％；谷丙转氨酶(alt)：1247u/l，谷草转氨酶(ast)：945u/l，总胆红素(tb)174umol/l，直接胆红素(db)145umol/l。肾功能：肌酐(cr)：62umol/l，尿素(bun)3.1mmol/l。
入院诊断：戊型肝炎急性发作。
入院后给与曲美他嗪20mg，每日三次进行治疗。
服用后1周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：18％，淋巴细胞绝对计数：1.1×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例27.6％；谷丙转氨酶(alt)：325u/l，谷草转氨酶(ast)：247u/l，总胆红素(tb)156umol/l，直接胆红素(db)109umol/l。肾功能：肌酐(cr)：57umol/l，尿素(bun)2.6mmol/l。
服用后2周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：14，淋巴细胞绝对计数：0.85×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例21.3％；谷丙转氨酶(alt)：124u/l，谷草转氨酶(ast)：98u/l，总胆红素(tb)77umol/l，直接胆红素(db)54umol/l。肾功能：肌酐(cr)：54umol/l，尿素(bun)2.7mmol/l。
病例3：患者，女，44岁，以“发现尿黄3天，皮肤黄染1天”为主诉入院。
入院后专科查体：全身皮肤及巩膜轻度黄染，腹平软，肝肋下2cm，脾肋下1cm，肝区叩击痛阳性，腹部无压痛及反跳痛，腹水移动性浊音阴性。
入院后完善相关检查提示：血常规：淋巴细胞比率：25％，淋巴细胞绝对计数：1.7×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例35.9％；谷丙转氨酶(alt)：667u/l，谷草转氨酶(ast)：724u/l，总胆红素(tb)274umol/l，直接胆红素(db)145umol/l。肾功能：肌酐(cr)：60umol/l，尿素(bun)3.7mmol/l。
入院诊断：药物性肝损伤。
入院后给与曲美他嗪20mg，每日三次进行治疗。
服用后1周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：19％，淋巴细胞绝对计数：1.4×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例18.9％；谷丙转氨酶(alt)：129u/l，谷草转氨酶(ast)：142u/l，总胆红素(tb)92umol/l，直接胆红素(db)50umol/l。肾功能：肌酐(cr)：59umol/l，尿素(bun)3.4mmol/l。
服用后2周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：16％，淋巴细胞绝对计数：0.91×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例24.2％；谷丙转氨酶(alt)：74u/l，谷草转氨酶(ast)：62u/l，总胆红素(tb)69umol/l，直接胆红素(db)42umol/l。肾功能：肌酐(cr)：58umol/l，尿素(bun)3.6mmol/l。
病例4：患者，女，52岁，以“反复肝功能异常2余年”为主诉入院。
入院后专科查体：全身皮肤及巩膜无黄染，腹平软，肝脾肋下未及，无肝区叩击痛性，腹部无压痛及反跳痛，腹水移动性浊音阴性。
入院后完善相关检查提示：血常规：淋巴细胞比率：24％，淋巴细胞绝对计数：1.5×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例34.5％；谷丙转氨酶(alt)：252u/l，谷草转氨酶(ast)：291u/l，总胆红素(tb)52umol/l，直接胆红素(db)38umol/l。肾功能：肌酐(cr)：54umol/l，尿素(bun)4.3mmol/l。抗核抗体1：1000，抗线粒体抗体1：3200.
