本发明涉及一种蛇床子中香豆素类成分的制备方法。
背景技术：
植物蛇床子为一年生草本植物，高30～80cm。茎直立，有分枝，表面有纵沟纹，疏生细柔毛。叶互生，2～3回羽头细裂，最终裂片线状披针形，先端尖锐；基生叶有长柄，柄基部扩大成鞘状。复伞形花序顶生或腋生；总苞片8～10，线形；花白色，花柱基短圆锥形，花柱细长，反折。双悬果宽椭圆形，果棱具翅。花期4～7月，果期6～8月。生于原野、田间、路旁、溪沟边等潮湿处。
中药蛇床子为伞形科（umbelliferae）蛇床属植物蛇床cnidiummonnieri(l.)cuss.的干燥成熟果实。蛇床子性温，味辛苦，有小毒。外用燥湿杀虫止痒，内服温肾壮阳，祛风燥湿。用于治疗阳痿，宫冷，寒痹腰痛，外治滴虫性阴道炎，手、足癣感染等。国内外关于蛇床子药理效应的报道很多，涉及免疫、神经、内分泌、心血管、呼吸及生殖等系统，主要表现为抗炎、抗过敏、中枢抑制、抗心律失常及抗肿瘤等作用。
蛇床子主要含香豆素类化合物，此外还有色原酮类和苯并呋喃类化合物。蛇床子挥发油中，相对含量较高的组分主要有倍半萜类，此外还有酯类和萜醇类化合物。大量研究证明蛇床子的有效成分为香豆素类化合物，其中含量最高的两种香豆素类化合物为蛇床子素（osthole，ost）、欧前胡素（imperatorin，imp）。
因此ost及imp经常作为评价不同来源地的蛇床子药材的质量及含蛇床子中成药的质控指标。由于ost具有许多重要的药理活性包括抗癌、抗增殖等活性，以及imp具有抑制癫痫发作、扩张血管、抑制心肌肥大、抑制肿瘤细胞增殖、抗微生物、影响药物代谢酶活性等多种药理作用，而受到越来越多的关注。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种蛇床子中香豆素类成分的制备方法。
本发明通过下面技术方案实现：
一种蛇床子中香豆素类成分的制备方法，包括如下步骤：将蛇床子粉碎，取10-20份粉末用65-75份乙醚回流脱脂4-6h，55-65℃烘干，然后放入三角瓶，加入90-100份体积分数为85-95%乙醇，在微波功率为500-600w下提取2-4次，每次30-40min，45-55℃保温振荡1-2h，过滤，合并提取液，提取液减压浓缩得到浸膏；将浸膏以适量水溶解后用大孔吸附树脂柱色谱分离，先用6倍柱体积的水洗脱除杂，弃去水洗脱部位，再用体积分数10%、25%、45%、65%、75%、85%、95%的乙醇梯度洗脱，收集85%乙醇洗脱部位，再经硅胶柱色谱分离，依次用体积比85:1、65:1、32:1、15:1的甲醇-水洗脱，收集32:1洗脱部分，浓缩即得；各原料均为重量份。
优选地，所述的制备方法中，取15份粉末用70份乙醚回流脱脂5h。
优选地，所述的制备方法中，60℃烘干。
优选地，所述的制备方法中，加入95份体积分数为90%乙醇。
优选地，所述的制备方法中，在微波功率为550w下提取3次。
优选地，所述的制备方法中，每次35min。
优选地，所述的制备方法中，50℃保温振荡1.5h。
优选地，所述的制备方法中，所述大孔吸附树脂为d101型。
本发明技术效果：
该方法简便、快捷、易操作，制备的蛇床子中香豆素类成分具有抗炎、抗过敏作用，可大规模制备。
具体实施方式
下面结合实施例具体介绍本发明的实质性内容。
实施例1
一种蛇床子中香豆素类成分的制备方法，包括如下步骤：将蛇床子粉碎，取15份粉末用70份乙醚回流脱脂5h，60℃烘干，然后放入三角瓶，加入95份体积分数为90%乙醇，在微波功率为550w下提取3次，每次35min，50℃保温振荡1.5h，过滤，合并提取液，提取液减压浓缩得到浸膏；将浸膏以适量水溶解后用d101型大孔吸附树脂柱色谱分离，先用6倍柱体积的水洗脱除杂，弃去水洗脱部位，再用体积分数10%、25%、45%、65%、75%、85%、95%的乙醇梯度洗脱，收集85%乙醇洗脱部位，再经硅胶柱色谱分离，依次用体积比85:1、65:1、32:1、15:1的甲醇-水洗脱，收集32:1洗脱部分，浓缩即得；各原料均为重量份。
实施例2
一种蛇床子中香豆素类成分的制备方法，包括如下步骤：将蛇床子粉碎，取10份粉末用65份乙醚回流脱脂4h，55℃烘干，然后放入三角瓶，加入90份体积分数为85%乙醇，在微波功率为500w下提取2次，每次30min，45℃保温振荡1h，过滤，合并提取液，提取液减压浓缩得到浸膏；将浸膏以适量水溶解后用d101型大孔吸附树脂柱色谱分离，先用6倍柱体积的水洗脱除杂，弃去水洗脱部位，再用体积分数10%、25%、45%、65%、75%、85%、95%的乙醇梯度洗脱，收集85%乙醇洗脱部位，再经硅胶柱色谱分离，依次用体积比85:1、65:1、32:1、15:1的甲醇-水洗脱，收集32:1洗脱部分，浓缩即得；各原料均为重量份。
实施例3
一种蛇床子中香豆素类成分的制备方法，包括如下步骤：将蛇床子粉碎，取20份粉末用75份乙醚回流脱脂6h，65℃烘干，然后放入三角瓶，加入100份体积分数为95%乙醇，在微波功率为600w下提取4次，每次40min，55℃保温振荡2h，过滤，合并提取液，提取液减压浓缩得到浸膏；将浸膏以适量水溶解后用d101型大孔吸附树脂柱色谱分离，先用6倍柱体积的水洗脱除杂，弃去水洗脱部位，再用体积分数10%、25%、45%、65%、75%、85%、95%的乙醇梯度洗脱，收集85%乙醇洗脱部位，再经硅胶柱色谱分离，依次用体积比85:1、65:1、32:1、15:1的甲醇-水洗脱，收集32:1洗脱部分，浓缩即得；各原料均为重量份。
该方法简便、快捷、易操作，制备的蛇床子中香豆素类成分具有抗炎、抗过敏作用，可大规模制备。