入院诊断：自身免疫性肝损伤。
入院后给与曲美他嗪20mg，每日三次进行治疗。
服用后1周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：18％，淋巴细胞绝对计数：2.1×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例27.5％；谷丙转氨酶(alt)：122u/l，谷草转氨酶(ast)：178u/l，总胆红素(tb)45umol/l，直接胆红素(db)18umol/l。肾功能：肌酐(cr)：51umol/l，尿素(bun)4.5mmol/l。
服用后2周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：14％，淋巴细胞绝对计数：1.3×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例20.9％；谷丙转氨酶(alt)：45u/l，谷草转氨酶(ast)：28u/l，总胆红素(tb)23umol/l，直接胆红素(db)12umol/l。肾功能：肌酐(cr)：51umol/l，尿素(bun)4.2mmol/l。
病例5：患者，男，34岁，以“右腹部不适7天，皮肤黄染4天”为主诉入院。
入院后专科查体：全身皮肤及巩膜轻度黄染，腹平软，肝脾肋下未及，肝区叩击痛阳性，腹部无压痛及反跳痛，腹水移动性浊音阴性。
入院后完善相关检查提示：血常规：淋巴细胞比率：27％，淋巴细胞绝对计数：1.7×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例34.2％；谷丙转氨酶(alt)：247u/l，谷草转氨酶(ast)：345u/l，总胆红素(tb)221umol/l，直接胆红素(db)145umol/l。肾功能：肌酐(cr)：55umol/l，尿素(bun)4.3mmol/l。
入院诊断：酒精性肝脏损伤
入院后给与曲美他嗪20mg，每日三次进行治疗。
服用后1周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：21％，淋巴细胞绝对计数：1.1×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例27.6％；谷丙转氨酶(alt)：162u/l，谷草转氨酶(ast)：141u/l，总胆红素(tb)86umol/l，直接胆红素(db)37umol/l。肾功能：肌酐(cr)：54umol/l，尿素(bun)4.3mmol/l。
服用后2周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：16％，淋巴细胞绝对计数：0.92×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例22.6％；谷丙转氨酶(alt)：74u/l，谷草转氨酶(ast)：58u/l，总胆红素(tb)62umol/l，直接胆红素(db)27umol/l。肾功能：肌酐(cr)：52umol/l，尿素(bun)2.8mmol/l。
实施例2：曲美他嗪作为免疫抑制剂治疗肾病的临床效果。
病例1：患者，女性，51岁，以“发现尿检异常6月余”为主诉入院。
入院后专科查体：颜面部无水肿，心肺无异常，腹平软，肝脾肋下未及，肝区叩击痛阳性，腹部无压痛及反跳痛，腹水移动性浊音阴性，双下肢无水肿。
入院后完善相关检查提示：尿常规：蛋白1+，隐血2+。24小时尿蛋白定量：5.3g。点式总蛋白：1.02g/g。血常规：淋巴细胞比率：45.4％，淋巴细胞绝对计数：2.54×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例32.8％；谷丙转氨酶(alt)：11u/l，谷草转氨酶(ast)：13u/l，总胆红素(tb)9.8umol/l，直接胆红素(db)4.2umol/l。肾功能：肌酐(cr)：67umol/l，尿素(bun)4.1mmol/l。其余检查结果未见明显异常。
入院初步诊断：肾病综合征。排除无禁忌症后行“肾脏病理穿刺活检术”，术后病理示：局灶增生性iga肾病，确诊为：肾病综合征局灶增生性iga肾病
后给予“曲美他嗪每次20mg、每日3次”进行治疗。
服用后1月复查结果提示：尿常规：蛋白-，隐血2+。24小时尿蛋白定量：0.26g。点式总蛋白：0.3g/g。血常规：淋巴细胞比率：45.5％，淋巴细胞绝对计数：2.6×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例38.9％；谷丙转氨酶(alt)：9u/l，谷草转氨酶(ast)：18u/l，总胆红素(tb)10.3umol/l，直接胆红素(db)8.0umol/l。肾功能：肌酐(cr)：56umol/l，尿素(bun)3.9mmol/l。
服用后2月复查结果提示：尿常规：蛋白-，隐血-。24小时尿蛋白定量：0.2g。点式总蛋白：0.1g/g。血常规：淋巴细胞比率：42.9％，淋巴细胞绝对计数：2.32×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例33.7％；谷丙转氨酶(alt)：21u/l，谷草转氨酶(ast)：23u/l，总胆红素(tb)11.1umol/l，直接胆红素(db)7.6umol/l。肾功能：肌酐(cr)：61umol/l，尿素(bun)7mmol/l。
服用后3月复查结果提示：尿常规：蛋白-，隐血-。24小时尿蛋白定量：0.15g。点式总蛋白：0.12g/g。血常规：淋巴细胞比率：40.6％，淋巴细胞绝对计数：1.8×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例35.3％；谷丙转氨酶(alt)：17u/l，谷草转氨酶(ast)：24u/l，总胆红素(tb)16.3umol/l，直接胆红素(db)10.4umol/l。肾功能：肌酐(cr)：73umol/l，尿素(bun)3.7mmol/l。
病例2：患者，女，47岁，以“间断双下肢及颜面部水肿30余年”为主诉入院。
入院后专科查体：颜面部水肿，心肺无异常，腹平软，肝脾肋下未及，肝区叩击痛阳性，腹部无压痛及反跳痛，腹水移动性浊音阴性。双下肢指凹性水肿。
入院后完善相关检查提示：尿常规：蛋白3+，隐血2+。24小时尿蛋白定量：25.15g。点式总蛋白：5.01g/g。血常规：淋巴细胞比率：39％，淋巴细胞绝对计数：2.91×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例27.3％；谷丙转氨酶(alt)：18u/l，谷草转氨酶(ast)：23u/l，总胆红素(tb)12.6umol/l，直接胆红素(db)6.7umol/l，。肾功能：肌酐(cr)：69umol/l，尿素(bun)3.8mmol/l。其余检查结果未见明显异常。
入院初步诊断：肾病综合征。排除无禁忌症后行“肾脏病理穿刺活检术”，术后病理示：微小病变肾小球病，确诊为：肾病综合征微小病变肾小球病。
后给予“曲美他嗪每次20mg、每日3次”进行治疗。
服用后1月复查结果提示：尿常规：蛋白-，隐血-。24小时尿蛋白定量：1.15g。点式总蛋白：0.21g/g。血常规：淋巴细胞比率：34％，淋巴细胞绝对计数：2.03×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例30.5％；谷丙转氨酶(alt)：15u/l，谷草转氨酶(ast)：18u/l，总胆红素(tb)12.8umol/l，直接胆红素(db)9.2umol/l。肾功能：肌酐(cr)：66umol/l，尿素(bun)5.1mmol/l。
服用后2月复查结果提示：尿常规：蛋白-，隐血-。24小时尿蛋白定量：0.08g。点式总蛋白：0.08g/g。血常规：淋巴细胞比率：35.9％，淋巴细胞绝对计数：2.12×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例32.1％；谷丙转氨酶(alt)：8u/l，谷草转氨酶(ast)：16u/l，总胆红素(tb)11.9umol/l，直接胆红素(db)7.4umol/l。肾功能：肌酐(cr)：65umol/l，尿素(bun)3.6mmol/l。
服用后3月复查结果提示：尿常规：蛋白-，隐血-。24小时尿蛋白定量：0.06g。点式总蛋白：0.05g/g。血常规：淋巴细胞比率：30.4％，淋巴细胞绝对计数：1.97×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例20.5％；谷丙转氨酶(alt)：9u/l，谷草转氨酶(ast)：9u/l，总胆红素(tb)13.4umol/l，直接胆红素(db)9.5umol/l。肾功能：肌酐(cr)：49umol/l，尿素(bun)7.1mmol/l。
实施例3曲美他嗪作为免疫抑制剂治疗风湿性疾病的的临床效果
病例1：患者，女，65岁，以“双手掌指关节、近端指间关节肿痛5月余”为主诉入院。类风湿性关节炎
入院后专科查体：双手掌指关节、近端指间关节、双肩关节、双肘关节、双膝关节压痛，左肘关节活动受限，心肺听诊无明显异常，肝脾肋下未触及，双下肢无水肿。
入院后完善相关检查提示：血常规：淋巴细胞比率：31.8％，淋巴细胞绝对计数：1.3×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例34.9％；谷丙转氨酶(alt)：16u/l，谷草转氨酶(ast)：18u/l，总胆红素(tb)5.8umol/l，直接胆红素(db)3.16umol/l。肾功能：肌酐(cr)：42umol/l，尿素(bun)4.59mmol/l。类风湿关节炎全套：抗核抗体1：320(+)颗粒型，抗环瓜氨酸肽抗体624.7ru/ml，类风湿因子igm型211.6iu/ml，抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体>1000u/ml，抗角蛋白抗体阳性(+)
入院诊断：类风湿性关节炎
入院后给与曲美他嗪20mg，每日三次进行治疗。
服用后1周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：28.4％，淋巴细胞绝对计数：1.2×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例30.2％；谷丙转氨酶(alt)：10u/l，谷草转氨酶(ast)：15u/l，总胆红素(tb)6.8umol/l，直接胆红素(db)4.2umol/l。肾功能：肌酐(cr)：54umol/l，尿素(bun)2.7mmol/l。
服用后2周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：23.1％，淋巴细胞绝对计数：1.02×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例22.3％；谷丙转氨酶(alt)：12u/l，谷草转氨酶(ast)：13u/l，总胆红素(tb)8.6umol/l，直接胆红素(db)5.2umol/l。肾功能：肌酐(cr)：66umol/l，尿素(bun)2.6mmol/l。
病例2：患者，男，28岁，以“游走性关节疼痛、皮疹半月余，发热1天”为主诉入院。
入院后专科查体：贫血貌，背部多发斑片状红斑，颈部/腋窝/腹股沟可触及肿大淋巴结，心肺听诊无明显异常，肝脾肋下未触及，双下肢无水肿。
入院后完善相关检查提示：血常规：淋巴细胞比率：36.5％，淋巴细胞绝对计数：1.39×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例37.9％；谷丙转氨酶(alt)：21u/l，谷草转氨酶(ast)：23u/l，总胆红素(tb)8.45umol/l，直接胆红素(db)3。98umol/l。肾功能：肌酐(cr)：58umol/l，尿素(bun)9.28mmol/l。结缔组织全套：抗核抗体1：1000(++)颗粒+胞浆型，抗双链dna抗体阳性>800iu/ml，抗核糖体抗体强阳性(+++)，抗组蛋白抗体阳性(+)，抗核小体抗体强阳性(+++)，抗ssb抗体阳性(++)抗ro52抗体强阳性(+++)，抗ssa抗体强阳性(+++)，抗sm抗体强阳性(+++)，抗nrnp/sm抗体强阳性(+++)
入院诊断：系统性红斑狼疮
入院后给与曲美他嗪20mg，每日三次进行治疗。
服用后1周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：32.4％，淋巴细胞绝对计数：1.24×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例30.2％；谷丙转氨酶(alt)：10u/l，谷草转氨酶(ast)：15u/l，总胆红素(tb)10.2umol/l，直接胆红素(db)5.6umol/l。肾功能：肌酐(cr)：66umol/l，尿素(bun)2.8mmol/l。
服用后2周复查结果提示：血常规：淋巴细胞比率：24.1％，淋巴细胞绝对计数：1.09×109/l。流式细胞仪检测cd8+t淋巴细胞的比例22.6％；谷丙转氨酶(alt)：23u/l，谷草转氨酶(ast)：13u/l，总胆红素(tb)15.8umol/l，直接胆红素(db)7.6umol/l。肾功能：肌酐(cr)：78umol/l，尿素(bun)2.3mmol/l。
实验例1
检测曲美他嗪对淋巴细胞的抗原递呈，抑制巨噬细胞的合成il-1在培养基中正常培养u937人巨噬细胞系，铺板后加入曲美他嗪进行刺激，24小时后应用人白介素il-1的酶联免疫法检测试剂盒检测细胞培养液上清中的il-1水平。具体步骤为：1)稀释标准品；2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需要的板条数，3个复孔；3)空白孔中只假如显色剂a&b和终止液；4)标准品孔加入标准品50ul，亲和素-hrp。4)待测样本孔加入样本40ul；5)在各个样本中加入抗il-1抗体10ul；6)轻轻震荡混匀，37°温育60分钟；7)然后根据试剂盒说明书进行加样、配液、洗涤、显色和测定；8)根据标准品的od值计算出标注曲线的直线回归方程，再根据样本的od值在回归方程上计算出对应的样品浓度。实验结果发现：曲美他嗪处理的淋巴细胞释放的il-1/2/3/4/6都显著降低，说明曲美他嗪抑制了淋巴细胞的激活。
实验例2
检测曲美他嗪对淋巴细胞的抗原递呈，抑制巨噬细胞的释放γ干扰素。首先在培养基中正常培养u937人巨噬细胞系，铺板后加入曲美他嗪进行刺激，24小时后应用人白介素il-1的酶联免疫法检测试剂盒检测细胞培养液上清中的γ干扰素水平。具体步骤为：1)稀释标准品；2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需要的板条数，3个复孔；3)空白孔中只假如显色剂a&b和终止液；4)标准品孔加入标准品50ul，亲和素-hrp。4)待测样本孔加入样本40ul；5)在各个样本中加入抗γ干扰素抗体10ul；6)轻轻震荡混匀，37°温育60分钟；7)然后根据试剂盒说明书进行加样、配液、洗涤、显色和测定；8)根据标准品的od值计算出标注曲线的直线回归方程，再根据样本的od值在回归方程上计算出对应的样品浓度。实验结果发现：曲美他嗪处理的淋巴细胞释放的γ干扰素都显著降低，说明曲美他嗪抑制了淋巴细胞的激活。
实验例3
edu是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶渗入正在复制的dna分子中快速检测细胞dna复制活性.1)取对数生长期淋巴细胞细胞，以每孔4×103～1×105细胞接种于96孔板中，培养至正常生长阶段。2)用细胞培养基按1000：1的比例稀释edu溶液(试剂a)，制备适量50μmedu培养基；3)每孔加入50μl细胞固定液(即含4％多聚甲醛的pbs)室温孵育30分钟，弃固定液；4)每孔加入50μl2mg/ml甘氨酸，脱色摇床孵育5分钟后，弃甘氨酸溶液；5)每孔加入100μlpbs，脱色摇床清洗5分钟，弃pbs；5)每孔加入100μl渗透剂(0.5％tritonx-100的pbs)脱色摇床孵育10分钟；pbs清洗1次，5分钟。6)每孔加入100μl的1x
实验例4
检测曲美他嗪对肿瘤坏死因子(tnfα)细胞因子的转录的影响。用实时定量pcr(real-timequantitativert-pcr)检测mrna。1)首先在培养基中正常培养u937人巨噬细胞系，铺板后加入曲美他嗪进行刺激，24小时后提取处理好的细胞用pbs洗涤，加入trizol并震荡对细胞进行细胞裂解处理，室温放置10分钟后12000g离心5分钟，吸取上清加入ep管中。2)加入氯仿，并剧烈摇荡30秒，然后室温放置3分钟，在低温离心机中12000g离心15分钟，然后取上层水样层至ep管中，加入异丙醇进行充分混匀，室温放置10分钟，4℃12000g离心15分钟；3)在ep管中加入1ml的75％乙醇，进行温柔混匀悬浮沉淀，4℃12000g离心15分钟，弃上清，然后置于室温干燥8min，然后用depc水溶解rna样品，55摄氏度水浴5分钟。应用用分光光度仪检测纯度和浓度。4)逆转录rna为cdna：首先去除基因组dna：反应体系为5xgdnaeraserbuffer2ul、gdnaeraser1ul、总rna1ug，加入rnasefreeddh2o至10ul，42℃水浴2min后置于冰上，逆转录反应根据试剂盒完成。5)荧光定量pcr根据荧光定量pcr仪器操作手册完成。6)数据分析：荧光定量的分析结果数据的采集和分析采用sds2.0软件，2-△△ct相对定量计算方法比较各组目的基因的表达差异。目的基因和内参基因各设4个复孔，相同的生物实验3次重复。实验结果发现：曲美他嗪处理的淋巴细胞的肿瘤坏死因子(tnfα)转录水平显著降低，说明曲美他嗪抑制了淋巴细胞的肿瘤坏死因子(tnfα)的转录水平。
实验证明，本发明所提供的曲美他嗪作为免疫抑制剂治疗免疫相关性疾病的新用途，能够提高通过抑制t淋巴细胞的活化和激活，发挥免疫抑制的作用。同时曲美他嗪作为治疗心脏的药物，在临床中已经应用很长时间，安全性极高，无明显副作用，能够极大的解决目前临床应用的免疫抑制剂副反应较大的不足。
虽然本发明已以实施例公开如上，然其并非用于限定本发明，任何本领域技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，均可作各种不同的选择和修改，因此本发明的保护范围由权利要求书及其等同形式所限定。